适配体解离常数测量方法

乙酸解离度和解离常数的测定pH 测定法一、实验目的1、 学习用pH 计测定乙酸解离常数的原理和方法；2、 加深对弱电解质解离平衡等基本概念的理解；3、学会酸度计、吸量管和容量瓶的正确使用。

二、实验原理乙酸（以HOAc 表示）是弱电解质，在水溶液中存在以下解离平衡：HOAc H+＋OAc ˉ 起始浓度 c 0 0平衡浓度 c （HOAc ） c （H +） c （OAc ˉ） 解离常数表达式为：K θ（HOAc ）为乙酸解离常数。

严格地说，离子浓度应该用活度来代替，但乙酸的稀溶液中，离子浓度与活度近似相等。

如果在上式中忽略由水解离所提供的H +量，则达到平衡时溶液中c(H +)=c(OAc —)（为了简便，式中c θ省略），代入（1）中)2()H (c c )H (c HOAc (K 2 ++-=）θ解离度α：测定已知浓度HAc 溶液的pH 值，便可算出它的解离度。

c)H (c +=α配制一系列已知浓度的乙酸溶液，在一定温度下，用酸度计测定其pH ，根据pH=-lgc （H +）求算c （H +）。

实际上，酸度计所测得的pH 反映了溶液中H +的有效浓度，即H +的活度值，在本实验中忽略这种差别。

将C(H +)代入（2）式中，即可求得一系列K θ值，其平均值即为该温度下的解离常数。

三、仪器、药品及材料仪器：pHS-3C 型pH 计，复合电极，烧杯（50mL ，5个），吸量管（20mL ，1只），容量瓶（50mL ，5只）药品：HOAc(0.1000mol·L-1) 材料：碎滤纸四、实验内容及步骤（1）配制不同浓度的乙酸溶液 用吸量管分别取5.00mL ，10.00mL ，15.00m ，20.00，25.00mL 标准的0.1000 mol·L -1HOAc 溶液，加入编成1～5号的5个50mL 容量瓶中，再用去蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

算出此3瓶)1(c /)HOAc (c c/)OAc (c ·c /)H (c )HOAc (K a θθθθ-+=HOAc 溶液的浓度。

分光光度法测解离常数分光光度法测解离常数是一种常用的化学分析方法，它基于溶液中离子生成化合物时所产生的吸收光谱变化，通过测量溶液的吸光度来确定离子的浓度，从而计算出其解离常数。

在分光光度法测解离常数中，常用的测量仪器是分光光度计。

分光光度计通过将一束白光通过光束分离器分成两束光，其中一束通过待测溶液，另一束通过参比溶液，然后测量两束光通过溶液后的吸光度差异。

这种方法的关键在于找到与所测离子有化学反应的试剂，使其在特定的条件下形成化合物，其吸收光谱具有可测的吸光度。

常用的试剂有一个化学反应物和一个指示剂。

分光光度法测解离常数的基本原理是比较溶液中阴离子与阳离子的摩尔吸光度的差异。

当哈伯德滥觞法则成立时，假设物质完全解离，可以得到如下平衡方程：AX ⇌A+ + X–在溶液中，阴离子与阳离子的浓度分别为cA和cX，摩尔吸光度分别为εA和εX。

当溶液被分光光度计通过时，吸光度的变化ΔA与溶液浓度变化Δc之间的关系为：ΔA = εAΔcA + εXΔcX其中，ΔcA和ΔcX分别为阴离子和阳离子浓度的变化量，εA 和εX分别为阴离子和阳离子的摩尔吸光度。

根据比例：cA/cX = εA/εX通过测量吸光度的变化，可以得到阴离子和阳离子浓度的变化量，从而计算出解离常数。

在实际应用中，为了测量离子的解离常数，需要选择适当的试剂和满足一定条件的反应体系。

同时，还需要进行一系列的标准曲线测量和数据处理，以获得准确的测量结果。

此外，还需要注意溶液的温度、pH值等条件对测量结果的影响。

分光光度法测解离常数广泛应用于分析化学、环境监测、生物化学等领域。

它具有灵敏度高、测量范围广、结果准确等优点，但也存在实验操作复杂、实验条件要求严格等问题。

因此，在实际应用中需要根据具体情况进行选择和优化，以获得可靠的测量结果。

分光光度法测解离常数分光光度法是一种常用于测定化学物质浓度的分析方法。

在此方法中，使用特定波长的电磁辐射照射待测物质，通过测量材料对这种辐射的吸收来确定浓度。

解离常数指的是在一定条件下，溶液中一个化学物质的解离程度。

下面将介绍分光光度法测解离常数的原理、方法以及一些相关的参考内容。

一、原理：分光光度法是基于比尔—朗伯定律的原理进行分析的。

比尔—朗伯定律描述了物质溶液对光的吸收规律，它指出物质溶液对光的吸收与物质的浓度成正比。

根据该定律，可以得到以下的关系式：A = εbc其中，A表示吸光度，ε为摩尔吸光系数，b为光程，c为物质溶液的浓度。

在测定解离常数时，通常选择适当波长的电磁辐射，使待测物质在这个波长下发生吸收。

根据比尔—朗伯定律，通过测量吸光度A，可以得到溶液中化学物质的浓度c。

然后，通过变化浓度、温度等条件，可以测得不同浓度下物质的吸光度，从而得到浓度和吸光度之间的关系。

最后，根据解离平衡常数的定义，根据浓度推导出解离常数。

二、方法：1. 准备试样溶液：按照一定比例将待测物质溶解于适当的溶剂中，制备一系列不同浓度的试样溶液。

2. 设置光度计：根据待测物质的吸收特性选择适当的波长，调节光度计的波长和光强。

3. 校准：通过测定已知浓度的标准溶液的吸光度建立校准曲线。

4. 测定：分别测定不同浓度的试样溶液的吸光度。

5. 统计处理：根据校准曲线和测得的吸光度，计算出每个试样溶液的浓度。

6. 计算解离常数：根据不同浓度下的吸光度和已知条件，推导出解离平衡常数。

三、参考内容：1. 《分析化学》(第七版)，基于本体《分析化学》主编气象出版社。

该参考书对分光光度法的原理和方法进行了详细的介绍，并且给出了一些实验例题，通过学习和实践可以更好地理解测解离常数的方法。

2. 《分析化学实验指导与操作》(第二版)，庆阳市应用文理学校分析化学教研组编著，科学出版社。

该参考书提供了一些分光光度法测定解离常数的实验操作指导，包括准备试样溶液、设置光度计、测定吸光度等实验步骤的详细介绍，对于初学者来说是一本很好的参考书。

无机化学实验报告【实验名称】实验八：醋酸解离常数的测定及稀释法配置准确浓度溶液的方法【班级】【日期】【姓名】【学号】一、实验目的1. 了解醋酸解离常数的测定方法。

2. 掌握稀释法配置准确浓度溶液的方法。

3. 学会pH计的使用方法。

二、实验原理1.稀释法配制准确浓度的溶液稀释后溶液的浓度可由稀释定律c1V1 = c2V2求出。

式中c1为稀释前溶液的浓度；c2为稀释后溶液的浓度；V1、V2分别为所取被稀释溶液的体积和稀释后溶液的体积。

根据有效数字运算规则，若c1只有二位有效数字,则得到的c2最多只有二位有效数字。

同理，若c1是具有四位有效数字的准确浓度，若所取的体积V1或所配溶液的体积V2中有一个不准(即不具有四位有效数字)，则所配溶液的浓度也不准确。

为得到四位有效数字的c2，则c1、V1及V2必须要有四位有效数字。

为此必须有一个准确浓度的标准溶液。

并且标准溶液的体积V1必须用移液管吸取，稀释溶液的体积必须用容量瓶来确定。

2.醋酸解离常数的测定醋酸HAc是一元弱酸，在溶液中存在下列平衡HAc === H+ + Ac-其标准平衡常数称解离常数Kθa，为：[c (H3O+)/cθ][c(Ac-)/ cθ]Kθa HAc(aq) = —————————————（3-10）[c(HAc)/ cθ]用pH计测出不同浓度HAc溶液的pH，则：c(H+) = c(Ac-)c平(HAc) = c初(HAc) - c(H+) ≈c初(HAc)代入上式则可计算出Kθa HAc。

由pH计测出的pH，计算出的c(H+)只有二位有效数字，计算出的Kθa HAc 最多也只有二位有效数字。

要得到有二位有效数字的Kθa，要求c初(HAc)至少也有二位有效数字。

三、仪器和药品1.仪器DELTA320酸度计；烧杯（100mL）3个；10mL吸量管（1支）；100mL容量瓶（2个）；10mL量筒；100mL量筒（或量杯）各1个；洗耳球（1个）。

乙酸解离度和解离常数的测定
1、乙酸溶液浓度的标定
用移液管移取乙酸溶液25.00ml，注入250ml锥形瓶中，加酚酞指示剂2滴，用已知浓度的NaOH标准溶液滴定至溶液由无色变为红色，且30s内不褪色即为终点，记录消耗NaOH体积，平行测定3次，计算乙酸溶液的准确浓度，取平均值。

2、系列醋酸溶液的配制和pH的测定
用滴定管计量，按下表在50ml烧杯中，配制系列醋酸标准溶液并搅拌均匀
用pH计测量1-4号烧杯中醋酸溶液的pH，并计算各溶液的C HAC、[H+]和解离度α。

3、用移液管移取25.00ml乙酸溶液，注入步骤1滴定后的锥形瓶中并摇匀即得[HAC]=[AC-]的HAC-NaAC缓冲溶液，测其pH值，平行测定两次，求Ka。

用ph计测解离常数的原理
使用pH 值来测量酸或碱溶液中的解离常数是一种常见的方法。

解离常数是一个衡量酸或碱在水中解离程度的指标。

pH 值是一个衡量溶液酸碱性的指标，它是指溶液的氢离子浓度的负对数。

在水中，酸或碱分子会解离为离子，而pH 值会反映该解离过程的程度。

当测量一个酸或碱溶液的pH 值时，可以使用pH 电极和pH 仪器来测量。

pH 电极是一种特殊的电极，可以测量溶液的氢离子浓度。

当pH 电极被浸入溶液中时，它会产生一个电压信号，该信号与溶液中的氢离子浓度成正比。

pH 仪器可以根据电压信号计算出溶液的pH 值。

测量酸或碱溶液的pH 值后，可以使用酸碱反应的平衡式来计算解离常数。

对于一个简单的酸HA，其解离反应可以写作：
HA + H2O H3O+ + A-
其中，HA 是酸分子，H3O+ 是溶液中的氢离子，A- 是酸的共轭碱。

解离常数K_a 定义为：
K_a = [H3O+][A-]/[HA]
其中，方括号表示物质的浓度。

通过测量pH 值并使用上面的方程式，可以计
算出该酸的解离常数。

适体和蛋白质解离常数检测方法比较分析苏雪;何逸婷;林俊生【摘要】Compare the two detection methods of dissociated constant of aptamer and protein based on quartz crystalmicrobalance(QCM)biosensor,a protocol with high accuracy and reasonability is introduced. Thrombin and thrombin aptamer namedTBA15 are used as models. The immobilization of thiolated aptamer,the block of the non-specific site and the signal response induced by two different sampling methods are monitored by QCM withdissipation( QCM-D)biosensor in real time and dissociated constant are calculated by data fitting. Dissociated constant are different when different sampling methods are used,and different block agent applied,blocking of nonspecific site. The sampling method with fixed bulk of protein from low concentration to high concentration are proved ideal method with high repeatability and fewer regents needed which is less than 1 μg.%对基于石英晶体微天平（QCM）生物传感器的两种检测核酸适体与蛋白质解离常数方法进行了比较，提出来一种更加精确合理的检测流程。

1实验四、乙酸解离度和解离常数的测定硫酸钡溶度积常数的测定一、实验内容1. 乙酸解离度和解离常数的测定；2. 硫酸钡溶度积常数的测定。

二、预习内容1. 酸度计及其使用-P87~892. 电导仪及其使用-p90~913. 滴定管、移液管、容喇瓶的使用-P30~373. 乙酸解离度和解离常数的测定-pH法-P1324. 酸钡溶度积常数的测定-电导法-P137三、预习思考题1. 用pH计测定不同HAc溶液的pH时，为什么要按由稀到浓的顺序进行？2. 解离常数K a值与解离度α值是否受酸浓度变化的影响？α越大，是否表示溶液中c(H+)越大?3. 在本实验中，测定HAc的K a值时，需精确测定HAc溶液的浓度；但在测定未知酸的K a时，则只要正确掌握滴定终点即可，而酸和碱的浓度都不必测定，为什么？4. 酸度计(pH计)是一种通过测量的方法来测定溶液pH值的仪器。

除可测量溶液的pH值，还可等。

酸度计由和构成。

测量电极是。

新电极使用前必须在纯水或0.1mol/LHCl 溶液中浸泡以上，使玻璃泡外表面开成可进行离子交接的软玻璃层。

5. 在pH-电位测量中，通常以电极为参比电极。

在温度较高时，进行电位分析可选用电极作参比电极。

大学化学实验G实验时用的是，其外壳下端比玻璃泡更长，能更好地保护玻璃泡。

玻璃电极与溶液中H+活度有确定的响应关系，在25℃时：。

6. 甘汞电极中的KCl溶液应保持，且在弯管内不应有，使用前应注意补充饱和KCl溶液至合适液位，要内部的小玻璃管口，使渗透量稳定，从而保证液接电位的稳定。

甘汞电极下端的微孔应保证。

检查方法为：将电极下端擦干，用滤纸贴在管端，有液渗出为正常。

测量时管端橡皮帽并管侧的橡皮帽以保持足够的液位压差，但要注意避免待测溶液渗入而沾污电极。

7. 在测量pH值时，必须要用标准缓冲溶液对酸度计进行和。

8. 为什么在制得的BaSO4沉淀中要反复洗涤至溶液中无Cl-存在？如果不这样洗对实验结果有何影响？9. 为什么λ(BaSO4)≈ λ0(BaSO4)？10. 怎样制备BaSO4沉淀？为了减少实验误差，对制得的BaSO4沉淀有何要求？11. 为什么计算BaSO4饱和溶液的K sp(BaSO4)时，要考虑水的电导率κ(H2O)?12. 为什么测定水的电导率的操作要迅速？13. 电解质浓度小时，当电解质溶液中离子的浓度发生变化时，其电导率κ值随着浓度C的增加而提高，κ与C成比。

适配体筛选⽅法研究进展适配体筛选⽅法研究进展王巍贾凌云*(⼤连理⼯⼤学环境与⽣命学院⽣物科学与⼯程系,⼤连116023)摘要利⽤指数富集配体进化技术(SELEX )可获得与⽬标靶具有特异性结合能⼒的适配体(寡核苷酸)。

经过近20年的研究,适配体被证实可在科研及临床应⽤中部分取代抗体,是有很⼤发展前景的技术领域。

适配体技术发展的关键在于对⽬标靶具有⾼选择性吸附能⼒的适配体的筛选和获得。

⼗⼏年来,以提⾼筛选效率和效果为⽬标的适配体筛选技术不断改进,产⽣了如消减筛选、复合靶筛选、基因组筛选、⽑细管筛选等新⽅法,推动了这⼀技术的发展。

本⽂对现有适配体筛选⽅法进⾏了系统的评述。

关键词适配体,指数富集配体进化技术,筛选⽅法,评述2008-09-08收稿;2008-10-26接受本⽂系国家⾃然科学基⾦(N o .20435020)资助项⽬*E-m ai:l l y j 81@dlut /doc/24e0b9e9b0717fd5360cdc62.html 1 引⾔适配体的概念在1990年由Tuer k 等[1]⾸次提出,是指利⽤指数富集的配体进化技术(syste m atic evo l u tion o f li g ands by exponentia l enr i c hm en,t SELEX )从特定的寡核苷酸库中筛选出对⽬标靶有特异性相互作⽤的寡核苷酸(DNA 或RNA )。

与传统的抗体相⽐,适配体具有以下特点和优势:(1)对⽬标靶分⼦具有与抗体相当甚⾄更⾼的亲和性;(2)可以⼤量、快速的在体外合成,制备⽅法更为简单快捷;(3)可以针对不同种类的⽬标靶进⾏筛选,包括⽣物毒性的分⼦以及只具有半抗原性的分⼦,拓宽了其应⽤范围;(4)稳定性优于抗体,利于储存。

基于适配体的上述优良特性,其在疾病检测、药物研发、临床治疗、分析化学、蛋⽩质组学以及基因表达调控机理研究等多个领域都有着良好的应⽤前景。

⽬前,限制适配体技术应⽤的瓶颈问题仍是适配体的有效筛选技术。