Ni Smart Beads
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NI展示5G芯片测试系统NI的5G芯片测试系统接受了一系列创新的技术,为5G芯片测试提供了全面的解决方案。
起首,该系统具备高度的灵活性和可扩展性。
它可以适应不同芯片型号、不同测试需求的变化,满足多样化的测量要求。
其次,该系统拥有卓越的性能和精确度。
通过精确的测量与分析,可以准确评估芯片的性能指标,找出潜在的问题与缺陷。
再次,该系统具备高效的测试速度和数据处理能力。
在保证测试结果准确的同时,节约了测试时间,提高了测试效率。
最后,该系统提供了丰富的功能和接口,使得测试工程师能够轻松地进行测试与分析,并快速解决问题。
该系统的核心部分是一款高性能的测试设备,配备了各种先进的测量仪器与工具。
这些仪器与工具可以实现对5G芯片的各项性能指标进行全面的测试,包括功耗、通信速率、干扰抗性、信号质量等。
测试设备与芯片之间通过高速的接口进行毗连,确保数据的稳定传输与准确采集。
同时,测试设备还支持多种测试模式与功能,如信号发生器、频谱分析仪、时域分析仪等,满足不同测试场景的需求。
除了测试设备,该系统还配备了一套完善的测试软件。
这套软件具备强大的数据处理和分析能力,能够对采集的测试数据进行精细的处理与分析,生成专业的测试报告。
测试工程师可以通过该软件对测试参数进行配置、实时监测测试过程,快速发现与解决问题。
软件还提供了一系列的测试工具和算法,援助工程师进行深度的测试与优化。
NI的5G芯片测试系统在展览会上引起了广泛关注。
与传统测试系统相比,该系统具有更高的灵活性、更强的性能、更高的测试效率。
它能够援助芯片制造商准确评估芯片的性能与质量,提高产品的竞争力与市场占领率。
同时,它也为通信系统运营商和设备制造商提供了有力的技术支持,助力5G通信网络的建设与进步。
总结起来,NI展示的5G芯片测试系统是一项具有重大意义的技术创新。
它不仅满足了5G芯片测试的需求,还为5G通信领域的进步提供了有力的支持。
随着5G技术的不息进步和普及,该系统的应用前景将会更加广泛,为5G通信的应用和推广提供更加可靠的保障综上所述,NI展示的5G芯片测试系统具备稳定传输与准确采集的能力,支持多种测试模式与功能,配备完善的测试软件。
锂电池性能一致性监测装置许强;周海洋;霍海波【摘要】为保证便携设备的正常使用,有必要对其内置锂电池进行实时监控.基于DS2438电池监测芯片开发的锂电池监控装置能实现锂电池状态实时监测,状态异常时通过蜂鸣器自动报警.该装置通过STM32微控制器控制DS2438电池管理芯片及其相应的外围电路,实现对锂电池温度、电流、电压及剩余容量的测量,能将数据通过串口通信传输到PC机.【期刊名称】《电源技术》【年(卷),期】2019(043)001【总页数】3页(P71-73)【关键词】锂离子电池组;一致性监测;STM32;DS2438【作者】许强;周海洋;霍海波【作者单位】上海海洋大学工程学院,上海200120;上海海洋大学工程学院,上海200120;上海海洋大学工程学院,上海200120【正文语种】中文【中图分类】TM912.9目前,大部分新能源汽车使用锂电池组,特斯拉就是其中一个例子,作为一款新能源汽车,2016年第三季度在美国的销售额已经超过了传统车型(如奔驰S系列、宝马7系列等)。
在环保要求不断提升的今天,驾乘电动汽车出行已经成为一种时代的趋势[1]。
锂离子电池电极由低密度的锂化合物和纯碳组成,所以很轻,比能量高。
离子电池没有记忆效应,使得锂离子电池日常使用维护简便。
但锂电池过放电时容易损坏,无法在较高温度环境下正常工作。
锂电池已经成为便携式设备首选电源,随着便携式设备增多,对锂电池的需求量越来越大。
对锂离子电池的监测可以确保锂电池在温度、电压、电流合适的情况下进行工作,所以对锂电池的监测很重要。
本文通过软件和硬件两部分的设计分析设计出了监测锂电池的装置,有一定的实际意义。
1 锂电池一致性当用电装置需要较大的能量和功率时,单只锂电池就无法满足要求,须多只单体电池串联并联。
单体电池串并联基础是电池性能一致性。
单体电池的一致性主要指电压、容量、内阻和自放电率的一致性。
1.1 容量一致性容量一致性是指配组单体之间容量偏差值保持在一个可接受范围内(如±1%)。
NI发布最小最轻便的测量设备将PDA转换成一个数据采NI发布最小、最轻便的测量设备, 将PDA转换成一个数据采集工具需要虚拟仪器专家的帮助吗?免费咨询电话:8008203622,或点击“请NI工程师回电,提供免费技术咨询!”新闻发布-2005年6月-工程师和科学家现在可以利用最新NI CompactFlash数据采集设备将标准PDA 转换成自定义的便携式测量工具。
尺寸仅比标准邮票大一点的NI CF-6004设备,可插入任何带有CompactFlash插槽的PDA,即可创建一个具有最新PDA设备处理和无线通信功能的手持式仪器。
NI CF-6004是一个14位的多功能数据采集设备,可以直接插入一个PDA CompactFlash插槽,从而在手持设备的四个模拟输入通道上提供了高达200KS/s的单通道采样性能。
该产品也提供了四条数字I/O线来控制和测量LVTTL 或LVCMOS信号。
工程师可以使用用于Pocket PC和Palm OS的NI LabVIEW图形化编程环境来在PDA上采集、分析和查看数据。
“CompactFlash数据采集设备的微型体积开拓了许多新型的便携式数据采集和监控应用。
”,NI研发部高级副总裁Tim Dehne先生说,“虚拟仪器技术就是让用户通过图形化编程和模块化硬件来自定义他们自己的仪器——正朝着小型化的方向发展,使得数据采集越来越便利、越来越轻便。
”NI CF-6004的灵活性和移动性使它成为诸如现场监控和诊断、实验室和教育设备之类应用的理想之选。
与购买几个传统的手持式仪器相比,工程师可以通过使用一个单一的带有LabVIEW 和NI CF-6004数据采集设备的PDA来节省宝贵的空间。
因为工程师可以在LabVIEW里定义他们自己特定的仪器然后轻松地应用到手持设备,所以他们也可以在日后作出改动,并重新配置这些应用来重新定义他们的PDA以用于新的测量。
此外,由于PDA通常比笔记本更加便宜,所以基于PDA的数据采集是手持式和便携式仪器的最佳选择。
大规模可溶性蛋白纯化实验操作Hao Lab in SII1. 取20 µL E.coli BL21目的菌种加入装有10 ml LB培养基的50 ml离心管中,加入氨苄青霉素(Biobasic inc, #AB0028) 至终浓度为100 µg/ml或硫酸卡那霉素(生工,#0408) 至终浓度为50 µg/ml,37°C, 250 rpm, 摇菌过夜。
2. 取过夜培养的菌液8 ml加入400 ml (1:50) 含有相同浓度抗生素的LB中培养,间断检测菌液OD600值,37°C, 250 rpm, 摇菌大约60~120 min,待其OD600值达到0.6~0.8之间,加入0.4 mM IPTG (碧云天,#ST098), 30°C, 220 rpm, 诱导表达3 h。
3. 收集菌液至50 ml离心管中,7,000 × g, 4°C离心3 min, 弃上清收集沉淀,进行下步实验或置于-80°C冰箱保存。
摇菌用的锥形瓶用84消毒液浸泡或高压灭菌。
4. 将收集到的菌体重悬于20 ml 冰冷的Lysis buffer中,震荡混匀。
以下步骤均置于冰上。
5. 向菌体重悬液加入甘油至终浓度为10%,加入EDTA 至终浓度为0.5 mM,充分混匀。
6. 冰上超声:功率为仪器最大功率的60%,脉冲时间为1 s,间隔时间为1 s,总时间7~15 min。
7. 超声后的蛋白溶液于8,000 × g,4°C离心30 min。
15,000 × g, 4°C离心15 min可省略步骤10。
8. 在步骤7离心的同时。
取下20 ml新层析柱(Qiagen, #34964)的帽子并剪掉底部尖端再盖上帽子,加入混匀的50% NI-NTA beads (Qiagen, #S13-26-36-46; GST beads, GE, #17-0756-01) 悬液2 ml。
人呼吸道卡他莫拉菌快速检测胶体金试纸的研制黄莹琪;张秋;陶冶;胡征;张改平;张华山【摘要】旨在研制一种快速、简便检测呼吸道感染病人呼吸道中卡他莫拉菌的试纸,并建立其检测方法.经生物信息学分析找到UspA1胞外结构域单一线性表位UspA1 Line,偶联血蓝蛋白KLH形成复合蛋白UspA1Line-KLH,并利用已构建的表达UspA1抗原的工程菌,表达纯化重组蛋白UspA1-His,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,取血清后利用Protein A亲和层析和多肽亲和层析两步纯化抗体,得到纯度高,特异性强的多克隆抗体.采用柠檬酸三钠还原法制备40 nm胶体金颗粒,与多克隆抗体结合,形成双抗体夹心,达到快速检测卡他莫拉菌的目的.结果显示,建立的检测方法可在10 min内完成对样本的检测,特异性检出样本中卡他莫拉菌,与其他常见的呼吸道病原菌无交叉反应,试纸条在24℃保存具有良好的重复性和稳定性.成功研制了可快速检测卡他莫拉菌的胶体金试纸条.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2018(034)009【总页数】6页(P184-189)【关键词】卡他莫拉菌;单一线性表位;UspA1;免疫层析法【作者】黄莹琪;张秋;陶冶;胡征;张改平;张华山【作者单位】湖北工业大学生物工程与食品学院,武汉430068;湖北工业大学生物工程与食品学院,武汉430068;湖北工业大学生物工程与食品学院,武汉430068;湖北工业大学生物工程与食品学院,武汉430068;发酵工程教育部重点实验室(湖北工业大学),武汉430068;工业发酵湖北省协同创新中心,武汉430068;河南农业大学,郑州450002;湖北工业大学生物工程与食品学院,武汉430068;发酵工程教育部重点实验室(湖北工业大学),武汉430068;工业发酵湖北省协同创新中心,武汉430068【正文语种】中文卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis,M. catarrhalis)属革兰氏阴性、兼性厌氧双球菌,是慢性肺病患者中引起下呼吸道感染的重要病原体[1]。
Ni NTA Magarose Beads目录 1. 产品介绍 (1)2. 注意事项 (2)3. 纯化流程 (2)4. 订购信息及相关产品 (5)1.产品介绍Ni NTA Magarose Beads 是专为高效/快速纯化组氨酸标签蛋白而设计的新型磁性微球产品,可以在磁场作用下直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,极大的简化了纯化工艺和提高纯化效率,适合科研和工业客户高通量地进行组氨酸标签蛋白的纯化。
与传统的柱层析方法相比,使用Ni NTA Magarose Beads 无需控制上样流速,更不需要昂贵的层析设备和离心设备,样品与磁珠的结合以及目的蛋白与磁珠的分离变的非常简单、快捷,而且更容易实现高通量、自动化的蛋白纯化方法。
Ni NTA Magarose Beads 是以4%琼脂糖凝胶为基质,通过化学方法偶联了四配位的氮川三乙酸(NTA ),螯合镍离子(Ni 2+)后,可以形成非常稳定的八面体结构,镍离子处于八面体的中心,这样的结构很有效的保护了镍离子免受小分子的进攻(产品结构见图1所示,三种产品结构的区别),更加稳定,具体性能见表1。
图1. Ni NTA Magarose Beads 产品化学结构示意图 表1. Ni NTA Magarose Beads 产品性能项目性能 基质 磁性琼脂糖微球载量(/mL 磁珠)>10 mg 6XHis-tagged protein 磁珠粒径(μm)30-100 磁珠比例磁珠悬浮于保护液中,含量为20%(V/V ) 保护液缓冲液含20% 乙醇的1XPBS 储存温度 2 °C-8 °C2+H 2O H 2O Ni NTA Magarose Beads表2. Ni NTA Magarose Beads试剂耐受情况试剂种类浓度还原剂 5 mM DTE1 mM DTT20 mM β-mercaptoethanol5 mM TCEP10 mM reduced glutathione变性剂8 M urea6 M Gua-HCl去污剂2% Triton™ X-100 (nonionic)2% Tween™ 20 (nonionic)2% NP-40 (nonionic)2% cholate (anionic)1% CHAPS (zwitterionic)其他类500 mM imidazole20% ethanol50% glycerol100 mM Na2SO41.5 M NaCl1 mM EDTA60 mM citrate缓冲液50 mM sodium phosphate, pH 7.4100 mM Tris-HCl, pH 7.4100 mM Tris-acetate, pH 7.4100 mM HEPES, pH 7.4100 mM MOPS, pH 7.4100 mM sodium acetate, pH 42. 注意事项1)使用本产品前,请仔细阅读产品说明书。
DAQ Getting Started GuideThis guide describes how to confirm your NI data acquisition (DAQ) device is operating properly. Install your application and driver software, then your device, using the instructions packaged with your device. Confirm Device RecognitionComplete the following steps:unch MAX by double-clicking the NI MAX icon on the desktop, or (Windows8) by clickingNI MAX from NI Launcher.2.Expand Devices and Interfaces to confirm your device is detected. If you are using a remoteRT target, expand Remote Systems, find and expand your target, and then expand Devices andInterfaces. If your device is not listed, press <F5> to refresh the configuration tree. If the device isstill not recognized, refer to /support/daqmx.For a Network DAQ device, do the following:•If the Network DAQ device is listed under Devices and Interfaces»Network Devices, right-click it and select Add Device.•If your Network DAQ device is not listed, right-click Network Devices, and select Find Network NI-DAQmx Devices. In the Add Device Manually field, type the Network DAQdevice’s host name or IP address, click the + button, and click Add Selected Devices. Yourdevice will be added under Devices and Interfaces»Network Devices.Note If your DHCP server is set up to automatically register host names, the device registers thedefault host name as cDAQ-<model number>-<serial number>, WLS-<serial number>,or ENET-<serial number>. You can find the serial number on the device. If you cannot find thehost name of that form, it may have been modified from the default to another value.If you still cannot access your Network DAQ device, click the Click here for troubleshootingtips if your device does not appear link in the Find Network NI-DAQmx Devices window orgo to /info and enter the Info Code netdaqhelp.Tip You can test NI-DAQmx applications without installing hardware by using an NI-DAQmxsimulated device. For instructions on creating NI-DAQmx simulated devices and importingNI-DAQmx simulated device configurations to physical devices, in MAX, select Help»Help Topics»NI-DAQmx»MAX Help for NI-DAQmx.3.Right-click the device and select Self-Test. When the self-test finishes, a message indicates successfulverification or if an error occurred. If an error occurs, refer to /support/ daqmx.4.For NI M and X Series PCI Express devices, right-click the device and select Self-Calibrate.A window reports the status of the calibration. Click Finish.Configure the Device SettingsSome devices, such as the NI-9233 and some USB devices, do not need properties for configuringaccessories, RTSI, topologies, or jumper settings. If you are installing only devices without configurable properties, skip to the next step. Configure each device with configurable settings that you install:1.Right-click the device name and select Configure. Be sure to click the device name under thefolder for the system (My System or Remote Systems) and NI-DAQ API in which you want tocontrol the device.For Network DAQ devices, click the device name and then the Network Settings tab to configurenetwork settings. For additional information on configuring Network DAQ devices, refer to yourdevice documentation.2.Configure the device properties.•If you are using an accessory, add the accessory information.•For IEEE 1451.4 transducer electronic data sheet (TEDS) sensors and accessories, configure the device and add the accessory as previously described. Click Scan for TEDS. To configureTEDS sensors cabled directly to a device, in MAX, right-click the device under Devices andInterfaces and select Configure TEDS.3.Click OK to accept the changes.Install Signal Conditioning or Switch DevicesIf your system includes SCXI signal conditioning modules, Signal Conditioning Components (SCC)such as SC carriers and SCC modules, terminal blocks, or switch modules, refer to the getting started guide for the product to install and configure the signal conditioning or switch hardware.Attach Sensors and Signal LinesAttach sensors and signal lines to the terminal block or accessory terminals for each installed device.You can find device terminal/pinout locations in MAX, the NI-DAQmx Help, or the devicedocumentation. In MAX, right-click the device name under Devices and Interfaces, and selectDevice Pinouts.For information about sensors, refer to /sensors. For information about IEEE 1451.4 TEDS smart sensors, refer to /teds. If you are using SignalExpress, refer to Use NI-DAQmx withYour Application Software.Run Test PanelsUse the MAX test panel as follows.1.In MAX, expand Devices and Interfaces or Devices and Interfaces»Network Devices.2.Right-click the device to test, and select Test Panels to open a test panel for the selected device.3.Click the tabs at the top and Start to test the device functions, or Help for operating instructions.4.If the test panel displays an error message, refer to /support.5.Click Close to exit the test panel.DAQ Getting Started Take an NI-DAQmx MeasurementNI-DAQmx Channels and TasksA physical channel is a terminal or pin at which you can measure or generate an analog or digital signal.A virtual channel maps a name to a physical channel and its settings, such as input terminal connections,the type of measurement or generation, and scaling information. In NI-DAQmx, virtual channels areintegral to every measurement.A task is one or more virtual channels with timing, triggering, and other properties. Conceptually, a taskrepresents a measurement or generation to perform. You can set up and save configuration information in a task and use the task in an application. Refer to the NI-DAQmx Help for complete information about channels and tasks.Use the DAQ Assistant to configure virtual channels and tasks in MAX or in your application software. Configure a Task Using the DAQ Assistant from MAXComplete the following steps to create a task using the DAQ Assistant in MAX:1.In MAX, right-click Data Neighborhood and select Create New to open the DAQ Assistant.2.In the Create New window, select NI-DAQmx Task and click Next.3.Select Acquire Signals or Generate Signals.4.Select the I/O type, such as analog input, and the measurement type, such as voltage.5.Select the physical channel(s) to use and click Next. the task and click Finish.7.Configure individual channel settings. Each physical channel you assign to a task receives a virtualchannel name. To modify the input range or other settings, select the channel. Click Details forphysical channel information. Configure the timing and triggering for your task. Click Run. Use NI-DAQmx with Your Application SoftwareThe DAQ Assistant is compatible with version 8.2 or later of LabVIEW, version 7.x or later ofLabWindows™/CVI™ or Measurement Studio, or with version 3 or later of SignalExpress.SignalExpress, an easy-to-use configuration-based tool for data logging applications, is at Start»AllPrograms»National Instruments»NI SignalExpress or (Windows8) NI Launcher.To get started with data acquisition in your application software, refer to the tutorials:Application Tutorial LocationLabVIEW Go to Help»LabVIEW Help. Next, go to Getting Started with LabVIEW»GettingStarted with DAQ»Taking an NI-DAQmx Measurement in LabVIEW.LabWindows/CVI Go to Help»Contents. Next, go to Using LabWindows/CVI»Data Acquisition»Taking anNI-DAQmx Measurement in LabWindows/CVI.Measurement Studio Go to NI Measurement Studio Help»Getting Started with the Measurement StudioClass Libraries»Measurement Studio Walkthroughs»Walkthrough: Creating aMeasurement Studio NI-DAQmx Application.SignalExpress Go to Help»Taking an NI-DAQmx Measurement in SignalExpress.© National Instruments3DAQ Getting Started GuideExamplesNI-DAQmx includes example programs to help you get started developing an application. Modifyexample code and save it in an application, or use examples to develop a new application or add example code to an existing application.To locate LabVIEW, LabWindows/CVI, Measurement Studio, Visual Basic, and ANSI C examples, go to /info and enter the Info Code daqmxexp. For additional examples, refer to .To run examples without hardware installed, use an NI-DAQmx simulated device. In MAX, selectHelp»Help Topics»NI-DAQmx»MAX Help for NI-DAQmx and search for simulated devices. TroubleshootingIf you have problems installing your software, go to /support/daqmx. For hardwaretroubleshooting, go to /support and enter your device name, or go to /kb.If you need to return your National Instruments hardware for repair or device calibration, refer to / info and enter the Info Code rdsenn to start the Return Merchandise Authorization (RMA) process.Go to /info and enter rddq8x for a complete listing of the NI-DAQmx documents and their locations.More InformationAfter you install NI-DAQmx, the NI-DAQmx software documents are accessible from Start»All Programs»National Instruments»NI-DAQ»NI-DAQmx document title or(Windows8) NI Launcher. Additional resources are online at /gettingstarted.You can access online device documentation by right-clicking your device in MAX and selecting Help»Online Device Documentation. A browser window opens to /manuals with the results of a search for relevant device documents. If you do not have Web access, documents for supported devices are included on the NI-DAQmx media.Worldwide Technical SupportFor support information, refer to /support for access to everything from troubleshooting and application development self-help resources to email and phone assistance from NI ApplicationEngineers. Visit /zone for product tutorials, example code, webcasts, and videos.Visit /services for NI Factory Installation Services, repairs, extended warranty, calibration, and other services.To ensure measurement accuracy, NI factory calibrates all applicable hardware and issues a BasicCalibration certificate, which you can get online at /calibration.Visit /training for self-paced training, eLearning virtual classrooms, interactive CDs,Certification program information, or to register for instructor-led, hands-on courses at locations around the world.For support available at the National Instruments worldwide offices, visit , or contact your local office at /contact. National Instruments corporate headquarters is located at 11500 NorthMopac Expressway, Austin, Texas, 78759-3504.DAQ Getting Started Refer to the NI Trademarks and Logo Guidelines at /trademarks for more information onNational Instruments trademarks. Other product and company names mentioned herein are trademarksor trade names of their respective companies. For patents covering National Instrumentsproducts/technology, refer to the appropriate location: Help»Patents in your software, thepatents.txt file on your media, or the National Instruments Patent Notice at /patents.You can find information about end-user license agreements (EULAs) and third-party legal notices inthe readme file for your NI product. Refer to the Export Compliance Information at /legal/export-compliance for the National Instruments global trade compliance policy and how toobtain relevant HTS codes, ECCNs, and other import/export data.© 2003–2013 National Instruments. All rights reserved.373737H-01Jul13。
Ni NTA Beads目录1. 产品介绍....................................................................................1 2. 纯化流程....................................................................................2 3. 在位清洗....................................................................................4 4. 填料再生....................................................................................5 5. 问题及解决方案.........................................................................5 6. 订购信息及相关产品 (6)1. 产品介绍Ni NTA Beads 是以4%琼脂糖凝胶为基质,通过化学方法偶联了四配位的氮川三乙酸(NTA ),螯合镍离子(Ni 2+)后,可以形成非常稳定的八面体结构,镍离子处于八面体的中心,这样的结构很有效的保护了镍离子免受小分子的进攻(产品结构见图1所示,三种产品结构的区别),更加稳定,具体性能见表1。
Ni NTA Beads 可以耐受一定浓度的还原剂、变性剂或耦合剂等苛刻条件(见表2),适用性更广,配体更稳定,选择性更高。
图1. Ni IDA Beads ,Ni NTA Beads 和Ni NTA Beads 6FF 化学结构示意图Ni 2+H 2O2+H 2O H 2O2OH 2ONi IDA BeadsNi NTA BeadsNi NTA Beads FFBeads 或者Beads FF表2. 纯化流程2.1 缓冲液的准备可使用下列推荐缓冲液,也可根据自己的使用习惯配置不同的缓冲液体系,基本原理就是低咪唑上样,高咪唑洗脱,或者高pH上样,低pH洗脱。
NI最新推出新一代的数据采集产品
无
【期刊名称】《自动化信息》
【年(卷),期】2004(000)007
【摘要】2004年9月,NI在一年一度的NIWeek上宣布推出了新一代的数据采集(DAQ)产品—M系列DAQ设备,它基于全新的NI-STC 2系列控制器芯片
与NI-PGIA 2放大器技术。
这些新款M系列数据采集产品在测量精度、采样速率、I/O通道数方面都有新的突破,增加了原先的多功能数据采集产品所不具备的诸多功能和特性。
【总页数】1页(P7)
【作者】无
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】TP274.2
【相关文献】
1.NI最新推出一系列USB数据采集卡最先推出的5款全新USBDAQ卡,为您提
供即插即用的便携式数据采集方案 [J],
2.泰克公司最新推出世界上速度快、功能强大、简便易用的逻辑分析仪——向下兼容能力为实现最新一代技术提供了道路以旧换新方案则鼓励广大客户采用最新产
品 [J],
3.NI推出新一代的数据采集产品——设定了数据采集新标准 [J],
4.NI最新推出新一代的数据采集产品——M系列DAQ设备 [J],
5.NI最新推出新一代的数据采集产品—设定了数据采集新标准 [J],
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Ni Smart Beads
目录
1.产品介绍 (1)
2.纯化流程 (1)
3.在位清洗 (2)
4.问题及解决方案 (3)
5.订购信息及相关产品 (3)
1.产品介绍
Ni Smart Beads是一种新型IMAC填料,螯合有非常牢固的Ni离子,具体性能见表1。
Ni Smart Beads主要应用于分泌到真核培养液上清中的组氨酸标记蛋白的捕获和纯化,可以在含有EDTA及DTT的情况下进行目的蛋白高效的纯化。
Ni Smart Beads有很强的组分兼容性,适用于广泛底物及盐浓度的缓冲条件,试剂耐受情况见表2。
表1.Ni Smart Beads产品性能
Ni Smart Beads
基质4%琼脂糖微球
载量(/mL基质)>10mg6XHis-tagged protein
微球粒径(μm)45–165
最大压力0.1MPa,1bar
储存缓冲液含20%乙醇的1XPBS
储存温度4°C-30°C
表2.Ni Smart Beads试剂耐受情况
试剂种类
0.01M HCl,0.01M NaOH一周
24小时
10mM EDTA,1M NaOH,5mM
DTT,5mM TCEP,20mM巯基乙
醇,6M盐酸胍
500mM咪唑,100mM EDTA2小时
30%异丙醇20分钟
2.纯化流程
2.1缓冲液的准备
可使用下列推荐缓冲液,也可根据自己的使用习惯配置不同的缓冲液体系,基本原理就是低咪唑上样,高咪唑洗脱,或者高pH上样,低pH洗脱。
缓冲液在使用前最好用0.22μm或者0.45μm滤膜过滤除菌。
平衡液:20mM磷酸盐,0.5M NaCl,pH7.4
洗杂液:20mM磷酸盐,0.5M NaCl,0-5mM咪唑,pH7.4
洗脱液:20mM磷酸盐,0.5M NaCl,250mM咪唑,pH7.4
注:为了减少宿主细胞蛋白的洗脱,建议在洗杂液中加入低浓度的咪唑。
为了消除一些离子作用蛋白的吸附,可以在溶液中加入0.5M-1.0M NaCl。
可以采用低pH值洗脱或与咪唑结合,如pH2.5-5.0。
2.2样品准备
1)将细胞培养液转移至离心杯,7,000rpm(7,500×g),离心15min取上清。
如果使用预装柱,样品在使用前最好用0.22μm或者0.45μm滤膜过滤除菌。
2)样品中含有可耐受范围内试剂,不需要透析或浓缩,可以直接上样。
2.3样品纯化流程
1)将Ni Smart Beads装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的平衡液进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。
2)将样品加到平衡好的Ni Smart Beads中,保证目的蛋白与Ni2+充分接触,提高目的蛋白的回收率,收集流出液。
3)用10-15倍柱体积的洗杂液进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。
4)使用5-10倍柱体积的洗脱液,收集洗脱液,即目的蛋白组分。
5)依次使用3倍柱体积的平衡液和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4-30°C保存,防止填料被细菌污染。
2.4SDS-PAGE检测
将使用纯化产品得到的样品(包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品使用SDS-PAGE检测纯化效果。
3.在位清洗
当填料使用过程中发现反压过高或者填料上面出现明显的污染时,需要进行在位清洗操作(Cleaning-in-Place,CIP)。
建议按照下面操作去除填料上残留的污染物,如沉淀蛋白、疏水蛋白和脂蛋白等。
去除强疏水结合的蛋白,脂蛋白和脂类
通过使用30%异丙醇清洗5-10个柱体积,接触时间为15-20分钟可以去除此类污染物。
然后,再使用10倍柱体积的去离子水清洗。
也可以选择使用含有去污剂的酸性或碱性溶液,清洗填料2倍柱体积。
例如,含有0.1–0.5%非离子去污剂的0.1M醋酸溶液,接触时间为1–2小时。
去污剂处理后,需要使用70%的乙醇清洗5个柱体积,以彻底去除去污剂。
最后使用10倍柱体积的去离子水清洗。
去除离子作用结合的蛋白
使用1.5M NaCl溶液清洗10-15分钟。
然后,再使用去离子水清洗10个柱体积。
4.问题及解决方案
问题原因分析推荐解决方案
柱子反压过高填料被堵塞裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上柱前
使用滤膜(0.22或0.45μm)过滤,或者离
心去除。
洗脱组分中没有目的蛋白样品中无His标签蛋白采用Western Blotting等确定样品中是否
含有目的蛋白。
表达量太低优化表达条件。
目的蛋白结合比较弱,在
洗杂步骤被洗下来了
提高洗杂液的pH,或者降低咪唑浓度
目的蛋白结合过强,不容
易洗脱下来
降低洗脱液的pH值,或者增加洗脱液中咪
唑浓度。
蛋白降解菌体破碎时添加一些蛋白酶抑制剂。
洗脱组分不纯(含有多种蛋白)洗杂不彻底增加洗杂液体积。
样品中含有其他的组氨酸
标签蛋白
通过调节pH值,或者咪唑浓度来优化洗杂
条件。
再使用其他的纯化手段(如离子交换,
疏水等)进一步纯化洗脱组分。
上样过程中蛋白发生沉淀操作温度太低室温下进行上样。
蛋白发生聚集在样品和所有的缓冲液中添加稳定剂,如
0.1%的Triton X-100或者Tween-20。
5.订购信息及相关产品
名称货号规格
Ni Smart Beads SA03501010mL
SA03505050mL
SA035100100mL
SA035250250mL
SA035C1L
Ni Smart Beads6FF SA03601010mL
SA03605050mL
SA036100100mL
SA036500500mL
SA036C1L HisCap Smart6FF SA036C111X1mL
SA036C515x1mL
SA036C151X5mL
SA036C555X5mL
SA036CS3X1mL+1X5mL。