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QIAamp DNA Micro HandbookZhang weiCarrier RNA的作用：它可以提高DNA和柱子的结合能力，尤其是对于低目标分子的样本来说。
如果加入了Carrier RNA，那么最后洗脱下来的产物中会有目的DNA和Carrier RNA。
而且Carrier RNA的量远远大于DNA的量。
因此，通过计算初始加入多少CarrierRNA 的量来确定后续实验中所需要使用的洗脱产物的量。
加入310uLBuffer AE到310ug的Carrier RNA干粉末中，充分溶解，存于-20℃保存，不要反复冻融在3次以上。
轻轻的将Buffer AL和溶解的Carrier RNA混匀，不要产生泡沫。
含有Carrier RNA的Buffer AL可以在常温下（15-25℃）放置48h。
事先溶液准备Buffer ATL如果出现沉淀，可以在70℃下溶解。
Buffer AL如果出现沉淀，可以在70℃下溶解。
Buffer AW1加入25mL无水乙醇。
Buffer AW2加入30mL无水乙醇。
加入Carrier RNA：小量血液提取DNA过程中，每100uLBuffer AL加入1uL溶解的Carrier RNA。
在微量组织中提取DNA中，200uLBuffer AL中加入1uL Carrier RNA。
微量血液中提取DNA（可以从1-100u1-100uL L 血液中提取基因组DNA）（微量细胞的基因组DNA提取可以使用该步骤）1)吸取100uL血液加入1.5mL离心管中2)加入Buffer ATL至最终体积为100uL3)加入10uL蛋白酶K4)加入100uLBuffer AL，关上盖子，涡旋15s5)56℃孵育10min（孵育时反复震荡几次可以增加DNA产出量）6)简单离心，甩下瓶盖上的液滴1)加入50uL无水乙醇，关上盖子，涡旋15s，室温孵育3min（如果室温超过25℃，无水乙醇可以事先冰浴）7)简单离心，甩下盖子上的液滴8)将上步的液体转移至吸附柱里，6000×g（8000rpm）离心1min，弃滤液（个人建议可以将滤液再次吸回吸附柱内在洗脱一次）9)在吸附柱里加入500uL Buffer AW1，6000×g（8000rpm）离心1min，弃滤液10)在吸附柱里加入500uL Buffer AW2，6000×g（8000rpm）离心1min，弃滤液11)空转20000×g（14000rpm）离心3min12)将吸附柱转移至干净的1.5mL离心管，在膜上小心加入20-100uL BufferAE或者双蒸水来溶解，室温放置1min，20,000×g(14,000rpm)离心1min。
QIAamp DNA Blood Mini Kit简介：QIAGEN公司出品的QIAamp DNA Blood Mini Kit适用于使用微型离心机或真空处理从全血、血浆、血清、血沉、淋巴细胞以及体液样品中提取总(基因、线粒体和病毒)DNA。
该试剂盒可处理带有EDTA、柠檬酸盐和肝素等常规抗凝剂的新鲜或冷冻的全血样本，样品量可达200μl。
整套基因组的操作时间约为20–40分钟，一般可从200μl健康全血中获得4–12 μg DNA，洗脱体积可在50–200μl范围。
抽提原理：样品中的DNA可以特异性结合到QIAamp的硅胶膜上，通过两次洗涤可以将PCR抑制剂，如：二价阳离子和蛋白完全去除，最后结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液进行洗脱收集。
开始前的注意事项：1. 所以的离心步骤需要在室温（15-25℃）进行2. 如果样品中含有的基因组当量少于10000，请添加载体DNA（carrier DNA）3. 200μl全血样品可以得到约3-12μgDNA开始前的准备工作：1. 将样品平衡到室温（15-25℃）2. 将水浴或是金属浴加热到56℃，以备第4步使用3. 将Buffer AE或蒸馏水平衡到室温，用于第11步的洗脱4. 确保Buffer AW1、AW2以及QIAGEN蛋白酶已经按照说明配置完毕5. 如果在Buffer AL中出现沉淀物，请在56℃孵育使其溶解操作步骤：以下为整个基因组提取操作的流程图，由于真空装置并非所有的实验室都配置，所以这里介绍的是离心法（流程图左侧）。
以下译介自QIAGEN官方出品的说明部分，黑粗体为实验操作的主体部分。
1. 吸取20μl QIAGEN蛋白酶（或者蛋白酶K）至1.5ml离心管的底部。
2. 加入200μl待提取基因组的样品至离心管中。
可以加入不超过200μl的全血、血浆、血清、血沉棕黄层，或者溶于200μl PBS中不超过5*106的淋巴细胞。
如果样品体积不足200μl，请使用PBS补足。
QIAGEN Plasmid Mini,Midi,and Maxi Kits（说明书中文翻译版）Plasmid Midi Kit(cat.Nos.12143and12145)The kit can be stored at room temperature(15~25℃)for up to2years.使用前的注意事项：（1）将Rnase A solution加入Buffer P1中，混匀，2~8℃储存。
（2）可选步骤：按1:1000的比例将LyseBlue试剂加入到Buffer P1中。
（3）使用前在4℃预冷Buffer P3，检查Buffer P2是否出现SDS沉淀。
（4）需准备好异丙醇和70%酒精。
（5）标志：圆形代表小提试剂盒；三角形代表中提试剂盒；正方形代表大提取试剂盒。
表1推荐LB培养物体积试剂盒高考倍质粒低拷贝质粒小提3mL不推荐中提25mL100mL大提100mL500mL具体操作步骤：1.收取过夜培养的细菌培养物，在4℃条件下6000×g离心15min。
2.（弃去上清液）使用4mL Buffer P1重悬菌体沉淀。
3.加入4mL Buffer P2，颠倒4~6次使彻底混匀，室温（15~25℃）孵育5min。
注：如果使用了LyseBlue试剂，溶液会变蓝。
4.加入4mL预冷过的Buffer P3，颠倒4~6次使彻底混匀，冰上孵育15min。
注：如果使用了LyseBlue试剂，溶液混匀后直至蓝色消失。
5.在4℃条件下≥20000×g（14000×g）离心30min。
6.平衡柱子QIAGEN-tip100：加入4mL Buffer QBT，通过重力流使液体过柱。
7.将第5步的上清液转移至QIAGEN-tip中，使其依靠重力流通过柱中的树脂。
8.使用10mL Buffer QC洗涤QIAGEN-tip，使Buffer QC依靠重力流通过柱中的树脂。
洗涤2次。
一、试剂盒法精提DNA1、先用1ml生理盐水（NS）洗菌，使管内抗原在NS中充分混匀，8000rpm，3min 离心，弃上清，只留沉淀。
2、向管中加180ul的ATL和20ul的蛋白酶K，混匀，放入56℃金属浴（带摇匀功能的金属浴箱）3h。
3、如要去除RNA，向体系中加4ul的RNA酶，震荡，室温离心2min，使液体全部进入管内，向样品中200ul的AL，混匀，震荡，在金属浴中放置10min（70℃）之后离心。
或4、如不去除RNA，则直接向样品中加200ul的AL，震荡混匀，在金属浴中放置10min（70℃）之后离心。
5、加200μl的乙醇（96%～100%），混匀后短暂离心，将盖上液体离下（全部体系包括沉淀全加柱子上）。
6、全部管内的液体及白色沉淀都加入所试剂盒提供的带柱子的管中。
注意不要碰到管的边缘，盖好管盖，8000rpm离心1min，之后将柱子转移到新的管中（试剂盒提供）。
7、向柱子中加500ul的AW1，盖好管盖离心（8000rpm，1min）之后将柱子转移到新的管中（试剂盒提供）。
8、向柱子中加500ul的AW2，盖好管盖最大转速离心（13800rpm，3min）。
9、换普通的EP管，最大转速下空离3min，确保杂质都不留在柱子上。
10、换普通EP管，开盖晾5~10min，向柱子加200μl的AE，室温放置1min，离心（8000rpm，1min）。
11、在分光光度计上测所提取核酸的浓度。
使用ND-1000V3.2.5软件测DNA浓度（Nucleic Acid）。
在使用分光光度计前用O启该软件的使用，以后每次加样时用纸沾干净之前所加样品。
用溶解核酸ddH2的溶剂调 Blank，使之显示读数为0。
之后加样测浓度（注：每次加样时都要在混匀器上将样品充分混匀。
）测好浓度后在管盖及管壁标明编号、日期和所测核酸的浓度。
必要时电泳看是否真正的提出了核酸。
12、将所提核酸保存在-20℃的冰箱中备用.可以再用水溶一次，水溶模板用于多重PCR鉴定；AE溶模板一般用于测序。
全血DNA 抽提(QIAGEN，德国)
采用血液基因组DNA 提取试剂盒按说明书进行操作，简述如下：
(1)先将无水乙醇加到漂洗液PW 和缓冲液GD 中，并将血液标本置于室温下平衡至标本完全溶解。
(2)取经RNaseA 酶处理过的离心管，按顺序编号后加入500μl 混匀的标本，随后
加入细胞裂解液CL lml，充分混匀后10000rpm 离心1min。
弃去上清，留下细胞
核沉淀。
(3)加入200μ1 缓冲液GS，振荡混匀。
随后加入20μ1 蛋白酶K 溶液，充分混匀。
加缓冲液GB 200μ1，充分混匀后，56℃水浴10min 至溶液变清亮。
取出后，加
无水乙醇200μl，混匀。
(4)上部物质转移到吸附柱内，12000rpm 离心30s。
弃去液体，并将吸附柱CB3 套在收集管上。
(5)加入500 μl 缓冲液GD，12000rpm 离心30s，弃去液体，将吸附柱CB3 放入收集管中。
(6)加入700μl 漂洗液PW，12000rpm 离心30s，弃去液体，将吸附柱CB3 放入收集管中。
(7)加入500μl 漂洗液PW，12000rpm 离心30s，弃去液体。
12000rpm 继续离心2min，弃去液体。
并把吸附柱置于室温数分钟，彻底晾干吸附材料中的漂洗液。
(8)将吸附柱套上一个干净的离心管中。
向吸附膜中间位置悬空滴加80μl 洗脱缓冲液TB，室温放置5min，12000rpm 离心2min。
将溶液收集到离心管中并标号，置于-20℃冰箱中冻存备用。
在开始探讨qiagen去核糖体rna试剂盒原理之前，我们首先要了解什么是去核糖体RNA（Ribonucleic Acid，以下简称RNA）。
RNA是一种重要的生物分子，它在细胞中扮演着传递、转录和翻译基因信息的角色。
而qiagen去核糖体RNA试剂盒则是用于提取RNA的试剂盒产品，被广泛应用于科研领域和临床实验中。
我们要了解这款试剂盒的工作原理。
在细胞内，RNA存在于细胞核和细胞质中。
而对于去核糖体RNA，它主要存在于细胞质中，并且不包含核糖体蛋白质。
利用qiagen去核糖体RNA试剂盒进行提取时，首先需要破裂细胞膜，释放出细胞内的RNA。
试剂盒中的某些成分可以选择性地结合RNA，将其他细胞组分和DNA与RNA分离开来。
我们通过离心、洗涤等步骤，最终得到纯净的去核糖体RNA样品。
在这一过程中，qiagen去核糖体RNA试剂盒采用了许多先进的生物化学技术，比如离心、融合、酶切等，以实现对RNA的高效提取。
这些技术的应用是保证试剂盒在提取RNA过程中高效、稳定、准确的关键因素。
试剂盒设计合理、步骤清晰，也为RNA提取提供了便利和效率。
从应用的角度来看，qiagen去核糖体RNA试剂盒在科学研究中发挥着重要作用。
比如在转录组学研究中，科学家可以利用该试剂盒提取出目标RNA，进行后续的RNA测序和分析。
在疾病诊断和生物医学领域，提取RNA也是必不可少的一步。
而qiagen去核糖体RNA试剂盒的高效性和稳定性，为这些领域的研究工作提供了强有力的支持。
从个人的理解来看，我认为qiagen去核糖体RNA试剂盒的原理是直观的、清晰的。
它使得对RNA的提取变得简单而高效，减少了实验中的复杂步骤和潜在误差的可能性。
通过对细胞的破裂、RNA的结合和分离等步骤的精准控制，qiagen去核糖体RNA试剂盒为科研工作者提供了稳定的实验条件和可靠的实验结果。
总结回顾起来，qiagen去核糖体RNA试剂盒的原理和应用是非常重要且有价值的。
QIAGEN试剂盒--动物组织样品DNA提取方法QIAGEN试剂盒提取组织DNA试验前的注意事项1、仔细阅读试剂盒使用说明。
2、所有的离心操作应在15-25℃下完成。
3、涡旋一般进行5-10s。
4、对于福尔马林或石蜡浸泡过样品，另见说明。
5、总RNA提取另见说明。
试验准备1、Buffer ATL 和Buffer AL保存时可能会出现沉淀，如果必要的话，可置于56°C水浴至完全溶解。
2、提供的Buffer AW1 和Buffer AW2是高浓度液，使用前需用96-100%的乙醇稀释至瓶子上注明的使用浓度。
3、预备一个热的振荡器或摇床或摇动的平板至56°C备步骤2使用。
4、如果为冻存的组织，需要将其溶至室温。
但是要避免此类的反复溶解。
应额外准备的物品：200μL枪及枪头；20μL枪及枪头；2mL的微量离心管；96-100%乙醇；56℃水浴锅；离心机（20,000 ×g (14,000 rpm)）；小镊子；振荡器操作步骤：1、取25mg的动物组织（脾脏最多10mg）粉碎成碎片放入1.5ml的微量离心管中。
对于啮齿类的尾巴，择取两只小鼠或一只大鼠尾巴0.4-0.6cm。
加入180μL buffer ATL，并将对应的动物作以标记。
（保证足够量的组织样本，对于脾脏由于其细胞含量丰富，我们建议不超过10mg。
我们强烈建议将组织粉碎以便于溶解提取DNA。
最好的方法是在添加bufferATL和蛋白酶K之前置于液氮中冻融。
同时，也可以采用QIAGEN公司产的几种组织匀浆机进行组织粉碎）2、加入20μL蛋白酶K，涡旋混合均匀，56℃孵育直至溶解。
在组织溶解的过程中不断（偶尔）涡旋使组织充分散开，或将该微量离心管置于摇晃的平台上，如摇床等。
（不同组织溶解时间不同，通常组织为1-3h，小鼠尾巴为6-8h。
如果试验条件许可，可以溶解过夜，其不会影响DNA提取）3、涡旋15s。
加入200μL buffer AL并涡旋使充分混匀，70℃孵育10min，然后加入200μL 乙醇（96%-100%），再次涡旋混合。
QIAGEN提取DNA的步骤缓冲液AP1和AP3/E可能在贮藏过程中形成沉淀，使用前检查，必要时65℃预热溶解。
(注意加完乙醇后就不能再加热)缓冲液AW和AP3/E第一次使用要加入适量乙醇（96-100%）。
1在磨碎的植物材料（湿重最大不超100 mg，干重不超20 mg）或真菌材料中加入400 µl 缓冲液AP1和4 µl RNase A 贮液（100 mg/ml），剧烈涡旋。
2将混合物在65℃下温育10 min，在温育过程中上下倒置试管混和2-3次。
3加入130 µl缓冲液AP2，混和，在冰上放置5 min。
（不必）可选条件：在20000 × g（14000 rpm）离心5 min。
4（先迅速离心清盖后）将裂解物置于QIAshredder Mini Spin Column（柱）中，下置2 ml 收集管，在20000 × g（14000 rpm）离心2 min。
5将步骤4中的滤液转移到一新的试管中，不要搅动细胞碎片小球。
6 在溶解清液中加入1.5倍体积的缓冲液AP3/E，吹吸混匀。
7将步骤6中650 µl 混和液（包括形成的沉淀）加入DNeasy Mini Spin Column（柱），下置试剂盒提供的2 ml收集管。
在≥6000 × g（≥8000 rpm）离心1 min，丢弃滤液。
8用剩余的混和液，重复步骤7，丢弃滤液与收集管。
9将DNeasy Mini Spin Column（柱）下置试剂盒提供的2 ml收集管，加入500 µl缓冲液AW，在≥6000 × g（≥8000 rpm）下离心1 min，丢弃滤液，在步骤10中再用一次收集管。
10 在DNeasy Mini Spin Column（柱）中加入500 µl缓冲液AW，在≥20000 × g（14000 rpm）下离心2 min，使膜干燥。
意加完乙醇后就不能再加热）缓冲液APW和AP3/E第一次使用时要加入适量乙醇（96%-100%1. 研磨前擦拭工作台。
2. 研钵里加入液氮，预冷。
研磨材料，加3-5次材料，充分研磨。
液氮预冷离心管后加入材料，加至1/2或2/3处。
若暂时不加缓冲液，就放入至液氮冷冻，用时拿出。
拿出后立即轻轻开盖，防止材料喷出。
3. 力口入440 I缓冲液AP1 （必须为预热好的），。
盖好后使劲颠倒混匀材料和缓冲液。
4. 加4 IRNase后，剧烈涡旋，使管底的材料也与液体混合。
5. 将混合物在65摄氏度下温浴15min,每5min中上下轻轻颠倒试管2-3次。
准备冰盒。
6. 加入130 l缓冲液AP2,上下颠倒混匀，在冰上放置5Min。
7. 14000rpm/min 离心5min.8. 仔细缓慢将上层液体（500 l ）置于QIAshredder Mini Spin Colum （柱）中（紫色）。
14000rpm/min 离心2min.9. 将上步中的滤液（450 l）缓慢吸至一新的离心管（自己准备的Axygen离心管）中，注意别吸到管底细胞碎片小球。
10. 在溶解清液中仔细缓慢加入倍体积（675 l ）的缓冲液AP3/E。
一定要仔细，慢慢抽吸至两者充分混匀。
11. 将上步中650 l混合液（包括形成的沉淀）加入Dneasy Mini Spin Colum （柱）中（白色），其余的混合液留着，用于再次抽提。
8000rpm/min （一般用14000rpm/min ）离心1Min，丢弃废液。
准备灭菌的去离子水于65摄氏度水浴锅中预热。
12. 剩余的混合液继续加入上一步的Dneasy Mini Spin Colum （柱）中，8000rpm/min （一般用14000rpm/min ）离心1Min，丢弃废液和收集管。
13. 将Dneasy Mini Spin Colum （柱）下置试剂盒提供的2ml离心管（取时手不要伸进去，隔着塑封袋捏出离心管）。
实验目的:白三烯受体mRNA的表达实验方法：（半）定量聚合酶联反应实验步骤：一、抽提RNA实验器具和材料1，实验器具与材料：（1）移液枪：1ml、200ul、10ul（2）吸头：1ml、200ul、20ul（3）吸头台：放置1ml吸头的一个，放置200ul和20ul的吸头一个（4）EP管1.5ml、2ml、200ul、10ul（5）电动匀浆器（6）50ml离心管（7）饭盒（8）冰盒碎冰（9）酒精纱布，供清洁桌面和试管架等。
2, 实验器具的处理与准备（1）金属制品：（镊子等）提前确定组织的重量，如果组织需要分割，还需要一个刀片。
先洗干净，再送干烤3次。
（不需要泡DEPC水）3，试剂配制和准备：（1）DEPC水：直接购买配置好的。
DEPC剧毒，购买那些已经高温高压处理去除DEPC 的水。
（2）配70％乙醇：用DEPC水和无水乙醇按照3：7的比例配置。
实际上，用超纯水配置也可以，因为70％乙醇用来提取蛋白，不涉及RNA降解的问题。
（3）无水乙醇（4）β-ME（5）DTT（6）Buffer RLT 、buffer ALO、 Buffer RPE、buffer AW1、buffer AW2、Buffer EB 准备工作：1. 在每 1 ml Buffer RLT 中加入10 ul β-ME (加入β-ME的Buffer RLT可在室温下放置1月)。
根据实验需要吸取Buffer RLT，不要把β-ME加到瓶子里。
2. 每1ml buffer ALO中加入8mg DTT。
根据实验需要吸取Buffer ALO。
3. Buffer RPE、buffer AW1、buffer AW2中加入一定体积的无水乙醇。
瓶盖上打钩说明已加入无水乙醇，如果没有打钩，需要加入无水乙醇。
4. buffer RLT可能会有沉淀，必要时可适当加热使其溶解，在室温中保存。
5. 预热Buffer EB至70℃（此步骤适用于抽提DNA）。
实验步骤：样本研磨和匀浆。
1.取组织：30mg、在干净的表面、速度要快。
（根据组织重量决定buffer RLT和其他试剂的用量）2.研磨组织，在600ul buffer RLT中匀浆化：电动匀浆器。
冰上操作。
3.最大速度离心溶解产物3分钟。
用吸量管将上层清液转入放置着Allprep DNA spincolumn的2ml收集管（紫色柱子）中。
轻轻盖上盖子，8000×g ( or 10000rpm)离心30s。
注意：有时，在3分钟离心后还存在着少量的未溶解的物质，要使这些不可见；确定离心后没有液体残留在column membrane，必要时可重复离心直到液体都通过膜。
4.将Allprep DNA spin column 放在一个新的2ml收集管中，并且在室温中保存或者在4℃为了之后的DNA提纯。
在后面的RNA提纯使用流出液。
注意：不要在室温或者4℃情况下保存Allprep DNA spin column太长时间。
不要冰冻柱子。
RNA提纯5.在刚才第4步的流出液中加入430ul无水乙醇：250ul（buffer RLT 350ul）或者430ul（bufferRLT 600ul）。
用吸量管充分混合。
勿离心，马上进入第6步。
注意：若匀浆的液体有所丢失，相应地减少无水乙醇的量。
这步可能会产生沉淀物，但是并不影响之后的过程。
6.将样本（约700ul，包括可能形成的沉淀）加入到RNeasy spin column中（粉色柱子，放在一个2ml的收集管中），轻轻盖上管盖， 8000×g ( or 10000rpm)离心15s。
为了之后的蛋白提纯，将流出液转移到一个2ml 的管子中。
注意：该收集管可在第7步中再使用。
如果样本量超过700ul，再离心。
7.将700ul buffer RW1 加入RNeasy spin column（粉色柱子）中。
轻轻盖上管盖，8000×g（or 10000rpm）离心15s。
弃掉流出液。
收集管继续使用。
注意：在离心后，小心转移RNeasy spin column，以避免column接触到流出液。
确定将收集管中是完全空的。
8.将500ul buffer RPE 加入RNeasy spin column中。
轻轻盖上盖子，8000×g（or 10000rpm）离心15s，弃掉流出液，收集管再用。
9.将500ul buffer RPE 加入RNeasy spin column中。
轻轻盖上试管8000×g（or 10000rpm）离心2min。
（此次长时间的离心可以使柱子的膜干燥，以保证在RNA洗脱过程中没有乙醇残留。
）注意：在离心后，小心转移RNeasy spin column，以避免柱子接触到流出液。
10.可选：将RNeasy spin column转到一个新的2ml收集管中，并且弃掉旧的含有流出液的收集管。
最大速度离心1分钟。
11.将RNeasy spin column转到一个新的1.5ml收集管中。
直接将30-50ul的Rnase-free water加入柱子的膜中。
轻轻盖上盖子，8000×g（or 10000rpm）离心1min以洗脱RNA。
12.如果预期的RNA产生大于30ug，可以另外再用30-50ul的Rnase-free water重复上一步的操作，或者如果需要高浓度RNA就直接使用上一步的洗出液。
上一步的收集管继续使用。
提取的RNA：-80℃冻存，但最好直接逆转录成DNA。
蛋白沉淀13.在第6步的流出液中加入1倍体积（通常600ul or 1000ul）的buffer APP。
用力混匀并在室温中静置10分钟以使蛋白沉淀。
14.最大速度离心10分钟，用枪小心吸掉上层清液。
15.在蛋白颗粒中加入500ul 70%的乙醇，最大速度离心1分钟，用枪小心移除上层清液。
16.在室温下吹干蛋白颗粒，大约5至10分钟。
17.加入100ul buffer ALO ，并用力混匀以使蛋白颗粒溶解。
18.在95℃下静置5分钟以使蛋白完全溶解及变性。
随后冷却样本。
19.最大速度离心1分钟。
上层-20℃保存，western用；沉淀-20℃保存，备用。
DNA提纯20.往之前第4步中的Allprep DNA spin column加入500ul buffer AW1，轻轻盖上管盖， 8000×g ( or 10000rpm)离心15s。
弃掉流出液。
Spin column继续使用。
21.往Allprep DNA spin column加入500ul buffer AW2，轻轻盖上管盖，最大速度离心2min。
注意：在离心后，小心从收集管中移出Allprep DNA spin column。
如果柱子中含有流出液，倒空收集管并再以最大速度离心1分钟。
22.将Allprep DNA spin column放置到一个新的1.5ml收集管中。
直接将100ul buffer EB 加入spin column membrane并关上盖子。
在室温中静置2分钟，然后 8000×g ( or 10000rpm)离心1min以洗脱DNA。
23.重复上一步。
注意：使用新的1.5ml收集管来收集第二次的DNA洗出液。
重复使用上一步的收集管使两次洗出液混合。
AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit可从同一细胞或组织样本中同时纯化基因组DNA、总RNA和总蛋白质，使样本制备流程流畅高效（参见流程图"AllPrep DNA/RNA/Protein procedure"）。
使用此试剂盒无需在纯化前将样本分为三份，因此DNA、RNA和蛋白质的回收水平达到最高。
此外，纯化过程中无需使用酚和丙酮等有机溶剂。
细胞或组织样本首先在Buffer RLT中裂解，使得DNA酶、RNA酶和蛋白酶立刻失活，确保可分离得到完整的DNA、RNA和蛋白质。
用AllPrep DNA离心柱过滤裂解液。
使用该离心柱和高盐缓冲液可高效的选择性结合基因组DNA。
洗脱之后即可得到即用型DNA。
在AllPrep DNA离心柱的流出液中加入乙醇，形成适合RNA结合的条件。
用RNeasy 离心柱过滤样本，总RNA与膜结合，污染物被去除。
然后用不含RNA酶的纯水进行洗脱，得到高品质RNA。
Buffer APP是新型的水溶性蛋白沉淀溶液。
将其加入RNeasy离心柱的流出液中，然后离心得到蛋白质沉淀。
用适合的溶液溶解完整的总蛋白质，即可直接用于下游应用。
此试剂盒包括Buffer ALO，该缓冲液用于溶解蛋白沉淀，不影响SDS-PAGE 操作。
应用AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit标准化了系统生物学研究中的样本制备过程。
DNA、RNA和蛋白质为同一来源，减少了从不同样本中制备这些分析物时引起的内在差异。
