痰液细菌学检验的标准化操作程序模板

痰检室标准操作程序一、进入实验室工作前，穿戴工作衣、口罩、帽子、手套。

二、痰标本分类：1、即时痰；2、夜间痰；3、次日晨痰。

三、痰标本性状分类：A、干酪痰；B、血痰；C、黏液痰；D、唾液痰。

标本量一般3—5ml。

四、标本采集：（一）初诊患者应收集3份痰液标本（1.即时痰；2.夜间痰；3.次日晨痰）；（二）治疗中或者随访患者按期留取2份标本（1.晨痰；2.夜痰）。

注：若当日未能检查的标本，应放入4℃冰箱保存，避免干固或污染。

五、标本处理：（一）收集痰标本后，首先将病人姓名、编号（初诊病人门诊序号或随访病人登记号）、痰标本序号和性状作登记。

（二）用铅笔在有磨砂面的新玻片上注明实验序号及标本序号。

注：确保玻片上的编号与痰盒上的编号一致（三）小心打开痰标本容器，使用折断的竹签挑取痰标本中可疑部分，于玻片正面均匀涂抹成10㎜×20㎜的卵圆形痰膜。

注：取样、染色必须在通风柜中进行。

（四）待痰涂片自然干燥后，放置在染色架上，玻片间距离10㎜以上，酒精灯5秒钟内将玻片经过火焰加热4次固定。

（五）染色：1、滴加石炭酸复红初染液盖满玻片，加热出现蒸汽，染色5分钟。

2、用流水自玻片一端轻缓冲洗，沥干水，滴加脱色液，脱色1分钟。

3、用流水自玻片一端轻缓冲洗，沥干水，滴加亚甲蓝复染液，染色30秒。

4、流水自玻片一端轻缓冲洗，沥干水，待玻片干燥后镜检。

（六）镜检：1、取染色干燥的玻片，痰膜向上放置在显微镜台上并固定。

2、先用10倍目镜调节成像清晰后，在玻片上滴1—2滴专用镜油，使用100倍油镜进行细致观察。

六、结果判定：阅片时，从头开始，以“弓”形移动读片，在淡蓝色背景下，抗酸杆菌呈红色杆状，其他细胞呈现蓝色。

1、观察300视野未见抗酸杆菌为阴性；2、1-8条/300视野以条数报告；3、3-9条/100视野为1+；4、1-9条/10视野为2+；5、1-9条/每视野为3+；6、≥10条/每视野为4+。

七、使用完显微镜后，立即用镜头纸将油镜擦净，关闭显微镜电源。

痰检实验室操作规程一、检查程序（一）痰标本收集：在三个痰标本盒上注明病人的姓名、编号、检查日期和容器序号。

病人首次留痰前应指导病人，留取“即时痰”、“夜间痰”、“晨痰”合格的痰标本，对所送不合格痰标本除常规检查外，应要求患者重新送检，合格的痰标本包括干酪痰、血痰、粘液痰。

唾液或口水用于病人确诊时为不合格痰标本，标本量一般在3～5 ml。

（二）痰涂片制作：1、检查前对新的玻片用95%的乙醇擦拭脱脂，经干燥、清洁、检查无油污、无划痕后作为合格的玻片备用。

在已经准备的痰玻片背面左端的1/3处注明编号，挑取痰标本中可疑部分约0.05～0.1 ml，于玻片正面右侧2/3处，均匀涂抹成10×20 mm的卵圆形痰膜。

2、痰膜朝上静置自然干燥后(一般约需要30分钟)进行染色镜检。

当气温低，痰膜不易干燥时，严禁将玻片直接在火焰上烘拷，以防产生气溶胶或痰膜脱落。

一张载玻片上只能涂抹一份痰标本，一张载玻片只能使用一次，不得清洗后再次用于痰涂片染色检查。

3、涂抹完毕后的痰标本，在检查结果报告前，应暂时保留。

以备涂片、染色不合格影响镜检结果时，重新涂片和染色之用。

4、萋－尼氏染色油镜检查.（三）实验室登记：按照年度病人序号和痰标本序号在实验室登记本上进行登记，并以同样的号码在痰涂片检查单上进行标记。

检验单的病人姓名应与实验室登记本一致。

（四）痰涂片检查结果登记与报告：及时在登记本上登记痰涂片检查结果。

当病人的三次痰涂片检查完成后，发现有阳性痰涂片，应在规定时间内报医院防保科，县级结核病防治机构再对痰涂片进行确认。

（六）痰涂片的保存：每个查痰点镜检后的全部痰涂片应按实验室登记本序号连续排列，分别存放在各点固定的玻片盒中，供上级实验室复核确认。

（七）痰检质量控制：每个痰涂片检查点均按照中国结核病防治规划《痰涂片镜检质量保证手册》的要求，作为一个独立的被质控单位接受室间质量评估和检查工作。

二、萋－尼氏染色1、涂片自然干燥后，放置在染色架上，玻片间距保持在10 mm以上的距离；火焰固定(在5秒钟内将玻片置于火焰上来回烘烤4次)。

痰培养操作流程sop
痰培养是一种常见的临床检验方法，用于检测痰样本中的细菌、真菌和病毒等微生物。

正确的痰培养操作流程（SOP）对于确保检测结果的准确性至关重要。

以下是一份关于痰培养操作流程的详细指南：
1. 准备工作：在进行痰培养之前，首先要准备好所需的实验室
用品和设备，包括培养皿、试管、吸管、培养基、显微镜等。

2. 收集痰样本：患者在清晨醒来后深呼吸数次，然后用消毒液
清洁口腔，用力咳嗽将痰样本吐入干净的容器中。

3. 样本处理：将收集到的痰样本转移到试管中，并加入适量的
生理盐水或其他稀释液，使样本更易于处理。

4. 稀释和涂片制备：将痰样本进行适当的稀释，然后取少量样
本涂抹在玻片上，用炉灰染色或其他染色方法染色。

5. 培养：将涂片放入培养皿中，加入适量的培养基，然后放入
培养箱中进行培养。

根据需要，可以选择不同种类的培养基，如血
琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基等。

6. 培养条件：将培养皿放入恒温培养箱中，设置适当的温度和
湿度条件，通常在37摄氏度下培养24-48小时。

7. 结果观察：观察培养皿中的细菌、真菌或病毒的生长情况，根据形态、颜色、大小等特征进行初步鉴定。

8. 进一步鉴定：对于生长的微生物，可以进行进一步的生化试验或分子生物学检测，以确定其种属和抗生素敏感性。

9. 结果报告：根据实验结果，编制详细的检测报告，并及时通知临床医生，以指导患者的治疗方案。

总之，痰培养操作流程需要严格按照规范操作，确保实验结果的准确性和可靠性。

只有这样，才能为临床诊断和治疗提供有效的支持。

痰标本采集操作规程一、目的（1）常规痰标本：检查痰的一般形状，涂片检查细胞、细菌、虫卵，以及观察其性质、颜色、气味和量以协助诊断呼吸系统疾病。

（2）痰培养标本：检查痰中的致病菌，及确定病菌类型。

（3）24h痰标本：检查24h痰的量及性状，协助诊断。

二、评估（1）病人的一般情况，病人的理解能力及其合作能力。

（2）病人的临床诊断和目前的病情、治疗情况。

（3）检查目的。

三、计划（1）用物准备：①病人能自行留痰者：标本容器（痰培养标本被无菌容器及漱口溶液200ml，24h痰标本备广口集痰器）、检验单（标明科室、床号、姓名、住院号、检查目的、送检日期时间）。

②病人无法咳痰或不合作：集痰器，检验单（标明病室、床号、姓名）、吸痰用物（吸引器、吸痰管）、生理盐水、手套。

痰培养标本需备无菌用物。

（2）病人准备：核对并向病人解释收集痰液的方法和注意事项。

（3）环境准备：通风。

（4）护士准备：做好个人防护。

四、实施（1）操作步骤：①常规痰标本A、病人能自行留痰者：贴标签于标本容器上，携用物至床旁→再次查对并做好解释→请病人于清晨醒来未进食前先漱口，数次深呼吸后用力咳出气管深处的痰液，盛于痰盒内，盖好痰盒→给予漱口或口腔护理→洗手、记录→送检B、无法咳痰或不合作者贴标签于标本容器上，携用物至床旁→再次查对并做好解释）→协助病员取合适卧位，由下向上叩击病人背部→用集痰器和吸引器按照吸痰法将痰吸入集痰器内，加盖→给予漱口或口腔护理→洗手、记录→送检②痰培养标本A、病人能自行留取痰液贴标签于标本容器上，携用物至床旁→再次查对并做好解释→病人清晨起床后，未进食前先用漱口溶液漱口，再用清水漱口，数次深呼吸后用力咳出气管深处的痰液于无菌集痰器内，盖好瓶盖→给予漱口或口腔护理→洗手、记录→送检B、无法咳嗽或不合作病人贴标签于标本容器上，携用物至床旁→再次查对并做好解释→取合适卧位，由下向上叩击病人背部→戴好无菌手套，用无菌集痰器和吸引器按吸痰法将痰吸入无菌集痰器内，加盖→给予漱口或口腔护理→洗手、记录→送检③24h 痰标本贴标签于标本容器上，携用物至床旁→再次查对并做好解释→在广口集痰器内加少量清水→从7am 未进食前漱口后第一口痰开始留取，次日晨7am 未进食前第一漱口后第一口痰作为结束，将24h 的全部痰液吐入集痰器内→给予漱口或口腔护理→洗手、记录→送检（2）注意事项：①帮助病人排痰，如伤口疼痛无法咳嗽，可用软枕或手掌压迫伤口，减轻肌肉张力，减少咳嗽时的疼痛。

痰培养的报告模板检测信息•检测编号：•检测日期：•检测机构：•检测人员：•样本来源：样品信息•样品姓名：•样品年龄：•样品性别：•样品种类：实验方法本次实验采用标准的痰培养方法进行检测，具体实验步骤如下：1.首先，将痰样液体细胞外部分基本清除干净。

2.取一个无菌平板，均匀涂抹痰样液体，摇晃使之均匀分布。

3.将涂有痰样液体的平板放入35℃恒温培养箱中培养2-3天。

4.观察痰样液体在培养箱中的生长情况，并记录其孔径、颜色、透明度等信息。

5.对生长出的菌落进行形态学鉴定、生理生化检测，鉴定其属于何种细菌。

6.对细菌进行药敏试验，确定其敏感性和耐受性。

实验结果分析1.经过痰培养实验，检测出样品中含有如下细菌：（按数量从多到少列出）–细菌名称–孔径（mm）–颜色–透明度2.经过细菌的形态学鉴定、生理生化检测以及药敏试验，确定细菌属于何种类型，以及其敏感性和耐受性，结果如下：–细菌名称：（填写）–形态学特征：（填写）–生理生化检测结果：（填写）–对常规抗菌药敏感性分析：（填写）•抗生素1：敏感，(抑菌直径 / 抗生素浓度)（填写）•抗生素2：敏感，(抑菌直径 / 抗生素浓度)（填写）•抗生素3：耐药，(抑菌直径 / 抗生素浓度)（填写）•抗生素4：耐药，(抑菌直径 / 抗生素浓度)（填写）•抗生素5：敏感，(抑菌直径 / 抗生素浓度)（填写）实验结论根据实验结果，我们可以得到如下结论：1.检测样品中存在如下细菌：（按数量从多到少列出）2.分析细菌的药敏结果，制定对应的治疗方案，以期能够有效控制感染症状。

实验注意事项1.该实验应由专业人员进行操作，遵守严格的规范操作流程。

2.操作时应注意卫生与消毒，避免污染。

3.实验前，应清洗操作台和仪器设备，准备好实验所需的各种试剂和装置。

4.实验后，应妥善处理实验产生的废弃物和危险品，善后工作应做到位。

第1篇实验目的：通过痰液细菌培养实验，检测痰液中是否存在病原菌，为临床诊断和治疗提供依据。

实验材料：1. 标本：痰液2. 试剂：营养琼脂平板、麦康凯琼脂平板、巧克力琼脂平板、革兰氏染色液、细菌鉴定试剂等3. 仪器：恒温培养箱、显微镜、无菌操作台等实验方法：1. 标本采集：按照无菌操作要求，收集患者的痰液标本。

2. 标本处理：将痰液标本用无菌生理盐水稀释，取适量加入营养琼脂平板、麦康凯琼脂平板、巧克力琼脂平板，涂布均匀。

3. 培养与观察：将涂布好的平板放入恒温培养箱中，37℃培养24-48小时，观察细菌生长情况。

4. 细菌鉴定：根据细菌形态、染色性、培养特性等，对分离出的细菌进行鉴定。

5. 药敏试验：采用纸片扩散法，对分离出的细菌进行药敏试验。

实验结果：1. 细菌生长情况：在营养琼脂平板、麦康凯琼脂平板、巧克力琼脂平板上，观察到明显的细菌生长。

2. 细菌鉴定结果：根据细菌形态、染色性、培养特性等，鉴定出以下细菌：- 肺炎链球菌：革兰氏阳性球菌，呈双球菌排列，对青霉素、头孢菌素等敏感。

- 流感嗜血杆菌：革兰氏阴性杆菌，呈链状排列，对氨苄西林、头孢菌素等敏感。

- 铜绿假单胞菌：革兰氏阴性杆菌，呈短链状排列，对庆大霉素、头孢他啶等敏感。

3. 药敏试验结果：肺炎链球菌对青霉素、头孢菌素等敏感；流感嗜血杆菌对氨苄西林、头孢菌素等敏感；铜绿假单胞菌对庆大霉素、头孢他啶等敏感。

实验结论：根据痰液细菌培养结果，患者痰液中存在肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌等病原菌。

根据药敏试验结果，建议临床使用青霉素、头孢菌素、庆大霉素等抗生素进行治疗。

实验讨论：1. 痰液细菌培养是一种常用的细菌学检测方法，可以有效地检测痰液中是否存在病原菌，为临床诊断和治疗提供依据。

2. 在本实验中，肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌等病原菌的检出，可能与患者呼吸系统感染有关。

3. 药敏试验结果对于指导临床合理使用抗生素具有重要意义。

痰液标本的细菌学检验的详细流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢！本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注！Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!一、采集痰液标本。

在进行痰液标本的细菌学检验前，首先需要采集痰液标本。

痰液标本细菌学检验（一）关键词：细胞库菌株培养中心 atcc 北京标准物质网一、检验程序痰及呼吸道标本的细菌学检验程序见图34—1。

二、检验方法(一)显微镜检查1．一般细菌涂片检查挑取标本中脓性或带血部分涂片进行革兰染色镜检，描述观察到的细菌的染色性、形态及排列等特征，可发出初步报告。

2．结核分枝杆菌涂片检查挑取标本干酪样或脓性部分做抗酸染色和金胺“O”荧光染色，前者用油镜，后者用荧光显微镜检查。

具体操作详见第十五章分枝杆菌属检验。

3．放线菌及诺卡菌涂片检查将痰液用生理盐水反复洗涤数次，挑取黄色颗粒(硫黄颗粒)或不透明着色斑点，置玻片上并覆以盖玻片，轻压后置高倍镜下观察。

如见中央为交织的菌丝，其末端粗杆呈放线状排列时揭去盖玻片，待干后做革兰染色及抗酸染色镜检。

4．下呼吸道其他标本检查支气管肺泡灌洗液等直接取自下呼吸道的标本，不易受上呼吸道杂菌的污染，涂片检菌的意义较大。

可取离心沉淀物进行革兰染色与抗酸染色检查。

(二)培养和鉴定1．痰培养标本的前处理于痰标本中加入一定量无菌生理盐水，剧烈振荡5～10秒后，将沉淀于管底的脓痰小片取出，置于另一试管中，同法再处理2次，可洗去痰中的正常菌群。

然后向洗涤过的痰液中加入等量pH 7. 6的1％胰酶溶液，放置35℃环境90分钟，使痰液均质化后备用。

2．培养基与培养环境(1)血琼脂平板：适用于分离多种细菌，需氧环境，可分离β-溶血性链球菌，葡萄球菌；置于5％CO环境培养，分离肺炎链球菌和β-溶血性链球菌。

根2据血琼脂平板生长的菌落特征及镜检形态，得出初步结果，再按各类细菌特性做进一步鉴定。

环境培养，常用于分离嗜血杆菌和脑膜(2)巧克力色琼脂平板：置于5％CO2炎奈瑟菌等有特殊营养需求的细菌。

(3)中国蓝琼脂平板／麦康凯平板：需氧环境培养，常用于分离肠杆菌科细菌。

(4)TTC-沙保弱培养基：需氧环境培养，用于分离白假丝酵母菌及其他酵母菌、诺卡菌、放线菌以及烟曲霉菌等。

.痰液及下呼吸道分泌物培养标准操作流程1 观察标本合格后操作。

一般为晨痰，再留取痰之前刷牙、反复漱口，应从气管深部咳出痰，吐进无菌容器内送检。

涂片白细胞小于10，上皮细胞大于25为不合格痰，相反白细胞大于25，上皮细胞小于10-25为合格痰标本。

2 点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。

3 接种环灭菌—待冷却后—取痰液—接种到血平板、中国兰平板（或麦康凯平板上）。

平板划线分离培养：（1）用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二三区依次用接种环划线。

（2）每划一区域应将接种环烧灼一次，冷却后再划下一区域，每一区域的划线应接触上一区域的接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。

（3）划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板的底部向上）于35°C培养18-24小时。

4观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌、阴性菌、球菌还是杆菌后鉴定种属。

5 做药敏试验-------报告结果。

便培养标准操作流程1.收取有粘液或脓血、稀水粪便标本。

2.点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。

3.接种环灭菌—待冷却后—取粪便—接种到血平板、SS平板、中国兰平板（或麦康凯平板上）。

平板划线分离培养：（1）用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二三区依次用接种环划线。

（2）每划一区域应将接种环烧灼一次，冷却后再划下一区域，每一区域的划线应接触上一区域的接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。

（3）划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板的底部向上）于35°C培养。

4培养18-24小时后观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌、阴性菌、球菌还是杆菌后鉴定种属。

5 做药敏试验-------报告结果。

尿培养标准操作流程1 收取晨尿第一泡清洁中段尿。

（把外阴用肥皂清洗一遍，再用清水清洗两遍，待干或用干净布擦干）用导尿管的病号需新换导尿管后取标本2 点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。

3 接种环灭菌—待冷却后将标本混匀，用定量接种环取尿液1ul(大约一接种环）—接种到血平板，接种环灭菌---待冷后取标本接种到中国兰平板（或麦康凯平板上）。

痰标本细菌学检验
细菌室
一、项目申请：
1、普通细菌培养：对于病房患者选择项目名称为“病房痰培养”，对于门急诊患者选择“门诊痰培养”。

如果临床怀疑奴卡菌等特殊病原体，需要在打印出的条码上注明目的病原菌，以便实验室延长培养时间和选择适当培养方法。

2、真菌培养：选择项目名称为“真菌培养”，标本种类选择“痰”。

3、不适于培养的病原菌：厌氧菌、军团菌、衣原体、支原体等，如果有疑问请与细菌室联系询问（电话2485）。

分枝杆菌培养为我院外送检验项目。

二、标本采集：
1、采集时间：尽量在抗生素使用前，以清晨留取的标本为更佳。

2、容器要求：螺旋口无菌塑料瓶。

3、采集方法：标本采集前应充分清洁患者口腔，如：漱口、刷牙等，有假牙的病人应取下假牙。

嘱附病人深咳，将痰液直接留到无菌瓶内。

容器瓶口旋紧勿泄漏。

4、将条码贴于标本瓶上，扫描记录采集时间。

三、送检要求：
1、标本采集后应及时（2小时内）送检。

标本若冷藏保存可能会影响对温度敏感细菌的检出。

2一天送检一次即可，不需同一天内连续送检多次，多余的送检标本视为不合格。

如遇特殊情况需多次送检时，请事先与细菌室联系。

3、常规送检时间为每周一至周五8点至16点30分，节假日顺延。

在常规时间以外如有送检要求，请事先与细菌室联系说明送检原因，经确认后再送检。

四、检验流程：
五、报告发放：
1、阴性报告：普通细菌培养2-3天，真菌培养1周，特殊病原菌延长相应时间。

2、阳性报告：4天，如遇细菌生长缓慢等特殊情况则延迟发放。