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软骨细胞甲苯胺蓝染色
1%甲苯胺蓝配制
原液：1g甲苯胺蓝粉末+10ml 70%酒精溶解（据说可保存6个月）
工作液：取上述原液1ml+9ml 1% NaCl 溶解，滤纸过滤（用时新鲜配制）
1% NaCl：1gNaCl + 100ml 蒸馏水（用时新鲜配制）
染色步骤：
（1）爬片用PBS洗2次，直接用4% 多聚甲醛固定于6孔板中1h或更长时间（4度）（2）自来水洗15分钟，最好不要直接冲爬片，易脱片
（3）蒸馏水洗5分钟
（4）加1%甲苯胺蓝浸染2h
（5）去除多余染液，我觉得可以用注射器从6孔板中吸走。
有人说用90%酒精的，但一定要慎重。
否则时间稍长，就会将颜色洗脱。
当然洗脱后仍然可以从（4）开始重复。
（6）镜下观察，满意后晾干，中性树胶封片（或者镜下观察）。
肥大细胞染色液(阿利新蓝沙黄法)简介：肥大细胞(Mast cell)是疏松结缔组织内常见的细胞，常成群的沿着小血管和淋巴管分布，也常见于支气管和胰腺的小叶间导管周围，一般细胞较大，直径约为20-30μm ，呈圆形或椭圆形，胞核较小、胞质内充满粗大且具有异染性嗜酸性颗粒。
Leagene 肥大细胞染色液(阿利新蓝沙黄法)能够区分不同类型的异染颗粒，染色后幼稚型肥大细胞颗粒呈蓝色，成熟型肥大细胞颗粒呈红色，对比较为清楚。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 取新鲜组织立即固定于10%中性福尔马林固定液中，常规脱水包埋。
2、 切片厚度5-6μm ，常规脱蜡至水。
3、 用阿利新蓝沙黄染色液滴染。
4、 稍微水洗。
5、 Csaba 脱水剂反复脱水。
6、 二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：幼稚型肥大细胞颗粒 蓝色 成熟型肥大细胞颗粒红色注意事项：1、 肥大细胞染色时，应注意组织要新鲜，取出后立即固定。
2、 如无10%中性福尔马林固定液，可用4%的甲醛生理盐水代替。
3、 如果Csaba 脱水剂不够，可用乙醇替代，但片子易于脱色。
4、 分色后应快速入95%乙醇、无水乙醇、二甲苯的时间不宜过久，否则容易导致褪色。
编号 名称DA0049 3×50ml Storage试剂(A): Csaba 酸化液 50ml RT 试剂(B): 阿利新蓝沙黄染色液 100ml 4℃ 避光 试剂(C): Csaba 脱水剂 250mlRT 避光 使用说明书1份有效期：12个月有效。
相关：编号名称DC0032 Masson三色染色液DF0111 中性福尔马林固定液(10%)DG0005 糖原PAS染色液DJ0001 普鲁士蓝染色试剂盒(核固红法)PS0013 RIPA裂解液(强)PW0053 Western抗体洗脱液(碱性)TE0002 碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(PNP微板法)。
甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)简介：甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。
Leagene 甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。
组成：操作步骤(仅供参考)：(一)肥大细胞染色1、脱蜡至蒸馏水。
2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。
3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。
4、冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。
5、快速和无水乙醇脱水。
6、 二甲苯透明，封固。
染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
(二)软骨染色1、 石蜡切片入二甲苯。
2、 系列乙醇各。
3、 自来水洗。
4、 入Toluidine Blue O Stain ，浸染。
5、 自来水洗，滤纸吸干水分。
6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、 逐级乙醇脱水。
编号 名称 DA0059 Storage Toluidine Blue O stain (0.5%,硼酸盐法) 100ml RT 避光 使用说明书 1份8、二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
(三)细胞涂片染色1、用乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释即可。
2、细胞涂片后，立即放入乙醇中固定，取出放在纸巾上。
3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。
4、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。
5、无需干燥，直接镜检。
北京雷根生物技术有限公司
甲苯胺蓝染色液(软骨专用)
简介：
甲苯胺蓝(T oluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
Leagene 甲苯胺蓝染色液(软骨专用)呈强碱性，更利于软骨组织的着色。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 常规脱钙，包埋、固定。
2、 石蜡切片入二甲苯2次每次。
3、 系列乙醇各1min ，自来水洗。
4、 入Toluidine Blue O Stain 浸染。
根据不同组织，染色时间不完全相同。
5、 自来水洗，滤纸吸干水分。
6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、 逐级乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
注意事项：
1、 针对于较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
编号 名称 DA0054 Storage Toluidine Blue O stain (软骨专用) 50ml RT 避光 使用说明书 1份。
甲苯胺蓝染色渗透试验
1.目的
根据ASTM F1929-2012标准方法采用染色渗透法检测无菌包装封口泄漏性能2.设备及工具、材料
天平（万分之一）10mL注射器，甲苯胺蓝、曲拉通X-100（氚X-1004）、纯化水、烧杯、试管
3.配制方法
3.1.用天平称量0.5g Triton X-100，与20ml纯化水混合，搅拌或摇动容器，混合二者。
待Triton X-100分散后。
再加入纯化水定容至100ml。
3.2.用天平称量0.05g甲苯胺蓝，加入混合了Triton X-100的溶液中,搅拌或摇动容器混合均匀，即成0.05%甲苯胺蓝染色液。
4.试验方法
4.1.把已灭菌产品包装在试验开始之前，放置于大气温度23±2℃（73.4±3.6oF）和相对湿度50±2%环境中进行存贮24小时。
4.2.依据ASTM F1929-2012标准，将足够的染料渗透液注入包装中，覆盖最长的封边，深度约5mm（0.25英寸）（注入方法：可以使用带有软管的注射器通过切口送入染料渗透剂）使染料渗透液与封边保持接触最少5s最多20s的时间，旋转包装使每道封边都能接触渗透液，如有需要可以补充染色液，确保每道封边都能接触足够量的染色液。
通过包装的透明面目力检测密封区，看有无泄漏或者通道出现，也可使用放大镜进行细致的观察。
5.检验标准
在包装透明的一边，用肉眼检测封口区域。
即可看见封口区的通道。
检查染色液有无透过密封区到达另一侧或染色液有无通过确定的通道进入密封区内部的迹象。
6.注意事项
染色渗透液与包装材料封边的作用时间不应超过20秒。
肥大细胞-甲苯胺蓝目的：此细胞广泛分布于结缔组织中。
胞质含有异染性颗粒，由肝磷脂和组胺构成。
原理：肥大细胞被染成红-紫色(异染质着染)和蓝色的背景(正染质着染)。
异染性组织染色原理是一种染液染出不同的颜色。
是因为碱性染料的PH值、染料浓度和温度。
蓝色和紫色染料可显出红色，红色染料可显出黄色异染色组织原理。
对照：皮肤固定：10%甲醛技术：4μ石蜡切片设备：染色，蒸馏水稍洗。
试剂：甲苯胺蓝原液：甲苯胺蓝Toluidine Blue O 1.0 gm70%酒精alcohol 100.0 ml混合溶解，保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
工作液：甲苯胺蓝Toluidine blue, Stock 5.0 ml1%氯化钠Sodium chloride 45.0 ml新鲜配制，用后丢弃。
警告：避免接触和吸入。
1%氯化钠：氯化钠Sodium chloride 0.5 gm蒸馏水Distilled water 50.0 ml新鲜配制。
安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。
在通风场所进行。
避免接触和吸入。
甲苯胺蓝O：有引起人的胃肠道和血液紊乱报导。
程序：1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 甲苯胺蓝工作液1-2 minutes。
3.蒸馏水稍洗×3。
4. 快速95%和无水乙醇脱水。
5. 二甲苯透明和封固。
结果：肥大细胞紫红色背景蓝色参考文献：Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp282,Battelle Press, OhioLuna L, Manual Of Histologic Staining Methods from the AFIP, 3rd Ed, 1968,pp 162-163, McGraw-Hill, NYCrookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the HistopathologyLaboratory, 2nd ED, 1991, Anatech肥大细胞-甲苯胺蓝对照：皮肤技术：4μ石蜡切片程序：1. 脱蜡至蒸馏水。
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肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)
简介：
甲苯胺蓝(T oluidine Blue O)中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
临床上，经常用甲苯胺蓝对软骨细胞和肥大细胞进行染色。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 石蜡切片入二甲苯2次。
2、 系列乙醇各1min 。
自来水洗。
3、 入Toluidine Blue O Stain 浸染。
4、 自来水洗2min ，滤纸吸干水分。
5、 95%乙醇分色至肥大细胞呈紫蓝色，背景呈淡蓝色。
6、 95%乙醇1min 。
无水乙醇2次，每次2min 。
二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果： 肥大细胞颗粒
紫蓝色 背景
淡蓝色
注意事项：
1、 针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
2、 固定液最好采用Carnoy 固定液。
3、 甲苯胺蓝染色后不宜采用低浓度乙醇脱水，否则容易导致褪色。
4、 分色后应快速入95%乙醇、无水乙醇、二甲苯的时间不宜过久，否则容易导致褪色。
有效期： 12个月有效。
编号 名称 DA0050 Storage Toluidine Blue O Stain 100ml RT 避光 使用说明书 1份。
SD大鼠甲苯胺蓝染色步骤1、甲苯胺蓝染色法鉴定软骨细胞表型将第二代软骨细胞以2x105/ml的密度接种到24孔细胞培养板上，并在与原代培养相同的条件下制备细胞爬片。
常规培养48小时后，进行甲苯胺蓝染色。
具体操作步骤如下：(1)倾去培养液，pbs充分漂洗3次，加入10％的中性甲醛常温下固定30min。
(2)倾去10％的中性甲醛，pbs充分漂洗3次，加入70％的乙醇固定30min除去四价铵离子，以免影响染色。
（3）倒出70%乙醇溶液，用PBS冲洗3次，在空气中干燥，加入甲苯胺蓝乙醇溶液（0.2g甲苯胺蓝溶于100m1的30%乙醇中）染色20分钟(4)pbs充分漂洗3次，迅速用无水乙醇再漂洗1次。
（5）取出爬升件，干燥中性树脂密封件，在电子显微镜下观察并取出。
2.I型胶原免疫细胞化学染色鉴定软骨细胞表型ⅱ代软骨细胞以2×105／ml的密度接种到铺有多聚赖氨酸盖玻片的24孔细胞培养板中，与原代培养条件相同，制作细胞爬片，常规培养48h后行免疫细胞化学法染色。
实验过程严格遵照免疫细胞化学染色试剂盒说明书进行操作，pbs缓冲液代替一抗作为阴性对照组。
具体操作步骤如下：（1）倒出培养基，用冷PBS冲洗3x3分钟，加入1毫升4%多聚甲醛，室温固定15分钟。
（2）使用PBS清洗样品3x3分钟。
每个样品加入1滴新鲜制备的3%H2O2，并在室温下培养10分钟。
（3）使用PBS清洗样品3x3分钟。
每个样品加入0.5 m（0.1%Timton+o.1 mg甘氨酸）的膜穿透溶液，并在冰上培养30分钟。
(4)pbs清洗标本3x3min，每张标本滴加5mg／ml的动物非免疫封闭血清(bsa)0.5ml，室温下封闭1h。
（5）向密封膜中加入50ul以1:150稀释的兔抗鼠II型胶原多克隆抗体，使标本与一抗充分接触，并将其置于4℃的湿盒中过夜。
阴性对照组用PBS缓冲液代替一抗。
（6）用PBS清洗样品3x3min，加入二抗工作液，37℃孵育20min。
x小体的染色甲苯胺蓝磷酸盐法染色是一种对物体表层进行着色的方法，通过改变物体的颜色，实现美化和增强其视觉效果的目的。
在染色中有许多方法和化学物质被应用于不同的物体上。
其中，甲苯胺蓝磷酸盐法是一种常用的染色方法，下面将对其原理和应用进行详细介绍。
甲苯胺蓝磷酸盐法是一种常用的染色方法，它是利用甲苯胺蓝和磷酸盐的相互作用来实现染色效果的。
甲苯胺蓝是一种有机染料，具有很好的亲水性和亲脂性，在水性和油性物体上均能有效染色。
磷酸盐是一种无机化合物，它在染色中所起的作用是增强染色效果和稳定染色剂。
首先，准备甲苯胺蓝和磷酸盐。
甲苯胺蓝可以溶解在水中，所以我们可以直接将其溶解在适量的水中，形成甲苯胺蓝溶液。
磷酸盐可以溶解在无机溶剂中，所以我们可以将其溶解在适量的无机溶剂中，形成磷酸盐溶液。
然后，将需要染色的物体浸泡在甲苯胺蓝溶液中。
甲苯胺蓝具有较好的渗透性，可以在物体表层形成均匀的染色层。
浸泡的时间可以根据物体的大小和染色效果的要求来确定，一般为数分钟到数小时。
接下来，将物体从甲苯胺蓝溶液中取出，并用清水进行洗涤，以去除多余的染料。
清水的用量要足够，以确保物体表层的染料被充分清洗干净。
洗涤的时间可以通过观察水的颜色来判断，当水不再有明显的染料溶出时，即可停止洗涤。
最后，将物体浸泡在磷酸盐溶液中，以固定染色剂。
磷酸盐可以与甲苯胺蓝发生反应，形成稳定的染色层，防止染料在后续使用中褪色。
浸泡的时间一般为数分钟到十几分钟，根据物体的大小和染色效果的要求来确定。
通过上述步骤，就可以使用甲苯胺蓝磷酸盐法对物体进行染色。
该方法具有操作简单、染色效果良好、染料稳定等优点，所以在实际应用中得到了广泛的应用。
甲苯胺蓝磷酸盐法在实际中的应用非常广泛。
它可以用于纺织品、皮革、纸张、玻璃等物体的染色，能够提高它们的装饰性和美观性。
此外，甲苯胺蓝还具有良好的抗紫外线性能，可以用于防晒衣物和防晒窗帘的染色。
在工业领域中，甲苯胺蓝磷酸盐法也被广泛应用于染色检测和颜色测定中。
南京森贝伽生物科技有限公司 网址：/第1页仅供科研 版本号：180917尼氏染色液(甲苯胺蓝法)【产品组成】【保存条件】室温,避光,12个月【产品概述】神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。
在细胞体中细胞质是尼氏颗粒，即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。
尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。
染色的变异、pH 和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质，也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。
尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。
各种神经细胞内都含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不同。
尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和包体的轴丘。
尼氏体会因为生理状态的变化而变化，尼氏体是神经元内合成蛋白质合成的重要部位，当神经元受到刺激后，包体内的尼氏体会明显减少。
尼氏染色液(Nissl Stain ，甲苯胺蓝法)采用甲苯胺蓝(Toluidine blue)作为核心染料，可以用于石蜡组织切片的尼氏体染色，尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标，当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况时，尼氏体会发生溶解甚至消失。
【使用方法】1、新鲜组织固定于乙醇、Carnoy 固定液或10%中性福尔马林溶液后，常规脱水包埋。
2、切片厚6-8µm ，常规脱蜡至水。
3、蒸馏水冲洗。
4、切片入Toluidine blue Stain ，将染色缸置于恒温箱50-60℃浸染25-50min 。
5、蒸馏水稍冲洗。
6、入70%乙醇冲洗。
7、95%乙醇迅速分化。
分化不易控制，如果分化失败，可重复步骤4。
8、无水乙醇迅速脱水。
二甲苯透明，中性树胶封固。
【染色结果】【注意事项】1、尼氏体离体后容易溶解，所以组织取出后应立即固定，否则难以着色。
苯胺蓝染色液使用说明
货号：G1350
规格：100ml
保存：室温避光保存，有效期24个月。
产品说明：
苯胺蓝染色液是Masson三色染色试剂盒的组成之一。
主要有苯胺蓝、弱酸等组成，呈酸性，常与丽春红品红染色液等配合使用对胶原纤维进行染色，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
操作步骤(仅供参考)：
以Masson三色染色为例：
1、切片常规脱蜡至水。
2、用配制好的Weigert铁苏木素染色液染色5min-10min。
3、酸性乙醇分化液分化、水洗。
4、Masson蓝化液返蓝、水洗。
5、蒸馏水洗1min。
6、丽春红品红染色液染色5-10min。
7、磷钼酸溶液分化1-2min
8、倒掉分化液，直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2min。
9、用弱酸工作液洗1min。
10、95%乙醇快速脱水。
11、无水乙醇脱水3次，每次5-10s。
12、二甲苯透明3次，每次1-2min。
13、中性树胶封固。
注意事项：
1.切片脱蜡应尽量干净。
2.切片入苯胺蓝染色液染色前不要水洗，否则可能出现不着色。
3.不同染色参照具体的实验要求。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
肥大细胞-甲苯胺蓝目的：此细胞广泛分布于结缔组织中。
胞质含有异染性颗粒，由肝磷脂和组胺构成。
原理：肥大细胞被染成红-紫色(异染质着染)和蓝色的背景(正染质着染)。
异染性组织染色原理是一种染液染出不同的颜色。
是因为碱性染料的PH值、染料浓度和温度。
蓝色和紫色染料可显出红色，红色染料可显出黄色异染色组织原理。
对照：皮肤固定：10%甲醛技术：4μ石蜡切片设备：染色，蒸馏水稍洗。
试剂：甲苯胺蓝原液：甲苯胺蓝Toluidine Blue O 1.0 gm70%酒精alcohol 100.0 ml混合溶解，保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
工作液：甲苯胺蓝Toluidine blue, Stock 5.0 ml1%氯化钠Sodium chloride 45.0 ml新鲜配制，用后丢弃。
警告：避免接触和吸入。
1%氯化钠：氯化钠Sodium chloride 0.5 gm蒸馏水Distilled water 50.0 ml新鲜配制。
安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。
在通风场所进行。
避免接触和吸入。
甲苯胺蓝O：有引起人的胃肠道和血液紊乱报导。
程序：1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 甲苯胺蓝工作液1-2 minutes。
3.蒸馏水稍洗×3。
4. 快速95%和无水乙醇脱水。
5. 二甲苯透明和封固。
结果：肥大细胞紫红色背景蓝色参考文献：Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp282,Battelle Press, OhioLuna L, Manual Of Histologic Staining Methods from the AFIP, 3rd Ed, 1968,pp 162-163, McGraw-Hill, NYCrookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech肥大细胞-甲苯胺蓝对照：皮肤技术：4μ石蜡切片程序：1. 脱蜡至蒸馏水。
肥大细胞特殊染色肥大细胞（Mast cell）来源于未分化的间充质细胞正常多见于小血管周围，结缔组织中有少量，常见于支气管周围和胰腺的小叶间导管周围，肠系膜小血管周围较多比一般细胞大（直径20~30微米），圆形或椭圆形，核较小，圆形，胞质充满粗大并具异染性的圆形嗜碱性颗粒，HE染色呈红色肥大细胞颗粒含肝素、组织胺、慢反应物质和嗜酸性粒细胞趋化因子等成分，参与过敏反应取材要组织新鲜，迅速固定，颗粒因存放过久而被破坏染色方法：硫堇法、甲苯胺蓝法、苏木精-中性红法、陶利新蓝沙黄法、醛品红-橘黄G法等硫堇法或甲苯胺蓝法将肥大细胞颗粒染成红紫色，其他组织蓝色苏木精中性红法将细胞颗粒染成红色阿利新蓝沙黄法将幼稚型肥大细胞染成蓝色，成熟型肥大细胞颗粒染成红色醛品红-橘黄G法将肥大细胞颗粒染成深紫色，其他细胞不着色，背景橙黄色，对比清晰甲苯胺蓝染色法试剂：甲苯胺蓝液：甲苯胺蓝(Toluidine blue)0.5克，加蒸馏水至100毫升0.5%冰醋酸液：冰醋酸（Glagial acetic acid)0.5毫升，蒸馏水99.5毫升方法：⑴组织固定于10%甲醛生理盐水或甲醛酒精液，常规脱水包埋切片。
⑵切片常规脱蜡至水。
⑶甲苯胺蓝液染20~30分钟，水速洗。
⑷冰醋酸液分化至细胞核和颗粒清晰，水稍洗，用风扇吹干。
⑸二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：肥大细胞颗粒红紫色，核蓝色。
染色后用风扇吹干而不用酒精脱水，因酒精容易使肥大细胞颗粒呈蓝色。
硫堇可代替甲苯胺蓝。
醛品红-橙黄G法（改良的Gomori，1950）试剂：醛品红液：弹力纤维橙黄G液：脑垂体方法：⑴组织固定于10%甲醛生理盐水溶液，常规脱水包埋切片。
⑵切片脱蜡至80%酒精。
⑶70%酒精稍洗。
⑷入醛品红液染10~15分钟。
甲苯胺蓝染液说明书货号：G3668规格：100mL/500mL保存：室温避光储存，有效期至少12个月。
产品说明：甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料，属于醌亚胺染料类，是碱性染料，甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色，可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测。
染色方法:（仅供参考）(一)肥大细胞染色：（1）组织切片脱蜡至水：①二甲苯（I）中脱蜡5-10min。
②换用新鲜的二甲苯（Ⅱ），再脱蜡5-10min。
③无水乙醇5min。
④95%乙醇2min。
⑤80％乙醇2min⑥70%乙醇2min。
（2）蒸馏水浸洗2-3次。
（3）甲苯胺蓝染液染色(具体时间根据染色结果和实验要求调整)。
（4）稍水洗，洗去多余染色液。
（5）95%酒精分色，在镜下控制分色效果。
（6）用100%酒精脱水。
（7）二甲苯透明，中性树胶封片：①二甲苯（I）1min。
②二甲苯（Ⅱ）1min。
③中性树胶封固，镜下观察。
染色结果：肥大细胞颗粒呈紫红色，胞核呈蓝色。
(二)细胞涂片染色（1）用20%的乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液，一般要求稀释到0.1%即可。
（2）细胞涂片后，立即放入95%的乙醇中固定，取出放在纸巾上。
（3）滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。
（4）将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。
（5）无需干燥，直接镜检。
染色结果：细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；核仁呈紫红色；细胞质、单核细胞呈淡蓝色。
注意事项：1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。
样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。
2、本产品为1%浓度水溶液，具体使用浓度可自行稀释。
3、由于温度对染料的溶解度与着色力有很大的影响，若要快速染色，当室温较低时，可以适当加温。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)使用说明
货号：G3670
规格：100mL
保存：室温避光保存，有效期12个月。
产品说明：
甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
临床上，经常用甲苯胺蓝对软骨细胞和肥大细胞进行染色。
操作步骤(仅供参考)：
1、石蜡切片入二甲苯2次，每次15min。
2、系列乙醇各1min。
自来水洗2min。
3、入Toluidine Blue O Stain，浸染10～15min。
4、自来水洗2min，滤纸吸干水分。
5、95%乙醇分色至肥大细胞呈紫蓝色，背景呈淡蓝色。
6、95%乙醇1min。
无水乙醇2次，每次2min。
二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：
肥大细胞颗粒紫蓝色
背景淡蓝色
注意事项：
1、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
2、固定液最好采用Carnoy固定液。
3、甲苯胺蓝染色后不宜采用低浓度乙醇脱水，否则容易导致褪色。
4、分色后应快速入95%乙醇、无水乙醇、二甲苯的时间不宜过久，否则容易导致褪色。
