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环丙沙星耐药的铜绿假单胞菌药敏情况分析吴爱武;李小靖【期刊名称】《中国微生态学杂志》【年(卷),期】2005(17)1【摘要】目的了解对环丙沙星耐药的铜绿假单胞菌的药敏情况。
方法细菌的鉴定及药敏试验,均采用法国生物梅里埃公司的VITEK2微生物鉴定与药敏系统,选择经VITEK2测定耐环丙沙星的铜绿假单胞菌(耐药株)68株及对环丙沙星敏感的铜绿假单胞菌(敏感株)67株,统计分析两者对亚胺培南、阿米卡星、庆大霉素、头孢他啶、哌拉西林和哌拉西林他唑巴坦等几种临床上常用抗生素的药敏情况。
结果耐药株对以上6种抗生素的敏感率分别为亚胺培南706%,阿米卡星206%,庆大霉素191%,头孢他啶279%,哌拉西林632%,哌拉西林他唑巴坦721%。
而敏感株对6种抗生素的敏感率则分别为925%、328%、687%、657%、881%与896%,明显高于耐药株,经χ2检验,除阿米卡星005<P<01外,其余P<005,两者差异有显著性。
结论对环丙沙星耐药的铜绿假单胞菌引起的感染,亚胺培南、哌拉西林他唑巴坦和哌拉西林仍是较好的选择,而阿米卡星、庆大霉素及头孢他啶则不推荐使用。
【总页数】2页(P55-56)【关键词】药敏;铜绿假单胞菌;环丙沙星;哌拉西林;阿米卡星;耐药株;头孢他啶;推荐使用;选择;鉴定【作者】吴爱武;李小靖【作者单位】广州医学院检验系【正文语种】中文【中图分类】R978;R378【相关文献】1.环丙沙星耐药铜绿假单胞菌的临床分离和药敏情况分析 [J], 刘春林;韩晓娜;朱月春;徐红云;邓德耀;李红;袁文丽2.环丙沙星耐药铜绿假单胞菌的分离和药敏结果分析 [J], 朱水龙3.对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌药敏情况分析 [J], 李小靖;陈武嘉;钟燕玲4.氨曲南联合环丙沙星或美罗培南对多耐药铜绿假单胞菌体外药敏研究 [J], 龚美亮;刘云霞;邹琳5.耐亚胺培南铜绿假单胞菌的药敏情况与耐药机制 [J], 郭丽;顾怡明;张杰;唐明忠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
铜绿假单胞菌生物被膜对抗菌药物作用影响的实验研究冯星火;赵广福;崔连东;关欣;王宏达【期刊名称】《微生物学报》【年(卷),期】2000(040)002【摘要】细菌生物被膜形成在难治性感染中起重要作用,本实验在体外进行铜绿假单胞菌生物被膜与抗菌药物作用的研究.铜绿假单胞菌在生理盐水-特氟隆系统孵育6d,可在特氟隆表面上形成细菌生物被膜(Biofilm),经扫描电镜证实,它包裹在微菌落表面.应用环丙氟哌酸,甲红霉素,罗红霉素,穿心莲作用于生物被膜细菌并观察结果.发现与2倍MIC环丙氟哌酸作用4h后,悬浮细菌存活率降至0.02%,但生物被膜细菌存活率则为41%,当10μg/mL甲红霉素,12μg/mL罗红霉素,0.05g/mL穿心莲分别与环丙氟哌酸联合应用时,生物膜细菌存活率分别降至0.2%,0.5%和2.7%.结果表明生物被膜细菌对环丙氟哌酸的抵抗力较悬浮细菌明显增强,而环丙氟哌酸分别与甲红霉素,罗红霉素,穿心莲联合应用则有明显抑菌作用.推测此种联合用药方式可能提高对难治性感染的治疗效果.【总页数】4页(P210-213)【作者】冯星火;赵广福;崔连东;关欣;王宏达【作者单位】辽宁省人民医院呼吸内科,沈阳,110015;辽宁省人民医院呼吸内科,沈阳,110015;辽宁省人民医院检验科,沈阳,110015;中国医科大学附属一院,沈阳,110001;中国医科大学附属一院,沈阳,110001【正文语种】中文【中图分类】Q939.11【相关文献】1.铜绿假单胞菌及其生物被膜影响A549细胞分泌细胞生长因子的实验研究 [J], 王非;赵玮;王媛;夏永良2.生物被膜铜绿假单胞菌相关肺感染的实验研究 [J], 关欣;郑红光3.铜绿假单胞菌lasR/rhlR基因缺陷对小鼠腹腔生物被膜感染的影响 [J], 刘晓岚;刘晓庆;荆雪宁;唐妮;景政;孔晋亮;宋志军;吴红4.磷霉素联合美罗培南对铜绿假单胞菌生物被膜的影响 [J], 曾爱英;廖星;戴木森5.亚胺培南联合阿奇霉素治疗铜绿假单胞菌生物被膜感染的实验研究 [J], 方向群;刘又宁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
铜绿假单胞菌的耐药性分析471003河南洛阳市中信重型机械公司职工医院检验科摘要目的：了解我院铜绿假单胞菌对常用抗生素的的耐药情况，指导临床合理选用抗生素。
方法：采用常规方法进行培养，然后按标准鉴定程序进行鉴定。
药敏实验：利用纸片扩散法（K-B法）测定了15种抗生素对其的抗菌活性。
结果：铜绿假单胞菌对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、环丙沙星等抗生素的敏感率较高，对头孢唑啉、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢曲松100%耐药，对其他抗生素出现不同程度耐药。
结论：铜绿假单胞菌耐药性较高，应加强药敏检测，指导临床合理用药。
关键词铜绿假单胞菌药敏抗生素耐药率铜绿假单胞菌是引起临床各种感染和医院内感染的主要致病菌之一，极易产生耐药性，在临床分离的革兰阴性菌中所占比率最大【sup】［1］【/sup】。
因此，加强对铜绿假单胞菌的耐药性检测对控制感染有重要意义。
2008年～2009年分离的92株铜绿假单胞菌的药敏结果进行分析。
资料与方法92株铜绿假单胞菌分离于2008～2009年住院患者送检的痰液、尿液、血液、咽拭子、浆膜腔液、脓性分泌物等标本。
菌种鉴定：标本按常规培养分离，菌种鉴定按《全国临床检验操作规程》进行。
药敏纸片：哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢哌酮、头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮／舒巴坦、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星、氧氟沙星、亚胺培南，由北京天坛药物生物技术开发公司提供。
药敏试验：采用KB（纸片扩散）法。
MH培养基由天和微生物试剂有限公司提供，药敏纸片由天坛生物药物技术开发公司提供。
质控菌株ATCC27853（铜绿假单胞菌）。
结果判定按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）标准。
数据分析：采用WHONET-5.4药敏数据统计软件。
结果铜绿假单胞菌的检出情况：2008～2009年检出铜绿假单胞菌共92株（临床总分离菌1025株的9.0%）。
铜绿假单胞菌对15种抗生素的耐药率分别为头孢唑啉100%、头孢呋辛100%、头孢噻肟100%、头孢曲松100%，哌拉西林36.2%、头孢他啶29.1%、头孢吡肟27.3%、头孢哌酮45.3%头孢哌酮/舒巴坦32.5%、庆大霉素38.6%、阿米卡星31.3%、环丙沙星56.3%、氧氟沙星59.1%，亚胺培南5.9%、哌拉西林/他唑巴坦4.6%。
乳铁蛋白对铜绿假单胞菌的杀菌作用及其机制研究第一部分乳铁蛋白对铜绿假单胞菌生长和毒力因子表达的调节及其机制目的研究乳铁蛋白对铜绿假单胞菌的杀菌性以及毒力因子表达和生物被膜形成的作用，同时探讨铁离子对其作用的影响。
方法分别将乳铁蛋白溶液、FeCl<sub>3</sub>溶液及乳铁蛋白与FeCl<sub>3</sub>混合溶液分别加入到铜绿假单胞菌培养基(OD<sub>600</sub>=0．05)中，以倍比稀释平板培养法检测活菌数评价其杀菌活性；以氯仿、盐酸萃取法定量检测绿脓菌素；以刚果红弹性蛋白检测弹性蛋白酶活性；结晶紫法定量检测生物被膜；以结晶紫染色法，在光镜下观察生物被膜形态。
结果乳铁蛋白对铜绿假单胞菌具有杀菌活性，同时抑制绿脓菌素生成、弹性蛋白酶活性和生物被膜形成，其作用与浓度成正相关；FeCl<sub>3</sub>促进铜绿假单胞菌生长，增加绿脓菌素生成和弹性蛋白酶活性，并进生物被膜形成；乳铁蛋白与铁结合后其杀菌性减弱，对绿脓菌素生成、弹性蛋白酶活性和生物被膜形成的抑制作用减弱。
结论乳铁蛋白对铜绿假单胞菌具有杀菌活性，能抑制毒力因子的表达，其作用受铁离子的影响，可能部分地与其铁螯合能力有关。
第二部分铁螯合剂对铜绿假单胞菌生长和毒力因子表达的调节及其机制目的研究铁螯合剂8-羟基喹啉、甲磺酸去铁胺对铜绿假单胞菌的杀菌性以及毒力因子表达和生物被膜形成的影响。
方法分别将8-羟基喹啉溶液、甲磺酸去铁胺溶液及各自与FeCl<sub>3</sub>混合溶液分别加入到铜绿假单胞菌培养基(OD<sub>600</sub>=0．05)中，以倍比稀释平板培养法检测活茵数评价其杀菌活性；以氯仿、盐酸萃取法定量检测绿脓菌素；以刚果红弹性蛋白检测弹性蛋白酶活性；结晶紫法定量检测生物被膜；以结晶紫染色法，在光镜下观察生物被膜形态。
乳铁蛋白多肽嵌合体对泛耐药铜绿假单胞菌生物被膜形成的作用徐国鹏;张俐;叶辛幸;徐晓【期刊名称】《中国现代医药杂志》【年(卷),期】2014(000)007【摘要】目的研究乳铁蛋白多肽嵌合体对泛耐药铜绿假单胞菌生物被膜形成的作用。
方法在泛耐药铜绿假单胞菌培养基（OD600=0.05）中分别加入乳铁蛋白多肽（LFcin、LFampin）以及乳铁蛋白多肽嵌合体（LFchimera）溶液干预；结晶紫法定量检测生物被膜；以结晶紫染色法，在光镜下观察生物被膜形态。
结果乳铁蛋白多肽以及乳铁蛋白多肽嵌合体均能抑制泛耐药铜绿假单胞菌生物被膜形成（P<0.05），生物被膜量与多肽浓度呈负相关（P<0.05）；乳铁蛋白多肽嵌合体的作用强于乳铁蛋白多肽及其混合物（P<0.05)。
结论乳铁蛋白多肽和乳铁蛋白多肽嵌合体，尤其是LFchimera对泛耐药铜绿假单胞菌生物被膜形成具有显著的抑制作用，有望用于泛耐药铜绿假单胞菌感染的治疗。
%Objective To study the effect of LFchimera on the biofilm formation in pandrug-resistant pseudomonas aeruginosa. Methods The solution of LFcin and LFampin, LFchimera were added into the culture medium of pandrug-resis-tant pseudomonas aeruginosa to evaluate the effect on biofilm formation respectively; biofilm quantification assay was performed by staining with crystal violet and spectrophotometer assay; biofilm morphology was viewed by optical microscopy after being stained with crystal violet. Results LFcin and LFampin, LFchimera could both inhibit the biofilmformation of pandrug-resis-tant pseudomonas aeruginosa, and the effect was positively correlated with their concentrations (P<0.05). The effect of LFchimera was greater significantly than LFcin, LFampin and their mixtures (P<0.05). Conclusion LFcin, LFampin and LFchimera, especially LFchimera could inhibit the biofilm formation in pandrug-resistant pseudomonas aeruginosa, it is promis-ing to be a new compound for the treatment for pandrug-resistant pseudomonas aeruginosa infections.【总页数】3页(P5-7)【作者】徐国鹏;张俐;叶辛幸;徐晓【作者单位】215002 江苏苏州，南京医科大学附属苏州医院呼吸内科;215002 江苏苏州，南京医科大学附属苏州医院呼吸内科;215002 江苏苏州，南京医科大学附属苏州医院呼吸内科;215002 江苏苏州，南京医科大学附属苏州医院呼吸内科【正文语种】中文【相关文献】1.乳铁蛋白多肽嵌合体对铜绿假单胞菌PAO1及PAO-JP2型菌株QS毒力因子的作用 [J], 左鹏;王爱利;王正云;胡琼洁;邵冰;熊维宁;熊盛道2.环丙沙星与乳铁蛋白多肽嵌合体联用对铜绿假单胞菌生物膜及密度感知系统信号分子生成的抑制作用 [J], 左鹏;王爱利;王正云;徐国鹏;胡琼洁;邵冰;徐西琳;熊维宁;熊盛道3.乳铁蛋白多肽嵌合体对泛耐药铜绿假单胞菌毒力因子表达的影响 [J], 徐国鹏;张俐;叶辛幸4.环丙沙星联合乳铁蛋白多肽嵌合体对铜绿假单胞菌PAO1生物被膜和QS系统信号分子表达的影响 [J], 李艳玲5.环丙沙星联合乳铁蛋白多肽嵌合体对铜绿假单胞菌PAO1生物被膜和QS系统信号分子表达的影响 [J], 章晓燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
环丙沙星联合阿奇霉素对碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌感染的疗效分析摘要：目的：探究环丙沙星联合阿奇霉素治疗碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌感染的疗效。
方法：于2016年7月-2017年7月在本院就诊的对碳青霉烯类耐药的铜绿假单胞菌呼吸道感染患者中选出389例，随机分成两组，对照组给予环丙沙星治疗，观察组给予环丙沙星+阿奇霉素治疗，对比两组的总有效率、最小抑菌浓度。
结果：治疗2周后，观察组的总有效率高于对照组，P＜0.05；两组的不良反应发生率差异不明显，均相对轻微，P＞0.05；治疗第7天、第14天，观察组的环丙沙星最小抑菌浓度低于对照组，P＜0.05。
结论：环丙沙星与阿奇霉素联合治疗可提高环丙沙星对碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌感染患者的抗菌活性，提高抗菌效果，用药安全性高，值得推广。
关键词：环丙沙星；阿奇霉素；碳青霉烯类；铜绿假单胞菌；呼吸道感染铜绿假单胞菌为革兰阴性无芽孢杆菌，是条件致病菌，是引起院内感染的主要致病菌之一，而且其对多种抗生素的耐药性高，极可能因外膜蛋白缺失、靶向病变、外排泵等机制导致耐药[1-2]。
碳青霉烯类抗生素是临床上广泛应用的抗菌药物，而近些年来对其耐药的铜绿假单胞菌越来越多，而且不少表现为多重耐药，增加了临床治疗难度。
本院应用环丙沙星联合阿奇霉素治疗取得满意疗效，报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选择2016年7月-2017年7月在我院呼吸内科就诊的对碳青霉烯类耐药的铜绿假单胞菌呼吸道感染患者中选出389例，排除近1个月内接受过化疗、激素冲击治疗、免疫抑制剂治疗的患者，排除合并肿瘤、肝硬化、免疫系统疾病、糖尿病患者。
随机分组，对照组194例，男112例，女82例，年龄37-72岁，平均（59.4±11.2）岁。
观察组195例，男116例，女79例，年龄41-74岁，平均（59.8±11.4）岁。
两组的一般资料对比差异不明显，P＞0.05，有可比性。
1.2 方法对照组给予环丙沙星治疗：首选给予患者250ml 5%葡萄糖溶液静脉滴注，结束2h后给予患者0.6g乳酸环丙沙星氯化钠注射液（100ml：0.2g）静脉滴注，每日1次，连续给药2周。
环丙沙星与乳铁蛋白多肽嵌合体联用对铜绿假单胞菌生物膜及密度感知系统信号分子生成的抑制作用左鹏;王爱利;王正云;徐国鹏;胡琼洁;邵冰;徐西琳;熊维宁;熊盛道【摘要】目的比较环丙沙星(CIP)、乳铁蛋白多肽嵌合体(LFchimera)单用及二者联用对铜绿假单胞菌生物膜及密度感知(QS)系统信号分子(AHL)生成的抑制作用.方法以铜绿假单胞菌野生菌株PA01为实验菌株,分为对照组(未干预的铜绿假单胞菌野生菌株PA01)、CIP(0.04 μg·mL-1)组、LFchimera(0.25 μmol·L-1)组、LFchimera(1.00 μmol·L“)组、CIP(0.04 μg· mL-1)±LFchimera(1.00 μmol·L-1)组,分别定量测定并比较各组PA01生物被膜和QS系统信号分子表达.结果与对照组PA01生物膜定量表达(A590) (1.511 3±0.031 8)及QS系统信号分子表达(A420) (0.502 5±0.028 3)比较,CIP(0.04 μ,g·mL-1)组(1.073 3±0.010 9,0.2453±0.014 0)、LFchimera(0.25 μmol·L-1)组(1.065 5±0.011 4,0.235 9±0.010 7)、LFchimera(1.00 μmol·L-1)组(0.665 3±0.012 9,0.108 6±0.007 0)和CIP(0.04μg·mL-1)± LFchimera(1.00 μmol·L-1)组(0.122 1 ±0.013 0,0.048 2±0.005 4)均下降(均P＜0.05);CIP(0.04 μg·mL-1)组和LFchimera(0.25 μmol·L-1)组比较,PAO1生物膜定量表达和QS系统信号分子表达差异无统计学意义(P＞0.05);LFchimera(1.00 μmol·L-1)组PA01的生物膜定量表达和QS系统信号分子表达较LFchimera(0.25 μmol·L-1)组和CIP(0.04 μg·mL-1)组均降低(均P＜0.05);CIP(0.04ug·mL-1)±LFchimera(1.00 μmol·L-1)组和各单独用药组比较,PAO1生物膜的定量表达和QS系统信号分子表达均下降(均P＜0.05).结论亚抑菌浓度的CIP和LFchimera都对铜绿假单胞菌生物膜的形成和QS系统信号分子的生成有抑制作用,且提高LFchimera浓度可加强抑制作用;CIP与LFchimera联用能增强抑制作用,这种作用可能是通过抑制QS系统信号分子的生成实现.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2015(034)001【总页数】5页(P35-39)【关键词】环丙沙星;乳铁蛋白;铜绿假单胞菌;生物膜;密度感知系统【作者】左鹏;王爱利;王正云;徐国鹏;胡琼洁;邵冰;徐西琳;熊维宁;熊盛道【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重症医学科,武汉430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重症医学科,武汉430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重症医学科,武汉430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重症医学科,武汉430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重症医学科,武汉430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重症医学科,武汉430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重症医学科,武汉430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重症医学科,武汉430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重症医学科,武汉430030【正文语种】中文【中图分类】R969;R965铜绿假单胞菌是医院内感染的重要病原菌[1]，其致病机制与细胞相关性毒力因子和分泌性毒力因子有关，例如其产生的弹性蛋白酶、胞外酶S、磷脂酶C和绿脓菌素等[2- 3]，它们的表达都受密度感知(quorum sensing，QS)系统调控。
铜绿假单胞菌耐药机制包括多个方面，其中之一是铜绿假单胞菌可以在细菌表面形成一层生物膜，不易被抗菌药物渗透和杀灭，从而引起感染反复发作，而生物膜的形成也与QS系统密切相关。
乳铁蛋白多肽嵌合体(lactoferrin-derived peptides chimera，LFchimera)对铜绿假单胞菌具有杀菌作用，同时可以抑制生物膜及QS 系统相关毒力因子的生成[4]，那么在临床上被公认的具有抗铜绿假单胞菌作用的喹诺酮类药物环丙沙星(ciprofloxacin，CIP)与LFchimera联用是否也有类似的甚至更强的的作用，目前国内外报道甚少。
因此，笔者以LFchimera为对照进一步研究CIP与LFchimera联用对铜绿假单胞菌生物膜及QS系统信号分子酰化高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserinelactone，AHL)生成的影响，为临床治疗铜绿假单胞菌感染提供实验依据。
1.1 菌株本研究所用铜绿假单胞菌野生菌株PAO1来自华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科微生物室；Escherichia coli(E.coli)MG-4(pKDT17)由本实验室保存(系由华盛顿大学的 Greenberg教授惠赠)。
1.2 试剂 LFchimera(杭州中肽生化有限公司合成)；CIP、邻硝基酚β-D-半乳糖苷(ONPG)购自美国Sigma公司；胰蛋白胨、细菌蛋白胨、蛋白胨、胰酶大豆肉汤、酵母提取物均购自美国BD公司；其余试剂均为国产分析纯。
本实验室自行配制：溶菌肉汤(lysogeny broth,LB)培养液(10 g·L-1胰蛋白胨，5 g·L-1酵母提取物，10 g·L-1氯化钠)；LB固体培养基(10 g·L-1胰蛋白胨，5 g·L-1酵母提取物，10 g·L-1氯化钠，15 g·L-1琼脂)；1 mmol·L-1磷酸钾缓冲液(0.140 g·L-1磷酸氢二钾，0.052 g·L-1磷酸二氢钾)。
1.3 仪器高速冷冻离心机(Centrifuge 5810R，德国Eppendorf公司；Universal 32R，德国Hettich Zentrifugen公司)；台式恒温振荡器(培英THZ-D型，江苏省太仓市实验设备厂)；Sunrise酶标仪(瑞士Tecan公司)；Elx800酶标仪(美国Bio-Tek公司)；细菌培养箱(WGP-350型隔水恒温培养箱，上海安亭科学仪器厂)；电热恒温鼓风干燥箱(DHG-9140A型，上海精宏实验设备有限公司)；紫外分光光度计(DU-640型，美国Beckman公司)；低温冰箱(MDF U50V 型，日本Sanyo公司)。
1.4 方法以铜绿假单胞菌野生菌株PAO1为实验菌株，分为对照组(未干预的铜绿假单胞菌野生菌株PAO1)、CIP(0.04 μg·mL-1)组、0.25 μmol·L-1LFchimera组、1.00 μmol·L-1LFchimera组、CIP(0.04 μg·mL-1)+LFchimera(1.00 μmol·L-1)组，然后分别定量测定各组PAO1的生物膜和QS系统信号分子的表达，并进行比较。
1.4.1 生物膜定量检测生物膜的形成是通过检测细菌在聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)培养板表面生长黏附的能力进行定量的[5-6]：取-80 ℃冻存PAO1菌株100 μL接种于新鲜LB培养液5 mL，37 ℃震荡培养过夜；将菌液涂布于LB 平板上，37 ℃孵育约20 h，挑单克隆接种于新鲜LB培养液，37 ℃震荡培养过夜，然后用新鲜LB培养液洗涤、悬浮至A600为0.05，继续培养至对数生长期，用新鲜LB培养液稀释至A600为0.05。
在96孔PVC板中完成各组配液，于各组中分别加入细菌悬液95 μL，使CIP、LFchimera及CIP+LFchimera达到所需终浓度。
37 ℃孵育24 h。
每孔无菌纯化水200 μL洗涤3次去除浮游细菌，静置风干后，每孔加入0.1%结晶紫150 μL在室温静置15 min，然后用无菌纯水漂洗3次去除剩余结晶紫。
再每孔加入95%乙醇200 μL洗脱生物膜上的结晶紫，静置15 min。
最后酶标仪检测A590。
1.4.2 QS系统信号分子检测 E.coli MG-4自身不能产生AHL分子，也不能合成β-半乳糖苷酶(lacZ)。
质粒pKDT17含有一个lasR lasB'-lacZ报告基因系统，lasR是铜绿假单胞菌密度感知系统的顺式调控元件，只有当AHL信号分子与lasR结合后才能启动lasB'-lacZ基因的表达[7-9]。
因此AHL检测菌株E.coli MG-4(含有质粒pKDT17)菌体内β-半乳糖苷酶活性高低由外界AHL调控，能够反应所在环境中的AHL水平。
β-半乳糖苷酶活性检测采用邻硝基酚β-D-半乳糖苷(ortho-nitrophenol beta-D-galactose glucoside,ONPG)法：β-半乳糖苷酶能将无色的ONPG水解为黄色的邻位硝基苯酚(orho-nitrophenol,ONP)，然后通过分光光度计检测产物ONP。
操作步骤如下：挑取MG4单克隆37 ℃ 、200 r·min-1振摇12 h，稀释至A600为0.1的细菌悬液；取-80 ℃冻存PAO1菌株100 μL接种于新鲜LB培养液5 mL，37 ℃震荡培养过夜，将菌液涂布于LB平板上，37 ℃孵育约20 h，挑单克隆接种于新鲜LB培养液，37 ℃震荡培养过夜，然后用新鲜LB培养液洗涤、悬浮至A600为0.05；于各组中分别加入铜绿假单胞菌细菌悬液5 mL，使CIP、LFchimera及CIP+LFchimera达到所需终浓度，37 ℃恒温培养箱200 r·min-1振荡孵育24 h；1%(体积比)乙酸酸化的乙酸乙酯5 mL从各组铜绿假单胞菌过夜培养物10 mL中萃取AHL信号分子，分装于离心管中干燥；在各组离心管中加入反应缓冲液100 μL，反应1min后加入LB培养液800 μL，加入MG4细菌悬液100 μL，30 ℃、200 r·min-1振摇5.5 h；12 000 r·min-1离心2 min后收集细菌，加入细菌裂解液裂解细菌，12 000 r·min-1离心10 min收集上清液；在总体积为1 mL的柠檬酸反应缓冲液(0.1 mol·L-1 柠檬酸用氢氧化钠调至pH 4.5)中含0.8 μmol·L-1的ONPG，37 ℃孵育30 min后，用0.5 mol·L-1 冷碳酸钠1 mL终止反应，用紫外分光光度计于420 nm波长处测定ONP的A值。
