蜂胶黄酮对D一半乳糖致衰小鼠学习记忆及脑组织NO含量、
- 格式:pdf
- 大小:251.86 KB
- 文档页数:3
蜂胶黄酮抗小鼠运动性疲劳的实验研究潘燕;彭彦铭【摘要】探讨蜂胶黄酮对运动小鼠的抗疲劳效用.将50只健康昆明(KM)小鼠随机分为安静对照组(A)、力竭即刻对照组(B1)、力竭即刻蜂胶黄酮组(C1)、力竭恢复对照组(B2)、力竭恢复蜂胶黄酮组(C2),每组10只.B、C组进行4周的递增负荷游泳训练,并于最后一次训练至力竭,观察小鼠一般状态,记录小鼠游泳力竭时间,测定心肌细胞自由基含量及抗氧化酶活性.结果显示:B组小鼠心肌自由基含量显著增高(P<0.05).抗氧化酶活性均显著下降(P<0.05):C组小鼠心肌细胞自由基含量显著低于B组(P<0.05).抗氧化酶活性显著高于B组(P<0.05),且C组小鼠游泳力竭时间明显长于B组(P<0.05),精神状态良好.结论:蜂胶黄酮可延长小鼠游泳至力竭时间、降低心肌脂质过氧化损伤,具有提高机体耐力运动能力、延缓疲劳出现及促进疲劳消除的作用.【期刊名称】《辽宁体育科技》【年(卷),期】2011(033)001【总页数】4页(P38-40,43)【关键词】蜂胶黄酮;疲劳小鼠;心肌细胞;自由基【作者】潘燕;彭彦铭【作者单位】湖北师范学院体育学院,湖北,黄石,435002;湖北师范学院体育学院,湖北,黄石,435002【正文语种】中文【中图分类】G804.32随着现代竞技运动水平的提高,比赛的日益激烈,运动员在运动训练过程中承受的负荷越来越高,出现运动性疲劳的几率也越来越大。
运动引起的疲劳能否及时消除,关系到运动技能的掌握和运动成绩的提高,甚至关系到运动员的健康。
近年来,中医药及针灸,尤其中药补剂应用于运动医学中取得了可喜的成果。
然而,采用蜂胶黄酮抗运动性疲劳的报道少见。
蜂胶被誉为“紫色黄金”,具有较强的抑菌作用,能治疗多种疾病,并具有天然的抗氧化性能和增强机体的免疫功能。
蜂胶的生物学、药理学及医疗功效主要与其所含的黄酮成分有关,其内含40余种黄酮化合物,被誉为“黄酮化合物之宝库”[1-4]。
第34卷第3期吉林医药学院2013年06月J our nal of Ji l i n M edi cal 学报V01.34N o.3C ol l e ge J un.2013———161———文章编号:1673-2995(2013)03-0161-04大豆异黄酮对D.半乳糖所致衰老大鼠的影响论著顾饶胜1,范红艳1,王艳春1,沈楠2,常影1,任旷1’(吉林医药学院:1.药理教研室,2.实验中心机能实验室,吉林吉林132013)摘要:目的探讨大豆异黄酮(s oybean i sof l avon,SI)对D-半乳糖所致衰老大鼠的作用及其机制。
方法以D一半乳糖(D—ga l act ose,D—gal)120m g/(kg d)颈背部皮下注射6周,构建大鼠衰老模型,次日以灌胃方式给予SI100、200、400m g/(kg d),连续6周。
通过M or r i s水迷宫观察大鼠学习记忆能力的改变;测量大鼠胸腺指数(t hym us w ei ght/body w ei ght,r If.吖Bw)和脾指数(s pl een w e i ght/body w ei ght,SW/B W);分光光度法检测血清中丙二醛(m al ondi al dehyde,M D A)含量、超氧化物歧化酶(s uper oxi de di sm ut as e,SO D)活性、脑组织中N a+一K+一A TP 酶活性。
结果SI中、高剂量可改善D一半乳糖致衰老大鼠的学习记忆能力,使胸腺指数、脾指数增高;增强血清中SO D活性和脑组织中N a+-K+一A T P酶活性,降低大鼠血清中M D A含量,同模型组比较有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。
结论SI的抗衰老作用可能与抗氧化作用、稳定细胞膜有关。
关键词:大豆异黄酮;衰老;D一半乳糖中图分类号:R749.1文献标识码:AE f f ect s of s oybean i s of l avon on t he agi ng i n r at s i nduced by D-gal act oseG U R a o—shen91,F A N H ong—yanl,W A N G Y an—c hunl,S H E N N a n2,C H A N G Y i n91,R E N K uan91+(1.D epar t m ent of Phar m acol ogy,2.E xper i m ent al Science,J i li n M edi c al C oll ege,J i li n ci t y,J i l i n pr ovi nce,132013,C hi na)A bs t r act:O bj ect i ve T o expl or e t he e ffe c t of soybean i s of l avon(S I)on t ll e a百ng i n R at s i nduce d by D—galact os e and i t s m echa ni s m.M et hods T he m odel of agi ng i n r a t s w as bui l t by subc ut a ne ous i nject i on of D-gal ac t ose(D—gal) f or120m g/(kg‘d)f or6w eeks i n vi vo.M eanw hi l e,r a t s w er e t r eat ed w i t h SI100,200and400m g/(kg d)by gas-t roi nt esf i nal adm i ni st r at i on f or6w e eks.M or r i s w a t e r m aze w as used t o m ea s ur e t he l ear ni ng and m em o r y per f or m ance.T hym us w e i ght/body w ei ght(T W/B W)a nd spl een w ei ght/body w e i ght(SW/B W)w er e de t e r m i ned.The co nt en t of m al ondi al dehyde(M D A)i n bl ood s erum,t l l e ac t i vi t i es of super oxi de di s m ut as e(SO D)i n bl ood ser um,N a+一K+.A7r.P a s e i n br ai n t i s s ue w e r e as sayed w i t h spect r ophot om et r y r e spe ct i vel y.R es ul t s M or r i s w at er m a ze s how ed t hat SI 200,400m r/(kg‘d)can i m pr ove l ear ni ng and m em or y per form ance of s eni l e r at s i nduce d by D—gal.C om par ed w i t h m odel gr oup,TW/B W and SW/B W w e r e i nc r eased i n SI200,400m g/(kg d)gr oups.C om par ed w i t h m odel group,t he co nt en t of MD Ai n bl ood s er um i n SI200,400m g/(kg d)gr oups w as s i gni fi cant l y r educe d and t he a ct i vi t i e s of S O D i n bl ood$e l"U l l l,N a+一K+-A T Pase of br ai n t i s s ue i n SI200,400m g/(kg d)gr oups w er e m ar kedl y enhanced (P<0.05o r P<0.01).C oncl usi on SI has obvi ous ant i.agi ng eff ect s w hi ch m ayb e as s oci at ed w i t h ant i oxi dat i on.s t abi l i zat i on of c el l m e m br/t/1PK ey w or ds:s oybean i s of l avon;agi ng;D—gal act os e大豆异黄酮(soybean i sofl avone,SI)是一种在结基金项目:吉林省教育厅“十一五科技计划”项目资助课题(2008402),吉林省教育厅“十一五科技计划”项目资助课题(2010254).作者简介:顾饶胜(1965一),男(汉族),教授,硕士.通讯作者:任旷(1963一),男(汉族),教授,本科.构和功能上与雌二醇非常相似的植物雌激素,主要分布于大豆种子的子叶和胚轴中,种皮中含量极少。
苦参总黄酮对D—半乳糖致衰老小鼠的影响该文研究了苦参总黄酮(flavonoids from Sophora flavescens)对D-半乳糖致衰老小鼠的影响,并探讨其作用机制。
将60只小鼠随机分为对照组、模型组、脑复康组(阳性对照组)、苦参总黄酮低、中、高剂量组。
采用D-半乳糖(160 mg·kg-1)颈背部皮下注射连续30 d建立亚急性衰老小鼠模型,造模同时,苦参总黄酮低、中、高剂量组分别灌胃苦参总黄酮(150,300,600 mg·kg-1),连续30 d。
采用跳台试验、避暗试验来检测小鼠的学习记忆能力,检测脑组织中丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量与超氧化物歧化酶(SOD)、单胺氧化酶-B(MAO-B)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性,检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并且HE染色,光镜下观察脑海马齿状回区组织结构的变化。
结果发现,与模型组比较,苦参总黄酮中、高剂量组及脑复康组能明显延长避暗潜伏期、跳台潜伏期,苦参总黄酮各剂量组及脑复康组均减少避暗错误次数,苦参总黄酮高剂量组及脑复康组可减少跳台错误次数(P<0.05或P<0.01)。
苦参总黄酮中、高剂量组及脑复康组能提高衰老小鼠脑组织中SOD和Na+-K+-ATP 酶活性,降低脑组织中MAO-B的活性、MDA及TNF-α含量,降低衰老小鼠血清中LDH活性(P<0.05或P<0.01)。
苦参总黄酮各剂量组及脑复康组脑组织中Ca2+-ATP 酶活性增强,同模型组比较有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。
病理可见模型组海马齿状回细胞数目减少,细胞排列稀疏,细胞形态欠完整,胞浆稀少,胞核与胞浆界限欠清晰,细胞核深染,固缩不规则形,核仁不明显。
苦参总黄酮组及脑复康组海马组织形态较模型组改善。
可见,苦参总黄酮能改善D-半乳糖致衰老小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与通过减少TNF-α含量而增强抗氧化作用,从而稳定细胞膜、降低脑内MAO-B活性有关。
高纯度银杏黄酮对衰老小鼠学习记忆功能的影响【摘要】目的:研究分析高纯度银杏黄酮对衰老小鼠学习记忆功能的影响。
方法:选取ICR小鼠140只,随机分为4组,A组注射银杏黄酮10ml/kg与D-半乳糖400mg/kg;B组注射脑蛋白水解物5mg/kg与D-半乳糖400mg/kg;C(模型组)组生理盐水0.4ml与D-半乳糖400mg/kg;D组(正常对照使用)注射生理盐水0.4ml。
用药均为每日1次,连续2个月。
2个月后研究分析各组小鼠学习记忆力情况。
结果:在进行跳台实验中A、B两组小鼠学习记忆练习的错误次数均低于C组(t=15.05,P=0.0000)差异有统计学意义;检查小鼠脑组织中乙酰胆碱酯酶活力发现A、B两组明显低于C组(t=175.24,P=0.0000)差异有统计学意义。
结论:高纯度银杏黄酮能够明显缓解因D-半乳糖导致的衰老小鼠的记忆能力,其治疗改善机制可能与小鼠脑组织中乙酰胆碱酯酶递质提升,自由基的清除以及抗脂质过氧化等相关,主要作用与脑蛋白水解质较为一致。
【关键词】高纯度;银杏黄酮;衰老小鼠;记忆功能【中图分类号】R338.64 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028(2015)5-0026-01高纯度银杏黄酮主要是采用特殊技术高度分解银杏叶后的提纯物,黄酮甙含量最高可达到49%,并且有酚类、萜类以及生物碱等各种有效成分,有较多的研究结果表明,高纯度银杏黄酮具有抗脂质过氧化,清除自由基,改善脑血液循环,提高脑组织代谢功能等作用,其药理作用是改善学习记忆功能。
作者通过研究140只衰老小鼠,使用高纯度银杏黄酮后,分析对其记忆学习功能的影响,现将报告如下:1 一般资料与方法1.1一般资料2014年2月~2014年5月期间在我院实验室中进行动物实验,选取140只健康ICR小鼠,均为雄性,鼠龄3~5个月,体重27~33g,采用数字标注法随机将小鼠分为4组,每组35只,A组注射银杏黄酮10ml/kg与D-半乳糖400mg/kg;B组注射脑蛋白水解物5mg/kg与D-半乳糖400mg/kg;C组(模型组)生理盐水0.4ml与D-半乳糖400mg/kg;D组(正常对照使用)注射生理盐水0.4ml。
艾灸及电针对D-半乳糖致衰老小鼠大脑组织形态的影响赵利华;韦良玉;王进声;范俊明;姚平;陈煌【期刊名称】《广西中医药》【年(卷),期】2010(33)4【摘要】目的:观察艾灸及电针对D-半乳糖致衰老小鼠大脑组织形态的影响.方法:健康3月龄昆明种雄性小鼠72只,按随机区组设计分为6组:正常对照组、模型对照组、艾灸1组、艾灸2组、电针组、尼莫地平组,每组各12只.除正常对照组外,余组连续42天颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型;正常对照组连续42天颈背部皮下注射等量生理盐水.第13天艾灸1组、艾灸2组,分别选取小鼠"足三里、悬钟","关元、百会"行艾灸治疗,电针组取"足三里、悬钟"治疗,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,均为隔日1次,共15次.另设自然衰老组(16月龄)昆明种雄性小鼠6只.采用光镜下观察脑组织形态学变化和神经元密度,电镜下观察脑组织超微结构.结果:①正常对照组大脑皮层、海马CA3区细胞结构正常.模型对照组、自然衰老组可见皮层、海马CA3区变薄,大部分神经元变性,胞核与胞浆界限模糊,核固缩,核仁消失.艾灸1、2组,电针组和尼莫地平组仍有不同程度的神经细胞变性,但变性神经细胞数量显著减少.②造模后小鼠大脑皮质、海马CA3神经元细胞密度明显下降(P<0.01),经艾灸、电针及尼莫地平干预治疗后神经元细胞密度均有显著提高(P<0.01).且艾灸及电针在提高大脑皮质神经元密度方面效果优于尼莫地平(P<0.05或P<0.01).结论:艾灸及电针均可减轻D-半乳糖造成的氧化损伤,保护神经元细胞.【总页数】4页(P47-50)【作者】赵利华;韦良玉;王进声;范俊明;姚平;陈煌【作者单位】广西中医学院第一附属医院,530023,南宁市东葛路89-9号;广西中医学院第一附属医院,530023,南宁市东葛路89-9号;广西中医学院第一附属医院,530023,南宁市东葛路89-9号;广西中医学院第一附属医院,530023,南宁市东葛路89-9号;广西中医学院第一附属医院,530023,南宁市东葛路89-9号;广西中医学院第一附属医院,530023,南宁市东葛路89-9号【正文语种】中文【中图分类】R742.8;R245.3【相关文献】1.艾灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆、大脑组织NOS/NO-cGMP信号系统及c-fosmRNA的影响2.金莲花中荭草苷和牡荆苷对D-半乳糖致衰老小鼠脂褐素和脑组织形态学的影响3.艾炷灸、电针对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力和脑组织c-fos mRNA 的影响4.夏黑葡萄花青素在D-半乳糖致衰老小鼠大脑、肾脏和脾脏组织中的抗衰老作用5.艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠大脑组织形态和超微结构的影响因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
探讨蜂胶的药理作用作者:申东浩来源:《中国科技博览》2013年第15期【分类号】:R285.5[摘要] 蜂胶具有免疫增强作用、抗氧化作用、降血脂作用、护肝作用、降血糖作用、抗菌作用、提高记忆力等多种药理作用。
本文根据近年的文献,阐述蜂胶的药理作用,为合理用药提供依据,为临床用药安全提供保证;阐述蜂胶的良好开发前景,为蜂胶的发展提供科学依据。
[关键词] 蜂胶;药理作用;综述;研究蜂胶是蜜蜂从植物芽孢和树干处采集的树脂,混入蜜蜂上颚腺分泌物和蜂蜡等形成的一种具有芳香味的黏性胶状固形物。
蜂胶作为一种新型的保健食品与药品,已经成为保健食品研究领域的热点。
1 免疫增强作用胡怡秀等探讨北京蜂胶对正常小鼠免疫功能的影响,与阴性对照组比较,0.367、1.101 g/(kg·bw)剂量能明显提高小鼠的迟发型变态反应的能力,1.101 g/(kg·bw)剂量能明显提高小鼠抗体生成细胞数、半数溶血值,明显增强小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力,明显提高小鼠NK细胞活性;3个剂量对小鼠体重增长、胸腺体重比值、脾脏体重比值、ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力均无明显影响,可以看出蜂胶具有增强免疫力作用。
谭宗艳等根据《保健食品检验与评价》方法检测了蜂胶对小鼠免疫免疫功能的影响,结果证明,蜂胶具有促进迟发型变态反应的作用;实验还证明,蜂胶有促进小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清功能的作用。
于晓红等研究采用氢化可的松免疫功能低下小鼠模型(HC小鼠模型),证实蜂胶有增强免疫力的功能。
李淑华等利用单克隆抗体技术检测实验小鼠药物处理前后T细胞总数及亚群变化,用MTT法检测T细胞增殖;实验证实了蜂胶乙醇提取液能促进淋巴细胞增殖,增加T细胞总数并调整T细胞亚群紊乱,说明EEP对免疫功能低下小鼠细胞免疫功能具有免疫刺激和调节作用。
2 抗氧化作用陈明之研究了蜂胶清除自由基和抗油脂氧化作用的能力。
结果表明,蜂胶提取液清除-OH 自由基的能力与总黄酮含量呈正相关;蜂胶具有良好的抗油脂氧化能力,其能力略高于同浓度的二丁基羟基甲苯(BHT)。
・1590・骨吸收不能正常沉积到骨矿,以及骨矿中原有BGP也因骨吸收亢进使进入血液的量增加,都导致SAMP6小鼠血清BGP水平显著高于SAMRI。
以上结果说明SAMP6小鼠伴随衰老有骨转换加剧,骨钙溶出增多;而尿钙排泄上升及体内钙重新分布至主动脉等软组织的倾向。
此外,血管钙化与衰老有关,衰老的过程伴有细胞内游离钙增加,动脉组织钙超载及多种致病因素共同引起钙沉积,最终导致血管组织钙化,并促使钙从骨骼向其他组织进一步迁移¨…。
病理学结果提示,8月龄SAMP6小鼠主动脉已发生形态功能方面的改变,并存在轻微钙化现象,钙化区位于主动脉壁中膜。
血管钙化发生于大动脉和中动脉管壁的内膜和中膜。
内膜钙化与动脉粥样硬化性病变相关联,主要发生于脂质条纹形成期,呈现为小而弥漫分布的羟基磷灰石晶体钙沉积,并形成与生理性骨发育类似的细胞内基质小泡。
中膜钙化独立于动脉粥样硬化病变存在,主要发生于衰老、糖尿病和尿毒症等病理状态下的血管。
中膜钙化主要发生在无炎性细胞浸润及脂质沉积的环境中,动脉中膜的弹力层出现基质小泡¨”。
SAMP6小鼠主动脉钙化斑位于中膜而非内膜,与衰老所致的血管钙化位置一致,属中膜钙化;其骨质疏松、动脉中膜轻微钙化和平滑肌细胞、弹力板形态结构的异常,是老龄时体内钙代谢异常,造成钙在细胞内外、组织间分布失衡的具体体现。
综上,骨质疏松小鼠SAMP6伴衰老有主动脉形态结构异常及中膜轻度钙化的特点,可深入对其加以研究,以阐明动脉钙化和骨质疏松间发病机制的相关性。
4参考文献1KielDP,KauppilaU,CupplesLA,eta/.Bonelossandtheprogressionofabdominalaorticcalcificationovera25yearperiod:theFraminghamHeartStudy[JJ.CalcffTissueInt,2001;68(5):271-6.2HakhE,PolsHA,vanHemertAM,eta1.Progre∞ion0faorticcalcifica—tionisa.∞oeiatedwithmetac酬bonelossduringmenopause:apopula-don.basedlolIgitudinalstudy(J].ArterioselerThrombVascBiol,2000;20(8):1926-31.3刘忠厚.骨质疏松学[M).北京:科学出版社,1998:509.4ShenH,BielakLF,StreetenEA,eta/.Relationshipbetweenvascularcal・cificationandbonemineraldensiWintheold-orderAmish[J】.CalcifTis-sueInt,200r7;80(4):244-50.5BucayN,SarosiI,DunstanCR,eta/.Osteoprotegerin—deficientmicede—velopearlyonsetosteoporosisandarterialcalcification[J].GenesDev.1998;12(9):1260-8.6Kuro-oM。
MatsumuraY,AizawaH,“a/.Mutationofthemouseklotbogeneleadstoasyndromeresemblingageing(J].Nature,1997;390(6655):45.51.7ChenH。
ShoumumS,EmuraS.Ultrastmcturalchangesinbonesofthe∞-nescence.acceleratedmouse(SAMP6):nmurinemodelforsenileosteo-porosis[J].HistolHistopatbol,2004;19:677-85.8LeeAJ,HodgesS,EastellI乙Measurementofoateocalcin[J].AnnChnBiochem。
2000;37:432-46.9EtfingerB,SanMartinJ,CramG,eta1.DifferentialeffectsofteriparatideonBMDaftertreatmentwithraloxifeneoralendrannte[J].JBoneMinerRes,2004;19:745-51.10MoriH,SetoS,OkuY,eta1.Therelationshipbetweentheaolmcpulsewavevelocityandoateoporosisinelderlywomen(J].NipponaonenIgukkaiZasshi,199l;28(2):200-4.11VattikutiR,TowlerDA.Osteogenicregulationofvascularcalcification:仰earlyperspective[J].AmJPhysiolEndocrinolMetab,2004;286:E686-96.[2007-12-04收稿2008-04-09修回](编辑张慧)蜂胶黄酮对D一半乳糖致衰小鼠学习记忆及脑组织NO含量、NOS和AchE活性的影响张悦赵蕾袁丽杰(哈尔滨医科大学大庆校区,黑龙江大庆163319)【摘要】目的探讨蜂胶黄酮对D.半乳糖所致急性衰老小鼠学习记忆障碍保护作用及其脑组织中NO含量、NOS和AchE活性的变化。
方法皮下注射D.半乳糖100nc/kg共30d.制造衰老模型小鼠。
实验组灌胃蜂胶黄酮300me/k930d后,用跳台法测定小鼠学习记忆能力,同时测定小鼠脑内NO含量、NOS和Ache活性。
结果D.半乳糖所致急性衰老小鼠记忆能力明显降低,表现为跳台实验的错误次数明显增加(P<0.05),以及脑组织中NO含量、NOS及AchE活性的增加(均P<O.01)。
蜂胶黄酮组能够减少小鼠电击次数(错误次数),24h重复实验,可延长跳下平台的潜伏期,错误次数明显减少(均P<O.05);同时降低了脑内NO含量、NOS及AchE活性(均P<O.01)。
结论蜂胶黄酮对D一半乳糖所致衰老小鼠学习记忆障碍具有保护作用,能增强学习记忆能力,其机制可能与降低脑内NO含量及NOS、AchE活性有关。
[关键词]蜂胶黄酮;学习记忆;D一半乳糖【中图分类号】船勰【文献标识码】A[文章编号】1005020212008)16-1590-03基金项目:黑龙江省卫生厅项目(2006318)作者简介:张悦(1965一),女,硕士,副教授,主要从事中西医结合抗衰老研究。
据统计,老年痴呆患病率在65岁以上的老年人中占3%一8%,在80岁以上老年人高达20%‘¨。
中医药治疗老年痴呆具有明显的特色和优势。
蜂胶黄酮是蜂胶中所含的主要有效成分之一,药理作用广泛。
多项研究已表明其具有清除自由基、万方数据毯悦笠竖照墓酩盟望:坐塾擅塾塞41匦堂望运丝垦魑鱼堡盟Q宣量,塑Q!塑叁!些适丝的丝蛔复!i翅抗脂质过氧化、促进脑血液循环、改善脑组织代谢等作用‘”。
本实验旨在探讨蜂胶黄酮对急性衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用及机制,为蜂胶黄酮在治疗老年痴呆方面的临床应用提供理论依据。
1材料与方法1.1试剂与仪器蜂胶黄酮由黑龙江中医药大学生化教研室采用醇提取获得,黑龙江省中药研究所鉴定并测定含量。
D一半乳糖为Sigma公司产品,NO、NOS、AchE测定试剂盒、双缩脲蛋白标准试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
跳台装置为蚌埠医学院无线电二厂生产,超声波细胞粉碎机购自宁波科生仪器厂,高速冷冻离心机D-37520为德国HERAEUS公司产品,紫外可见分光光度计WF2800一D3A购于北京第二光学仪器厂。
1.2实验动物及分组昆明种健康小鼠,体重(25-I-2)g,雌雄各半,小白鼠常规喂养6d。
随机分为空白对照组(A)、D-半乳糖衰老模型(B)组和蜂胶黄酮组(C),每组lO只。
实验小鼠均由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。
除对照组外,致衰老模型组和蜂胶黄酮组每天用D一半乳糖150mg/kg颈背部皮下注射连续30d,空白对照组组皮下注射等剂量生理盐水,自由进食进水;造模同时C组灌胃蜂胶黄酮300mg/kg,A组及B组灌服等量生理盐水,每天1次,连续给药30d。
模型组连续给D一半乳糖30d后,小鼠行动迟缓,毛色灰暗,形体瘦弱,呈明显的衰老体征,证明衰老模型成功建立。
1.3实验方法和观察指标1.3.1小鼠跳台实验¨3给药30d后各组小鼠分别进行跳台实验。
实验开始前将动物置于实验室适应环境1h,实验开始时,将动物放在跳台装置的安全台上,适应环境3min,然后通以36V电压,动物跳至铜栅时既受到电击,为错误反应,其正确反应是跳回安全台。
如此训练5min,记录错误次数为学习成绩。
24h后重复测验,测验时先将跳台装置通以36V电流,然后将动物放在安全台上。
记录3rain内的错误次数及潜伏期(从安全台第1次跳下的时间),此为记忆成绩。
1.3.2蜂胶黄酮对脑组织NO含量、NOS及AchE活性的影响①组织匀浆制备:末次给药1d后,各组动物颈椎脱臼处死,取脑,冷生理氯化钠溶液冲洗残血,拭干。
精确称取脑组织,剪碎,置超声波组织匀浆器中,加入9倍预冷的氯化钠溶液或根据需要加入蒸馏水,制取10%的脑组织匀浆待测。
②测试方法:NO测定:硝酸还原酶法;NOS测定:比色法;AchE测定:比色法。
以上均按试剂盒说明操作。
1.4统计学方法数据用i-t-s表示,采用SPSSll.0软件进行方差分析。
2结果2.1跳台实验与模型组相比较,蜂胶黄酮组能够明显减少5rain内受电击次数。
24h重复实验,蜂胶黄酮能够明显延长小鼠第1次跳下平台潜伏期,缩短小鼠的逃避潜伏期,降低急性衰老小鼠3rain内错误数。
提示蜂胶黄酮能抵御D-半乳糖对脑学习记忆功能力损伤作用(见表1)。
2.2蜂胶黄酮对脑内NO含量、NOS和AchE活性的影响模・159l・型组与正常组比较有极显著差异(P<0.01),说明皮下注射D.半乳糖已造成小鼠脑AchE的活性升高,进而造成实验性衰老模型,与其学习记忆功能低下相一致。
蜂胶黄酮与模型组相比较,有非常显著差异(P<0.01),提示蜂胶黄酮能够对抗D一半乳糖致衰老小鼠所引起的脑NO、NOS、AchE的升高,说明蜂胶黄酮对实验性衰老模型小鼠有一定的治疗作用(见表2)。
表1各组小鼠跳台实验学习记忆成绩比较(i4-¥)与B组比较:1)P<0.05表2蜂胶黄酮对小鼠脑内NO、NOS、AchE的影响(i4-¥)与B组比较:1)P<0.Ol3讨论NO是一个能扩散的有高度化学活性的气体分子,具有生理及病理双重作用。