地中海贫血的分子基础和产前诊断徐湘民

血红蛋白病的人群筛查和产前诊断徐湘民【期刊名称】《《海南医学》》【年(卷),期】2019(000)0z1【总页数】9页(P47-55)【关键词】血红蛋白病; 地中海贫血; 遗传筛查; 产前诊断; 二代测序【作者】徐湘民【作者单位】南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广东广州 510515; 广东高校人类遗传病分子诊断工程技术研究中心广东广州 510515; 广东省出生缺陷监测与干预重点实验室广东广州 510515【正文语种】中文【中图分类】R5521 遗传性血红蛋白病及人群防控对策遗传性血红蛋白病是人类常见的孟德尔遗传病，这组疾病包括异常血红蛋白(abnormal hemoglobin, structural variants)和地中海贫血(thalassemia)，异常血红蛋白中最重要的疾病是镰状细胞贫血，它是由人β-珠蛋白基因的第6 号密码子上的谷氨酸变异为缬氨酸而导致的严重、致死性溶血性贫血，世界上最早的“分子病”的概念就是从镰状细胞贫血的研究中提出的[1-2]。

地中海贫血(简称地贫)因最先在地中海地区发现而得名，α-和β-地贫是其中最重要的疾病类型。

此外，还有一种发育阶段异常的良性表型—遗传性持续性胎儿血红蛋白(hereditary persistence of fetal hemoglobin，HPFH)，该遗传特质在上述两种血红蛋白病，特别是β-地贫的临床表型变异上有重要的遗传修饰作用，是目前临床精准诊断的主要靶点之一[3]。

由于镰状细胞贫血患儿主要发生于非洲，本文重点阐述α-和β-地贫的人群筛查和产前诊断。

α-和β-地贫是最早被阐明分子病理学基础的人类遗传性疾病，也是世界上最先采用分子诊断技术开展产前诊断的疾病对象，从20 世纪70 年代中期开始，有人就已经通过检测“珠蛋白合成”成功进行了α-地贫的产前诊断，并随即应用分子杂交技术完成了β 地贫的产前诊断[4]。

经过近半个世纪的研究积累，我们已经有了系统的α-和β-地贫的人群遗传流行病学和分子病理学的基础知识，包括中国人在内的导致α-和β-地贫的在疾病高发区的人群发生率和疾病突变谱已经阐明，我国血红蛋白病的流行病学研究是从曾溢滔教授领导的合作团队于20 世纪80 年代中期开展的全国100 万人群的大规模调查开始的[5]，随着技术的进步，后续的研究更进一步阐明了我国南方一些高发省区的详细、准确的遗传流行病学数据，这是指导开展临床诊断、人群筛查和通过产前诊断实现该病预防控制的前提和基础[6-7]。

遗传性持续性胎儿血红蛋白增高症(HPFH)的分子机制曾小红【摘要】遗传性持续性胎儿血红蛋白增高症(Hereditary persistence of fetal hemoglobin,HPFH)是成人红细胞中持续存在过量的胎儿血红蛋白(Fetal hemoglobin,Hb F),血液学检查正常的遗传综合征.携带者常无临床症状.HPFH具有高度的遗传异质性,分子机制主要涉及11p15上β-类珠蛋白基因的遗传缺陷导致的Hb F异常高表达.最近的研究表明,HPFH具有数量性状遗传特点,其发生机制可能不局限于单纯的β-类珠蛋白基因上的遗传缺陷,HPFH还与多个基因座的异常有关,具有数量性状位点(quantitative trait loci,QTL)的遗传特征.主要包括QTL6q23和QTL2p15等的异常.通过HPFH来探索珠蛋白基因的网络化表达调控机制,为镰状细胞性贫血、重型地中海贫血等疾病的治疗研究开拓了新路径.【期刊名称】《中国产前诊断杂志（电子版）》【年(卷),期】2012(004)002【总页数】7页(P26-32)【关键词】HPFH;分子机制;β-类珠蛋白基因;QTL【作者】曾小红【作者单位】昆明医科大学附属昆华医院遗传诊断中心,云南昆明650032【正文语种】中文【中图分类】R394.3血红蛋白（Hemoglobin）是人体红细胞内的一种主要蛋白质，由珠蛋白和血红素结合而成，通过携氧释氧实现氧气在人体内的运输[1］。

血红蛋白是由两条α珠蛋白链（αξ）和两条非α珠蛋白链（βγδε等）组成的四聚体。

6种不同的珠蛋白肽链组合成人类的6种血红蛋白，按照其在人体内表达的先后顺序分别是：Hb Gower1（ξ2ε2）、Hb Gower2（α2ε2）、Hb Portland（ξ2γ2）、Hb F（α2γ2）、Hb A（α2β2）、Hb A2（α2δ2）；前3种为胚胎型血红蛋白，Hb F（Fetal hemoglobin，胎儿血红蛋白）为胎儿时期血红蛋白主要成分，出生后逐渐由Hb A取代，由于γ链有Gγ和Aγ两种亚型，所以Hb F也有两种构成：α2Gγ2和α2Aγ2。

珠蛋白生成障碍性贫血的分子诊断研究进展徐祥虎;朱宝生【摘要】珠蛋白生成障碍性贫血是一类发病率较高的常染色体显性遗传病,除输血及骨髓造血干细胞移植之外,目前尚无较好的治疗方法,产前诊断是防止重型地贫胎儿出生积极有效的应对措施.近年来,在血红蛋白异常筛查方面出现了全自动血红蛋白电泳、高效液相色谱、傅里叶变换红外光谱等新技术;在基因诊断领域出现了DNA芯片技术、悬浮点阵技术、DNA测序、多重PCR等.由于这些新的技术具有更准确、灵敏、方便等优点,它们正在逐渐取代以往所使用的旧方法.非侵入性产前诊断、种植前遗传诊断成为地贫产前诊断的重要发展方向.目前对胎儿的超声检查仍不能取代血红蛋白电泳在地贫高发地区对孕妇群体进行携带者筛查,种植前遗传诊断存在着一定的医疗风险,绝大多数病例的预防仍是通过对高风险胎儿进行产前基因诊断来实现.【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》【年(卷),期】2011(003)004【总页数】6页(P283-288)【关键词】地中海贫血;分子基础;产前诊断;基因诊断【作者】徐祥虎;朱宝生【作者单位】昆明医学院附属昆华医院遗传诊断中心,云南,昆明,650032;昆明医学院附属昆华医院遗传诊断中心,云南,昆明,650032【正文语种】中文地中海贫血（thalassemia）是一种由于珠蛋白基因缺陷导致血红蛋白中的α-或β-珠蛋白肽链合成减少或不能合成,引起血红蛋白成份改变，从而导致的溶血性贫血[1]。

地贫的主要类型有两种：α地中海贫血和β地中海贫血，分别由α-或者β-珠蛋白基因突变所致，其表现型呈常染色体隐性遗传的方式出现。

重型α地贫胎儿（Bart's水肿胎）多在妊娠末期胎死腹中或产下即死；重型β地贫患儿一般在出生后3～6个月出现症状，要靠输血维持生命，多在童年期夭折。

全球人口的1.67%为地贫的基因突变携带者，每年出生的新生儿中突变纯合子和双重杂合子高达4.4‰[2]。

其发病区域主要集中在地中海沿岸、少数非洲地区、东南亚和中国的南方。

地中海贫血的实验室分子诊断技术研究进展李继慧;覃运荣;梁毅【摘要】地中海贫血是最常见的血红蛋白病之一,具有遗传性,其主要类型为α-及β-型.目前实验室针对α-、β-型地中海贫血的分子学诊断方法主要是基于PCR法的多种检测技术,此外还有多重连接探针扩增技术、基因芯片技术、高通量测序技术等,各种技术均有其优缺点,合理选择检测方法有助于提高地贫的检出率,还能够引导患者及时进行产前诊断,为降低人口出生缺陷和提高人口素质提供有效的临床依据.本文就目前应用于地中海贫血的多种实验室分子诊断技术作一综述.【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》【年(卷),期】2018(010)003【总页数】4页(P202-205)【关键词】地中海贫血;分子诊断技术;α-地中海贫血;β-地中海贫血【作者】李继慧;覃运荣;梁毅【作者单位】广西玉林市妇幼保健院检验科,广西,玉林537000;广西玉林市妇幼保健院检验科,广西,玉林537000;广西玉林市妇幼保健院检验科,广西,玉林537000【正文语种】中文地中海贫血（简称地贫）是世界上最常见的血红蛋白病之一，主要是由于遗传性珠蛋白基因缺失或点突变导致血红蛋白中一种或一种以上珠蛋白链合成缺失和/或不足而引起的贫血，也称为珠蛋白生成障碍性贫血［1］。

按照存在缺陷的珠蛋白基因的种类，地中海贫血一般可以分为α⁃、β⁃、δβ⁃和εγδβ⁃等类型，其中α⁃和β⁃地贫是最为常见的2种地贫类型［1］。

地中海贫血好发于地中海、中东、南亚次大陆和东南亚等地区，在我国四川、云南、广西、贵州、广东等南部地区也较为常见［2］。

地贫患者具有广泛的临床表现，可从几乎无症状到需要终身输血并伴随多器官系统并发症的重度贫血，并会遗传给下一代，给家庭和社会带来沉重的负担［3］。

目前对于地贫的治疗一般是根据其类型采用相应的治疗方案，而α⁃重型地贫（通常是指Hb⁃Bart's胎儿水肿综合征）及β⁃重型地贫尚无有效、经济的治疗方法［4⁃5］。

地中海贫血的分子诊断技术进展王文娟;朱春江【摘要】地中海贫血是常见的人类遗传性血液病之一,其表型严重程度与地中海贫血基因突变型密切相关.及时准确地对地中海贫血进行基因诊断及产前基因诊断,可为患者的治疗以及产前优生遗传咨询提供依据.笔者将常见的地中海贫血分子诊断技术进行综述.【期刊名称】《华夏医学》【年(卷),期】2017(030)002【总页数】5页(P172-176)【关键词】地中海贫血;分子诊断技术;基因【作者】王文娟;朱春江【作者单位】桂林医学院,广西桂林541004;桂林医学院附属医院,广西桂林541001【正文语种】中文【中图分类】R556.61目前对于地中海贫血的诊断技术，除了有很多用于诊断已知地中海贫血类型的基于PCR的诊断技术，还有用于检测未知地中海贫血的其他分子诊断技术[1]。

这些技术包括等位基因特异性寡核苷酸(ASO)杂交、斑点杂交、反向斑点杂交、突变特异扩增体系(ARMS)、限制性酶切分析、缺口-PCR(gap-PCR)等，以上技术主要用于检测已知突变，对于未知突变的筛查，基于PCR技术的变性单链DNA检测会更有优势，例如变性梯度凝胶电泳(DGGE)等。

基因突变鉴定的金标准仍然是DNA直接测序。

长期以来，DNA测序技术一直是分子生物学相关研究中最常用的技术手段之一[2]。

而二代测序技术、三代测序技术则实现了地中海贫血常见新发基因缺陷等高通量快速检测[3]，常见地中海贫血分子诊断技术如下。

Southern印记杂交(Southern blotting)技术是1975年英国爱丁堡大学的E.M.Southern教授首创的，因而称该技术为Southern印迹杂交[4]。

但是，Southern印迹杂交技术操作烦琐、费时费力、费用高、需使用放射性核素，且其成功率还很大程度依赖于所用基因组DNA的质和量[5]。

近些年已被多重连接探针扩增法替代[1]。

常用于对缺失型突变的检测。

其原理是：针对缺失区域上下游序列设计引物，正常情况下，这对引物由于相距太远无法扩增出特定片段，但是，当上下游引物之间的序列发生缺失突变时，上下游引物被拉近，从而得以扩增出特定长度的片段。

60例同型地中海贫血基因携带者产前诊断结果分析发布时间：2022-11-14T02:17:20.346Z 来源：《医师在线》2022年6月12期作者：黄向阳[导读]黄向阳（玉林市妇幼保健院检验科；广西玉林537000）摘要：目的分析夫妇双方均为同型地中海贫血基因携带者胎儿基因诊断情况，以防止中/重地中海贫血患儿出生。

方法分析2021年1月-2021年4月在我院就诊的有地贫产前诊断指征的孕妇60例，应用Gap-PCR和PCR结合反向斑点杂交技术对羊水标本进行α、β-地中海贫血基因检测。

分析同型地中海贫血基因携带者胎儿基因型分布及构成情况。

结果 60例夫妇双方均为同型地中海贫血基因携带者中，检出重型α-地中海贫血胎儿5例，中间型α-地中海贫血胎儿8例，中/重型β-地中海贫血胎儿4例，中/重型地贫检出率为28.33%，终止妊娠10例。

其中胎儿α-地贫主要基因突变类型为--SEA/αα19例（42.22%）比例最高，其次为--SEA/--SEA（11.11%），--SEA/-α3.7（11.11%），-α3.7/αα（8.89%）；β-地贫主要基因突变类型为βCD41-42/βN7例（50.00%）比例最高，其次为βCD41-42/βCD41-42（14.29%），结论地中海贫血产前基因诊断可有效地避免重症地中海贫血患儿的出生，减少出生缺陷，提高人口素质。

关键词：地中海贫血；基因诊断；产前诊断；中图分类号：R556.71 文献标识码：A地中海贫血（thalassaemia，简称地贫）是指由珠蛋白基因的缺失或点突变使珠蛋白基因的表达受到抑制，引起相应蛋白链合成减少甚至完全不能合成导致的遗传性溶血性贫血，是临床上最常见的单基因遗传病之一[1]。

根据合成珠蛋白的异常的情况，根据不同类型的珠蛋白合成的障碍进行分型可以有α-地贫和β-地贫，在中国主要分布于两广地区。

根据贫血严重程度分轻、中、重之分，静止型和轻型地贫可没有贫血或仅有轻度贫血，表现的是小细胞、低色素的贫血。

地中海贫血基因诊断和产前基因诊断
黎青;孙筱放;胡冬贵;孔舒;黄艳仪
【期刊名称】《中国优生与遗传杂志》
【年(卷),期】2001(9)4
【摘要】地中海贫血是珠蛋白链合成减少或缺乏导致血红蛋白四聚体α -链 /非α -链之间失去平衡所引起的一种溶血性遗传病 ,发病遍及全球 ,也是国内长江以南各省 (两广尤其 )最常见的遗传病之一。

本文报道本院自 1 996-1 999年期间所完成的 3 56例地中海贫血的基因诊断和 4 8例α -地中海贫血以及 2 7例β -地中海贫血风险胎儿产前诊断结果。

在临床上采用人工引产术终止了 1 2例重症α -地中海贫血患胎和 2例重症β -地中海贫血患胎的妊娠。

有效地开展地中海贫血基因诊断和产前基因诊断是做好遗传咨询和产前诊断。

【总页数】2页(P7-8)
【关键词】引产;地中海贫血;基因诊断;产前基因诊断
【作者】黎青;孙筱放;胡冬贵;孔舒;黄艳仪
【作者单位】广州市第二人民医院
【正文语种】中文
【中图分类】R556.61;R714.254
【相关文献】
1.梧州市1365对地中海贫血筛查双阳夫妇泰国缺失型α地中海贫血基因诊断及产前诊断结果分析 [J], 黎永鉴;闫丽琼;陈唯
2.地中海贫血产前筛查及产前基因诊断结果分析 [J], 黎惠红
3.地中海贫血产前筛查及产前基因诊断结果分析 [J], 钟莹
4.梧州市1365对地中海贫血筛查双阳夫妇泰国缺失型α地中海贫血基因诊断及产前诊断结果分析 [J], 黎永鉴;闫丽琼;陈唯
5.β-地中海贫血的基因诊断及产前基因诊断 [J], 宋丹;钱卫平;田菁燕;谭玉梅
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地中海贫血的产前诊断地中海贫血(地贫)是人类遗传性血红蛋白(Hb)病的一种类型,该病是由于人类珠蛋白基因的先天性缺陷而导致相应的珠蛋白链合成不足或完全缺如,形成Hb的α链与非α链比例失衡,从而使患者产生中度或严重的溶血性贫血表现。

由于早期报道的病例几乎都是来自于地中海地区的移民,该病遂被命名为地中海贫血,后来发现地贫并非一种而是一组疾病,且在全球热带和亚热带广为流行的遗传性溶血性疾病。

根据珠蛋白肽链合成受到抑制的类型,地贫可以分为α地贫、β地贫、δ地贫、γ地贫、δβ地贫和εγδβ地贫等。

α和β地贫是人群中最常见的地贫类型。

目前,全世界至少有3.45亿人携带地贫的致病基因,全球地贫基因携带者频率高达 2.62%,包括中国南方在内的东南亚地区、印度次大陆、地中海地区、中东、北非和太平洋地区都是该病的高发地区。

20世纪70年代中期,分子遗传学的兴起使α和β地贫成为世界上最早被阐明分子水平基础的人类单基因病之一;70年代末期,对α和β珠蛋白基因簇的结构鉴定和染色体定位的研究成果,奠定了开展地贫产前诊断的基石。

在前人阐明α珠蛋白基因结构和基因缺失类型的基础上,1976年,美国华裔科学家简悦威(Kan Y uet~wai)应用液相杂交技术,对α珠蛋白基因cDNA进行定量检测,并检测其与胎儿DNA(培养的羊水细胞)的杂交率,实现了对α珠蛋白基因缺失拷贝数的检测,结果显示,被测胎儿DNA的杂交率(65%)明显高于其双亲(携带者)的杂交率(57%)因此判定该胎儿为健康胎儿。

这一研究工作是世界上第一次采用分子诊断技术完成的人类单基因遗传病的临床实践,也是人类单基因病产前诊断的第一个成功案例,开创了人类遗传性疾病分子诊断的先河。

一、产前诊断地贫的历史回顾由于地贫的治疗代价昂贵且难以治愈,通过产前诊断阻止重型地贫患儿出生是目前公认的首选预防措施。

探索地贫产前诊断的研究工作最早始于20世纪60年代末,研究发现,β地贫患儿脐带血中β珠蛋白链的合成明显低于健康新生儿,随后的研究工作证实,从孕中期脐血中也可以检测出孕妇Hb的水平。