痰液(呼吸道)标本细菌学检验
- 格式:ppt
- 大小:12.64 MB
- 文档页数:42
痰液标本的报告与解释第一篇:痰液标本的报告与解释痰液标本的报告与解释关键词:细胞菌种保藏中心细胞库 ATCC 北京标准物质网一、阳性结果报告(一)显微镜结果根据镜下观察结果,进行报告。
如“抗酸染色后,中间部分的菌丝为革兰阳性,而四周放射的末端为革兰阴性”。
(二)培养结果痰及呼吸道标本,培养出引起下呼吸道感染性疾病的病原体(表34-2)等具有临床意义。
均应报告“XX细菌生长”及相应的药敏试验结果。
二、阴性结果报告(一)显微镜结果根据镜下观察结果,进行报告。
如“未见真菌”或“未见抗酸杆菌”。
(二)培养结果当培养足够时间未生长目的菌时,可进行阴性报告,如“经48小时培养无细菌生长”或“有正常菌群生长”。
第二篇:痰液标本采集法痰液标本采集法操作内容一、操作目的根据医嘱采集痰标本,进行临床检验,为诊断和治疗提供依据。
二、评估患者1、询问、了解患者身体状况,评估病人能否自行咳嗽咳痰;标准分 5三、操作要点四、指导患者2、观察患者口腔粘膜有无异常和咽部情况,向病人作好解释,取得病人合作。
1、仪表:符合要求2、操作用物:治疗盘、痰液收集器、化验单、一次性无菌手套、温开水、纱布、手电筒、治疗巾、胶水或胶布、弯盘。
3、操作步骤:1)核对医嘱,准备用物。
2)核对患者床号、姓名,评估患者。
3)洗手、戴口罩。
4)携用物至病人床旁,再次核对。
5)协助患者清洁口腔,取合适体位。
6)取治疗巾置于患者颌下。
7)采集痰标本:①能自行留痰者:戴手套。
嘱病人用温开水漱口,观察有无食物残渣,帮助患者拍背,嘱患者深呼吸数次后用力咳出气管深处的痰液于无菌痰液收集器内,盖好瓶盖。
②人工辅助呼吸者:戴无菌手套,将痰液收集器连接在负压吸引器上,打开吸引器开关,将导管插入咽喉深部,留取痰液标本5~10ml后加盖。
8)再次核对,将化验单副联贴于痰液收集器上,注明留取时间。
9)用纱布擦净患者口唇,脱手套。
10)整理床单位,协助患者取舒适体位。
询问患者需要。
痰标本的细菌学检查随着医疗技术的更新和医疗事业的不断发展,临床上采纳了很多介入性诊疗措施,以致于抗菌药物广泛应用、耐药菌株不断增多、细菌的耐药机制越发复杂和机体免疫功能下降引发感染逐渐增多,也正因此临床对于细菌学检查提出了更多、更迫切的要求。
细菌学检查所面临的最主要的问题是提供临床结果的可靠性和准确性,影响细菌检验结果可靠性的因素有很多,比如采取标本的时机、方法,标本的保存和运送方式以及分离培养方法、鉴定手段等等,临床中很多医生仅仅重视细菌标本的鉴定和培养方法,却忽略了标本的质量和采集方法。
其中痰标本的问题是最严重的,痰也是下呼吸道分泌物,在大多数情况下,采集痰标本的方式是自然咳痰,因此很容易受到上呼吸道分泌物的干扰,所以如何能够确定改为提高痰标本的治疗改为质量是十分重要的,这个问题也已经受到了国内外广大微生物工作者的重视,所以本篇文章就对痰标本的细菌学检查这一问题进行深入的探讨。
一、痰标本的现状以及存在的问题首先是痰标本的采取,目前大多数医院都对患者采取自然咳痰的方式采集清晨的第一口痰,患者在留痰前需要使用清水漱口,而且需要漱口三次,然后将痰液用力的咳出。
虽然有很多医院能够严格按照标准执行,但还有部分医院尚未按照要求去做。
其次是痰标本的运送,细菌学检查痰标本需要在留取痰标本之后立即将其送往细菌时,但是据相关数据显示,到目前位置仅有一小部分医院能够做到,绝大多数医院并没有在标本留取之后立刻送检。
尤其是对于住院的患者,医院的做法往往是将所有患者的标本集齐之后再由相关人员送往细菌室,以致于患者的标本从留取到送检之间耽搁了两至三个小时,如果痰标本在送到细菌室之后并未立进行接种或者是涂片,而是再耽搁一段时间的话,则会造成该观察的内容没有观察到,而且应该培养出来的细菌也并未培养出来。
随之而来的问题就是涂片染色显微镜检查,到目前为止,仍然有很多医院在培养痰标本之前并未进行涂片染色显微镜检查,不包括特殊检查,比如痰涂片找抗酸杆菌。
痰液标本细菌学检验的注意事项痰液标本细菌学检验是一种常用的临床检查方法,主要用于分离和鉴定痰液中的细菌,以帮助诊断和治疗呼吸系统感染和其他相关疾病。
随着医学技术的不断发展和进步,痰液标本细菌学检验的应用范围和检测方法也在不断更新和完善。
然而,由于痰液标本细菌学检验存在一些技术难点和操作问题,容易出现误判和漏诊等情况,给临床诊疗带来一定的挑战和困难。
采集痰液标本前的准备工作是痰液标本细菌学检验中非常重要的一个环节。
如果准备工作不充分,将会影响痰液标本的质量和可靠性,甚至导致检测结果的误判和漏诊。
因此,在采集痰液标本前,应做好以下准备工作:①确认患者是否适宜进行痰液标本检测。
痰液标本检测主要适用于呼吸系统感染和其他相关疾病的诊断和治疗。
在进行痰液标本检测前,应仔细询问患者的病史,了解其病情和病程,以确认是否适宜进行该项检测。
②患者的呼吸系统状态要充分准备。
采集痰液标本时,需要患者能够充分清除呼吸道内的分泌物,以便采集到干净的痰液。
因此,患者应在采集痰液标本前充分排空呼吸道,建议在晨起后进行采集,因为此时痰液较为浓稠,容易采集到足够的样本。
③患者是否接受抗生素治疗。
抗生素治疗可能会影响痰液中细菌的生长和检测结果。
因此,需要了解患者是否接受抗生素治疗,并在采集痰液标本前停止使用抗生素一段时间,以避免影响检测结果。
④采集器材的准备。
在采集痰液标本时,需要准备相应的器材,如痰杯、痰杯盖、手套、口罩等。
要求器材干净、无菌、无异味,以避免交叉感染。
⑤给患者充分解释并获得其同意。
在采集痰液标本前,需要给患者充分解释采集的目的、方法、注意事项等信息,并获得其明确的同意。
同时,要给予患者必要的配合和安抚,以避免出现不必要的痛苦和不适。
采集痰液标本的方法主要有两种:咳痰和吸痰。
咳痰是患者主动咳出痰液,一般要求患者咳嗽力度足够,并在容器内采集痰液。
吸痰则是通过吸氧管或者吸痰管吸出痰液,需要专业人员进行操作,注意不要把口腔中的唾液混入痰液中,以免影响检测结果。
细菌培养检查小常识——如何正确留取痰培养标本?
肺癌患者由于免疫力降低易伴随呼吸道感染,同时呼吸道感染也是临床上最常见的感染性疾病之一,随着抗生素的广泛应用,感染菌株耐药率不断增加,给临床治疗带来了极大的困难。
当呼吸道发生细菌感染时,痰液量会明显增多,痰培养是呼吸道感染病原学诊断最常用的方法,同时,痰培养的检验结果及药敏试验在指导临床抗生素使用方面也发挥了非常重要的作用。
痰标本的留取是影响培养结果准确性的重要因素之一。
留取标本时一般以晨痰为佳,在留取之前用清水或淡盐水反复漱口,或用牙刷清洁口腔,取坐位或半坐卧位,屈膝,上身前倾,深吸气后屏气3秒,然后腹肌用力,做爆破性咳嗽,将痰液咳出,吐入无菌的透明密闭痰盒内,尽可能的缩短容器开盖时间并立即送检以减少杂菌生长。
对于幼龄咳痰困难或不会咳痰的儿童可用压舌板向后压舌,用棉拭子深入咽部,其受到刺激咳嗽时,可喷出肺部或气管的分泌物黏在拭子上。
另外需要我们特别注意的是留取痰标本一定要在停用抗生素一周之后或者是抗菌药物使用之前,如果是做结核菌涂片,应送检三
份痰标本,连续三日,每日采集清晨第一口痰。
参考文献。
痰标本在细菌学检验中的应用分析摘要目的:探讨痰标本在细菌学检验中的应用价值。
方法:选择送检于检验科的300例痰标本,分别接种培养于不同的培养基上。
结果:1例标本在923tbl液体培养基浑浊,有细菌生长,在7h9l 半固体蔗糖培养基中有油煎蛋样的菌落出现,而在罗氏培养基、923tbb和7119b培养基中没有菌落生长。
结论:用高渗半固体培养基可以从临床痰标本中分离出结核分枝杆菌l型菌株,表明痰标本在细菌学检验中仍有一定的价值。
关键词痰标本细菌学检验在感染疾病的病原菌中,细菌l型是细菌细胞壁部分缺损或完全丧失而造成的,细菌胞壁的缺失可以是自发的,也可以是人工诱导的,但人工诱导的频率远比自发为高。
痰标本在琼脂培养基上,菌落呈“油煎蛋”样式[1]。
本实验旨在筛查临床痰标本中结核分枝杆菌l型细菌的存在情况,论述了痰标本在细菌学检验中的应用效果,为进一步研究结核分枝杆菌l型细菌的形成提供思路,现报告如下。
资料与方法实验对象:2009年6月~2012年5月送检于检验科的300例痰标本。
培养基配制:罗氏培养基的配制:基础液,谷氨酸钠1.8g、磷酸二氢钾1.2g,枸橼酸镁0.3g,葡萄糖0.3g,硫酸镁0.1g,丙三醇6ml、蒸馏水300ml。
上述溶液加热充分溶解,加入土豆粉6g,摇匀加热5分钟。
冷却到40~50℃时,加入500ml全卵液,加入已经高压灭菌的2%孔雀绿10ml,摇,静置后进行分装。
呈斜面放置于干燥箱85℃,1.5小时。
冷却后,培养基斜面颜色鲜艳,表面光滑无气泡,4℃保存。
痰标本的细菌培养:取痰标本,以1:3的比例加入消化液,漩涡振荡,3000转/分,离心15分钟,加入适量pbs重悬沉淀,取300ml分别接种于middlebrook mgit 7h9液体、7h9l、7h9b半同体培养基、923tbb和923tbl液体培养基中,37℃静置培养。
消化液的配制:4%naoh 50ml,2.9%枸橼酸钠50ml,n-乙酰-l-半胱氨酸0.5g当天配制,24小时内使用。
呼吸道标本细菌学检验标准操作程序1.检验目的规范呼吸道标本细菌学检验操作规程,确保检验结果准确可靠。
2.适用范围呼吸道标本培养和涂片检查。
3.标本采集与运送3.1 采集时间以晨痰为好。
3.2 采集方法3.2.1 自然咳痰法用清水反复漱口后从气管深部咳出痰,吐入无菌容器内。
3.2.2 气管镜下采集法在病灶附近用导管吸或用支气管刷直接取得标本。
3.2.3 气管穿刺法在环甲膜下穿刺抽取痰液,收集标本,适用于厌氧菌培养。
3.2.4 呼吸机采集法使用呼吸机的病人,可利用呼吸机吸取深部痰入专用采集器内送检。
3.2.5 为了明确扁桃体炎、会厌炎、鼻咽部化脓性感染的病原体,可以采集拭子送检。
首先拭子用无菌生理盐水沾湿,然后用力在感染部位擦拭,采集标本与无菌管送检。
3.3 标本运送3.3.1 采集标本后立即送到实验室,放置时间不应超过2h。
3.3.2 延迟送检或待处理标本应置于4℃冰箱保存(疑为肺炎双球菌、流感嗜血杆菌等苛氧菌感染除外),以免杂菌生长,但必须在24h内处理。
3.3.3 对可疑烈性呼吸道传染病的患者检验标本,在采集、运送及保存过程中必须注意生物安全防护。
4.检验步骤4.1接种:用无菌拭子蘸取脓性部分,接种于血平板和巧克力平板第一区,再用一次性接种环分区划线接种。
4.2 涂片在接种的同时进行涂片。
用铅笔在磨砂部位编号,每片只涂一份标本。
4.3 培养:血平板、巧克力平板置35℃二氧化碳培养箱培养18-48h。
4.4 涂片染色镜检:涂片革兰染色,自然干燥后镜检。
先用低倍镜浏览整片,计数平均每个低倍视野WBC、上皮细胞的数量。
标本合格与否参考表1,合格标本再用油镜观察,主要观察片中主要细菌类型、WBC内吞噬什么细菌等,以作为看板时决定什么细菌要做的依据。
表1 痰液标本分级4.5 培养结果观察4.5.1 口咽部正常寄生的需氧菌主要是腐生的奈瑟菌、草绿色链球菌,4.5.2 有明确意义的病原菌: A群溶血性链球菌(咽炎)、流感嗜血杆菌(b型5y以下儿童急性会厌炎、急性支气管炎)、肺炎链球菌(急性支气管炎常继发于病毒感染、大叶性肺炎)、百日咳鲍特菌(咳嗽、支气管扩张)、金黄色葡萄球菌(肺炎)、军团菌(肺炎)、白喉棒状杆菌。
呼吸道标本细菌学检验操作规程(一)目的:规范呼吸道标本细菌学检验,确保检验结果准确可靠。
(二)适用范围及操作人员:呼吸道标本培养和涂片检检查;检验科工作人员。
(三)支持性文件:《WST805-2022临床微生物检验基本技术标准》、《下呼吸道感染细菌培养操作指南》、《全国临床检验操作规程》。
(四)标本类型:痰、咽拭、支气管肺泡灌洗吸出液、支气管冲洗液或刷子、肺穿刺液等。
(五)标本采集时间:尽量在抗生素使用前采集。
(六)标本采集方法:1、咳痰:适用于肺部感染患者,特别是重病监护室(ICU)及住院的社区获得性肺炎(CAP)、慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)、肺脓肿(咳痰非最适标本)、可疑细菌性病原体引起的肺部感染患者。
咳痰前,患者用无菌生理盐水漱口;指导患者咳出深部痰,勿留取唾液和鼻咽腔分泌物。
2、气管吸出物:仅当气管插管的患者出现肺炎症状时(如发热或浸润),可采集气管吸出物标本。
从气管中吸痰,用无菌容器留取送检。
3、支气管肺泡灌洗液:利用纤维支气管镜向小支气管和肺泡中注入无菌生理盐水灌洗,在40mL~80mL回收的灌洗液中包含约1mL支气管末梢和肺泡中的分泌物;弃去前段可能污染的部分,收集其余部分后立即送检。
4、保护毛刷标本:将纤维支气管镜插入亚段支气管可疑感染部位,经支气管镜刷检孔推出双层套管中的毛刷(远端填塞聚乙二醇),刷取脓性分泌物,采样后将毛刷回收入双层套管并退出纤维支气管镜,用无菌剪刀剪断毛刷,置于含lmL生理盐水的无菌容器中(仅供需氧培养),快速送检。
5、气管穿刺法在环甲膜下穿刺抽取痰液,收集标本,适用于厌氧菌培养。
6、棉拭采集法用无菌棉拭子轻轻擦拭病人鼻咽部黏膜,留取标本,置无菌试管内送检。
(七)标本拒收标准:1、申请单姓名、科别、床号与标本的标签不符。
2、痰标本呈水样或唾液样。
3、痰涂片白细胞<10/低倍视野,上皮细胞>25/低倍视野。
4、标本容器溢漏,无瓶盖。
5、痰标本留取放置时间太长,超过2小时。
下呼吸道感染细菌学检验操作规范(1)下呼吸道感染细菌学检验操作规范近年来,下呼吸道感染病例不断增加,给医疗卫生事业带来了严峻的挑战。
为了确保下呼吸道感染病例的快速、准确、可靠的检测和诊断,制定下呼吸道感染细菌学检验操作规范,将有助于提高检验水平和工作效率,本文将针对细菌学检验操作规范进行详细介绍。
一、检验前准备1. 确定样本种类:本次检验需使用的下呼吸道标本种类有:痰、咽拭子或喉拭子等。
2. 样本采集:根据患者的情况进行样本采集,采集时要求患者咳嗽并咳出深部痰液,若患者不配合,则可采用吸痰管等工具进行痰液采集。
同时也可以采用喉拭子或者咽拭子进行标本采集。
3. 样本处理:对采集的样本,应及时送到检验室进行处理,加工前需要做出相应的标签,记录样本采集时间、采集标本证号、病人基本信息等。
二、操作流程1. 样本处理(a) 痰液标本处理方法:对于痰液标本,先进行分液处理,即分离痰液中的黏液、脓液、红细胞和有机杂质等。
然后以0.9%氯化钠溶液洗涤一次,摇匀后进行离心(5000r/min,10min)。
(b) 咽拭子或喉拭子标本处理:将采集的咽拭子或喉拭子样本转移到含有0.9%氯化钠溶液的离心管中,然后离心(5000r/min,5min),离心后取上清液进行下一步检验。
2. 检测**(a) 涂片制备:将上述处理后的纯化液采用无菌钢丝圈或无菌载玻片刷取标本并均匀涂在两张干净的干燥擅菌片上,干燥后送至乙醇固定。
(b) 染色:采用Gram染色方法进行染色,首先用碘酒凝固后,将菌片在床头火上迅速脱色,用80%乙酸洗去多余的碘酒和颜料,再冲洗水清洗,细心观察染色质量,必要时要反复染色。
(c) 细菌形态观察:观察染色后菌的形态。
非典型革兰氏染色细胞如需观察需通过进一步检验的手段,如选择恰当的培养基及培养条件等。
(d) 培养:将涂片标本在含有相应营养物质的培养基上培养,观察菌落的形态及生理生化特性,以进行分类鉴定。
常用的培养基及相应的菌种分类可参见《常用细菌分类鉴定表》。
【项目名称】痰细菌培养【检验报告】1.痰细菌培养时间一般为3天,在此之前明确诊断的要及时通知医生。
2.未检出致病菌时,应报告“正常菌群”。
3.对于机会致病菌,一般仅当其数量超过正常菌群时才可报告鉴定结果及药敏试验结果。
4.检出致病菌时,除报告该菌的鉴定名称外,还需同时报告正常菌群的情况。
5.通常以报告草绿色链球菌和奈瑟菌作为正常菌群存在的指标。
【检验方法】1.细菌培养:下呼吸道的病原菌种类繁多,一般须用以下几种分离培养方法。
①.血平板:适用于分离各类细菌,特别是β-溶血性链球菌、葡萄球菌、肺炎链球菌等。
②.巧克力平板:于CO2环境下分离嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌。
③.中国蓝/麦康凯平板分离革兰氏阴性杆菌。
④.沙保罗培养基用于分离念珠菌及其他酵母菌、奴卡菌等。
2.细菌鉴定:常用的有手工微量生化管法,API细菌鉴定板条,Vitek、mini vital等自动化鉴定仪。
【临床意义】1.呼吸系统感染患者的痰液标本中分离出病原菌的机会相当多,对细菌学结果的正确解释并非容易,只有区别是病原菌还是上呼吸道的正常菌群.才能判断被检标本中是否有病原菌存在。
2.上呼吸道的正常菌群有αγ链球菌、微球菌、奈瑟菌、嗜血杆菌、表皮葡萄球菌、棒状杆菌、拟杆菌、梭杆菌和厌氧球菌等,其中奈瑟菌、嗜血杆菌和棒状杆菌也可以是致病菌。
3.痰液中常见的病原菌有:肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、假单胞菌属细菌厌氧球菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌、结核分支杆菌、放线菌、卡他莫拉菌、脑膜炎奈瑟菌、奴卡菌、假丝酵母菌、白喉棒状杆菌、炭疽杆菌、奋森螺旋体、肺炎支原体、嗜肺军团菌、百日咳鲍特菌及其它肠杆菌科细菌等。
4.肺炎链球菌:寄居于人的上呼吸道,一般不致病,致病物质主要靠荚膜的侵袭作用,当机体抵抗力下降时,如寒冷刺激、感冒或麻疹之后,可引起大叶肺炎或支气管肺炎。
肺炎链球菌引起的大叶肺炎占82.48%,在支气管肺炎中占65.79%。
此外还可引起中耳炎、乳突炎、脑膜炎、败血症等。
痰标本的细菌学检验与质量控制1.1采集方法:痰标本最好在应用抗菌药物之前采集,以晨痰最好。
常用采集法有自然咳痰法、支气管镜采集法、胃内采痰法等。
采集可疑烈性呼吸道患者痰标本时,应注意生物安全防护。
自然咳痰法:患者清晨起床后用清水反复漱口,用力自气管咳出第一口痰于灭菌容器内,立即送检。
对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入加温至45℃的10%NaCl水溶液,使痰液易于排出。
对咳痰量少的幼儿,可轻轻压迫胸骨上部的气管,使其咳嗽,将痰收集于灭菌容器内送检。
支气管镜采集法用气管镜在肺部病灶附近用导管或者支气管刷直接取材,此法患者不易接受,故不常用[1]。
1.2标本运送与保存标本采集后应立即送检,室温保存不超过2 h;做结核分枝杆菌和真菌培养的标本不能及时送检的,可放于4℃保存,以免杂菌生长。
2 检验方法2.1 显微镜检查痰标本宜先直接涂片镜检,并于低倍镜下观察白细胞和上皮细胞数目,以确定该标本适合做什么细菌培养。
一般认为,合格的痰标本含白细胞和支气管柱状上皮细胞较多,而受污染的痰标本则是来自颊黏膜的扁平鳞状上皮细胞较多。
在低倍镜视野下,白细胞超过25个、鳞状上皮细胞不超过10个的痰标本为合格标本。
①一般细菌涂片检查:挑取标本中脓性或带血部分涂片进行革兰染色镜检,根据染色性、形态及排列等特征可发出初级报告。
②结核分枝杆菌涂片检查:挑取标本干酪样或脓性部分做抗酸染色,根据所见结果报告“找到(或未找到)抗酸杆菌”[2]。
③放线菌及奴卡菌涂片检查:将痰液用生理盐水反复洗涤数次,挑取黄色颗粒(硫黄颗粒)或不透明着色斑点,置玻片上并覆以盖玻片,轻压后置高倍镜下观察。
如见中央为交织的菌丝,其末端粗杆呈放线状排列时揭去盖玻片,干后做革兰及抗酸染色镜检并报告。
2.2分离培养与鉴定:①痰培养标本的前处理:于痰标本中加入适量无菌生理盐水,剧烈振荡5~10s后,将沉淀于管底的浓痰小片取出,置于另一试管中,同法再处理2次,可洗去痰中的正常菌群。
痰液标本的细菌学检验的详细流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!并且,本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,如想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!痰液标本的细菌学检验详细流程在医学领域,痰液标本的细菌学检验是一种常用的技术,用于诊断和治疗呼吸道感染疾病。
痰液标本细菌学检验(一)关键词:细胞库菌株培养中心 atcc 北京标准物质网一、检验程序痰及呼吸道标本的细菌学检验程序见图34—1。
二、检验方法(一)显微镜检查1.一般细菌涂片检查挑取标本中脓性或带血部分涂片进行革兰染色镜检,描述观察到的细菌的染色性、形态及排列等特征,可发出初步报告。
2.结核分枝杆菌涂片检查挑取标本干酪样或脓性部分做抗酸染色和金胺“O”荧光染色,前者用油镜,后者用荧光显微镜检查。
具体操作详见第十五章分枝杆菌属检验。
3.放线菌及诺卡菌涂片检查将痰液用生理盐水反复洗涤数次,挑取黄色颗粒(硫黄颗粒)或不透明着色斑点,置玻片上并覆以盖玻片,轻压后置高倍镜下观察。
如见中央为交织的菌丝,其末端粗杆呈放线状排列时揭去盖玻片,待干后做革兰染色及抗酸染色镜检。
4.下呼吸道其他标本检查支气管肺泡灌洗液等直接取自下呼吸道的标本,不易受上呼吸道杂菌的污染,涂片检菌的意义较大。
可取离心沉淀物进行革兰染色与抗酸染色检查。
(二)培养和鉴定1.痰培养标本的前处理于痰标本中加入一定量无菌生理盐水,剧烈振荡5~10秒后,将沉淀于管底的脓痰小片取出,置于另一试管中,同法再处理2次,可洗去痰中的正常菌群。
然后向洗涤过的痰液中加入等量pH 7. 6的1%胰酶溶液,放置35℃环境90分钟,使痰液均质化后备用。
2.培养基与培养环境(1)血琼脂平板:适用于分离多种细菌,需氧环境,可分离β-溶血性链球环境培养,分离肺炎链球菌和β-溶血性链球菌。
根菌,葡萄球菌;置于5%CO2据血琼脂平板生长的菌落特征及镜检形态,得出初步结果,再按各类细菌特性做进一步鉴定。
环境培养,常用于分离嗜血杆菌和脑膜(2)巧克力色琼脂平板:置于5%CO2炎奈瑟菌等有特殊营养需求的细菌。
(3)中国蓝琼脂平板/麦康凯平板:需氧环境培养,常用于分离肠杆菌科细菌。
(4)TTC-沙保弱培养基:需氧环境培养,用于分离白假丝酵母菌及其他酵母菌、诺卡菌、放线菌以及烟曲霉菌等。
痰液细菌学检验的标准化操作程序卢先雷1前言众所周知,传统习气顺序的痰标本细菌学检验其临床契合率并不高,其缘由是多方面的。
除了痰标本采集不规范招致的不合格标本带来的培育结果与病人感染不相符外,还由于微生物和人体的相关性自身就具有复杂性:源自细菌的致病与条件致病的辨证性,如致病菌能够为正常携带,而细菌在肺通气功用异常病人的下呼吸道的可以发作单纯定植或感染,要证明培育结果与感染的相关性是医学微生物学所面临的难题,这也使得不时以来在关于痰培育的规范化停顿十分缓慢,以致在各版«全国临床检验操作规程»上也未提出相应详细可行的令全国同行公认的一致规范的规范化操作顺序〔SOP〕和完整的痰液培育的质量控制方法。
习气顺序的痰标本细菌学检验的缓慢也很不顺应临床诊断治疗的迫切性[1]。
故而,树立规范而快速的痰液细菌学检验的SOP关于提高呼吸系统感染病的诊治水平和控制抗生素的滥用等效果均有重要的作用痰培育阳性率普遍教低,临床契合率差的关键要素是痰标本采集不规范,不合格痰标本将直接招致病原菌被分别的时机降低,少量正常菌群也会抑制病原菌的生长或搅扰病原菌的检出,降低了临床契合率;再有就是操作顺序的不规范,不注重直接涂片,检验进程控制的不严密也是招致临床契合率低的重要缘由。
我们经过SOP的临床运用状况的剖析,痰培育阳性率和临床契合率均能够被提高,并且细菌散布统计结果显示本文与国外文献所报道的状况基本分歧[2]。
关于直接涂片的意义,在于判别标本中微生物有无、类型、染色特性、形状特征,标本的污染状况,还可对痰标本中能够的病原菌初步诊断(依据人体被病原菌感染后的炎性渗出包裹和白细胞吞噬反响),判别能否存在双数菌感染,静态观察处于治疗进程中不同时期所送检的标本中病原菌状况的变化〔似乎种病原菌数量的增减,机体的免疫反响,菌群的交替〕。
甚至可以推断临床治疗疗效和病人病情的变化和转归,医院内感染的发作等,具有重要意义[3]。
市第一人民医院细菌室下呼吸道标本的细菌学检验1. 下呼吸道标本培养常见病原菌
金黄色葡萄球菌
脑膜炎奈瑟氏菌
化脓性链球菌
流感嗜血杆菌
肺炎链球菌
肠杆菌科细菌
结核分支杆菌
非发酵菌
白喉棒状杆菌
嗜肺军团菌
假丝酵母菌
2.标本收集:
2.1下呼吸道标本采集的基本要求是采集深部的痰液,具体方法有以下几种:1.自然咯痰法 2.气管镜采集法
3.小儿取痰法
4.气管穿刺法
5.胃内采痰法。
2.2标本采集的注意事项
2.2.1标本采集以晨痰为佳,咳前应充分嗽口,减少口腔正常菌群的污染。
2.2.2标本采集后应及时送检,以防某些细菌在外环境中死亡。
做结核分枝杆菌或真菌培养的痰液如不能及时送检,应放入4℃冰箱,以免杂菌生长。
3.检验步骤:
3.1一般细菌涂片检查挑取痰液的脓性或带血部分放在两张玻片中,置室温自然干燥,经火焰固定后,做革兰氏染色,另一张根据检验需要做抗酸染色或其他染色。
如标本中每个低倍视野内鳞状上皮细胞多于25
个,脓细胞又少于10个,并找不到病变部分,表示标本来自唾液,标本不合格,不必进一步检查,要求重新送检。
3.2分离培养一般细菌培养分别接种于血平板、麦康凯、巧克力平板,巧克力应置于CO2环境中35℃培养18~24小时。
4.报告结果:检出细菌,应报告菌名和药敏结果。