太子参染色体倍性鉴定方法研究

收稿日期:2002-09-05基金项目:江苏省自然科学基金资助项目(BK 200176)太子参化学成分、药理作用及质量评价研究进展余永邦　秦民坚　余国奠(中国药科大学中药资源研究室,江苏南京210038)摘　要　对近年太子参的化学成分、药理作用、质量评价等方面的研究进展作一综述。

关键词　太子参,化学成分,药理作用,质量评价 太子参为石竹科孩儿参属植物孩儿参P seu 2d ostella ria heterop hy lla (M iq .)Pax ex Pax et Hoffm 的干燥块根,别名孩儿参,童参,双批七,四叶参或米参,为常用中药。

全国各地均有分布,主产于江苏、安徽、山东、福建等省。

具有益气生津,补肺健脾之功效,与人参功用相仿,但以“清补”见长,特点为益气但不升提,生津但不助湿,扶正却不恋邪,补虚又不峻猛。

主治心悸自汗,疲倦乏力,脾虚食少,气阴不足,自汗口渴,肺燥干咳等症。

由于近年来太子参的需求量不断增加,极需要对太子参作进一步的研究,笔者从化学成分、药理作用、质量评价等方面对太子参近年的研究成果作一综述,为该药的研究开发提供资料。

1　化学成分20世纪90年代以前,对太子参成分的报道较少,90年代后,国内外学者对太子参的化学成分进行了较系统的研究,但其成分与功效之间的关系至今尚不够明确。

现对太子参的各类成分归纳如下。

1.1　微量元素太子参含Fe ,Cu ,Zn ,C r ,N i ,Co ,Sr ,M n ,Pb ,L i ,N a ,B ,B e ,T i ,A l ,Ca ,M g ,K ,P ,Se 等丰富的微量元素,其中Fe ,Cu ,Zn ,C r ,N i ,Co ,Sr ,M n 为人体的必需元素,据分析以Fe ,Cu ,Zn ,M n 的含量较高,Pb 为有害元素[1]。

1.2　氨基酸太子参含有大量的氨基酸,包括组氨酸,亮氨酸,异亮氨酸,赖氨酸,蛋氨酸,苯丙氨酸,苏氨酸,缬氨酸等8种人体必需氨基酸[2]。

植物细胞染色体倍性鉴定方法魏爱民;杜胜利;韩毅科;张历【摘要】综述了植物细胞染色体倍性鉴定的染色体计数法、流式细胞分析法、检测气孔大小及气孔保卫细胞叶绿体数目法等各种检测方法，并对其优缺点进行了评述。

【期刊名称】《天津农业科学》【年(卷),期】2001(007)002【总页数】3页(P41-43)【关键词】植物;倍性;染色体;流式细胞分析;气孔;叶绿体【作者】魏爱民;杜胜利;韩毅科;张历【作者单位】天津市黄瓜研究所,;天津市黄瓜研究所,;天津市黄瓜研究所,;天津市黄瓜研究所,【正文语种】中文【中图分类】农业科学【文献来源】https:///academic-journal-cn_tianjin-agricultural-sciences_thesis/020*********.html2001 年 6 月Jun ． 2001 天津农业科学 TianjinAgricultural Sciences第 7 卷第2 期Vol.7No． 2植物细胞染色体倍性鉴定方法魏爱民，杜胜利，韩毅科，张历 (天津市黄瓜研究所，天津 300192)摘要：综述了植物细胞染色体倍性鉴定的染色体计数法、流式细胞分析法、检测气孔大小及气孔保卫细胞叶绿体数目法等各种检测方法，并对其优缺点进行了评述。

关键词：植物；倍性；染色体；流式细胞分析；气孔；叶绿体中图分类号：S641.3文献标识码：A文章编号：1006-6500(2001)02-0041-03倍性鉴定在植物遗传育种中具有十分重要的作用。

在单倍体育种中，通过花药（花粉小孢子）、未受精子房等途径再生出的植株，往往是单倍体、双单倍体及其他倍性植株的混合群体，有效的倍性鉴定是了解其遗传背景和进一步应用的基础。

尽早检测出单倍体有利于对其进行加倍处理。

在三倍体无子西瓜、甜瓜的种子检测中，倍性鉴定可用来检测种子纯度。

另外，倍性鉴定也可用于分析细胞分裂活动等生理和遗传研究。

国内外关于各种鉴定方法的报道不少，但较分散，而且很少见将各种方法加以综合和比较的报道。

太子参健康种参块根的筛选与鉴定作者：肖荣凤陈燕萍许丽宁郑梅霞刘波朱育菁来源：《福建农业科技》2021年第08期肖榮凤，1977年生，硕士，研究员，主要从事植物病害及其防治的研究工作，在由镰刀菌Fusarium引起的茄科、瓜类和中药材等农作物的土传病害（枯萎病、根腐病、茎腐病等）病原学及生物防治方面取得重要进展。

主持福建省自然科学基金项目、福建省属公益类科研院所基本科研专项、福建省种业创新与产业化工程专项子课题等20余项，获福建省科技进步奖一等奖1项（排名第2）、福建省科技进步奖三等奖2项（排名均第4）、神农中华农业科技奖一等奖1项（排名第4）、福建省农业科学院科学技术奖一等奖2项（排名第2和7），获国家授权发明专利3件（均排名第2），参编专著3本（分别排名第3，5和5），第一作者发表学术论文30余篇，其中SCI收录3篇。

摘要：针对目前太子参种参块根筛选缺乏统一的质量标准和种参质量参差不齐的问题，介绍了种参块根的初步筛选方法、虫害种参和病害种参的症状识别与剔除方法，并对筛选种参块根的萌发率、出苗率和产量等进行了分析，为太子参健康种参筛选提供依据。

结果表明：建立了太子参健康种参块根的筛选方法为选择参体肥大、表皮完好无损、无病斑、无虫害咬食伤口，芽头完整饱满的块根;筛选出的健康种参块根萌发率和出苗率均可达100.00%，萌发后的芽头完整饱满，出苗整齐且健壮，干重产量为484.63 g·m2;对照组未经筛选种参块根的萌发率为88.00%，出苗率为77.78%，出苗不整齐且长势较弱，干重产量为326.44 g·m2。

健康种块根萌发率、出苗率和干重产量显著高于未经筛选种参块根。

关键词：太子参;健康种参;筛选方法;病虫害中图分类号：S 567.53 文献标志码：A 文章编号：0253-2301（2021）08-0001-06DOI： 10.13651/ki.fjnykj.2021.08.001Screening and Identification of the Root Tubers of Healthy Cultivated Pseudostellaria HeterophyllaXIAO Rong-feng， CHEN Yan-ping， XU Li-ning， ZHENG Mei-xia， LIU Bo， ZHU Yu-jing*（Institute of Agricultural Biological Resources， Fujian Academy ofAgricultural Sciences，Fuzhou， Fujian 350003， China）Abstract： Aiming at the problems of the lack of uniform quality standard and the uneven quality for the screening of root tubers of the cultivated P.heterophylla， the preliminary screening methods for the root tubers of cultivated P.heterophylla， as well as the symptom identification and elimination methods for the cultivated P.heterophylla damaged by pests or infected by diseases were introduced. In addition， the germination rates， seeding emergence rates and yield of root tubers of the screened cultivated P.heterophylla were also analyzed to provide basis for the screening of healthy cultivated P.heterophylla. The results showed that the method for selecting the root tubers of healthy cultivated P.heterophylla was established， which was to select the root tubers with fat body， intact epidermis， no disease spots， no insect bites and full bud head. The germination rate and seedling emergence rate of root tubers of the screened cultivated P.heterophylla could reach 100.00%，meanwhile the buds was complete and full after germination， the seedlings emerged neatly and healthily and the dry weight yield was 484.63 g·m2. In the control group， the germination rate ofroot tubers of the unscreened cultivated P.heterophylla was 88.00%， and the seedling emergence rate was 77.78%， with irregular seedling emergence， weak growth and the dry weight yield of 326.44 g·m2. The germination rate， seedling emergence rate and dry weight yield of root tubers of the cultivated P.heterophylla were significantly higher than those of root tubers of the unscreened cultivated P.heterophylla.Key words： P.heterophylla; Healthy cultivated ginseng; Screening method; Plant diseases and insect pests太子参Pseudostellaria heterophylla是一种以块根入药的名贵滋补类中药材，具有益气养阴、健脾消食、生津润肺等功效[1]。

太子参化学成分研究进展作者：刘东韩邦兴姚厚军等来源：《中国民族民间医药·下半月》2014年第08期【摘要】对太子参的化学成分进行总结和分析，为其资源的利用与开发提供参考。

太子参化学成分类别主要包括糖类，皂苷类，环肽类，甾醇类，油脂类，挥发油类，氨基酸类，磷脂类，脂肪酸类，微量元素。

分别对以上化学成分的研究进行归纳，并对其相关药理作用进行综述。

【关键词】太子参；化学成分；研究进展【中图分类号】 R284 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）16-0018-03Advances on Chemical Constituents in Radix PseudostellariaeLIU Dong1，2， HAN Bang-xin1，2， YAO Hou-jun1， DAI Jun1， CHEN Nai-fu1*1. School of Biology and Pharmaceutical Engineering， West Anhui University， Luan 237012， China；2. Center of Traditional Chinese medicine R﹠D， West Anhui University， Luan 237012，ChinaTo summarize and analyze the chemical constituents in Radix pseudostellariae， and provide some？references for the utilization and development of its resource. The reported compounds of Radix pseudostellariae mainly included saccharide， saponins， Cyclic peptides， sterols， lipids，Volatile oils， amino acids， phospholipids， fatty acids， trace elements. In this review， major compounds from the Radix pseudostellariae were generalized and their pharmacological action were discussed concisely.Radix Pseudostellariae； Chemical components； Research advances太子参系石竹科植物孩儿参Pseudostellaria heterophylla （Miq.） Pax ex Pax et Hoffm的干燥块根，又名童参，双批七，四叶参，米参。

太子参三倍体种质培育的初步研究何绿洪;苏志杭;缪霖辉;陶心想;叶祖云【摘要】开展太子参二倍体和四倍体种质之间的人工杂交授粉,进行杂交种子的种胚离体诱导培养和组培株系的染色体倍性鉴定.结果显示:太子参二倍体和四倍体种质之间的杂交,花朵大部分败育,能接蒴果的花朵不到20％.以柘参1号(2x)为母本、柘参3号(4x)为父本的杂交,F1代有二倍体、三倍体和四倍体植株,以柘参3号为母本、柘参1号为父本的杂交,F1代只有四倍体植株.研究首次获得太子参三倍体新种质(2n=3x=48),为丰富太子参种质资源及其多倍体育种奠定了基础.【期刊名称】《宁德师范学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(029)002【总页数】5页(P171-174,207)【关键词】太子参;杂交;种胚培养;染色体;三倍体【作者】何绿洪;苏志杭;缪霖辉;陶心想;叶祖云【作者单位】福建省特色药用植物工程技术研究中心;宁德师范学院生物系,福建宁德352100;福建柘参生物科技股份有限公司,福建柘荣355300;福建省特色药用植物工程技术研究中心;宁德师范学院生物系,福建宁德352100;福建省特色药用植物工程技术研究中心;宁德师范学院生物系,福建宁德352100;福建省特色药用植物工程技术研究中心;宁德师范学院生物系,福建宁德352100【正文语种】中文【中图分类】S567.5+3太子参(Pseudostellaria heterophylla(Miq.)Pax ex Pax et Hoffm)为石竹科孩儿参属植物，以块根入药，是我国道地中药材，具有益气生津、补肺健脾之功效[1].太子参是可用于保健食品的中药材，多为人工栽培，主产于福建、贵州、江苏、山东等地.目前太子参栽培品种较为单一，并且栽培过程长期采用块根进行无性繁殖，使得其种质退化、病害增多，严重影响太子参的产量和药材质量[2,3]，开展太子参种质创新和新品种培育是解决生产问题的关键环节.植物多倍体育种与杂交育种相结合培育新品种，会产生更大的品种优势.2019年培育出太子参四倍体新种质[4]，经过多年的田间对照栽培，2014年选育出性状优良的四倍体新品种“柘参3号”.在此基础上，开展了太子参二倍体和四倍体种质之间杂交育种及种胚培养研究，期望选育出遗传稳定、性状优良的太子参三倍体新种质.杂交亲本材料选择福建省柘荣县太子参主栽品种柘参1号（2x=32）和本实验室培育的太子参新品种柘参3号（4x=64）.2014年11月，种植于柘荣县英山乡的福建柘参生物科技股份有限公司太子参良种繁育基地.2015年早春，太子参开花时期，晴天选择太子参杂交亲本的顶部有瓣花，开展柘参1号和柘参3号的正交和反交人工去雄授粉，授粉后的花朵套袋.人工杂交授粉后一个月左右，果实成熟，及时收集成熟果实和种子，水选法去除空瘪种子，自然风干，置于4℃冰箱保存备用.将太子参杂交种子浸泡2 h，用清水洗净，依次用75%乙醇消毒30 s、10%磷酸三钠消毒20 min、0.1%氯化汞消毒12 min，无菌水洗5-6次；然后在净化工作台上，仔细剥除种子的外种皮、内种皮和外胚乳[5]，将完整的种胚接种到诱导培养基MS+2.0 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA，置于温度为20±2℃，光照强度1000 lx，光照时间12 h·d-1的培养箱进行培养，观察种胚萌发生长情况.杂交种子种胚诱导培养30 d，将培养成活的种胚苗，转接到培养基MS+0.2mg·L-1NAA中，进行生根壮苗培养，培养温度22±2℃，光照强度2500 lx，光照时间14 h·d-1；培养45-60 d，将组培苗剪切成带顶芽或腋芽的单茎节接材，接入生根壮苗培养，进行多次继代扩繁培养，建立单个杂交种子的组培苗株系.1.5.1 气孔观察取杂交种子各株系、柘参1号和柘参3号组培苗的成熟叶片，数码显微镜下仔细观察各组培苗叶片下表皮相同位置的气孔和保卫细胞，测量气孔长度，统计保卫细胞内叶绿体的数量，每个株系观察3个不同的植株，每个植株观察3张叶片，每个叶片观察10个气孔及保卫细胞.1.5.2 染色体计数采用太子参细胞染色体压片技术[6]，观察杂交种子各株系、柘参1号和柘参3号组培苗的体细胞染色体.选取处于旺盛生长状态的组培苗，剪取茎尖，长约0.5 cm，每个株系取10个茎尖，置于4℃冰箱中预处理24 h，然后加入Carnoy固定液固定24h，转入75%乙醇中保存备用.压片前，将茎尖放入解离液中解离20 min，于体视镜下剖取茎尖顶端生长点，用卡宝品红染液染色20min后压片，数码显微镜下观察、计数、拍照.柘参1号（Z1）和柘参3号（Z3）人工杂交授粉的情况见表1.以Z1为母本的正交，90%左右的授粉花朵都败育，能结实的蒴果中，干瘪的种子较多，饱满的种子有1-4个；以Z3为母本的反交，授粉花朵结果率相对略高，达18%左右，蒴果中干瘪的种子较多，饱满的种子有1-3粒.太子参蒴果成熟时易开裂，需及时采收杂交授粉后的果实和种子.杂交种子的种胚在诱导培养基中培养，有部分种胚发黄死亡，成活种胚的子叶伸长膨大，颜色由鲜黄色逐渐转绿色，胚根生长缓慢，产生须根，胚芽从两片子叶之间伸长出来，形成小植株，部分形成丛生芽，培养30 d后，小芽转接于生根壮苗培养基中培养60 d，形成健壮组培苗，通过继代扩繁培养，建立单个杂交种子组培苗株系.杂交种子种胚培养，共获得26个组培苗株系.正交种子培养的19个株系中，有5个株系组培苗形态特征与柘参1号组培苗相似，植株茎杆较细，叶片卵状披针形，表现出二倍体太子参组培苗特征；有14个株系组培苗形态特征与柘参3号组培苗相似，植株生长健壮，茎杆较粗，叶片较圆较厚，呈深绿色，表现出多倍体太子参组培苗特征.反交种子培养的7个株系组培苗形态特征均与柘参3号组培苗相似.2.3.1 组培苗气孔特征观察通过对柘参1号、柘参3号和26个杂交种子的组培苗成熟叶片下表皮气孔及保卫细胞叶绿体数量的对比观察、计数、统计，结果显示：正交种子培养的19个株系中，有5个株系组培苗叶片气孔长度36～44 um，保卫细胞叶绿体有14～22个，与柘参1号组培苗的气孔特征相似（图1a），呈现出二倍体太子参的气孔特征；其它14个株系及反交种子培养的7个株系组培苗叶片气孔长度约48～60 um，保卫细胞叶绿体有26～36个，与柘参3号组培苗的气孔特征相似，呈现多倍体太子参的气孔特征(图1b,c).对于太子参组培植株，气孔观测法以气孔长度及保卫细胞叶绿体数量作为观测指标，能初步判定植株为二倍体还是多倍体.气孔观察时，必须选取培养时间45天以上的太子参组培苗作为材料，此时组培苗植株中下部有成熟叶片，其气孔大小和保卫细胞叶绿体数量都较为稳定，撕取的下表皮应选择叶片主脉与侧叶缘中间的位置，观测结果具有代表性和普遍性.2.3.2 组培苗细胞染色体计数通过对26个杂交种子株系组培苗进行染色体观察、计数、统计，结果显示：正交种子培养的19个株系中，气孔特征与柘参1号相似的5个株系，其细胞染色体数目为2n＝2x＝32条，是二倍体太子参(图2a)；气孔特征与柘参3号相近的14个株系中，有3个株系的细胞染色体数目为2n＝3x ＝48条，是三倍体太子参(图2b)，其余11个株系的细胞染色体数目为2n＝4x＝64条，是四倍体太子参(图2c).反交种子培养的7个株系的组培苗细胞染色体数目为2n＝4x＝64条，均是四倍体太子参.本次以柘参1号为母本、柘参3号为父本的正交，后代有二倍体、三倍体和四倍体植株，以柘参3号为母本，柘参1号为父本的反交，后代只有四倍体植株，正交和反交结果存在一定的差异.太子参柘参1号与柘参3号的杂交，超过80%的花朵都败育，收获的果实中多为干瘪的种子，这可能与其胚乳的发育不正常密切相关.植物二、四倍体间杂交不育是比较普遍的现象，一般认为倍性间杂交不育与胚乳发育不良和提早退化有关[7]，胚乳过早退化，会造成胚胎发育的营养缺失，致使尚未分化的原胚细胞因饥饿而死亡.柘参1号为母本的杂交，F1代有二倍体，可能是母本去雄不彻底，导致自花授粉，或是同源花粉的干扰；而F1代中的四倍体，可能是母本减数分裂异常，形成2n配子，与父本的2n配子结合而形成的.柘参1号与柘参3号杂交，结实率较低，得到三倍体的概率很低，且只有以二倍体为母本的杂交有获得三倍体，需进一步探寻太子参杂交最佳的授粉时间和授粉方式，以提高杂交花朵的结实率.目前，研究仅获得太子参同源三倍体种质，将进一步选用来自江苏、贵州等地的太子参品种或品系，与柘参3号进行杂交授粉，培育异源三倍体种质，并探讨不同的太子参二倍体种质与柘参3号杂交的可育性问题.植物三倍体在遗传和育种上具有重要的应用价值.三倍体具备细胞体积增大引发的巨大性和减数分裂异常造成的不育性，已广泛用于培育高产质优和无籽的植物新品种.药用植物中约有70%的药材是以根、茎、叶入药，同时，50%以上的药用植物能够进行无性繁殖[8]，三倍体优势利用在药用植物中具有很大的潜力.例如，利用杂交转育获得优良丹参三倍体新品系，其根数及根鲜重均显著高于四倍体，药效成分达到或超过药典标准[9]；灯盏花三倍体植株生长旺盛，生物学产量以及主要有效成分灯盏乙素量都远高于二倍体[10]；在不同倍性何首乌块根产量和品质差异研究中表明，三倍体在块根产量及二苯乙烯苷产量方面比四倍体更具优势[11].本研究初次获得太子参三倍体新种质，将利用已建立的太子参种苗繁育技术[12]，培育三倍体种苗，开展田间对照栽培试验，研究其生长特性和生物学特征.【相关文献】[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京：化学工业出版社，2015.[2]晏春耕.药用植物太子参的研究及其应用[J].现代中药研究与实践，2008，22（2）：61-65.[3]黄冬寿.“柘荣太子参”产业现状与发展思路[J].农业科技通讯，2010，11：21-22.[4]Ye Zuyun,Wang Yaying,Tian Huiqiao.Regeneration of plantlets and tetraploidy induction in Pseudostellaria heterophylla[J].Acta Biologica Cracoviensia Series Botanica,2009,51(2):13-18.[5]叶祖云，阮少江，高文，等.太子参种子特性及种胚离体诱导培养技术研究[J].种子，2010，29(11):6-13.[6]姚丽园，张伟伟，叶祖云.太子参染色体倍性鉴定方法研究[J].宁德师范学院学报（自然科学版），2012，24（1）：47-50.[7]满红，张成合，柳霖坡，等.结球甘蓝二、四倍体间杂交三倍体的获得及细胞学鉴[J].植物遗传资源学报，2005，6(4):405-408.[8肖培根.新编中药志[M].北京：化学工业出版社 ,2002.[9]李秀兰，陈力.三倍体丹参的培育及其可持续利用研究[J].中草药，2012，43（2）:375-379.[10]吴红芝，梅琳，郑思乡，等.灯盏花三倍体培育及生物性状的观察研究[J].中草药，2011，42（5）：991-995.[11]汪珍春，张晓燕，姚焱，等.多倍体何首乌产量和品质初步评价[J].北方园艺，2012，264（9）：191-193.[12]叶祖云，阮少江，杨卓飞，等.四倍体太子参种苗繁育技术体系的建立[J].中药材，2011，34（3）:340-342.。

收稿日期:2004-02-18 修回日期:2004-04-19作者简介:吴朝峰(1975-),男,硕士.研究方向:作物栽培.药用植物太子参的研究进展吴朝峰1,2,林彦铨1(1.福建农林大学农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室,福建福州350002;2.安阳工学院,河南安阳455000)摘要:介绍了太子参的化学成分、药理作用、临床应用功效特点及在化妆品、保健营养中应用的研究进展及生产现状,并指出太子参生产利用中存在的问题和对策.关键词:太子参;药理作用;临床应用;功效中图分类号:S567.5+3文献标识码:A 文章编号:100627817(2004)0420426205Advances in studies on T aizishen (Pseudostella ria heterophylla )WU Chao 2feng 1,2,L IN Yan 2quan 1(1.K ey Lab of Eco 2physiology &G enetic Improvement for Sugarcane ,Ministry of Agriculture ,P.R.China ,Fujian Agriculture and Forestry University ,Fuzhou ,Fujian 350002,China ;2.Anyang Institute of Technology ,Anyang ,Henan 455000,China )Abstract :This paper report the recent progress in the study of chemical components ,pharmacological action ,clinical application and functions and effects of Pseudostellaria heterophylla .And its applications in cosmetics ,health care and nutrition are also re 2viewed.The present situation of its production is reported and some solutions to the problems of its production and utilization are also suggested.K ey w ords :Pseudostellaria heterophylla ;pharmacological action ;clinical application ;function and effect太子参系常用中药,又名孩儿参、童子参、四叶茶参、米参,《本草从新》、《本草纲目拾遗》等多部医药著作中均有记载.太子参为石竹科(Caryophllaceae )植物异叶假繁缕[Pseudostellaria heterophylla (Miq.)Pax ]的干燥块根,分布于华东、华中、华北和西北等地,福建、山东、江苏和安徽等省有种植,尤以福建柘荣太子参质量较好.其性甘、性平、微苦;入脾肺二经,有益气健脾、生津润肺之功效,用于治疗脾虚体倦、食欲不振、病后虚弱、气阴不足、自汗口干、肺燥干咳等病症.临床上可单独使用或与其它中药配合使用,或用于成方制剂.近年来临床表明,太子参在治疗肝炎、糖尿病、冠心病、心绞痛、继发性再生障碍性贫血、白细胞减少症、甲亢、淋巴结核等疑难病症方面取得了新的进展.现又有用太子参用于保健食品、化妆品研制开发,其用量速增.本文对太子参的化学成分,药理作用,临床应用,功效特点,化妆品及保健营养的应用,生产现状,高产栽培技术,前景展望作一综述.1　化学成分1.1　氨基酸据研究,太子参含人体必需氨基酸7种,即赖氨酸、苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸和苯丙氨酸,人体半必需氨基酸2种,即精氨酸和组氨酸[1,2].此外,还含有其它氨基酸,如丙氨酸、胱氨酸.余国奠等[3]对各地区太子参品系进行排位,为中医用药提供参考.1.2　微量元素太子参含有人体必需的微量元素,如Ca 、Fe 、Zn 、Mn 、Se 、Mo 、Si 、Co.这些微量元素在人体的新陈代谢中起着非常重要的作用[2,4].据报道[5],分解醇、蛋白质的酶都是含Zn 酶,如将Zn 除去,酶的活性降低,这可能与中医用太子参治疗食欲不振、体弱无力等有关.Mn 能刺激抗毒素的合成,增强对传染病的抵抗力,这可能与太子参具有滋养强壮的功效有关.人体缺Co 可发生气喘等病,而太子参补气功能与此有关.福建农林大学学报(自然科学版)第33卷第4期Journal of Fujian Agriculture and Forestry University (Natural Science Edition )2004年12月1.3　糖类刘训红等[6]研究发现太子参含有免疫活性多糖PHP 2A 、PHP 2B.平均相对分子质量为3.2×104和4.6×104.据多年太子参药理和临床研究,太子参多糖与太子参水煎液药理作用相似,具有增强小鼠体力和非特异性免疫功能及增强免疫、抗疲劳、抗氧化等多方面功能[7-9].因此,将太子参多糖作为免疫增强剂等加以开发利用十分有意义.此外,太子参还含有果糖、蔗糖、α2槐糖、麦芽糖和淀粉.1.4　环酞类环酞A 、B 、和C [10-12].1.5　有机酸棕榈酸、亚油酸、山嵛酸、22吡咯甲酸[13].1.6　酯类22吡咯甲酸232呋喃甲酯、亚油酸212甘油酯、三棕榈酸甘油酯、甘油212单亚油酸酯、3′2糖基2吡咯21羧酸酯、22环己烯212醇2苯甲酸酯、邻苯二甲酸二特丁酯、邻苯二甲酸二丁酯[14-15].1.7　其它成分β2谷甾醇、豆甾烯232β醇、胡罗卜甙、蔗糖、吡咯、糠醛、糠醇、12甲基232丙基苯、吡咯、22甲基吡咯、42丁甲氧基2(12丙烯醇)2酚、22甲基2(12丙烯基)2酚[14-15].2　药理作用2.1　对神经系统的影响据研究,太子参对中枢神经系统,特别是其高级部位有某种特异作用.根据对动物的脑电图及条件反射方法的研究,发现太子参主要是加强大脑皮层的兴奋过程,同时能加强抑制过程,改善神经活动的灵活性,增强动物抗疲劳作用,也能提高人的一般脑力和体力的机能.2.2　对内分泌系统的影响刘维俊等[16]研究发现,太子参提取液有明显的抗应激作用,能显著抑制小鼠肾上腺、胸腺、脾、甲状腺等器官在应激反应中的重量变化,对肾上腺内维生素C 、胆甾醇水平、血糖和肝糖元有显著影响.长期服用太子参,可改变小鼠对非特异刺激的耐受能力.刘玉翠等[17]进行太子参口服液药效的研究,发现太子参口服液能使小鼠脾脏、胸腺显著增大.2.3　对机体反应的影响倪峰等[18]进行太子参药效试验,发现太子参能增强小鼠耐饥渴能力、增强机体对有害刺激的防御能力,延长了小鼠的存活时间,减轻不良环境对机体的影响,促进动物恢复健康.这有助于太子参对身体虚弱、食欲不振等症的治疗.倪峰等[14]用太子参提取物进行小鼠常压耐缺氧研究,结果表明太子参水提物、醇提物明显延长常压耐缺氧环境下的生存时间,提高机体耐受力.2.4　对免疫器官的影响近年来对太子参氨基酸和多糖的大量研究表明其具有明显的免疫促进作用.太子参中以精氨酸含量最高.精氨酸能够提高机体免疫功能,增强机体对外界有害刺激免疫能力,同时改善氮的平衡,促进胰岛素等多种激素分泌.注射太子参多糖可显著增强小鼠体力和非特异性免疫功能及免疫、抗疲劳、抗氧化等多方面功能[7-9,19].2.5　对其它方面的影响据研究,太子参具有明显抑制小鼠肠推进色距离,对虚弱、消化不良等病有治疗效果[16].同时倪峰等[18]指出,太子参水、醇提取物可以增强小鼠耐饥渴能力,明显增大大鼠木糖排出量,增强小肠吸收功能,并对脾虚模型有很好的改善、治疗作用.太子参对环磷酰胺所致小鼠造血功能受撒模型、白细胞下降有明显的升白作用,增强其补血功能、机体抵抗力,有助于病后康复.太子参水煎沉剂对淋巴细胞增殖有明显的刺激作用.2.6　毒性刘玉翠等[17]进行毒性试验研究,结果表明太子参口服液(50g ・kg -1)在观察期间对人体无毒害作用,也未见到药物引起的异常反应.3　临床应用及功效特点・724・第4期吴朝峰等:药用植物太子参的研究进展3.1　胶囊由太子参水煎、浓缩、喷雾干燥后,加药渣粉末为敷料制成的胶囊(别名童乐丸),主用于小儿体虚、消化不良等症.太子参胶囊能延长病人在缺氧情况下的存活时间,起到一定的保护作用[16].3.2　复方口服液由太子参、黄芪等多味中药配成的复方制剂,其味甘平,入心、肺、脾经,具益气健脾、生津润肺的功效,主治脾胃虚弱、食少神倦、自汗心悸.复方太子参口服液使机体虽处在不良的外环境下,仍保持内环境的稳定,从而增强了机体对外界刺激的抵抗力,这对年老体衰或年幼体虚特别有益[17].3.3　止咳平喘散(精)由太子参、冬虫夏草、浙贝母、槟榔、白芨、甘草等多味中药加工制成的散剂.该制剂具有解除支气管痉挛、抑杀革兰氏阳性和阴性菌及抗感冒病毒、增强机体免疫功能的作用.同时具有益气养阴、滋养脏腑、清补、平补扶其正,清热解除其湿,润肺化痰止渴平喘祛其邪,恢复体内阴阳平衡的作用,达到标本同治,攻补兼施的目的[20-21].3.4　复方颗粒由太子参、黄芪、川芎、党参、何首乌、白芍、续断、骨碎补、炙日草等多味中药制成的颗粒剂,能够加快神经生长速度,促进周围神经损伤修复再生[22].3.5　功效特点以“清补”见长,益气但不升提,生津而不助湿,扶正而不恋邪,补虚而不峻猛,具有与人参相似的功效,但又常用于不宜使用人参的病症等[23-24].4　在化妆品、营养保健上的应用4.1　在化妆品中的应用近年来,世界化妆品行业具有越来越多使用天然物质的趋势,而这些添加剂多为维生素类、微量元素、有机化合物、氨基酸等.太子参含有多种人体必需的氨基酸和微量元素,这些必需的氨基酸恰好有益营养皮肤和头发.微量元素有机化合物在化妆品中起着非常重要的作用.如微量元素Fe 在护肤类化妆品中是防止由于皮肤Fe 的缺失而干扰体内血浆中Fe 的动态平衡,也可对微循环和微血管起着重要的平衡作用.此外,太子参中糖皂甙以及十六酸、亚油酸、单甘油酯等含量都不低,这些都是化妆品中常用作改善角质层的添加剂.用太子参提取液加工而成的化妆品有着良好的护发养发、护肤养肤的功效.因此,将太子参提取全液作为头发、皮肤化妆品的营养添加剂是十分理想的[25].4.2　在营养保健品中的应用太子参含果糖、淀粉、多种矿物质和维生素,并且太子参皂甙具有与人参一样的滋补功效.近年来,人们把它碾成粉末添加到食品中,开发出相应的太子参系列产品,如枣汁即食太子参、什锦太子参酥脆、姜汁太子参酥、医方太子参酥脆及明胶、阿胶太子参酥脆.既可以利用其药用价值,又可以发挥营养价值,突破果蔬脆模式,对许多中草药补品、天然营养品的加工和新产品开发产生深远的意义[26].5　生产现状太子参有着悠久的用药历史,又是一种极具开发价值的药用植物,但太子参生产现状不容乐观[27-29].具体表现如下.5.1　种质资源太子参种质资源缺乏科学的系统整理和研究,造成品种混乱;种质选育工作进展缓慢,优良品种品系少;资源保护意识淡薄,种质散失严重;许多野生太子参品种再生能力无法恢复.因此要建立优良太子参种质的评价体系,开展种质资源的收集整理,提高育种的专属性和方法的先进性,规范种质资源的程序[30].5.2　栽培现状太子参作为中药材,除要求较高的产量以外,还要注重品质.应从两方面衡量,一方面从外观形态、色泽、质地及气味等方面加以鉴别,另一方面从有效成分(如皂甙、多糖、氨基酸)来鉴别.产量高低和质量好坏与栽培技术有很大的关系.现在,太子参栽培比较粗放,表现在选地、杂草清除、病虫害防治等方面.特别是病毒病非常严重,既影响产量,又影响品质.此外,管理水平跟不上,采收加工不规范严重阻碍了太子参・824・福建农林大学学报(自然科学版)第33卷的发展.因此,要增加农业投入,改善生产条件,满足太子参的生长发育条件,同时加大科技投入,使栽培技术向规范化、科学化、基地化方向发展.5.3　市场制约太子参作为中药材,生产规模受市场变化的影响和制约,市场价格的高低决定着生产规模的大小.由于市场价格变化引起了生产的大起大落,而参农对市场动态了解不够,因此参农感到种参效益没有保障,影响了参农的积极性.近几年,价格趋于稳定,但种参的生产规模仍然要根据市场动态作相应的调整,不要一拥而上,最好与药材公司、药材科研机构、市场挂钩,了解市场信息,掌握市场动态,同时,要加强太子参的品牌意识,提升市场竞争力.6　高产栽培技术太子参高产栽培技术主要包括以下几方面[31,32].6.1　繁殖方法太子参分为无性繁殖和有性繁殖2种方式,生产上以无性繁殖为主.但太子参长期进行无性繁殖,导致病毒病严重发生,平均每年减产30%-40%,同时,品种质量下降.为了提高产量、质量,目前可结合有性繁殖进行品种复壮,减少病虫害发生.6.2　田间管理主要从选地整地、培土除草、追肥排灌等方面入手.太子参喜生长在湿润阴凉、肥力高、排水良好、腐殖质丰富的沙质土壤.幼苗适时除草培土有利于发根和根的生长,除草时尽量用手拔或者用小锄浅锄一次.太子参忌水,要注意排水.追肥应根据苗情而定.6.3　病虫害防治6.3.1　病害　(1)叶斑病.病原为半知菌类链孢属太子参叶斑病菌,为害叶片.发病初期,叶片上产生暗绿色水渍状的小点,几天后扩大成灰白色或黄褐色斑块,后期病斑上着生小黑点,病斑汇合,叶片枯萎.防治方法:发病初期喷1∶1∶150波尔多液或65%代森锌可湿性粉剂500-600倍液,每7-10天喷1次,严重发病时,可用50%多菌灵可湿性粉剂500-1000倍液或托布津800倍液,每7-10天喷1次,连喷2-3次[33,34].(2)花叶病.病原为太子参花叶病毒,受害植株叶片畸形,皱缩,出现花叶,块根细长而小,是当前太子参生产中的最大问题.防治措施:1)实行轮作,与小麦、旱稻等禾本科作物进行轮作;2)选用种子繁殖,培育无病种苗,搞好种苗消毒,可用50%多菌灵500倍液浸种10min ;3)加强田间管理,增施磷钾肥,增强植株抗病力;4)利用生物技术,通过茎尖培养、愈伤组织培养、器官培养、微牙嫁接培养等得到无菌苗,再通过后期的科学管理,减少病毒病发生,或运用分子生物学和化学指纹图谱,选育出优良的太子参抗病品种[35-39].据报道目前唯一的太子参抗病品种是由山东省文登市药材开发研究所选育的杂交种———抗毒一号[40].6.3.2　虫害　为害太子参的虫害常见的有白蚂蚁、地老虎、蛴螬、蝼蛄、金针虫和蚜虫.防治措施:(1)清除杂草.(2)用50g 氯丹乳油和炒香的麦皮10kg ,加水配制.7　前景展望在对太子参药理作用不断深入研究的基础上,临床应用方面可进一步开发新的中成药,探索新的适应症,加快相关保健品、美容化妆品的研制开发,使资源优势发挥出更大的社会效益和经济效益.生产上,目前正通过组织培养途径,进行太子参脱毒培养、工厂化育苗试验的探索,有望获得优良的品种.此外利用DNA 分子遗传标记技术和多方面的生物学手段,阐明它的物种起源及变异式样.充分利用野生太子参品种,加速培育新的抗病品种,寻找有效成分的功能基因,克隆、表达那些次生代谢产物的酶基因,利用代谢工程在工业化条件下大规模生产出有效成分,满足市场需求.太子参的开发和发展,社会需求是主要因素.随着保健、美容意识越来越强,太子参需求量越来越大.今后发展方向将是生产出“真实、优质、安全、稳定、可控”的绿色太子参及相关系列产品,实现生产基地化、品种标准化,栽培组合最优化、生产流程全程无公害化,经营方式集约化[41-43].参考文献:[1]王吉吉星,高淑贤,徐绥绪.太子参化学成分的研究(Ⅰ)[J ].沈阳药学院学报,1992,53(4):300-301.・924・第4期吴朝峰等:药用植物太子参的研究进展[2]钟方晓,彭广芳.山东太子参氨基酸和微量元素分析[J ].时珍国药研究,1997,8(3):223-224.[3]余国奠,刘学平,潘红娟,等.华东地区太子参品系的氨基酸比较分析[J ].中国野生植物资源,1999,18(1):9-11.[4]余国奠,刘学平,潘红娟,等.5个太子参品系的微量元素分析研究[J ].中国野生植物资源,1998,17(4):20-22.[5]李书祯.微量元素与人体健康[M ].呼和浩特:内蒙古人民出版社,1982.5.[6]刘训红,阚毓铭,王玉玺,等.太子参多糖的研究[J 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太子参同源四倍体表型变异的ISSR分析史辉;阮少江;叶祖云【摘要】利用前期研究建立的太子参ISSR-PCR体系,从100条ISSR引物中筛选出15条适于太子参扩增的引物.对2份二倍体太子参原种及经染色体加倍形成的19个同源四倍体太子参表型变异株系进行ISSR分子标记分析,将二倍体与其同源四倍体株系以及同源四倍体株系之间的差异进行对比分析.结果发现只有个别四倍体株系相对于二倍体原种表现出少量的基因差异,且同源四倍体株系间极少表现出基因差异.表明在太子参染色体加倍的过程中发生了低频率的基因突变;但是鉴于同源四倍体株系的性状变异较大,推测这些性状变异并不都是基因突变造成的;基因突变可能不是表型变异的主要因素,其他因素对表型变异的贡献可能更大.【期刊名称】《宁德师范学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(027)004【总页数】6页(P407-412)【关键词】太子参;同源四倍体;表型变异;ISSR【作者】史辉;阮少江;叶祖云【作者单位】宁德师范学院生物系,福建宁德352100;闽东特色生物资源福建省高校工程研究中心,福建宁德352100;宁德师范学院生物系,福建宁德352100;闽东特色生物资源福建省高校工程研究中心,福建宁德352100;宁德师范学院生物系,福建宁德352100;闽东特色生物资源福建省高校工程研究中心,福建宁德352100【正文语种】中文【中图分类】S567.5+3太子参Pseudostellaria heterophylla（Miq.）是珍贵的中药材，有补气健脾、生津润肺、养阴益血之功效.福建省柘荣县是我国太子参之乡，太子参药业是宁德市传统特色优势产业，90%农户种植太子参，总产量约占全国的60%.然而，太子参栽培过程长期采用块根进行无性繁殖，栽培品种较单一，使得太子参的种质退化、病害加剧，使得这2 年的太子参产量和品质迅速下降.这已成为太子参种植业和药业发展的技术瓶颈，因此对太子参进行品种改良的研究势在必行[1].太子参以块根入药，其经济效益是它的块根大小和有效成分含量多少，而多倍体通常能引起营养器官体积增大和次生代谢产物增多.在此背景下，我系叶祖云教授通过多倍体育种诱导技术培育出大块根的太子参多倍体新品种.经过5 年的大田栽培发现，不仅同源四倍体株系与二倍体原种（柘参一号和柘参二号）在一些农艺性状上存在较大的稳定差异，而且多个同源四倍体株系间也存在较大的稳定差异.基于上述情况，本研究拟采用ISSR 标记技术，在DNA 水平上对这些表型变异进行遗传分析，分析造成这些表型变异的原因，找到突变片段，为后续太子参相关农业性状的基因克隆、种质资源鉴定及分子标记辅助选育奠定基础.1 材料和方法1.1 材料1.1.1 试材供试材料为柘参1 号（2 倍体）、柘参2 号（2 倍体）、6 个柘参1 号同源四倍体株系（3-1、3-2、3-3、3-4、3-5、3-6）和13 个柘参2 号同源四倍体株系（4-1、4-2、4-3、4-4、4-5、4-6、4-7、4-8、4-9、4-10、4-11、4-12、4-13），采自宁德市柘荣县太子参良种繁育基地.1.1.2 试剂引物由上海捷瑞生物工程有限公司合成；rTaq、DM2000 Marker、dNTP、复杂植物基因组提取试剂盒均购自北京康为世纪生物科技有限公司；琼脂糖为西班牙Biowest 进口；其他试剂均为国药分析纯.1.1.3 仪器超微量核酸蛋白测定仪（美国ACTGene Nanodrop 1000），高速冷冻离心机（德国SIGMA3-30K），梯度PCR 扩增仪（美国Biometra C-412），电泳仪（北京六一DYY-10C 型），凝胶成像系统（Biorad GelDoc EZ），超纯水系统（美国MILLI-Q），移液枪（法国吉尔森Ppetman 系列）.1.2 方法1.2.1 基因组DNA 提取及纯度检测采用康为世纪复杂植物基因组提取试剂盒提取，所提DNA 经1.5%琼脂糖凝胶电泳和超微量核酸蛋白检测完整度、纯度与浓度. 1.2.2 太子参适宜ISSR 引物的筛选在前期试验建立的太子参ISSR 反应体系的基础上，本文以柘参1 号（二倍体）和4-1 株系（四倍体）为模板，对100 条ISSR 引物进行ISSR-PCR 扩增分析.退火温度参考引物合成报告单上给的Tm，并在此基础上减去4℃，从中筛选扩增清晰、重复性和多态性高的引物为太子参适宜的ISSR 引物.1.2.3 ISSR 引物退火温度的确定筛选出的各适宜引物以步骤1.2.2 中的退火温度为中心温度，以1℃为梯度，上下各增减4 个水平，在梯度PCR 仪上生成9 个退火温度.然后进行温度梯度扩增，选择扩增条带多、亮度高、背景浅、清晰度高的温度为该引物的最适退火温度.20μL 反应体系中含80ng 模板DNA，引物0.4μmol/L；10×PCR Buffer 2μL；dNTPs0.18mmol/L；Taq 酶0.5U；补ddH2O 至20μL.初始PCR 扩增程序为：94℃预变性5min；94℃变性45s，引物相应的最适退火温度退火45s，72℃延伸90s，共35 个循环；72℃最后延伸7min，4℃保存[2].扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳检测，凝胶成像系统拍照记录数据.1.2.4 同源四倍体表型变异的ISSR-PCR 分析利用筛选出的适宜引物和建立的ISSR 反应体系，对各四倍体表型突变株系进行扩增，以二倍体太子参亲本为对照，鉴定各株系的遗传变异情况.以上试验均设3～5 个重复.2 结果与分析2.1 基因组DNA质量分析琼脂糖凝胶电泳检测所提取的太子参基因组DNA 质量结果如图1 所示.DNA 电泳条带整齐，点样孔内无杂质，电泳条带基本无拖尾，表明所得的DNA 较完整，没有降解.主带清晰，无杂带，说明RNA 去除彻底，纯度较高，质量较好.核酸检测结果表明（表1）所提取的21 个太子参基因组DNA 的OD260/OD280 平均为1.86，表明蛋白质和RNA 去除干净；OD260/OD230 平均为3.15，表明多酚、多糖及其他杂质去除干净，所得基因组DNA 纯度较高；每克鲜重叶片平均可获得69.38μg 的DNA，满足后续试验要求.图1 太子参基因组DNA 提取效果表1 太子参基因组DNA 的平均纯度和产量材料名称浓度/(ng/μL) A260 A280 A260/A280 A260/A230 产率/(μg·gFW-1)21 份太子参材料 46.25 0.925 0.4971.86 3.15 69.382.2 适宜ISSR引物的筛选以优化建立的ISSR 反应体系为反应体系，以柘参1 号（二倍体）和4-1 株系（四倍体）为模板，对100 条ISSR 引物（UBC801-UBC900）进行ISSR-PCR 预扩增.图2 显示的是部分引物的筛选结果，从图中可以看出UBC807（泳道1）、UBC808（泳道2）、UBC810（泳道4）、UBC811（泳道5）、UBC818（泳道6）5 个引物的扩增条带多且清晰，其余引物扩增条带较少且模糊，不适于太子参的ISSR 分析.从100 条ISSR 引物中筛选出15 条扩增清晰、扩增条带多、多态性良好的适宜太子参遗传分析的引物.分别为UBC807、UBC808、UBC810、UBC811、UBC818、UBC825、UBC836、UBC840、UBC861、UBC864、UBC866、UBC867、UBC868、UBC876、UBC880.图2 部分ISSR 引物对太子参的扩增情况2.3 ISSR引物退火温度的确定对筛选出的15 条适宜引物进行退火温度梯度优化，确定了各引物的最适退火温度，如图3 展示了UBC818和UBC840 两个引物的退火温度梯度优化结果. 引物UBC807、UBC808、UBC810、UBC811、UBC818、UBC825、UBC836、UBC840、UBC861、UBC864、UBC866、UBC867、UBC868、UBC876、UBC880 退火温度分别是51.1、53.3、50.0、51.1、54.0、53.9、55.1、48.4、65.5、49.7、55.8、60.5、49.0、43.8、46.1℃，比引物合成报告单给出的Tm值都偏低，平均偏低4.1℃.图3 不同退火温度的扩增效果2.4 同源四倍体变异株系的ISSR遗传分析本文利用筛选出的适宜引物和优化建立的反应体系，对二倍体太子参亲本及各四倍体表型突变株系群体进行扩增，所有株系都可以扩增出较清晰的条带，如图4 展示了UBC818 和UBC864 两个引物的扩增结果，箭头指示的条带是株系间的差异条带即突变条带.试验结果进一步说明了筛选的引物适于太子参的ISSR 扩增.以二倍体太子参亲本为对照，发现部分四倍体品系扩增出少量差异的谱带，说明太子参染色体加倍过程存在一定程度的基因突变.同时笔者发现突变谱带极少，说明染色体加倍过程中基因突变的程度较低.图4 太子参各品系的ISSR 扩增结果（上图引物UBC818，下图引物UBC864）3 讨论本试验从100 条ISSR 引物中筛选出15 条扩增清晰、扩增谱带丰富、多态性好的引物.ISSR 标记是随机标记，在基因组上有很多接合位点，会扩增出很多片段，因此引物扩增谱带的数量与基因组模板上出现的引物同源序列的频率有关[3, 4]，频率越高，扩增谱带越多.多数引物没有扩增，是因为在太子参基因组上找不到同源序列，不能互补配对.还有一些引物扩增谱带模糊，是因为引物与基因组相应位点没有完全匹配，引物在基因组接合不牢固，扩增过程中容易脱落，导致扩增效率低[5-7].引物扩增谱带的清晰度以及明亮程度与模板和引物的同源程度（互补配对）有关；同源程度越高，扩增条带越明亮清晰，同源程度越低，扩增条带越暗淡模糊[8, 9].退火温度对扩增的影响表现在温度过高时引物与模板结合不牢固，引物容易从模板上脱落，减少有效扩增，导致扩增谱带变少且亮度降低[10, 11]；但退火温度过低，又会增加一些不完全配对的引物与模板结合的稳定性，增加了非特异性扩增[9, 12].本试验中，高的退火温度明显减少扩增谱带的数量，随着退火温度的升高，很多大片段（＞500bp）逐渐模糊直至消失，而小片段（250～500bp）数量没有增减，反而扩增效果更好，这可能是因为大片段需要较长的扩增时间，温度过高，引物容易从模板上脱落；而小片段的扩增只需要很短的时间就可以完成，由于没有大片段与小片段竞争引物和底物，所以小片段得到较好的扩增.前人研究表明人工同源四倍体相对于其二倍体发生表型变异的原因主要有：染色体加倍产生的基因剂量效应；组织培养过程中的自发突变；多倍体诱导过程中秋水仙素的诱发突变；基因组的加倍过程中染色体重组；反转录转座子的激活；甲基化模式的改变，甚至环境选择压力也会使个体性状发生不遗传的变异[13-15].本研究发现部分四倍体株系相对于二倍体有少量突变而表现出少量差异谱带，说明太子参染色体加倍过程存在低频率的基因突变[16, 17].但是很多四倍体表型变异株系没有被检测到任何突变，但是相对于二倍体却发生了明显的表型变异.推测这些性状差异不是基因突变造成的，很可能是其他因素如基因剂量累加或者一些碱基的后成修饰（如甲基化）而发生表观遗传变异等造成的.本研究还发现各同源四倍体株系的扩增结果较为一致，极少出现突变片段，但是在大田栽培中各同源四倍体株系间有明显的表型差异，这也表明突变并不是造成同源四倍体株系间表型变异的主要原因，其他因素对表型变异的贡献可能更大，其具体机理有待于近一步研究.参考文献：[1] 黄炜. 柘荣太子参产业化影响因素实证研究[D]. 福州：福建农林大学，2013.[2] 史辉，黄其梅，叶美娜，等. 爱玉ISSR 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太子参药材的快速分子鉴定为建立一种简便快捷的太子参分子鉴定方法，对太子参药材及其混伪品的rDNA-ITS片段进行比对分析，找出特异性片段，设计太子参鉴别引物，并优选扩增条件，扩增产物经100×SYBR Green I染色后紫外光下观察。

结果显示，PCR 扩增反应液（包括DNA Taq聚合酶预混液5.5 μL，Tzs-2F，Tzs-2R各10 pmol，DNA模板20～80 ng，双重灭菌蒸馏水加至25 μL）经95 ℃预变性1 min，95 ℃变性5 s，56 ℃退火延伸15 s，30个循环，72 ℃后延伸30 s后，在扩增产物中加入1 μL 100×SYBR Green I混匀后于紫外光下呈绿色荧光的为太子参，混伪品无绿色荧光出现。

40 min内即可完成DNA提取、扩增等整个鉴定过程。

该方法能特异性扩增太子参DNA，紫外光下肉眼观察即可鉴定药材的真伪，且操作简捷、结果准确、利于推广，可为快速鉴定中药材的真伪提供参考。

标签：太子参；分子鉴定；特异性PCR；SYBR Green I太子参为石竹科植物孩儿参Pseudostella riaheterophylla（Miq.）Pax ex Pax et Hoffm的干燥块根，具有益气健脾、生津润肺的功效，用于脾虚体倦、食欲不振、病后虚弱、气阴不足、肺燥干咳等症的治疗[1]。

作为药食两用品种，太子参近年来得到了广泛的开发与利用。

为牟取私利，市场上出现以淡竹叶Lophatherum gracile Brongn.、繁缕Stellaria media （L.）Cirillo、宝铎草Disporum sessile D. Don、直立百部Stemona sessilifolia （Miq.）Miq.、阔叶山麦冬Liriope platyphylla F. T. Wang & Tang、矮小山麦冬L. minor （Maxim.）Makino等植物的根或块根冒充太子参销售[2-5]。