软骨染色液(甲苯胺蓝法)

软骨染色液（番红O法）步骤及注意事项软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项货号：G2540规格：100ml有效期：12个月有效产品简介：软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。

软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。

软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。

番红0软骨染色的原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色。

番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。

自备材料：10%福尔马林固定液、脱钙液、蒸馏水、Weigert铁苏木素、系列乙醇等。

操作步骤（仅供参考）：1.标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

2.常规脱蜡至水。

3.入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。

4.酸性乙醇分化液分化15s。

5.蒸馏水洗10min。

6.（可选）在固绿染色液内浸染5min，蒸馏水洗1min。

7.入Safranin O stain内浸染1-2min，蒸馏水洗1min。

8.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

9.二甲苯透明，光学树脂封固。

染色结果：软骨基质深红色软骨细胞核蓝色软骨细胞浆红色细胞核灰黑色注意事项：1.需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。

2.Weigert苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h 失去染色能力。

3.切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。

4.Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。

5.95%乙醇脱水时间不宜过长。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

软骨染色液(番红O法)简介：软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。

软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。

软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。

软骨染色液(番红O法)染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。

番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布。

当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。

通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析，番红O分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。

组成：编号名称DB00712×100mlStorage试剂(A): Safranin O stain 100ml RT 避光试剂(B): Safranin分化液100ml RT使用说明书1份自备材料：1、10%福尔马林固定液2、脱钙液3、蒸馏水4、系列乙醇操作步骤(仅供参考)：1、标本的处理：福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

2、常规脱蜡至水。

3、蒸馏水洗。

4、入Safranin O stain内浸染，蒸馏水洗。

5、用Safranin分化液洗涤切片，蒸馏水洗。

6、分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

7、二甲苯透明，光学树脂封固。

染色结果：软骨基质红色注意事项：1、切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。

2、切片分化时间应恰当，以背景呈绿色为宜。

3、Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。

4、95%乙醇脱水时间不宜过长。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。

相关：编号名称DC0032Masson三色染色液TC0713葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。

改良番红O-固绿软骨染色液说明书货号：G1371规格：5×50ml/5×100ml有效期：6个月有效产品简介：软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。

软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。

软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。

改良番红0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织和骨组织区分开。

番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。

番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。

当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。

通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析。

固绿与胶原纤维结合，不宜褪色。

番红O-固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。

产品组成：名称规格5×50ml5×100ml Storage试剂(A)A1:Weigert A液25ml50ml RT避光A2:Weigert B液25ml50ml RT避光临用时，取A1、A2等量混合为Weigert染液，24h后失去染色力，不宜预先配制。

试剂(B):酸性分化液50ml100ml RT试剂(C):固绿染色液50ml100ml RT避光试剂(D):Safranin O stain50ml100ml RT避光试剂(E):弱酸溶液50ml100ml RT自备材料：10%福尔马林固定液，脱钙液，蒸馏水，系列乙醇。

第1页，共2页操作步骤（仅供参考）：1、标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

2、常规脱蜡至水。

软骨染色液（甲苯胺蓝法）B1104（Toluidine blue Staining Solution）货号产品名称规格价格B1104软骨染色液（甲苯胺蓝法）100ml240元描述：甲苯胺蓝，英文名称为Toluidine blue，CAS号为92-31-9，分子式为C28H20N2O10S2·2Na，分子量为305.8256。

甲苯胺蓝属于常用的人工合成的醌亚胺染料类的一种，是具有两个发色团和两个助色团的碱性染料。

甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用。

软骨基质中含有大量的多糖类（硫酸软骨素或硫酸角质素）阴离子基团，具有嗜碱性；组织细胞的细胞核、神经元的尼氏体、肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等酸性物质的特殊颗粒等的酸性物质与甲苯胺蓝中的阳离子相结合而被染色，呈现发光色团的颜色，蓝色。

本品适用于软骨组织、细胞核、尼氏体、肥大细胞的特殊颗粒的染色。

本产品用于软骨染色，可以间接反应软骨基质中蛋白多糖的含量和分布，当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，导致染色减弱或不着色，用于软骨组织损伤和粘多糖代谢的研究。

适用范围：适用于鉴定细胞或基质内酸性物质的存在，主要用于软骨、细胞核、尼氏体、肥大细胞颗粒的染色。

储存：室温下保存3个月，4℃保存6个月。

染色步骤：1.组织切片入蒸馏水（石蜡切片需脱蜡至水）。

2.入甲苯胺蓝染液染色30分钟左右。

（镜下观察，适当调整染色时间）3.自来水冲洗2分钟去掉浮色，滤纸吸干水分。

4.丙酮或醋酸分化液分化，至软骨细胞呈清晰的紫蓝色为止。

（可省）5.常规酒精脱水、透明后中性树胶封片或蒸馏水洗后冷风吹干，甘油明胶封片。

染色结果：软骨细胞、成骨细胞呈紫红色，基质呈淡蓝色。

说明：1.第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验，确定合适的染色时间。

2.固定、脱水、透明所需的试剂需要另购置。

本公司有甘油明胶封片液。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

改良番红O-固绿软骨染色液操作步骤及染色结果说明货号：G1371规格：5×50ml/5×100ml有效期：6个月有效产品简介：软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。

软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。

软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。

改良番红0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织和骨组织区分开。

番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。

番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。

当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。

通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析。

固绿与胶原纤维结合，不宜褪色。

番红O-固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。

产品组成：名称规格5×50ml5×100ml StorageA1:Weigert A液25ml50ml RT避光试剂(A)A2:Weigert B液25ml50ml RT避光临用时，取A1、A2等量混合为Weigert染液，24h后失去染色力，不宜预先配制。

试剂(B):酸性乙醇分化液50ml100ml RT试剂(C):固绿染色液50ml100ml RT避光试剂(D):Safranin O stain50ml100ml RT避光试剂(E):乙酸溶液50ml100ml RT使用说明书1份自备材料：10%福尔马林固定液，脱钙液，蒸馏水，系列乙醇。

操作步骤（仅供参考）：1、标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)简介：甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。

甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。

甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。

另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。

Leagene 甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。

组成：操作步骤(仅供参考)：(一)肥大细胞染色1、脱蜡至蒸馏水。

2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。

3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。

4、冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。

5、快速和无水乙醇脱水。

6、 二甲苯透明，封固。

染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。

(二)软骨染色1、 石蜡切片入二甲苯。

2、 系列乙醇各。

3、 自来水洗。

4、 入Toluidine Blue O Stain ，浸染。

5、 自来水洗，滤纸吸干水分。

6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。

7、 逐级乙醇脱水。

编号 名称 DA0059 Storage Toluidine Blue O stain (0.5%,硼酸盐法) 100ml RT 避光 使用说明书 1份8、二甲苯透明，中性树胶封固。

染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。

(三)细胞涂片染色1、用乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释即可。

2、细胞涂片后，立即放入乙醇中固定，取出放在纸巾上。

3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。

4、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。

5、无需干燥，直接镜检。

软骨染色液（番红O法）使用说明书
货号：G2540
规格：100mL
保存：室温避光保存，12个月有效。

产品简介：
软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。

软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。

软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。

番红0软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，它常与固绿合用用于显示软骨，是基于阳离子染料粘多糖中阴离子集团的结合，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织与骨组织区分开。

操作步骤（仅供参考）：
1.标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

2.常规脱蜡至水。

3.入Safranin O stain内浸染1-2min，蒸馏水洗1min。

4.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

5.二甲苯透明，光学树脂封固。

也可参照改良番红O-固绿软骨染色液进行。

染色结果：
软骨基质、细胞浆红色
注意事项：
1.需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。

2.切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。

3.Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。

4.95%乙醇脱水时间不宜过长。

5.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

北京雷根生物技术有限公司
软骨染色液(阿利新蓝法,pH1.0)
简介：
阿利新蓝(Alcian)又称爱先蓝或阿尔辛蓝等，是一种类铜钛花青共轭染料，最初用于纺织纤维染色。

这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。

pH 值为2.5时，组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有羧基的酸性黏液物质(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)染色。

软骨染色液(阿利新蓝法,pH2.5)利用染液的不同pH 值可区分粘液物质的类属，pH 为1时，羧基(COOH)不着色，硫酸基(OSO3H)着色。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 常规脱钙，二甲苯脱蜡，通过梯度乙醇后，入蒸馏水再水化。

2、 入Alcian 酸化液浸泡。

3、 入Alcian 染色液染色。

4、 流水冲洗。

5、 梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

染色结果: 硫酸黏液物质(羧基)
蓝色 细胞核 淡蓝色
注意事项：
1、 固定液采用10%中性福尔马林。

2、 已开封试剂应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。

编号 名称 DB0063 2×50ml Storage 试剂(A): Alcian 酸化液 50ml RT 试剂(B): Alcian 染色液(pH1.0) 50ml 4℃ 避光 使用说明书 1份。

结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法鲜红色：胶原纤维黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核图表E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。

2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图) 红色：胶原纤维绿色：细胞核黄色：其他3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维红色：胞核（核固红复染）黄棕色：胶原纤维淡红色：细胞质（红液复染）图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表G Gomori氏银氨液配制法Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维红色：胶原纤维黄色：背景图表I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH）蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色：粗弹性纤维（有时）紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌图表J 6.1.磷钨酸苏木素法图表K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法（1974年）红色：缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色：正常心肌蓝色：细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色（光学显微镜, ×200）2.Poley显示缺氧心肌染色法（1964年）红色：缺氧心肌紫色：胞核绿色：其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff（PAS）染色法红色：糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色：细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质（黏多糖）染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法（1956）红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质图表M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表N 8.1.胃粘膜组织AB-PAS染色40×：2.爱先蓝（PH2.5）法蓝色：唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色：胞核不着色：强硫酸化黏液物质图表O 8.2.爱先蓝（PH2.5）染色液图表P 8.2.爱先蓝法图表Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝（PH1.0）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒红色：胶原纤维浅黄色：背景图表R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色：黑色素浅绿或不着色：背景黄色：肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue（普鲁士蓝）反应显示三价铁蓝色：含铁血黄素浅红色：其他组织图表S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。