疑难血型鉴定及交叉配血处理流程
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输血科疑难交叉配血试验标准操作规程1.目的为规范疑难交叉配血试验操作,保证临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。
2.适用范围适用于医疗机构输血科对临床疑难交叉配血受血者,主要是对红细胞ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性及自身免疫性溶血性贫血(AlHA)患者的交叉配血试验。
3.职责医疗机构输血科技术人员负责疑难交叉配血试验。
4.原理本规程中疑难交叉配血是指受血者ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性或受血者是自身免疫性溶血性贫血患者等情况下的交叉配血试验。
配血前需确定受血者的ABO血型或红细胞不规则抗体的特异性,选择ABO血型相容的红细胞或红细胞不规则抗体对应抗原阴性的红细胞进行交叉配血试验。
5.所需设备和试剂普通离心机,血型血清学专用离心机,水浴震荡仪,普通显微镜等。
6.检测环境条件室温应控制在18-27°C,湿度应保持30%-70%°7.步骤与方法7.1交叉配血前受血者ABO血型鉴定不确定者执行《ABO疑难血型鉴定标准操作规程》,确定ABO血型后,再选择ABO血型相同或相容的献血者血液进行交叉配血试验。
7.2红细胞不规则抗体筛选阳性时7.2.1随机与库存血中多袋血液进行交叉配血试验,选择交叉配血相合的血液输注。
7.2.2我院库存血中无相合的血液时,应立即联系临床医生说明情况:①上述实际情况;②应送市血液中心进行“疑难配血”,会产生费用,存在配血不成功的可能:③详细告知家属,决定是否送市血液中心。
7.2.3家属同意后,由医生填写“免疫学申请单”,并抽取血样EDTA抗凝血5-10ml,送输血科。
7.2.4输血科联系血液中心,并送血样。
7.3冷型自身抗体或冷型AIHA患者交叉配血试验:执行7.2.2-7.2.4程序8.交叉配血结果判定主侧、次侧交叉配血均无溶血、无凝集,表示配血相合。
对于AlHA患者,已经排除同种抗体的存在,而所有交叉配血又都不相和时,可选择凝集强度弱于自身凝集的血液输注。
ABO疑难血型三步分析法在血型分类中没有疑难血型,迄今为止在文献中也查不到“疑难血型”的定义,因为“疑难血型”是1种血型难以检定或判定的“现象”,而不是1种型别。
检定1份标本是否属“疑难血型”,除了标本本身的特殊性外,还与实验室的设备、技术人员的水平、经验等多种因素有关,例如1份ABO亚型标本,在基层医院血库可能因为正定型与反定型不一致而分析不出原因被认为是“疑难血型”,但在血液中心血型参比实验室该问题可能就易于迎刃而解。
在检定血型时,标本如果受多种因素干扰使结果难以判定,便呈现“疑难血型”现象。
一、干扰ABO血型正确判定的因素(一)生理性因素1.年龄老年人(ABO抗原或ABO抗体减弱),6个月前的婴儿(ABO 抗原或ABO抗体不成熟),可能导致ABO血型误定。
2.ABO亚型包括A(B)型、B(A)型,ABO抗原减弱导致细胞定型(正定型)受干扰,或血清中出现不规则抗体干扰血清定型(反定型)。
3.冷凝集素有些健康人血清中含有冷凝集素,且在<4℃才有活性,不干扰ABO血型检定,如果冷凝集素效价升高,或在室温以上反应,致敏自身红细胞可能干扰ABO正定型,存在于血清可能干扰ABO反定型。
4.“先天性”无ABO抗体近年有“先天性”无ABO抗体的个案报告,原因有待研究。
5.双精子授精红细胞呈嵌合体。
6.个体特异性个别人血清中ABO可溶性血型物质过高,ABO正定型红细胞凝集减弱。
(二)实验技术原因1.标本混淆如采错被检者,红细胞和血清非同一人,记录结果与标本编号不对应。
2.静脉输液处采样ABO抗体被输液稀释,干扰ABO反定型。
3.采样不规范用凝血块洗下红细胞检定血型,其中混有凝集程度不一的红细胞;用血浆做ABO反定型,操作过程中纤维蛋白析出凝集试剂红细胞。
4.试剂质量问题或漏加试剂定型试剂过期失效,未达标准,被污染。
操作中未遵循“先加血清后加细胞”的原则,大批量样本试验时漏加试剂血清或试剂红细胞。
5.实验操作不规范被检红细胞未洗涤,非特异性粘附血浆蛋白,或被检红细胞悬液过浓或过稀。
临床输血规范血型鉴定与配血操作步骤详解输血是一项重要的医疗技术,对于一些临床病例来说,输血可以挽救患者的生命。
而在输血操作过程中,准确的血型鉴定与配血是至关重要的环节。
本文将从血型鉴定和配血操作两个方面,详细介绍临床输血规范的步骤。
一、血型鉴定血型鉴定是确保输血安全的前提,它是根据红细胞表面产生的抗原和抗体的相互作用来确定的。
目前,常用的血型系统有ABO血型系统和Rh血型系统。
以下是血型鉴定的步骤:1. 样本采集临床血型鉴定通常采用的样本是抗凝血全血或抗凝血血浆。
样本采集时,要保证无菌操作,并确保在采集前患者已经停药或者没有接受其他相关的干扰性治疗。
2. 血凝试验血凝试验是根据血型抗体与红细胞抗原相互作用而产生的凝集反应来确定血型。
常用的血凝试验有直接凝集试验和间接凝集试验。
在实验过程中,要严格按照试剂说明书进行操作,并记录凝集结果以及反应程度。
3. 抗人球蛋白试验抗人球蛋白试验用于鉴定Rh血型系统。
该试验是通过抗人球蛋白抗体与红细胞抗原相互作用来确定血型。
操作过程中,也需要注意严格按照试剂说明书进行操作,并记录试验结果。
二、配血操作在完成血型鉴定后,即可进行配血操作。
配血的目标是寻找与受血者血型相匹配的供血者,以确保输血的安全有效。
以下是配血操作的步骤:1. 选择合适的供血者根据受血者的血型需求以及供血者的血型特点,选择合适的供血者。
一般情况下,可以通过ABO和Rh血型相匹配的原则来进行选择。
2. 交叉配血试验交叉配血试验是将受血者的血浆与供血者的红细胞进行反应,以判断是否存在抗体与红细胞抗原相互作用。
该试验主要用于检测受血者的血浆中是否存在不相容的抗体。
3. 输血前配血记录在进行输血之前,要对配血结果进行记录。
记录内容通常包括受血者与供血者的血型信息、交叉配血试验结果以及配血的目的等。
4. 输血操作输血操作中,要严格按照规范的操作流程进行。
首先,核对受血者和供血者的身份;其次,核对血液制品的标签与要求;然后,进行给药前的检查,包括外观、溶解情况和悬浊物等;最后,开始进行输血操作,同时监测受血者的生命体征。
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血型及交叉合血操作规程一、引言作为医疗机构中常见的操作流程之一,血型及交叉合血是确保输血安全的重要环节。
本文将介绍血型和交叉配血的基本概念、操作步骤以及注意事项,以提供规范的操作指南。
二、血型的基本概念血型是指个体红细胞膜上存在的抗原和抗体的组合情况,分为A、B、AB和O四种类型。
在血型鉴定中,需要使用抗A和抗B两种血清对被测血液进行试验,从而确定其血型类型。
此外,还需要测试被测血液中是否存在抗D抗体,以判断其Rh阴性或Rh阳性。
三、交叉配血的基本概念交叉配血是在输血前进行的一项重要试验,旨在检测受血者的血清中是否存在与供血者红细胞的抗体相对应的抗原,以避免输血反应的发生。
具体操作如下:1. 取受血者的血清和供血者的红细胞,将它们分别置于两个试管中。
2. 依次加入适量混合胶体试验红细胞悬液和抗人球蛋白试剂,轻轻振荡混合。
3. 观察反应是否出现凝集、增浊或溶解等现象。
4. 凝集或增浊反应表示交叉配血不合格,需停止输血操作;溶解反应则表示血型和抗体基本匹配,可以进行输血。
四、血型及交叉合血操作规程以下为血型及交叉合血操作的具体步骤,操作人员应根据实际情况进行:1. 准备工作a. 确认受血者的基本信息,包括姓名、住院号、血型等。
b. 根据受血者血型,选择相应的供血者。
c. 根据病情和输血需求,估计所需输血量。
d. 消毒操作台面和操作器具。
2. 操作步骤a. 将受血者的血液样本采集到干燥无菌试管中,标明受血者信息。
b. 将受血者的样本送至血库,进行血型鉴定。
c. 根据受血者的血型和抗体情况,在血库选择适当的供血者。
d. 从血库获取供血者的血液样本。
e. 将供血者样本标记并送至血型试验室进行交叉试验。
f. 根据交叉试验结果判断是否合适进行输血操作。
g. 如满足输血条件,按照医嘱进行输血操作。
五、注意事项1. 操作人员应进行严格的洗手和穿戴手套等防护措施,以防交叉感染。
2. 每一步操作都需要仔细核对患者信息,确保输血操作正确。
输血科交叉配血工作流程一、血型鉴定(一)、正定型【检验方法】1.平板法(玻片法):(1) 加1滴抗A或抗B试剂于玻片上。
(2) 再加1滴10%的被检红细胞悬液。
该红细胞悬液可以是盐水悬液,也可以是悬浮自身血浆或血清中的红细胞。
(3) 在圆形的玻片区域中混匀, (直径约为20mm大小),前后缓慢摇晃玻片.2分钟左右肉眼判读结果,并记录。
2.试管法:(1) 加一滴抗A或抗B试剂于二支预先标记好的试管中(75x12mm或75x10m)。
(2) 再加一滴2% -5%的被检红细胞悬液于试管中。
混匀。
(3) 离心,速度和时间可选择以下二种之一:a)转速1000rpm,时间1分钟;b)转速3400rpm,时间15秒。
(4) 检查是否有溶血(溶血可能是阳性结果,或者是细菌污染),然后轻轻摇晃,使细胞再悬浮。
(5) 观察凝集状况,并立即记录结果.必要时可借助显微镜。
(6) 许多红细胞亚型(如Ax)能在抗AB试剂的盐水中凝集,但与抗A不凝,在室温(23+3℃)中放置几分钟,可以增强反应,但放置时间不宜超过30分钟,(二)、反定型【检验方法】1.试管法:(1) 取被检者血清(或血浆)各1滴(50ul) 分别加于3支标记好的小试管中;(2) 分别各加1滴(50ul) A1、 B、0试剂红细胞;(3) 摇动试管,离心,速度和时间可选以下二种之一^:a)转速1000rpm,时间1分钟;b)转速3400rpm,时间15秒;(4) 先观察是否溶血( 溶血可能是阳性结果,或者是细菌污染),然后轻轻摇晃,使细胞再悬浮起来;(5) 观察凝集状况,并立即记录结果。
(三)、RhD(IgM)血型定型【检验方法】1.平板法(玻片法):(1) 加1滴抗D试剂于玻片上。
(2) 再加1滴35-45%的被检红细胞悬液。
该红细胞悬液可以是盐水悬液,也可以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞。
(3) 在圆形的玻片区域中混匀,(直径约为20m 大小),前后缓慢摇晃玻片.2分钟左右肉眼判读结果。
⾎型鉴定、交叉配⾎操作规程ABO、Rh-D⾎型鉴定操作规程1.⽬的:规范ABO、Rh-D检测的操作过程2. 标本采集:静脉采⾎2ml抗凝⾎,避免溶⾎试剂3. 试剂:长春博讯⽣物技术有限责任公司4.⽅法原理【原理】:标准⾎清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表⾯相应的抗原在盐⽔介质中发⽣特异性的凝集反应。
根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。
5. 操作:⼀、玻⽚法(⼀般只能做正定型)【正定型】:1、取⼀张玻⽚,⽤蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每⼀等份左上⾓标明A、B、D,2、对应加⼊抗A和抗B抗D标准⾎清⼀滴;3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);4、⽤洁净⽵签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2⼤⼩;5、轻轻地连续倾斜转动玻⽚2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型⾎;B端凝集为B型⾎;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,⽆凝集则为RH阴性。
备注:玻⽚法可作为ABO⾎型初筛或复检;不适⽤于抗体鉴定和交叉配⾎;不适合检测ABO亚型。
⼆、试管法(盐⽔介质)【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者⾎清(⾎浆)中相应的抗体发⽣特异性结合,形成⾁眼可见的凝集反应,从⽽可推断出受检者的⾎型。
【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可⾃⾏新鲜配制);2、受试者⾎清或⾎清;3、洁净康⽒试管。
【正定型】:1、取⼆⽀洁净试管分别记上抗A和抗B;2、对应加⼊抗A和抗B⾎清1滴;3、分别加⼊病⼈红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型⾎;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型⾎;抗A管凝集则为A型⾎;抗B管凝集则为B型⾎。
【反定型】:1、取⼆⽀试管分别记上AC和BC;2、分别加⼊病⼈⾎清;3、对应加⼊A和B型试剂红细胞;4、混匀室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果;【解释】:⾸先检查上清液有⽆溶⾎,然后轻摇试管,检查是否凝集,A、B管均凝集受试者为O型⾎;A、B管均不凝集则为AB型⾎;A管凝集则为B型⾎;B管凝集则为A型⾎。
困惑血型鉴定及相互交叉配血处理流程一、背景介绍困惑血型是指个体的血液患有两种或更多种血型抗原,造成传统血型鉴定方法无法准确确定其血型。
针对困惑血型患者的血液配型和输血处理,我们建议采取以下处理流程。
二、困惑血型鉴定流程1. 进行常规血型鉴定:采用血型鉴定试剂,按照通常的方法检测血液中的抗原和抗体,以初步确定困惑血型的存在。
2. 确认困惑血型:若常规血型鉴定无法准确确定血型,则需要进行进一步的血型鉴定方法,如基因分型、酶抗体方法等,以确认困惑血型的具体类型。
3. 鉴定报告:根据鉴定结果,出具困惑血型鉴定报告,并备注该患者的具体困惑血型类型。
三、相互交叉配血处理流程1. 患者评估:根据患者的具体情况,包括疾病状况、输血史、困惑血型类型等,评估是否需要进行相互交叉配血处理。
2. 配血策略选择:根据患者的困惑血型类型和供血者的血型,选择适当的配血策略,如血型替代、红细胞分离、红细胞滤过等。
3. 配血操作:根据选择的配血策略,进行相应的配血操作,确保输血过程中避免发生输血不良反应和血液不相容。
4. 监测与护理:在输血过程中,进行密切监测,及时发现并处理可能出现的输血相关问题。
5. 输血记录和报告:对输血过程中的相关数据进行记录,包括输血量、注射时间、输血反应等,以便后续的处理和数据统计。
四、注意事项1. 严格遵守血液安全管理规范,确保输血过程中的质量和安全。
2. 在困惑血型鉴定和配血处理过程中,严格执行相关操作规程,避免操作失误和交叉感染。
3. 注重困惑血型患者的个体差异和特殊需求,提供个性化的医疗服务。
以上为困惑血型鉴定及相互交叉配血处理流程的简要介绍。
在实际操作过程中,请勿忽视个体差异和相关法律法规的要求。
交叉配血流程交叉配血是一种通过检测血型抗原和抗体来确定合适的血液输血配对的过程。
在进行输血之前,医生会对受血者和供血者进行血型鉴定,并进行交叉配血试验,以确保输血过程的安全和有效。
下面将详细介绍交叉配血的流程。
1. 预登记和采血在进行交叉配血之前,医生会对受血者和供血者进行预登记,记录他们的个人信息和血型信息。
然后,医生会采集他们的血液样本,通常是从静脉中抽取一定量的血液。
2. 血型鉴定采集到的血液样本会送往实验室进行血型鉴定。
血型鉴定是通过检测血液中的抗原和抗体来确定一个人的血型。
根据抗原的不同,人的血型可以分为A型、B型、AB型和O型。
根据抗体的不同,血型可以进一步分为Rh阳性和Rh阴性。
3. 交叉配血试验交叉配血试验是为了确定受血者的血液是否与供血者的血液相容。
在试验中,医生会将受血者的血液与供血者的红细胞进行混合反应,观察是否出现凝集现象。
如果出现凝集现象,则说明受血者的血液中含有抗体,与供血者的红细胞发生了不相容反应。
4. 交叉配血结果根据交叉配血试验的结果,医生会确定受血者与供血者的血液相容性。
如果交叉配血试验结果为阴性,表示受血者的血液与供血者的血液相容,可以进行输血。
如果交叉配血试验结果为阳性,表示受血者的血液与供血者的血液不相容,不能进行输血。
5. 输血过程当确定受血者与供血者的血液相容后,可以进行输血。
在输血过程中,医生会将符合血型要求的供血者的血液通过输血管插入受血者的血管中。
在输血过程中,医生会密切观察受血者的反应,以及监测血液的流速和输血量。
6. 输血后观察输血结束后,医生会对受血者进行观察,以确保输血过程没有出现不良反应。
常见的输血反应包括发热、寒战、呼吸困难、过敏反应等。
医生会根据受血者的症状和体征调整治疗措施,以确保受血者的安全。
交叉配血是一项非常重要的临床操作,它可以减少输血相关的不良反应和并发症的发生。
通过准确的血型鉴定和交叉配血试验,可以确保输血过程的安全和有效。
疑难血型鉴定与疑难交叉配血1、疑难血型鉴定疑难血型就是一种血型难以检定或判定(正反定型不一致)得现象,多由血型抗原减弱形成亚型、疾病原因引起抗体减弱或部分血型系统罕见表型等原因引起。
因此,疑难血型鉴定主要从弱抗原、弱抗体与特殊抗原或抗体检测角度出发,结合血型血清学与分子生物学研究方法对患者样本进行检测。
而对于不规则抗体筛查与鉴定,主要就是对抗体种类与特性进行研究,尤其就是利用吸收/放散试验对同时存在多种同种抗体或自身抗体进行分离鉴定,从而较为准确得分析患者血清抗体得特异性。
在工作中遇到此类情况时,应按照以下步骤进行分析与处理:(1)分析可能存在得原因先排除人为操作因素,再通过了解患者临床资料分析可能得原因,主要包括抗原类影响因素与抗体类影响因素,抗原类影响因素一般包括ABO亚型、血液病、骨髓移植等,抗体类影响因素一般包括不规则抗体、药物抗体、先天抗体缺失、丙种球蛋白过低、冷凝集素等。
(2)设计实验进行验证疑难血型鉴定流程见流程图1。
流程图1 疑难血型鉴定流程2014年1月,在工作中发现正反定型结果不符样本一例,经一系列血清学试验确证该患者为P1Pk血型系统得p表型,经分子生物学基因测序,初步推断A4GALT 基因第3外显子得903C>G突变就是患者p表型形成得分子生物学基础,该研究成果从不同角度与深度撰写论文,先后发表《临床军医杂志》与《中国输血杂志》论文各一篇,并由此逐步展开疑难血型鉴定。
在此之后得工作中,通过阅读文献自修学习,鉴定出Am、Bm、B3等血型亚型,形成了一套相对完整得疑难血型鉴定思路与流程。
2014年2月与2015年10月,在工作中分别遇到一例反复进行输血治疗得患者,经一系列血清学试验,确证此两例患者均因多次输血治疗而产生多种不规则抗体,该研究成果先后以论文形式发表于《临床军医杂志》。
在后期工作中,通过对解放军174医院住院患者不规则抗体筛查与鉴定结果进行分析,对厦门地区住院患者不规则抗体得分布特征有了较为清晰得了解,该研究成果以论文形式发表于《国际医药卫生导报》,并形成了一套相对完整得不规则抗体筛查与鉴定流程。
疑难血型鉴定及交叉配血处理流程
一、正反定型不一致
1、重复试验(严格正规操作)。
2、重新取血(以纠正污染或弄错标本造成的不符),溶血标本不能用于合血。
3、洗涤红细胞后进行以下试验(正反定型凝集低于2+的,应首先怀疑是由于亚型或抗原抗体活降低引起。
)
1)、用自身血清、红细胞做定型对照,检验自身有无完全抗体。
2)、用O型红细胞做反定型对照,确认是否存在ABO系统以外完全抗体。
3)、用抗A、抗AB、抗A1和抗H进行正定型:
①A亚型细胞与抗A、抗AB的凝集强度低于A1细胞,但与抗H的凝集强度高于A1细胞(3+以上);
②A亚型(特别是A2中约有1-8%会产生抗A1),与抗A1基本不发生凝集。
③用抗AB(O型血清或血浆)是因为它的抗A效价较高,与弱A和弱B抗原亲和力强。
4)、分别用A1型和A2型红细胞反定型检查血清中有无抗A1存在(A亚型中有部份会产生抗A1,能与A1发生凝集,但不与A2凝集。
)
5)、询问病史,判断是否是由于病人抗体缺失或减弱引起反定型错误,可延长反应时间,或用灵敏度更高的血型卡做反定型。
6)、被检红细胞做直抗(观察有无被抗体致敏的情况),若为阳性,应将细胞放散至阴性后再定血型。
4、若还不能确定血型,应增加血型物质的检测(如唾液等)。
二、交叉配血不合
(一)主侧端不相合
1、血型鉴定不正确,重新鉴定血型。
2、病人血清中存在同种抗体,与供血者红细胞上的相应抗原反应。
3、供血者红细胞上已经包被了抗体,导致抗球蛋白试验阳性。
4、病人血清不正常,如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状凝集,血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂
引起假阳性。
5、试验系统被污染。
(二)次侧端不相合
1、供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗体。
2、病人与供血者的ABO血型不相合。
3、病人的红细胞已经包被了抗体,直接抗人球蛋白试验阳性。
4、抗筛阴性,而次侧不合多由自身抗体引起(此是抗人球配血不合,而聚凝胺配血通过可输血)。
(三)配血不合的主要因素
1、血型是否正确。
2、是否有自身抗体。
3、是否有同种异体抗体。