免疫组化套餐
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病理科免疫组化在临床上得应用及其意义免疫组化技术就是以免疫学得抗原抗体反应为其理论基础发展起来得一门方法学,在生物学领域尤其就是在医学得基础与临床研究中发挥重要得作用,对疾病尤其就是肿瘤得诊断、鉴别诊断及发病机制得研究提供了强有力得手段、免疫组化技术就是20世纪70年代初Sterb Berger 在酶标法得基础上发明得,80年代在外国开始应用于临床研究与诊断,90年代初在我国逐渐开始应用于疑难病例得诊断与鉴别诊断。
随着新技术得不断发展,抗体种类从研发开始得十几种发展到目前数百种抗体应用于临床科研得各个领域,我国在临床病理诊断上可用抗体293种。
由于抗体较昂贵,所以各院根据活检量与病种不同选择不同得抗体,这些抗体对大部分疑难病例得诊断起到重要得辅助作用、对病人得预后及指导治疗具有重要得意义。
一、目前常用得抗体分四大类1。
上皮性标记物:CKhigh(AE3), CK low,CK-pan,CK19,CK7, CK20,EMA,CEA,-CA 15-3,SCLC , E—Caldeherin,CA125, Tg(甲状腺球蛋白) ,TTF—1ﻫAFP。
这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于上皮组织,如果就是恶性肿瘤,就就是癌2ﻫ.间叶组织标记物:SMA ,Desmin,Vimentin,Lysozyme,AACT, CD68 MyoD1,CD117,这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于间叶组织,如果就是恶性肿瘤,就就是肉瘤、3ﻫ、神经及神经内分泌标记物:CgA ,Synaptophysin,NSE,S-100:NF (神经纤维丝蛋白),GFAP,CD99,CD56、4淋巴细胞标志物:T cell标记物:CD3, CD45RO, CD43,CD5, CD8,CD4,ALK,GranmB , CD56 。
ﻫBcell标记物:CD—20 ,CD79a,CD23, CD10,Kappa ,Lambda CD21CD38 ,CyclinD1 ,Bcl—2。
病理学教材思考题答案浙大临床病理学思考题及答案临床病理学思考题及答案一、分子临床病理 1. 请结合自己的专业,简单设计一个免疫组织化学标记的方案来研究一个课题(一抗和二抗的名称和来源,一抗的定位预测;实验方案,生物学意义和临床意义,实验设计(每个对照组的意义)。
结果判断。
一抗:鼠抗人VEGF单克隆抗体;二抗:羊抗小鼠Biotin标记抗体;一抗的定位预测:表达在肺组织的细胞浆中;实验方案:选择非小细胞肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织三组石蜡标本切片。
通过抗体标记 VEGF,经过免疫组化染色后判定相关蛋白表达与肺细胞癌的临床病理特征的关系。
生物学意义:VEGF是肿瘤血管生成和侵袭转移过程中的关键因素,可以通过其相关的特异性受体选择性作用于内皮细胞发挥作用。
临床意义:通过了解非小细胞肺癌VEGF的表达,可能预测非小细胞肺癌的转移、预后,从而指导抗肿瘤治疗。
实验设计:通过设立癌旁组织和正常肺组织的对照组,对比所研究蛋白在不同组织中表达的差异,进而得出实验结论。
结果判断:免疫组化染色后,利用电脑的病理图文报告分析系统进行结果判读,对染色结果定量分析。
掌握以下原则:阳性细胞定位是否明确,是胞膜、胞浆还是胞核阳性间质清晰,无背景着色;阳性细胞要在5%以上,才能定为阳性;参考评价:<5% -, 5%-25%+, 25%-50%++,>50%+++。
2. 免疫组化的应用范围。
1)提高病理诊断准确性;2)对疾病的预后和治疗的意义;3)癌基因蛋白的应用;4)对肿瘤增生程度的评价;4)微小病灶的发现;5)在肿瘤分期上的意义;6)指导肿瘤的治疗;7)免疫性疾病的辅助诊断;8)病原微生物的检测;3. 何谓“套餐式”免疫标记?举两例说明每一种组织的标记物必须用2种以上的抗体,除了能够阳性正面证实的抗体,还要有能阴性反面证实的抗体。
例如:a. Keratin,Vimentin,LCA,S100四种抗体组合。
Keratin 角蛋白,存在于上皮细胞,Keratin阳性且其它阴性的结果可以筛选出可疑癌或生殖细胞瘤;Vimentin波纹蛋白,存在于间质细,LCA存在于血细胞,Vimentin和LCA阳性的结果可以筛选出可疑淋巴瘤;S-100 存在于神经内分泌细胞,Vimentin和S100阳性的结果可以筛选出可疑神经内分泌肿瘤;Vimentin阳性的结果可以筛选出可疑肉瘤。
免疫组化物价标准《免疫组化物价标准,你了解多少?》嘿,朋友们!你们知道吗?在医学的奇妙世界里,免疫组化就像是一场精彩的魔法秀,而物价标准就是这场魔法秀的神秘规则!要是不搞清楚这个标准,那可就像是在魔法世界里瞎转悠,一不小心就会掉进坑里哦!一、“价格之钥:开启免疫组化宝藏”在免疫组化的领域里,价格可不是随便定的哟!“哎呀呀,这免疫组化的价格就像是一把神奇的钥匙,能打开通往准确诊断的大门呀!”免疫组化涉及到各种试剂、技术和人力成本,不同的项目和检测方法都会影响价格。
就好比你去超市买东西,不同品牌、不同规格的商品价格肯定不一样啦!比如一些常见的免疫组化标志物检测可能价格相对较为亲民,但要是一些特殊的、罕见的标志物检测,那价格可能就会稍微高一些咯,这就像是买普通零食和进口高级零食的区别嘛!二、“成本之谜:探寻价格背后的秘密”“哇塞,这免疫组化的成本就像是一个神秘的谜团,等着我们去解开呢!”这里面可包含了好多因素呢!试剂的质量和来源,那可是至关重要的呀,就像你玩游戏选装备,肯定得挑好的呀!还有技术人员的专业水平和经验,这就像是武林高手的内力一样,厉害的人才能把免疫组化做得又快又准!另外,仪器设备的先进程度也会影响成本哦,好的设备就像是超级跑车,速度和性能都是一流的!医院的运营成本也得算进去呀,毕竟人家也得维持运转嘛。
所以说,免疫组化的物价标准可不是随便定定的,那都是有原因的哟!三、“合理定价:平衡的艺术”“嘿呀,这合理定价就像是走钢丝,得把握好平衡呀!”医院和检测机构可不能乱定价哦,得考虑到患者的承受能力和医疗的公益性呢!既要保证检测的质量和准确性,又不能让患者望价兴叹呀!这就需要在成本和收益之间找到一个最佳平衡点,就像玩跷跷板一样,两边都得照顾到。
而且,相关部门也会对物价进行监管和调控呢,防止出现乱收费的现象,这可是保障咱老百姓权益的重要举措呀!四、“价值之思:免疫组化的意义”“哇哦,免疫组化的价值可真是不可估量呀!”它能帮助医生更准确地诊断疾病,就像给医生配备了一副超级透视眼,能看到疾病的本质。
做病理咋还让做免疫组化检查?前几天,我写了一篇名为《为了几百元钱的免疫组化费,病人快不行了》的文章发表在一医学网站上,说一位46岁的农村男病人因左侧腹股沟多发肿块并疼痛在自己所属的镇卫生院就诊,医生考虑淋巴结炎,但输液消炎治疗效果却不理想。
怕是恶性,医生给他做了肿块摘除手术,术后将标本送给我们医院做病理检查。
HE切片出来后,我考虑恶性淋巴瘤,在征得病人家属的同意后,将HE切片及蜡块通过快递公司送到济南的一家省级医院,请省里的专家会诊。
省里的专家会诊后也考虑淋巴瘤,要求再做4项免疫组化检查,每项收费100元。
病人的妻子听后,竟说我们是骗病人的钱,断然拒绝了,并且还要求退回会诊费及病理费。
结果尚未半年,病人的左侧腹股沟就又发现了肿块,继而右侧腹股沟及左侧腋物、双侧颈部也陆续发现了肿块,最终还是通过免疫组化检查确诊为恶性淋巴瘤(霍奇金淋巴瘤结节硬化型伴肉芽肿及小脓肿形成)。
由于错过了恶性淋巴瘤的最佳治疗时机,尽管辗转多家各级各类医院,花费了不少的医药费,病人的生命仍进入了到计时。
文章发表后被网友纷纷转发,不少读者在为病人感到惋惜的同时,也感到迷惑:什么是免疫组化检查?做病理咋还要做免疫组化检查?就连某些从医多年的临床医生,对此也是不太理解:病理检查不就是在显微镜下看看切片吗?怎么时不时就让病人做免疫组化检查呢?要明白这个问题,首先要从病理学说起。
病理学是研究疾病病因、发病机制、形态结构改变以及由此而引起的功能变化的一门基础医学与临床医学之间的桥梁学科。
病理学作为一门科学,从18世纪中期就开始了,主要是通过尸体解剖将器官所见与临床表现相联系。
1843年Virchow开始用显微镜观察病变部位的细胞和组织结构,并于1858年发表了他著名的“细胞病理学”,从而开创了用显微镜观察细胞和组织结构的细胞病理学时代。
1932年Knall和Rusha发展了透射电镜,1938年Ardenne首创了扫描电镜。
电子显微镜的问世,使病理学从细胞水平向亚细胞结构深入,产生了超微结构病理学。
的分析,其在甲状腺肿瘤诊断中的应用报道不一。
陈英等[9]认为CD56是诊断甲状腺乳头状癌有意义的抗体,特别是在鉴别滤泡型甲状腺乳头状癌和其他滤泡性肿瘤中具有重要意义。
Scarpino等[10]报道61例甲状腺乳头状癌中有18例CD56呈阴性,43例甲状腺乳头状癌中CD56阳性,但肿瘤细胞阳性率<5%,且CD56阳性肿瘤细胞位于肿瘤浸润的边缘,提示CD56失表达可能与肿瘤侵袭能力强有关。
杨俊杰等[11]报道61例甲状腺乳头状癌中仅1例CD56散在表达。
本组CD56在甲状腺乳头状癌中敏感度较低,仅为56 80%,部分病例阳性细胞约100%,与良性病变相似,但是其特异度高,在良性病变中均呈强阳性,提示CD56失表达可有助于提高甲状腺乳头状癌诊断的准确性。
TPO属于糖基化血红素蛋白,存在于甲状腺滤泡细胞游离面,是与甲状腺激素合成相关的酶,在T3T4合成中起重要的催化作用。
位嘉等[4]应用免疫组化法检测甲状腺乳头状癌及良性乳头状病变中TPO的表达,其阳性率分别为11 9%、98 4%,其敏感度、特异度和准确度分别为88 05%、98 36%、90 91%。
罗巧明等[8]报道TPO特异度及准确度更好。
本组TPO的敏感度、特异度和准确度分别为81 02%、100 0%、88 37%。
TPO在良性病变中均为强阳性,染色均匀一致,而在甲状腺乳头状癌中主要为弱阳性,表达部位和强弱不等,呈斑驳状。
因此,TPO是一种特异性强的标志物。
综上所述,所有抗体均有可能出现假阳性或假阴性,单项指标应用存在局限性。
甲状腺乳头状癌中CK19和MC为阳性抗体,CD56和TPO为阴性抗体,在实际工作中可将几种指标联合应用、相互补充,并结合组织形态学特征进一步提高甲状腺乳头状癌诊断的准确性。
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免疫组化套餐免疫组化套餐泌尿与男性生殖系统肿瘤1.前列腺癌:CK、P63、34ßE12、PSA、P504S(9AMAC)、AR2.前列腺增生/腺瘤:CK、P63、34BE12、P504S3.肾癌:CK、EMA、Inhibin、Melan-A、CK7、Vimentin、PAX2、CD104.肾母细胞瘤:WT-1、CK、P53、Ki-675.膀胱尿路上皮癌:CK7、CK20、P53、Ki-67、P636.精原细胞瘤:CK、PLAP、CD117、LCA、OCT3/4淋巴造血系统肿瘤7.胸腺肿瘤:CK、CD3、CD5、CD20、TdT、EBV*8.霍奇金淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*、PAX-59.非霍奇金淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、TdT、CD4310.间变大细胞淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*11.弥漫性大B细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD30、Ki-6712.小B细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD79α、CyclinD1、TdT13.T细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD43、CD45RO、CD79α、TdT、TiA-1、Perforin14.套细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD20、CD79α、CyclinD1、TdT、Bcl-2、Ki-6715.T/NK细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD56、TiA-1、Perforin、粒酶B16.淋巴上皮病变/癌:CK、EMA、S-100、Ki-67、P53、EBV*、P63、CD30、CD2017.Burkitt淋巴瘤:CD3、CD20、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki-67、EBV*、TdT18滤泡性淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki6719.脂膜炎样T细胞淋巴瘤:CD2、CD3、CD7、CD20、CD43、Perforin、TiA-1、EBV*20.浆细胞瘤:CD3、CD20、CD38、CD138、CD79α、EMA、κ*、λ*21.坏死性淋巴结炎:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD68、Mac387、CD16322.粘膜相关淋巴瘤:CK、CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD43、CD79a、CyclinD123.血管免疫母细胞性淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD43、CD79α24.组织细胞肉瘤:S100、CD10、CD21、CD35、CD68、Lysozyme、MPO、CD33、CD34、CD11c、CD14、CD45RO25.朗格罕氏细胞增生症/肉瘤:S100、CD1α、CD68、CD35、HMB45、CK、EMA、Ki67、CD4526.指状突树突细胞肉瘤/肿瘤:S100、CD1α、CD68、CD21、CD35、CD3、CD20、CD30、CK、EMA、Ki67、CD4527.滤泡树突细胞肉瘤/肿瘤:CD21、CD35、S100、CD1α、CD68、CD3、CD23、EMA、VIM、MPO、CD34、CD79α、CK、HMB4528.肥大细胞肿瘤:CD117、CD45、CD33、CD68、CD15、CD3、CD20消化系统肿瘤29.胃癌:CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS**30.肠癌:CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS**31.肝细胞癌:AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、P53、HbsAg、Hepatocyte32.肝胆管细胞癌:CK7、CK20、Villin、AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、Hepatocyte、HbsAg33.食道癌:P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、P6334.胰腺癌:CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、Villin、CK7、CK20、35.胰岛细胞瘤:CD56、Syn、CgA、Ki-67、Insulin、CK8/18、CK1939.肝炎病毒:HbsAg、HbcAg、HCV涎腺肿瘤37.涎腺粘液性囊腺癌:CK、P63、SMA、Vimentin、Myosin-heavy chain38.上皮肌上皮癌:CK、P63、SMA、Vimentin、S-100、Myosin-heavy chain39.导管腺癌:CK、P63、SMA、AR、HER2、Myosin-heavy chain40.多形性腺瘤:CK、P63、SMA、S-100、GFAP、Myosin-heavy chain神经内分泌肿瘤41.神经内分泌癌:CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8/1842.肺神经内分泌癌:CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8/18、CD99、TTF-1、P63、Sp-B43.甲状腺乳头状癌:Tg、TTF-1、CK19、HMBE-1、Gelactin-3、Ki-67、TPO44.甲状腺髓样癌:Tg、CT、CD56、CD57、Syn、CgA、CEA45.肾上腺皮质癌:CK、CEA、Inhibin、Melan-A、CD10、CgA、Syn、S10046.肾上腺嗜铬细胞瘤:Syn、CgA、S-100、CK、EMA、Inhibin、Melan-A、47.肾上腺外副神经节瘤:Syn、CgA、S-100、CK、EMA、Inhibin、Melan-A、GFAP48.Merkel细胞癌:CK7、CK20、Syn、CgA、CK、CD99软组织肿瘤49.促纤维增生性小圆细胞肿瘤:CK、EMA、CD99、S-100、Des、Syn、CgA、50.尤文/PNET/视/嗅/髓母细胞瘤:CD99、S-100、Syn、CgA、CD56、CD57、GFAP、Vimentin51.上皮样血管平滑肌脂肪瘤:HMB45、S-100、Melan-A、CD34、CK、SMA、Vimentin52.上皮样血管瘤:CK、CD34、CD31、CD68、EMA53.孤立性纤维性肿瘤:CD34、Bcl-2、CD99、S-100、CK、Vimentin、SMA54.间皮瘤:CK5/6、HMBE-1、Calretinin、TTF-1、D2-40、CK、WT155.横纹肌(肉)瘤:MyoD1、Myogenin、Desmin、SMA、CK、S100、CD9956.滑膜肉瘤:EMA、CK、CD34、CD99、CD68、S-100、Bcl-2、Vimentin57.皮隆突/恶纤组:CD34、CD68、S-100、SMA、Vimentin58.血管球瘤:EMA、CK、CD34、SMA、S-10059.血管周肌细胞瘤:EMA、CK、CD34、SMA、S-100、Desmin60.梭形/多形性脂肪:CD34、SMA、S-100、HMB45、CK、CD31、CD6861.脊索/副脊索瘤:SMA、S-100、EMA、CK、GFAP、CD6862.腱鞘巨细胞瘤:SMA、MSA、Desmin、CK、Vimentin63.平滑肌(肉)瘤:SMA、MSA、Desmin、CK、S-100、CD34、Vimentin64.软骨母细胞瘤:CD99、S-100、CK、Vimentin65.结节性筋膜炎:CK、SMA、MSA、DES、CD68、S100、Vimentin66.缺血性筋膜炎:VIM、SMA、CD68、DES、S100、CD34、Vimentin67.肌纤维瘤/肌纤维瘤病:VIM、SMA、Actin、S100、EMA、CK、Vimentin68.硬化性纤维母细胞瘤:VIM、SMA、CK、DES、EMA、S100、CD3469.乳腺型肌纤维母细胞瘤:DES、CD34、EMA70.钙化性腱膜纤维瘤:VIM、SMA、MSA、CD99、S10071.血管肌纤维母细胞瘤:DES、SMA、Actin、ER、PR、CD34、S100、CK、fast myosin72.富于细胞性血管纤维瘤:VIM、CD34、DES、Actin、SMA、MSA73.项型纤维瘤:VIM、CD34、CD99、DES、Actin74.Gardner纤维瘤:VIM、CD34、SMA、MSA、DES、ER、PR75.钙化性纤维性肿瘤:Vim、VⅢ因子、XⅢa因子、Des、Actin、S100、CD31、CD34、CK76.巨细胞血管纤维瘤:CD34、CD99、Bcl-277.韧带样型纤维瘤:Vim、SMA、Des、S10078.脂肪纤维瘤病:CD34、Bcl-2、S100、Actin、EMA、CK、Des、CD9979.炎症性肌纤维母细胞性肿瘤:Vim、SMA、Des、CK、S100、ALK、CD11780.低度恶性肌纤维母细胞瘤:Actin、Des、CD34、CD99、S100、CK81.黏液炎症性肌纤维母细胞瘤:Vim、CD34、CD68、SMA、CK、LCA、CD30、T and B转移性肿瘤鉴别82.转移性肺/肝癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、CK、AFP、CD34、Hepatocyte83.转移性肺/胃肠癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、Sp-B、CDX-284. 转移性肺/前列腺癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、PSA、PSAP85. 转移性肺/甲状腺癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、TG86. 转移性腺/鳞癌:CKAE1、CKAE3、CK8/18、CK5/6、EMA、CD15、P6387. 转移性肺/鼻咽癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、EMA、EBV*88.食道低分化癌/神经内分泌癌:Syn、P63、CgA、CD56、CD99、CKAE3、CK5/689.转移性卵巢粘液/浆液性癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、CA125、CDX-2神经系统肿瘤90.垂体瘤:TSH、FSH、GH、LH、ACTH、PrL、P5391.胶质瘤:GFAP、MBP、Vim、EMA、S-10092.少突胶质细胞瘤:Pax-5、GFAP、MBP、Vim、EMA、S-100、CD5793.胶质肉瘤:GFAP、CD68、Vim、S-100、Ki-6794.节细胞胶质瘤:Syn、CgA、GFAP、S-100、CD68、Vim、Ki-6795.神经束膜瘤:S-100、EMA、GFAP、CK、Vim96.恶性外周神经鞘瘤:S-100、CK、HMB45、Desmin、SMA、MyoD1、CD57、MBP97.脑膜瘤:GFAP、EMA、Vim、S-10098.神经纤维/神经鞘瘤:GFAP、EMA、Vim、S-100、CK99.中枢神经细胞瘤:GFAP、S-100、Syn、CD57、MBP、EMA、CgA、Calretinin 100.室管膜瘤:EMA、CK、S-100、GFAP、Syn、CD57、MBP、101.脉络丛乳头状瘤:GFAP、CK、S-100、Syn、EMA、Ki-67、CgA102.颅咽管瘤:CKAE1、EMA、GFAP、CKAE3、Ki-67103.颅内血管母细胞瘤:CD34、CD31、EGFR、CK、EMA、VEGF乳腺及女性生殖器官104.浸润性乳腺癌:P53、Bcl-2、ER、PR、HER2、E-Cadherin、Ki-67、CK7、GCDFP-15 105.浸润性筛状癌/腺样囊性癌:ER、PR、HER2、P63、Laminin106.实性神经内分泌癌:ER、PR、HER2、GCDFP-15、CK7、CK20、CgA、Syn107.子宫内膜样肿瘤/宫颈腺癌:Vim、CK、ER、PR、Inhibin、P16、CEA108.子宫内膜间质肿瘤:Vim、CD10、SMA、Inhibin109.移行细胞癌:CA125、CK7、CK20、P63110.颗粒细胞瘤:CD99、Inhibin、Vim、S100、SMA、CK、CK7、EMA111.卵泡膜瘤-纤维瘤:Vim、Inhibin112.硬化性的间质瘤:Vim、Des、SMA、Inhibin113.Sertoli-间质细胞瘤:Vim、Inhibin、EMA、Ker、ER、PR114.无性细胞瘤:Vim、CD117、PLAP、CK、Des、CEA、S100115.卵黄囊瘤:AFP、CK、CD30、ER、PR116.胚胎性癌:AFP、CD30、CK117.非妊娠绒毛膜癌:CK、hPL、ß-Hcg恶性肿瘤预后与耐药监测指标P53、Bcl-2、PCNA、Ki67、P-gp、TOPOⅡα、GSTπ宫颈CIN病变分级检测指标P16、P53、Ki-67、CD68、Pro-EXC。
免疫组化与病理诊断免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)是临床病理诊断中常用的技术和手段。
从20世纪70年代开始,免疫组化技术就已经应用于病理诊断,对诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。
本文重点讨论了免疫组化技术在临床上的应用与常见的免疫组化指标在临床上的意义。
1. 什么是免疫组化?2. 什么是病理诊断?3. 免疫组化技术在临床上的应用4. 病理诊断中免疫组化的局限性5. 临床上常用指标的意义1、什么是免疫组化?在了解免疫组化在临床上的应用之前,我们先来了解下什么是免疫组化。
免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原。
然后通过免疫动物后获得特异性的抗体,再用此抗体去探测组织或细胞中的同类抗原物质。
由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法(荧光素、酶、金属离子、同位素)将抗原抗体结合的部位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究(Figure 1)。
Figure 1. The theoretical diagram of IHC免疫组化针对的样本主要是组织。
组织是来自患者或动物,经过冷冻或石蜡包埋。
将这些组织制成约4μm厚的切片,封片后再处理。
若样本是细胞,通常被称为免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)。
对于ICC,大部分细胞外基质及其他基质组分被去除,只剩下整个细胞来染色。
ICC 的来源可以是细胞悬液,来自患者或动物(如血涂片、拭子等),或在实验室中进行的组织培养细胞系。
2、什么是病理诊断?病理诊断是研究疾病发生发展和疾病过程中患病机体形态结构、功能代谢改变与疾病转归,从而为疾病的诊断、治疗与预防提供必要的理论基础和实践依据。
病理全流程数字化系统需求说明
一、项目概况
近十年来,随着病理科的快速发展,区域化、集团化、标准化的病理医疗体系需求越来越大。
现我院病理科亟需建设一套病理科全流程信息管理系统,且应用满足浙江大学医学院附属儿童医院的病理医疗信息互联互通,能与医院现有HIS等信息系统对接交互,能确保各类诊疗资料有效地互联互通和务实应用,便于促进医院服务质量和服务效率的提升,加快推进智慧医院相关工作开展,全面提高医院信息化建设水平。
通过本项目建设实现长期、动态、实时的病理工作过程和质量的监督管理,实现信息化管理和精细化质控,深度集成常规病理、分子病理等综合业务模块,完善科室试剂耗材、设备等整体管理,要求该系统具备良好的升级能力,使用临床、教学、科研等领域,满足医院未来高水平的医疗管理需求,打造区域信息化龙头医院。
二、技术参数
三、配置清单(一)软件模块
(二)硬件配置。
免疫荧光(IF、ICC)服务信息采集单类型:福尔马林浸泡组织组织蜡块组织切片96孔板细胞组织包埋切片HE染色预实验拍照客户需知:1)客户检测蛋白的种属,客户提供实验分组情况及实验背景资料,有具体要求请事先说明;2)客户可提供组织块(以4%中性缓冲甲醛固定,如组织块极小请事先说明)、蜡块或切片(使用免疫组化专用切片,以避免实验过程中掉片),细胞免疫荧光(ICC)实验建议优先采用96孔板培养的细胞(以4%多聚甲醛固定),悬浮细胞的免疫荧光实验每个组至少提供10^5个细胞(以4%多聚甲醛固定);3)抗体:目的蛋白一抗及说明书(或由我们代购);4)标本收集与保存:取材时应保持所检标本原有的结构、形态,为避免挤压组织,尽量使用锋利刀片,并且避开坏死组织。
如提供组织块,事先应以4%中性缓冲甲醛(10%的中性福尔马林)固定;5)样本运输:样本密封完毕,建议以塑料瓶装好标本寄送以免路途损坏;如寄送切片则选择切片盒包装,周围加以泡沫或纸巾填塞以免路途损坏,常温寄送即可(视路程远近2-3天可到达);如寄送细胞样本,建议以封口膜密封96孔板或离心管并用生物冰袋和泡沫盒包装周围加以泡沫或纸巾填塞,4℃低温运输。
6)染色完毕后,可照相1-2 张图片/切片,如需要拍照和图片分析请事先说明。
取材的要求及注意事项1、标本新鲜:一般在30min以内进行,超过30min,组织将有不同程度的自溶,其抗原或变性消失,或严重弥散。
新鲜大标本应切开固定12~24小时后再取材。
新鲜组织应在离体30分钟内,用10-20倍体积的10%中性福尔马林(4%中性缓冲甲醛液)进行固定12~24h后进行取材,取材后再固定4~6h。
(寄送如2~3天内能到达,取材固定后可直接寄送,否则用水冲洗干净后保存于75%酒精再寄送。
)过度固定易造成假阴性。
2、取材大小:切取的组织块厚薄要均匀,一般厚度为0.2~0.3cm,大小以不超过1.5X2.0cm为宜。
3、取材部位:除取病灶或含待检抗原部位外,还应取病灶与正常交界处,即所取组织切片中同时应有抗原阳性和阴性区,以形成自身对照。
病理科免疫组化在临床上的应用及其意义免疫组化技术是以免疫学的抗原抗体反应为其理论基础发展起来的一门方法学,在生物学领域尤其是在医学的基础和临床研究中发挥重要的作用,对疾病尤其是肿瘤的诊断、鉴别诊断及发病机制的研究提供了强有力的手段。
免疫组化技术是20世纪70年代初Sterb Berger在酶标法的基础上发明的,80年代在外国开始应用于临床研究和诊断,90年代初在我国逐渐开始应用于疑难病例的诊断和鉴别诊断。
随着新技术的不断发展,抗体种类从研发开始的十几种发展到目前数百种抗体应用于临床科研的各个领域,我国在临床病理诊断上可用抗体293种。
由于抗体较昂贵,所以各院根据活检量和病种不同选择不同的抗体,这些抗体对大部分疑难病例的诊断起到重要的辅助作用。
对病人的预后及指导治疗具有重要的意义。
一、目前常用的抗体分四大类1.上皮性标记物:CK high(AE3),CK low ,CK—pan,CK19,CK7, CK20,EMA,CEA,-CA15-3,SCLC ,E-Caldeherin, CA125,Tg(甲状腺球蛋白),TTF-1AFP.这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于上皮组织,如果是恶性肿瘤,就是癌2.间叶组织标记物:SMA ,Desmin,Vimentin,Lysozyme,AACT , CD68 MyoD1,CD117,这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于间叶组织,如果是恶性肿瘤,就是肉瘤。
3.神经及神经内分泌标记物:CgA ,Synaptophysin,NSE,S—100:NF (神经纤维丝蛋白),GFAP,CD99,CD56.4淋巴细胞标志物:T cell标记物:CD3, CD45RO , CD43,CD5, CD8,CD4,ALK,GranmB ,CD56 .B cell标记物:CD-20 ,CD79a ,CD23,CD10 ,Kappa ,Lambda CD21 CD38 ,CyclinD1 ,Bcl—2。
免疫组化套餐免疫组化套餐泌尿与男性生殖系统肿瘤1.前列腺癌:CK、P63、34ßE12、PSA、P504S(9AMAC)、AR2.前列腺增生/腺瘤:CK、P63、34BE12、P504S3.肾癌:CK、EMA、Inhibin、Melan-A、CK7、Vimentin、PAX2、CD104.肾母细胞瘤:WT-1、CK、P53、Ki-675.膀胱尿路上皮癌:CK7、CK20、P53、Ki-67、P636.精原细胞瘤:CK、PLAP、CD117、LCA、OCT3/4淋巴造血系统肿瘤7.胸腺肿瘤:CK、CD3、CD5、CD20、TdT、EBV*8.霍奇金淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*、PAX-59.非霍奇金淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、TdT、CD4310.间变大细胞淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*11.弥漫性大B细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD30、Ki-6712.小B细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD79α、CyclinD1、TdT13.T细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD43、CD45RO、CD79α、TdT、TiA-1、Perforin14.套细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD20、CD79α、CyclinD1、TdT、Bcl-2、Ki-6715.T/NK细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD56、TiA-1、Perforin、粒酶B16.淋巴上皮病变/癌:CK、EMA、S-100、Ki-67、P53、EBV*、P63、CD30、CD2017.Burkitt淋巴瘤:CD3、CD20、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki-67、EBV*、TdT18滤泡性淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki6719.脂膜炎样T细胞淋巴瘤:CD2、CD3、CD7、CD20、CD43、Perforin、TiA-1、EBV*20.浆细胞瘤:CD3、CD20、CD38、CD138、CD79α、EMA、κ*、λ*21.坏死性淋巴结炎:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD68、Mac387、CD16322.粘膜相关淋巴瘤:CK、CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD43、CD79a、CyclinD123.血管免疫母细胞性淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD43、CD79α24.组织细胞肉瘤:S100、CD10、CD21、CD35、CD68、Lysozyme、MPO、CD33、CD34、CD11c、CD14、CD45RO25.朗格罕氏细胞增生症/肉瘤:S100、CD1α、CD68、CD35、HMB45、CK、EMA、Ki67、CD4526.指状突树突细胞肉瘤/肿瘤:S100、CD1α、CD68、CD21、CD35、CD3、CD20、CD30、CK、EMA、Ki67、CD4527.滤泡树突细胞肉瘤/肿瘤:CD21、CD35、S100、CD1α、CD68、CD3、CD23、EMA、VIM、MPO、CD34、CD79α、CK、HMB4528.肥大细胞肿瘤:CD117、CD45、CD33、CD68、CD15、CD3、CD20消化系统肿瘤29.胃癌:CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS**30.肠癌:CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS**31.肝细胞癌:AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、P53、HbsAg、Hepatocyte32.肝胆管细胞癌:CK7、CK20、Villin、AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、Hepatocyte、HbsAg33.食道癌:P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、P6334.胰腺癌:CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、Villin、CK7、CK20、35.胰岛细胞瘤:CD56、Syn、CgA、Ki-67、Insulin、CK8/18、CK1939.肝炎病毒:HbsAg、HbcAg、HCV涎腺肿瘤37.涎腺粘液性囊腺癌:CK、P63、SMA、Vimentin、Myosin-heavy chain38.上皮肌上皮癌:CK、P63、SMA、Vimentin、S-100、Myosin-heavy chain39.导管腺癌:CK、P63、SMA、AR、HER2、Myosin-heavy chain40.多形性腺瘤:CK、P63、SMA、S-100、GFAP、Myosin-heavy chain神经内分泌肿瘤41.神经内分泌癌:CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8/1842.肺神经内分泌癌:CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8/18、CD99、TTF-1、P63、Sp-B43.甲状腺乳头状癌:Tg、TTF-1、CK19、HMBE-1、Gelactin-3、Ki-67、TPO44.甲状腺髓样癌:Tg、CT、CD56、CD57、Syn、CgA、CEA45.肾上腺皮质癌:CK、CEA、Inhibin、Melan-A、CD10、CgA、Syn、S10046.肾上腺嗜铬细胞瘤:Syn、CgA、S-100、CK、EMA、Inhibin、Melan-A、47.肾上腺外副神经节瘤:Syn、CgA、S-100、CK、EMA、Inhibin、Melan-A、GFAP48.Merkel细胞癌:CK7、CK20、Syn、CgA、CK、CD99软组织肿瘤49.促纤维增生性小圆细胞肿瘤:CK、EMA、CD99、S-100、Des、Syn、CgA、50.尤文/PNET/视/嗅/髓母细胞瘤:CD99、S-100、Syn、CgA、CD56、CD57、GFAP、Vimentin51.上皮样血管平滑肌脂肪瘤:HMB45、S-100、Melan-A、CD34、CK、SMA、Vimentin52.上皮样血管瘤:CK、CD34、CD31、CD68、EMA53.孤立性纤维性肿瘤:CD34、Bcl-2、CD99、S-100、CK、Vimentin、SMA54.间皮瘤:CK5/6、HMBE-1、Calretinin、TTF-1、D2-40、CK、WT155.横纹肌(肉)瘤:MyoD1、Myogenin、Desmin、SMA、CK、S100、CD9956.滑膜肉瘤:EMA、CK、CD34、CD99、CD68、S-100、Bcl-2、Vimentin57.皮隆突/恶纤组:CD34、CD68、S-100、SMA、Vimentin58.血管球瘤:EMA、CK、CD34、SMA、S-10059.血管周肌细胞瘤:EMA、CK、CD34、SMA、S-100、Desmin60.梭形/多形性脂肪:CD34、SMA、S-100、HMB45、CK、CD31、CD6861.脊索/副脊索瘤:SMA、S-100、EMA、CK、GFAP、CD6862.腱鞘巨细胞瘤:SMA、MSA、Desmin、CK、Vimentin63.平滑肌(肉)瘤:SMA、MSA、Desmin、CK、S-100、CD34、Vimentin64.软骨母细胞瘤:CD99、S-100、CK、Vimentin65.结节性筋膜炎:CK、SMA、MSA、DES、CD68、S100、Vimentin66.缺血性筋膜炎:VIM、SMA、CD68、DES、S100、CD34、Vimentin67.肌纤维瘤/肌纤维瘤病:VIM、SMA、Actin、S100、EMA、CK、Vimentin68.硬化性纤维母细胞瘤:VIM、SMA、CK、DES、EMA、S100、CD3469.乳腺型肌纤维母细胞瘤:DES、CD34、EMA70.钙化性腱膜纤维瘤:VIM、SMA、MSA、CD99、S10071.血管肌纤维母细胞瘤:DES、SMA、Actin、ER、PR、CD34、S100、CK、fast myosin72.富于细胞性血管纤维瘤:VIM、CD34、DES、Actin、SMA、MSA73.项型纤维瘤:VIM、CD34、CD99、DES、Actin74.Gardner纤维瘤:VIM、CD34、SMA、MSA、DES、ER、PR75.钙化性纤维性肿瘤:Vim、VⅢ因子、XⅢa因子、Des、Actin、S100、CD31、CD34、CK76.巨细胞血管纤维瘤:CD34、CD99、Bcl-277.韧带样型纤维瘤:Vim、SMA、Des、S10078.脂肪纤维瘤病:CD34、Bcl-2、S100、Actin、EMA、CK、Des、CD9979.炎症性肌纤维母细胞性肿瘤:Vim、SMA、Des、CK、S100、ALK、CD11780.低度恶性肌纤维母细胞瘤:Actin、Des、CD34、CD99、S100、CK81.黏液炎症性肌纤维母细胞瘤:Vim、CD34、CD68、SMA、CK、LCA、CD30、T and B转移性肿瘤鉴别82.转移性肺/肝癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、CK、AFP、CD34、Hepatocyte83.转移性肺/胃肠癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、Sp-B、CDX-284. 转移性肺/前列腺癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、PSA、PSAP85. 转移性肺/甲状腺癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、TG86. 转移性腺/鳞癌:CKAE1、CKAE3、CK8/18、CK5/6、EMA、CD15、P6387. 转移性肺/鼻咽癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、EMA、EBV*88.食道低分化癌/神经内分泌癌:Syn、P63、CgA、CD56、CD99、CKAE3、CK5/689.转移性卵巢粘液/浆液性癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、CA125、CDX-2神经系统肿瘤90.垂体瘤:TSH、FSH、GH、LH、ACTH、PrL、P5391.胶质瘤:GFAP、MBP、Vim、EMA、S-10092.少突胶质细胞瘤:Pax-5、GFAP、MBP、Vim、EMA、S-100、CD5793.胶质肉瘤:GFAP、CD68、Vim、S-100、Ki-6794.节细胞胶质瘤:Syn、CgA、GFAP、S-100、CD68、Vim、Ki-6795.神经束膜瘤:S-100、EMA、GFAP、CK、Vim96.恶性外周神经鞘瘤:S-100、CK、HMB45、Desmin、SMA、MyoD1、CD57、MBP97.脑膜瘤:GFAP、EMA、Vim、S-10098.神经纤维/神经鞘瘤:GFAP、EMA、Vim、S-100、CK99.中枢神经细胞瘤:GFAP、S-100、Syn、CD57、MBP、EMA、CgA、Calretinin 100.室管膜瘤:EMA、CK、S-100、GFAP、Syn、CD57、MBP、101.脉络丛乳头状瘤:GFAP、CK、S-100、Syn、EMA、Ki-67、CgA102.颅咽管瘤:CKAE1、EMA、GFAP、CKAE3、Ki-67103.颅内血管母细胞瘤:CD34、CD31、EGFR、CK、EMA、VEGF乳腺及女性生殖器官104.浸润性乳腺癌:P53、Bcl-2、ER、PR、HER2、E-Cadherin、Ki-67、CK7、GCDFP-15 105.浸润性筛状癌/腺样囊性癌:ER、PR、HER2、P63、Laminin106.实性神经内分泌癌:ER、PR、HER2、GCDFP-15、CK7、CK20、CgA、Syn107.子宫内膜样肿瘤/宫颈腺癌:Vim、CK、ER、PR、Inhibin、P16、CEA108.子宫内膜间质肿瘤:Vim、CD10、SMA、Inhibin109.移行细胞癌:CA125、CK7、CK20、P63110.颗粒细胞瘤:CD99、Inhibin、Vim、S100、SMA、CK、CK7、EMA111.卵泡膜瘤-纤维瘤:Vim、Inhibin112.硬化性的间质瘤:Vim、Des、SMA、Inhibin113.Sertoli-间质细胞瘤:Vim、Inhibin、EMA、Ker、ER、PR114.无性细胞瘤:Vim、CD117、PLAP、CK、Des、CEA、S100115.卵黄囊瘤:AFP、CK、CD30、ER、PR116.胚胎性癌:AFP、CD30、CK117.非妊娠绒毛膜癌:CK、hPL、ß-Hcg恶性肿瘤预后与耐药监测指标P53、Bcl-2、PCNA、Ki67、P-gp、TOPOⅡα、GSTπ宫颈CIN病变分级检测指标P16、P53、Ki-67、CD68、Pro-EXCB细胞淋巴瘤与T细胞淋巴瘤的鉴别诊断肿瘤类型 CD3 CD20 CD43 CD45RO CD79a Pax-5B细胞淋巴瘤-+-/+-++T细胞性淋巴瘤+-++--含有大细胞的淋巴瘤免疫组化鉴别诊断肿瘤类型 CD3 CD15 CD20 CD30 Pax-5 ALK-1 Fascin EMA EBV弥漫性大B细胞性淋巴瘤--+-+---/+-富于T的大B细胞淋巴瘤-★-+-+---/+-霍奇金淋巴瘤(R-S)-+-++-+-+霍奇金淋巴瘤(L&H)--+-+---/+-/+间变性大细胞性淋巴瘤-/+--+-+-/+▲+-CD30+的T细胞淋巴瘤+--+-----★背景大量的T淋巴细胞阳性▲弱阳性表达滤泡性淋巴瘤与淋巴组织反应性增生的免疫组化鉴别诊断标记物 CD3 CD10 CD20 CD23 Bcl-2▲ Ki-67 Bcl-6滤泡性淋巴瘤-++++低指数+淋巴组织反应性增生+-+--高指数-▲不能用于淋巴瘤的分类,仅有助于滤泡性淋巴瘤的诊断与滤泡反应性增生的鉴别诊断。