微生物实验报告(微生物形态观察、分布、灭菌消毒)
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微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜(油镜)的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊结构5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点二、实验原理1. 普通光学显微镜(油镜)的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油,然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器,使油镜头浸没在油滴内,当油镜头几乎接触玻片时停止转动,以免碰撞玻片,用双眼观察目镜,同时调节细调节器,直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时,用右手持镜壁,左手托镜座,平端于胸前2.油镜用毕后,要立即用擦镜纸擦去香柏油;再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头;最后,用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去,以免损伤油镜头3.镜头擦净后,降低接物镜并将其转成八字形,罩好镜罩放入柜内4.做好使用记录3.微生物知识1.细菌按形态分类:球菌:球形(包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等)杆菌:杆状(包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等)螺旋菌:螺旋状(包括螺旋菌、弧菌等)2.细菌的基本结构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3.细菌的特殊结构荚膜:如肺炎双球菌鞭毛:又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如:变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞:如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4.微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称,包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类:细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类:真菌、原生动物、显微藻类非细胞类:病毒、亚病毒5.真菌单细胞:圆形、芽生孢子。
如:酵母菌多细胞:菌丝及孢子、孢子出芽。
如:霉菌6.白假私酵母菌(白念)生物学性状:G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性:皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染微生物学检查:直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7.新型隐球菌生物学性状:圆形酵母型菌、外周有厚荚膜(比菌体大1-3倍)致病性:吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿;侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查:脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查;墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔:1支;大镊子:1支;火柴:1盒;蜡笔:1支;试管架:1个;酒精灯:1个;接种环:1支;Olympus显微镜:1台;显微镜使用记录本:1个四、实验内容1. 观察细菌三种形态1)球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌(子弹形)、脑膜炎双球菌(蚕豆形)、四联菌2)杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌(异染颗粒)、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3)螺形菌弧菌——霍乱弧菌;螺菌;螺杆菌——幽门螺杆菌;弯曲菌2. 观察细菌的特殊结构芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus);肺炎双球菌(pneumo coccus);脑膜炎球菌(meningococcus);破伤风杆菌(Clostridium Tantenus);霍乱弧菌(vibrio cholera);芽胞(spore);鞭毛(flagellum);荚膜(capsule);钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下图,已交。
第1篇一、实验目的1. 了解细菌的基本形态结构。
2. 掌握细菌的分离、纯化和鉴定方法。
3. 学习细菌生理生化反应的检测原理和应用。
二、实验原理细菌是单细胞微生物,具有典型的原核细胞结构。
通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应,可以鉴定细菌的种类。
三、实验材料与仪器1. 材料:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等纯菌株。
2. 仪器:显微镜、接种环、培养皿、酒精灯、无菌水、生理盐水、革兰氏染色液、生理生化试剂等。
四、实验方法1. 细菌形态观察- 将细菌涂布在载玻片上,进行革兰氏染色。
- 使用显微镜观察细菌的形态、大小、染色性等特征。
2. 细菌分离与纯化- 将纯菌株接种于琼脂平板,进行划线分离。
- 观察菌落特征,挑选单菌落进行纯化。
3. 细菌生理生化反应检测- 进行糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验、V-P试验等。
- 观察反应结果,判断细菌的生理生化特性。
五、实验结果与分析1. 细菌形态观察- 大肠杆菌:革兰氏阴性,呈杆状,两端钝圆。
- 金黄色葡萄球菌:革兰氏阳性,呈球形,呈葡萄串状排列。
- 肺炎克雷伯菌:革兰氏阴性,呈短杆状,两端钝圆。
2. 细菌分离与纯化- 划线分离后,观察到单菌落形成。
3. 细菌生理生化反应检测- 糖发酵试验:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖。
- 吲哚试验:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。
- 甲基红试验:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。
- V-P试验:金黄色葡萄球菌呈阳性,大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均呈阴性。
六、讨论与分析1. 通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应,可以初步鉴定细菌的种类。
2. 细菌的生理生化反应具有特异性,可用于细菌的鉴定和分类。
3. 在实际应用中,细菌的分离、纯化和鉴定是微生物学研究和临床诊断的重要环节。
七、实验结论1. 通过本次实验,我们掌握了细菌的基本形态结构、分离、纯化和鉴定方法。
2. 我们学会了利用生理生化反应进行细菌的鉴定和分类。
3. 本实验有助于提高我们对微生物学基本理论的认识和应用能力。
第1篇一、实验背景细菌是自然界中广泛分布的微生物,它们在人类的生活和环境中扮演着重要的角色。
了解细菌的分布情况,对于研究细菌与人类健康、环境以及生态系统之间的关系具有重要意义。
细菌分布实验旨在探究细菌在不同环境中的分布规律,分析影响细菌分布的因素,为细菌的防治和利用提供理论依据。
二、实验原理1. 细菌分布与生态环境细菌分布受多种生态环境因素的影响,包括温度、湿度、pH值、营养物质、氧气含量等。
这些因素共同构成了细菌生长的微环境。
实验中,通过对比不同环境条件下细菌的分布情况,可以了解生态环境对细菌分布的影响。
2. 细菌培养与计数细菌培养是研究细菌分布的基础。
实验中,采用适宜的培养基和培养条件,使细菌在培养基上生长繁殖。
通过观察菌落形态、颜色等特征,可以初步判断细菌的种类。
利用计数器对菌落进行计数,可以得到细菌的浓度。
3. 细菌分离与纯化为了研究特定细菌的分布情况,需要对混合细菌进行分离和纯化。
实验中,采用平板划线法、稀释涂布法等方法,将混合细菌分离成单个菌落。
通过纯化后的细菌,可以进一步研究其生物学特性。
4. 细菌鉴定细菌鉴定是研究细菌分布的关键步骤。
实验中,根据细菌的形态特征、生理生化特性、分子生物学方法等进行鉴定。
常用的鉴定方法包括显微镜观察、生化反应、DNA指纹分析等。
三、实验方法1. 空气中细菌分布检测(1)采样:采用无菌采样器采集空气样品,如空气采样管、空气采样盒等。
(2)培养:将采样器中的空气样品注入含有适宜培养基的培养皿中,进行培养。
(3)计数:培养一段时间后,统计菌落数量,计算细菌浓度。
2. 土壤中细菌分布检测(1)采样:采用无菌工具采集土壤样品,如土壤采样管、土壤铲等。
(2)培养:将土壤样品进行稀释,将稀释后的样品接种于培养基上,进行培养。
(3)计数:培养一段时间后,统计菌落数量,计算细菌浓度。
3. 水体中细菌分布检测(1)采样:采用无菌采样器采集水样,如无菌水桶、无菌试管等。
(2)培养:将水样进行稀释,将稀释后的样品接种于培养基上,进行培养。
一、实验目的1. 学习微生物分离纯化的基本方法。
2. 掌握微生物形态观察和菌落特征鉴定技术。
3. 培养微生物实验操作技能,提高对微生物学基本知识的理解。
二、实验原理微生物分离与鉴定是微生物学实验中的基本操作。
通过分离纯化,可以获得单一菌株,便于进行后续研究。
微生物鉴定则是根据微生物的形态特征、生理生化特性等,确定其种类。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂、无菌水、无菌试管、接种环、酒精灯、显微镜等。
2. 实验仪器:高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、无菌操作台等。
四、实验步骤1. 样品采集与处理(1)采集土壤样品,放入无菌试管中。
(2)用无菌水将土壤样品稀释10倍,制成土壤悬液。
2. 分离纯化(1)将土壤悬液取适量,涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上。
(2)将平板倒置放入恒温培养箱中,37℃培养24小时。
(3)观察菌落生长情况,挑取单个菌落,进行纯化培养。
3. 形态观察与菌落特征鉴定(1)将纯化后的菌株涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上,37℃培养24小时。
(2)观察菌落形态、颜色、大小、边缘等特征。
(3)将菌落置于显微镜下观察菌体形态。
4. 生理生化特性鉴定(1)根据菌落特征,选取疑似菌种进行生理生化试验。
(2)进行糖发酵试验、氧化酶试验、甲基红试验等。
(3)根据试验结果,确定菌种。
五、实验结果与分析1. 分离纯化经过多次挑取,成功分离出多个单菌落。
2. 形态观察与菌落特征鉴定观察发现,分离出的菌株菌落呈圆形,表面光滑,边缘整齐,颜色为白色。
3. 生理生化特性鉴定经过糖发酵试验、氧化酶试验、甲基红试验等,确定分离出的菌株为乳酸菌。
六、实验总结本次实验成功分离纯化了土壤样品中的乳酸菌,并通过形态观察、菌落特征鉴定和生理生化特性鉴定,确定了其种类。
在实验过程中,掌握了微生物分离纯化的基本方法,提高了微生物实验操作技能,加深了对微生物学基本知识的理解。
七、注意事项1. 实验操作过程中,严格遵守无菌操作规程,避免污染。
微生物学实验报告微生物学实验报告实验目的:观察和学习微生物在不同条件下的生长和繁殖特性。
实验原理:微生物是一类非常小型的生物体,包括细菌、真菌、病毒等。
它们广泛存在于自然界中的土壤、水体和空气中。
微生物可以通过分裂、繁殖等方式进行增殖,并且受到温度、pH值、营养条件等环境因素的影响。
实验材料:培养皿、琼脂、试管、移液器、细菌液等。
实验步骤:1. 准备好所需的培养皿,将琼脂均匀地倒入各个培养皿中。
2. 将培养皿放入高压锅中进行高压灭菌处理,以杀死培养皿中的病原体。
3. 等待琼脂冷却固化后,将培养皿倒置放置。
4. 使用无菌手术针,从微生物液体中获取一定量的微生物液体。
5. 将微生物液体均匀地涂抹在琼脂培养皿上。
6. 使用无菌眼刷将一部分涂抹的微生物液体划线,以便观察微生物的生长情况。
7. 将培养皿放入恒温箱中进行培养,并设置不同的温度、pH 值、营养条件等。
8. 每隔一段时间,观察培养皿上微生物的生长情况,并记录下来。
实验结果和分析:根据观察和记录的结果,我们发现微生物在不同条件下的生长速度和繁殖能力是有差异的。
在适宜的温度、pH值和营养条件下,微生物的生长速度相对较快,生物量也相对较高。
而在不适宜的条件下,微生物的生长速度会减慢或停止,甚至会死亡。
实验结论:微生物的生长和繁殖特性与环境条件密切相关。
适宜的温度、pH值和营养条件可以促进微生物的生长和繁殖,而不适宜的条件会影响微生物的生长。
因此,在实际应用中,我们需要根据微生物的需求条件来选择合适的培养条件,以提高微生物的生长和繁殖能力。
实验总结:通过本次实验,我们进一步了解了微生物在不同条件下的生长和繁殖特性。
微生物的生长和繁殖受到温度、pH 值、营养等环境因素的影响,这是我们在环境控制和微生物培养中需要注意的因素。
掌握微生物的生长和繁殖特性,有利于我们更好地应用微生物技术,并解决一些与微生物相关的问题。
第1篇一、实验背景细菌是自然界中广泛分布的一类微生物,它们在生态系统中扮演着重要的角色。
为了了解细菌的分布情况,我们进行了细菌分布实验,通过对不同环境中的细菌进行检测,分析细菌的分布规律和特点。
二、实验目的1. 掌握细菌分布检测的基本原理和方法;2. 了解不同环境中的细菌种类和数量;3. 分析细菌分布与生态环境的关系。
三、实验方法1. 样品采集:分别从土壤、水体、空气、植物表面等不同环境中采集样品;2. 样品处理:将采集到的样品进行适当处理,以便进行细菌培养和检测;3. 细菌培养:将处理后的样品接种到不同类型的培养基上,进行细菌培养;4. 细菌鉴定:对培养出的细菌进行形态观察和生化实验,进行细菌鉴定;5. 统计分析:对实验数据进行统计分析,得出细菌分布规律和特点。
四、实验结果与分析1. 土壤样品:在土壤样品中,共检测到15种细菌,其中革兰氏阳性菌占80%,革兰氏阴性菌占20%。
细菌数量在土壤表层最多,随着深度的增加,细菌数量逐渐减少。
2. 水体样品:在水中共检测到12种细菌,其中革兰氏阳性菌占60%,革兰氏阴性菌占40%。
细菌数量在水源上游最多,随着水流方向,细菌数量逐渐减少。
3. 空气样品:在空气中共检测到8种细菌,其中革兰氏阳性菌占70%,革兰氏阴性菌占30%。
细菌数量在室内空气中最多,室外空气中细菌数量较少。
4. 植物表面样品:在植物表面共检测到10种细菌,其中革兰氏阳性菌占50%,革兰氏阴性菌占50%。
细菌数量在植物表面最多,随着距离植物表面的距离增加,细菌数量逐渐减少。
5. 细菌分布与生态环境的关系:通过实验结果分析,我们发现细菌分布与生态环境密切相关。
土壤、水体、空气和植物表面等不同环境中的细菌种类和数量存在差异,这与各自生态环境的特点有关。
五、实验结论1. 细菌在自然界中广泛分布,不同环境中的细菌种类和数量存在差异;2. 细菌分布与生态环境密切相关,生态环境的特点影响着细菌的分布;3. 细菌在生态系统中扮演着重要角色,对生态环境的稳定性具有重要意义。
微生物实验报告实验名称:微生物实验实验目的:1. 掌握微生物的培养方法。
2. 了解微生物的形态特征和生长规律。
3. 观察和比较不同微生物产生的效应。
实验步骤:1. 准备培养基:取适量琼脂糖、胨粉、酵母浸膏等材料,加入适量蒸馏水煮沸溶解,煮沸后装入培养皿中,冷却并凝固。
2. 无菌操作:将培养皿放入高温高压锅中,进行高温高压处理,杀灭培养基中的微生物,避免外来微生物污染。
3. 接种微生物:选择需要培养的微生物菌株,用无菌棉签取少量微生物悬液在琼脂糖培养基表面涂抹均匀。
4. 培养条件控制:将培养皿放入恒温培养箱中,设置适当的温度和湿度,以促进微生物的生长。
观察培养皿中微生物的生长情况,并记录生长的时间和形态特征。
5. 结果观察与分析:观察不同微生物在培养基上的生长情况,比较不同微生物产生的效应。
实验结果:通过实验观察,发现不同微生物在培养基上的生长情况存在着明显差异。
有些微生物在培养基上形成了均匀的菌落,有些则形成了不规则的斑点状。
同时,可以观察到菌落的颜色、大小、形状等也存在差异。
实验结论:1. 不同微生物菌株在培养基上的生长速度和形态特征不同。
2. 微生物的生长受环境因素的影响较大,如温度、湿度等。
3. 微生物在培养基上的生长情况可以用于鉴定和分类微生物。
存在的问题:1. 对微生物的培养条件控制不够精细,可能导致结果的偏差。
2. 对微生物形态特征的观察和描述不够准确。
改进方案:1. 对微生物的培养条件进行更加精确的控制,确保实验结果的准确性。
2. 对微生物的形态特征进行更加准确的观察和描述,可以通过借助显微镜来观察微生物的细节结构。
备注:本报告中的微生物实验为虚构实验,仅作为示例展示微生物实验报告的基本结构和内容,实际实验应根据具体需要进行设计和操作。
竭诚为您提供优质文档/双击可除显微镜观察微生物形态的实验报告篇一:微生物实验报告:微生物形态观察实验一微生物形态观察一、实验目的1.巩固显微镜的使用方法,重点练习油镜的使用;2.认识细菌、放线菌和霉菌的基本形态特征和特殊结构;3.练习手绘微生物图片。
二、实验原理1.细菌基本形态细菌是单细胞生物,一个细胞就是一个个体。
细菌的基本形态有3种:球状,杆状和螺旋状,分别称为球菌、杆菌、螺旋菌。
球菌根据细胞分裂后排列方式的不同分为单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌、链球菌、葡萄球菌等。
杆菌分为单杆菌、双杆菌、链杆菌等,是细菌中种类最多的。
螺旋菌分为弧菌和螺菌。
除此之外,还有一些特殊形态的细菌。
2.细菌特殊结构细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。
荚膜是某些细菌向细胞壁表面分泌的一层厚度不定的胶状物质,具有抗干燥、抗吞噬和附着作用。
鞭毛是某些细菌表面着生的1至数根由细胞内伸出的细长、波曲的丝状体,具有运动功能,在菌体上的着生位置、数目因菌种而异。
菌毛(又称纤毛)是在细菌体表的比鞭毛更细、更短、直硬,且数量较多的丝状体,与细菌吸附或性结合有关。
芽孢又称内生孢子,是某些细菌生长到一定阶段,在菌体内部产生的圆形、椭圆形或圆柱形休眠体,具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等特性。
3.真菌的结构特征菌丝是构成真菌营养体的基本单位,是一种管状细丝。
可伸长并产生许多分枝,许多分枝的菌丝相互交织在一起,就叫菌丝体。
根据菌丝中是否存在隔膜可分为无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。
为适应不同的环境条件和更有效地摄取营养满足生长发育地需要,许多真菌的菌丝可以分化成一些特殊的形态,这些特化的形态称为菌丝变态。
比如吸器、假根、子实体。
4.放线菌的结构特征放线菌的形态比细菌复杂些,但仍属于单细胞生物。
链霉菌是典型的放线菌,其细胞呈丝状分枝,菌丝直径很小,在营养生长阶段,菌丝内无隔,故一般呈多核的细胞状态。
当其孢子落在固体基质表面并发芽后,就不断伸长、分支并以放射状向基质表面和内层扩展,形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝,同时在其上又不断向空间方向分化出颜色较深、直径较粗的分枝菌丝,这就是气生菌丝。
微生物实验报告同济医学院实验目的:本实验旨在通过对不同环境样品的微生物培养和观察,了解微生物的生长特点和对不同环境的适应能力。
实验材料:1.紧口试管2.琼脂培养基3.培养皿4.放大镜5.滴管6.高温灭菌器实验步骤:1.收集不同环境的样品,如土壤、水源、食品等。
2.在实验室中进行样品的处理,将每个样品分别放入紧口试管中。
3.使用滴管将琼脂培养基注入紧口试管中,确保培养基完全覆盖样品。
4.用棉花塞住紧口试管,并将其标记以便后续观察。
5.将标记好的紧口试管放入高温灭菌器中,以杀死可能存在的外来微生物。
6.将灭菌后的试管放入培养皿中,观察培养皿上是否有菌落形成。
7.使用放大镜观察菌落的形状、颜色和大小,并记录下来。
实验结果:经过观察,发现不同环境样品中都出现了不同形状、颜色和大小的菌落。
其中,土壤样品中的菌落较为丰富,颜色多样且形状不规则;水源样品中的菌落较少,颜色较为单一且形状较规则;食品样品中的菌落数量较多,颜色和形状各异。
实验结论:微生物在不同环境中具有不同的适应能力和生长特点。
土壤样品中的微生物较为多样化,可能受到土壤中的丰富养分和适宜的生长条件的影响;水源中的微生物数量较少,可能受到水质的限制;食品样品中的微生物数量较多,可能与食品中的营养成分和储存条件有关。
实验改进:为了得到更准确的结果,可以在实验中增加对样品的处理步骤,如使用过滤器过滤样品,以排除可能的外来微生物。
同时,可以增加样本数量和重复实验次数,以提高实验的可靠性和准确性。
注意事项:在进行微生物实验时,需要严格遵守实验室的安全操作规范,包括戴手套、口罩和实验室服等。
同时,实验后需要正确处理实验废弃物,确保实验室的环境卫生和安全。
实验一环境中微生物的检测一、目的:1.学习制备培养基平板的方法,了解如何进行无菌操作。
2.用实验证明生活中存在各种微生物,并学会菌落的观察统计。
二、原理:微生物的分布广泛,而肉眼却无法看到,因此我们常常忽略它们的存在。
通过制备无菌培养基平板,我们可以接种各种物质中的微生物,使它们在培养基上生长增殖为肉眼可见的菌落,从而观察其菌落形态,鉴别其种类。
三、材料:已灭菌培养基、无菌培养皿、酒精灯。
四、实验步骤:1.制备培养基平板:在点燃的酒精灯火焰附近打开装有培养基的锥形瓶,并灼烧瓶口。
用另一只手在火焰旁边打开无菌培养皿,将适量培养基缓缓倾倒入培养基后合盖,将培养基缓慢放在桌面过程中不能震荡。
静置冷却。
2.接种:(1)取一套培养基平板,打开皿盖,20分钟后盖好皿盖并注明处理方式,写明组别及时间。
(2)取一套培养基平板,打开皿盖,用手指轻触培养基滑动后盖好皿盖并注明处理方式,写明组别及时间。
(3)取一套培养基平板,打开皿盖,将衣服袖口在培养基上方抖动半分钟后盖好皿盖并注明处理方式,写明组别及时间。
(4)取一套培养基平板,用镊子拔下一根头发,打开皿盖,将头发压在培养基上后盖好皿盖并注明处理方式,写明组别及时间。
(5)取一套培养基平板,不做任何处理,注明为对照,以“CK”表示。
3.将所有培养皿倒置,于28℃温箱中培养一周,观察结果。
五、结果与讨论实验结果经观察整理如下表所示:培养皿号菌落数菌落类型菌落大小(单位:cm)菌落形态表面干湿颜色边缘菌落种类数1手145 1 0.55 丝状干白色不规则 42 0.70 圆形湿米黄色不规则3 0.40 圆形湿肉色完整2衣服150 1 0.39 丝状干白不规则92 1.3 圆形干白丝状3 0.6 纺锤湿黄完整3空气53 1 1.2 丝状干中青外白丝状92 1.5 不规则干白不规则3 0.4 圆形湿中黄完整4头发细菌沿头发长成菌苔,无法分辨菌落及数目。
5、CK 0 123从结果我们可以看出,衣服和手的菌落数接近,而衣服中的微生物种类较多。
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如:变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞:如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4.微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称,包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类:细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类:真菌、原生动物、显微藻类非细胞类:病毒、亚病毒5.真菌单细胞:圆形、芽生孢子。
如:酵母菌多细胞:菌丝及孢子、孢子出芽。
如:霉菌6.白假私酵母菌(白念)生物学性状:G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性:皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染微生物学检查:直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7.新型隐球菌生物学性状:圆形酵母型菌、外周有厚荚膜(比菌体大1-3倍)致病性:吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿;侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查:脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查;墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔:1支;大镊子:1支;火柴:1盒;蜡笔:1支;试管架:1个;酒精灯:1个;接种环:1支;Olympus显微镜:1台;显微镜使用记录本:1个四、实验内容1. 观察细菌三种形态1)球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌(子弹形)、脑膜炎双球菌(蚕豆形)、四联菌2)杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌(异染颗粒)、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3)螺形菌弧菌——霍乱弧菌;螺菌;螺杆菌——幽门螺杆菌;弯曲菌2. 观察细菌的特殊结构芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus);肺炎双球菌(pneumo coccus);脑膜炎球菌(meningococcus);破伤风杆菌(Clostridium Tantenus);霍乱弧菌(vibrio cholera);芽胞(spore);鞭毛(flagellum);荚膜(capsule);钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下图,已交。
六、思考与讨论1.显微镜高倍镜使用时看不清楚的常见原因(1)未滴加镜油(2)镜头不干净(3)标本放置反了,所以达不到对焦平面(4)制片问题:标本太厚、染色误差等细菌分布一、实验目的1. 掌握固体培养基的制备2. 掌握机体常见部位及环境中的细菌采样、培养、及初步鉴定3. 掌握革兰氏染色方法及结果判定二、实验原理1. 培养基:1.细菌生长所需营养物质:水、碳源、氮源、无机物和生长因子2.培养基分类:(1)根据营养物质:营养培养基、选择培养基、鉴别培养基(2)根据物理性质:液体培养基、固体培养基和半固体培养基3.细菌在培养基中的生长状况:表面生长、均匀浑浊生长、沉淀生长2. 革兰氏染色:革兰阳性细菌细胞壁的肽聚糖(peptidoglycan)层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,通道弯曲,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄,脂肪含量高,经乙醇处理后孔径仍可使结晶紫与碘的复合物通过,因而将染料洗去而被脱色。
三、实验材料咽拭子、羊血培养皿:1套/人;大号普通培养皿:1块/2人;载玻片:1片/人;A、B菌:6套/桌;NS:1份/人;滤纸:1张/人;消毒液:4套/桌;三角瓶、电天平、营养琼脂、称药纸、称药勺、量筒:1套/桌四、实验内容1. 培养基制备1)按产品要求称取营养琼脂2)每实验桌制备200ml3)高压蒸汽灭菌后,在洁净工作台内倒平皿4)所制备的普通平皿用于空气培养2. 机体不同部位的细菌采样、培养1)咽部正常菌群的采样、培养咽拭子擦拭咽部,平行划线法接种于羊血平皿。
2)手指消毒前后细菌的采样培养未消毒手指平行划线法接种于普通平皿;同一手指碘酒、酒精消毒后平行划线法接种于普通平皿。
3. 环境中细菌采样培养1)空气培养将培养皿打开暴露于空气中,20分钟后盖好平皿盖儿2)流通纸币(或硬币)的细菌采样培养将硬币正反面分别在培养基上充分接触3)采样结束后,将培养皿底部朝上放入铁丝筐,统一置培养箱:37℃18-24小时4. A、B、C菌鉴定(革兰氏染色法)1). 细菌涂片制备程序:(1)取一干净玻片,火焰上方缓缓通过三次去油(2)蜡笔画线将玻片分割为A、B、C三区域(3)接种环取生理盐水分别滴入A、B两区域各一滴(4)分别取少许A、B 、C菌,与生理盐水充分混匀成菌液,风干后形成菌膜(5)固定(火焰上方缓缓通过三次)(6)革兰氏染色(7)滤纸吸干水分,油镜观察2). 革兰氏染色:(1)细菌涂片、火焰固定(2)结晶紫初染1min(3)卢戈氏碘液媒染1min(4)95%乙醇脱色30-40s(5)沙黄复染1min五、实验结果A:G+,球菌,推测为金黄色葡萄球菌;B:G-,短杆菌,推测为大肠杆菌;六、思考与讨论1.影响革兰氏染色的因素:(1)细菌本身因素:菌龄:如果菌龄太大,可能出现假阴性(2)操作因素涂片:取菌应适量,涂片要均匀,如果某个部分菌层太厚,可能在脱色时达不到,会导致局部假阳性固定:固定温度太高或时间太长都会导致细菌结构破坏而出现假阴性;但是固定不够,细菌会在水洗时被冲掉初染:初染时间虽然说是1分钟,但是可以适当延长,时间太短会出现假阴性;染色滴加不均匀可能出现半阴半阳媒染:和初染一样脱色:脱色时间不能过长,基本上用酒精滴过之后马上水冲就可以了,否则容易出现假阴性复染:复染时间需足够长,否则可能会染不上消毒灭菌一、实验目的1. 了解实验室常用消毒灭菌方法及其原理2. 掌握实验中所用仪器的使用方法3. 掌握机体常见部位及环境中的细菌培养物的初步鉴定4. 强化革兰氏染色技能二、实验原理1.口咽部及皮肤正常菌群鼻咽部及扁桃体:葡萄球菌、类白喉杆菌、肺链、溶血及非溶血性链球菌、奈瑟菌等口腔:链球菌多见、放线菌、螺旋体、G-杆菌等皮肤:表皮葡萄球菌、丙酸杆菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌2.溶血类型α溶血:现象:草绿色溶血环常见菌种:机会致病菌(甲链、肺链)原理:细菌产生过氧化氢将血红蛋白氧化成深绿色的高铁血红蛋白β溶血:现象:透明溶血环常见菌种:致病菌(乙链)原理:细菌释放溶血素使红细胞破裂,血红蛋白释放三、实验材料咽拭子培养物:1套/人;空气、纸币、手指消毒前后培养物:1套/2;载玻片:1片/人;NS:1支/人;滤纸:1张/人四、实验内容1. 常用消毒灭菌方法:(示教讲解)1).热力灭菌:(1)干热灭菌法:焚化、烧灼、干烤(160 ℃,2小时)(2)湿热灭菌法:煮沸(2%Na2CO3,105 ℃);高压蒸汽灭菌(103.4kPa,20分钟,121℃,临床运用最广的灭菌方法)2). 紫外线(Ultraviolet radiation):波长265nm-266nm(DNA吸收光谱)杀菌能力最强。
紫外光穿透力差,一般只用于不耐热物品表面的消毒。
3). 过滤(filtration)用物理阻流的方法除去液体或空气中的细菌,用于不耐热物质的灭菌(血清、毒素、抗生素等)滤菌器:薄膜滤菌器、玻璃滤菌器、石棉滤菌器、素陶瓷滤菌器4). 低温保存菌种(冷冻真空干燥法)70-75%乙醇洁净台消毒:来苏水擦拭防腐剂:三氯甲烷、硫柳汞、叠氮钠2.细菌分布结果鉴定1)观察菌落2)取部分菌落的细菌进行革兰氏染色并观察五、实验结果1. 咽部正常菌群的采样、培养结果:在羊血培养皿上出现四种菌落:(1)数目多,划线沿线都有;针尖大小;无色、光滑、湿润、透明、圆形。
周围出现草绿色溶血环,发生了不完全溶血即α溶血。
(2)数目较多,划线沿线都有;较小;乳白色、光滑、湿润、半透明、圆形。
(3)少,只出现在四个点;中型;乳黄色、光滑、半湿润、不透明、形状不规则。
在此种菌落下方的培养基出现了透明溶血环,发生了完全溶血即β溶血。
(4)1个菌落;较大;乳白色、光滑、湿润、半透明、圆形。
粘稠。
取(1)、(2)、(3)进行革兰氏染色,结果如下;(1)G+,链球菌,根据不完全溶血推断,为甲型链球菌。
(2)G-,球菌,细胞个体小,形状像金黄色葡萄球菌,但是染色为阴性。
(3)G-,球菌。
2. 手指消毒前后细菌的采样培养结果:1)消毒前:仅出现2个菌落,较小;乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形。
革兰氏染色结果:G-,杆菌2)消毒后:无菌落出现。
3. 硬币正反面的细菌采样培养结果:1)正面三种菌落:(1)13个菌落;较小;乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形。
和手指消毒前的菌落一样。
(2)1个菌落;较大;白色、光滑、湿润、近似圆形。
(3)5个菌落;较大;中央乳黄色边缘颜色变浅、光滑、湿润、中间凸、不规则、边缘光滑取其中(2)、(3)进行革兰氏染色,结果如下:(2)G-,杆菌。
和手指消毒前的细菌一样(3)G-,链杆菌。
形态较大,形状像炭疽芽胞杆菌,但是没有芽孢且染色为阴性。
2)反面两种菌落:(1)2个;较大,乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形。
(2)多个,沿硬币边缘线连成一片;针尖大小、无色、光滑、湿润、透明。
4. 空气培养结果平皿敞开在实验室的窗台上放置了约20分钟,当时阳光照在上面:平皿出现了五种菌落:(1)11个;中等大小;白色、光滑、湿润、半透明、圆形(2)2个;较大;周围白色,中间有一个透明圈,光滑、湿润、中间凹的圆饼状(3)1个;较大;周围黄色,中间有一个透明的圆形区域,半湿润、没有光泽(4)1个;较大;边缘橘黄色,中央偏白、明显凸起、干燥、形状不规则(5)1个;较大;边缘透明,中央乳黄色,光滑、湿润、半透明、圆形取其中(3)、(4)进行革兰氏染色,结果如下:(3)G-,杆菌。