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高效液相色谱法测定当归补血汤中阿魏酸的含量王宏洁 沈 欣 杨健 杨桦 边宝林(中国中医研究院中药研究所 北京 100700)郭续林(北京医科大学应用药物研究所 100832)摘要 以高效液相色谱法对当归补血汤中阿魏酸进行了含量测定,同时对阿魏酸在汤剂中的稳定条件及提取分离方法进行了比较研究。
关键词 高效液相色谱 当归补血汤 阿魏酸Determination of Ferulic Acid in Danggui Buxue Decoction by HPLCW ang H ongj ie,Shen X in,Yang J ian,Yang H ua,B ian Baolin(I nstitute of Chinese M ateria M edica,China Academy of TCM,Beij ing,100700)Guo X ulin(Ap p lied P harmaceutical Research I nstitute,B eij ing Medical Univ ersity,B eij ing,100832)Abstract:T he contents of ferulic acid in Dangg ui Bux ue decoction w ere determined by HPLC.Stability conditions and ex tracting m ethods o f ferulic acid in the decoction w ere stud-ied.Key words:HPLC,Dang gui Bux ue decoctio n,ferulic acid 当归补血汤始载于《内外伤辨惑论》,是著名的补气生血方。
主治劳倦内伤,气弱血虚,阳浮外越。
本方由黄芪、当归2味药组成。
阿魏酸作为当归有效成分之一,曾对其进行过不同产地等方面的含量测定研究[1,2]。
高效液相色谱法测定当归养血丸中阿魏酸含量何玲玲【摘要】Objective: To establish a method for the content determination of Perlic acid in Angelica nourishing Pills by HPLC. Methods: The Hypersil C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) column was used. The mobile phases consisted of methanol and acetic acid (25:75), the flow rate was 1.0 ml/min and the detection wavelength was at 321 run. The column temperature was 25℃. Results: The linear ranges of Perlic acid was at 0.025-1.200 mg (γ=0.999 8), the average recovery was 98.69％ with a RSD of 0.96％. Conclusion: The method is fast, reliable, accurate and can be used in the quality control of Perlic acid in Angelica nourishing Pills.%目的:建立高效液相法测定当归养血丸中阿魏酸含量的方法.方法:采用Hypersil C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-1.0%冰醋酸溶液(25:75);检测波长:321 nm;流速:1.0 ml/min;柱温:25℃.结果:阿魏酸在0.025～1.200 mg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为98.69%,RSD=0.96%.结论:本方法简便、准确、重现性好.可用于当归养血丸中阿魏酸的质量控制.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2011(008)003【总页数】3页(P60-62)【关键词】高效液相色谱法;当归养血丸;阿魏酸;含量测定【作者】何玲玲【作者单位】广东省佛山市中医院,广东佛山,528000【正文语种】中文【中图分类】R927.2根据《中国药典》2005年版一部[1]中收载，当归养血丸主要是由当归、白芍、黄芪和地黄等10味药物组成。
高效液相法测定当归补血丸中阿魏酸含量摘要目的建立高效液相法（HPLC）测定当归补血丸中阿魏酸含量的方法。
方法采用HPLC测定当归补血丸中的阿魏酸含量，C18柱：4.6 mm×250 mm，5 μm；流动相采用甲醇-1.0%冰醋酸溶液。
结果阿魏酸在5.00～80.00 ?g/ml浓度范围与峰面积具有良好的线性关系（r=0.9998），回收率为98.86%，RSD=1.13%。
结论采用HPLC测定当归补血丸中的阿魏酸含量具有简便、准确和灵敏的优势，可用于对当归补血丸进行质量控制。
关键词当归补血丸；高效液相法；阿魏酸当归养血丸主要是由当归、黄芪、白芍与地黄等10味中药组成，具有养血、益气与调经等功效，临床上多用于治疗月经不调、气血两虚等疾病，并且可获得满意的疗效。
2005年版《中国药典》法定标准钟仅对当归显微鉴别项目、丹皮薄层鉴别方法进行了收录，这对药品的生产与使用质量造成一定的限制[1]。
基于此，本研究参考相关文献，对高效液相法测定当归补血丸中阿魏酸含量方法的建立进行了研究，借以更好的控制药物的质量。
1 仪器与试剂1. 1 仪器高效液相色谱仪，型号为Thermo fisher U3000，以及配套工作站（包括紫外与荧光检测器等）；生产厂家：Thermo fisher；C18柱：4.6 mm×250 mm，5 ?m；电子分析天平，精密度为0.0001；紫外可见分光光度计，型号为TU-1900。
1. 2 试剂甲醇，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
阿魏酸对照品生产批号为20131015，生产厂家：中国药品生物制品检定所；当归养血丸源于市场销售同一生产厂家，生产批号为140306、140501、140701、140901、141101。
2 方法与结果2. 1 色谱条件选择采用HPLC高效液相色谱法对当归补血丸中的阿魏酸含量，C18柱：4.6 mm×250 mm，5 ?m；流动相采用甲醇-1.0%冰醋酸溶液，比例为25：75；检测波长为：320 mm；柱温：25℃；流速1.0 ml/min。
高效液相色谱法测定丹参益坤口服液中芍药苷和阿魏酸陈艳梅【摘要】Objective To establish HPLC method for the determination of paeoniflorin and ferulic acid in danshenyikunkoufurongye.Methods Using Eclipse Plus-C18 Agilengt chromatography column, mobile phase: acetonitrile-methanol-5% phosphoric acid (5∶40∶55).The flow rate was1.0 ml/min;detection wavelength 320 nm, external standard method quantitative.Results Paeoniflorin in 0.163～3.264 μg(r=0.999 9), the average recovery rate was 98.26%, RSD=0.13% (n=6).Ferulic acid in 0.046 8～0.936 μg (r=0.999 9), the average recovery rate was 97.91%, RSD=0.54% (n=6).Conclusion The method is simple, sensitive and accurate.It can be used to control the quality of Salvia miltiorrhiza oral solution.%目的了解测定丹参益坤口服液中芍药苷和阿魏酸含量的方法.方法采Thermo Scientific-C18色谱柱,流动相:乙腈-甲醇-5%磷酸(5∶40∶55);流速:1.0 ml/min;检测波长230 nm,外标法定量.结果芍药苷在0.163～3.264 μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为98.26%,RSD=0.13%(n=6);阿魏酸在0.046 8～0.936 0 μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为97.91%,RSD=0.54%(n=6).结论该方法简便易行,有较高灵敏度,结果准确,可以用于丹参益坤口服液的质量控制.【期刊名称】《河南职工医学院学报》【年(卷),期】2017(029)003【总页数】3页(P265-267)【关键词】丹参益坤口服液;芍药苷;阿魏酸;HPLC【作者】陈艳梅【作者单位】商丘市食品药品检验检测中心,河南商丘 476000【正文语种】中文【中图分类】R286.0丹参益坤口服液[1]为河南省商丘市柘城县人民医院的医院制剂，临床应用已数十年，具有消炎止痛、活血化瘀之功效，用于慢性盆腔炎，输卵管梗阻等症，疗效显著。
高效液相色谱法测定当归补血汤分煎液与合煎液中阿魏酸含量梁光义;徐必学;李霞;曹佩雪
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2003(025)002
【摘要】目的:比较当归补血汤(当归,黄芪)分煎液与合煎液中阿魏酸含量.方法:采用Hypersil C18,以甲醇-0.05%乙酸(45:55)为流动相,在324nm波长处测定.结果:分煎液阿魏液平均回收率为100.86%,RSD=2.33%;合煎液阿魏酸平均回收率为101.37%,RSD=1.52%.结论:合煎液中阿魏酸含量高于分煎液.
【总页数】3页(P146-148)
【作者】梁光义;徐必学;李霞;曹佩雪
【作者单位】贵州省、中国科学院天然产物化学重点实验室,贵州,贵阳,550002;贵州省宏宇药业有限公司,贵州,贵阳,550002;贵州省宏宇药业有限公司,贵州,贵
阳,550002;贵州省、中国科学院天然产物化学重点实验室,贵州,贵阳,550002【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定生化汤协定方代煎液中游离阿魏酸和总阿魏酸的含量 [J], 汪怡
2.黄芩汤分煎液与合煎液中黄芩苷、芍药苷和甘草酸含量的比较 [J], 陈建真;吕圭源;罗小敏;叶磊;陈建明
3.补阳还五汤共煎液与单煎混合液中芍药苷、阿魏酸含量比较 [J], 朱伟;丘小惠;阮
新民
4.当归六黄汤分煎与合煎样品中阿魏酸含量的比较 [J], 钟正灵;梁光义;张丽艳;靳凤云;曹佩雪;杨玉琴
5.丹栀逍遥散分煎液和合煎液中芍药苷变化分析 [J], 张茜;李吉锋;周慕荣;白毕艳;韩新;初日
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高效液相色谱法测定当归中阿魏酸的含量陈超超1*，王艳2，梁超21. 成都中医药大学药学院，四川成都（610075）2. 天津中医药大学药学院，天津 (300193）摘要:目的：建立了一种高效液相色谱法测定当归中阿魏酸的含量。
方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为TIANHE C18 (250 mm×4.6 mm,5 um)，以甲醇-水-冰醋酸（40:60:0.5）为流动相，流速为1 mL·min-1，检测波长为320 nm。
结果：阿魏酸在0.036～0.216 ug范围内，线形关系良好（r=0.9999），平均回收率为101.4%（n=5），RSD为0.76%。
结论：该方法测定阿魏酸含量简便、快捷、准确，是一种较好的分析方法。
关键词：高效液相色谱法；当归；阿魏酸；含量测定中图分类号：R284.1 文献标识码：A当归是一种常用中药材，始载于《神农本草经》，为伞形科植物当归Angelica sinensis （Oliv.）Diels的干燥根，属多年生草本植物，主产于甘肃岷县、武都、漳县、成县、文县等地。
其性温，味甘、辛。
具有补血活血，调经止痛，润肠通便之功效。
可用于治疗血虚诸证，眩晕心悸、月经不调、经闭、痛经、崩漏、虚寒腹痛、肠燥便秘、风寒湿痹、跌打损伤等症[1]。
阿魏酸是当归中的重要药效成分。
其分子结构式见下图1。
现代研究表明，阿魏酸具有抗氧化和清除自由基、抗血栓、降血脂、防治冠心病、抗菌、抗病毒、抗病变和防癌等作用[2]。
因此，当归质量标准的控制通常选取阿魏酸成分的含量为定量指标。
目前,有关当归药材中阿魏酸成分的分析测定方法报道较多的有薄层层法、高效液相色谱法[3～5]等。
我们研究考察了不同的测试方法,结合实际情况,建立了一种高效液相色谱法(HPLC)测定当归中阿魏酸成分的含量。
本方法不仅操作简便、而且具有快速、灵敏、准确等特点，是一种较好的分析方法。
图1 阿魏酸分子结构式1. 材料与方法1.1仪器LabAlliance高效液相色谱仪，LabAlliance紫外检测器，LabAlliance空气泵，Anastar 色谱工作站。
高效液相色谱法测定补血液口服液中阿魏酸的含量【中图分类号】r286【文献标识码】a【文章编号】1672－3783(2011)08－0358－01
【摘要】目的建立补血口服液的含量测定方法。
方法：采用高效液相色谱法对阿魏酸进行含量测定。
采用shimadzu vp-ods c18（4.6mm×250 mm,5μm）色谱柱；流动相：乙腈－甲醇－水（5：24：71）流速：1.0ml；检测波长：322nm，柱温30℃。
结果：阿魏酸在50.1ng～250.5ng范围内呈良好的线性关系(r=0.9999,n=5)。
加样回收率为98.7%，rsd=0.8%(n=9)。
结论：本方法操作简便、方便、准确，可用于补血液口服液的质量控制。
【关键词】补血液口服液；阿魏酸；高效液相色谱
补血液口服液是本市某医院的医院制剂，由当归、川芎、白术、黄芪等十四味制成的口服液，具有治疗气虚血亏，产后体虚，功能性子宫出血，再生障碍性贫血。
原质量标准简单，只有些检查项目，未收载含量的测定，为了更好的控制其质量，笔者建立了补血液口
服液的含量测定。
介绍如下。
1 仪器与试药
岛津 lc-20at 泵，spd-m20a检测器，sil-20a自动进样器，
lc-solμtion色谱工作站；阿魏酸对照品（中国药品生物制品检定所批号：110773-200611），补血液口服液由某医院提供，甲醇为色谱纯（manμfactμred by sk chemicals ulsan 680-160,korea），乙腈为色谱纯（manμfactμred by sk chemicals ulsan
680-160,korea），其它试剂均为分析纯，水为纯化水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件: 色谱柱为shimadzu vp-ods c18（4.6mm×250 mm,5μm）；流动相乙腈－甲醇－水（5：24：71）波长：322nm，柱温30℃，进样量为10μl.，理论塔板数按阿魏酸峰计算应不低于3000。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备取阿魏酸对照品6.26mg于50ml容量瓶中，加一定量的甲醇超声10分钟，取出放冷，定容到刻度，做为贮备液。
取贮备液2ml到10ml容量瓶中，定容至刻度，即得。
2.2.2 供试品溶液:取供试品5支混匀，精密量取10ml，用盐酸调ph值至1～2，置分液漏斗中，用乙酸乙酯30，30，20，20，15ml 提取，合并洗液，蒸干，用甲醇溶解置10ml量瓶中，定容至刻度，即得。
2.2.3 阴性对照溶液的制备:取缺当归、川芎的阴性样品10ml，用盐酸调ph值1～2，置分液漏斗中，用乙醚30，30，20，20，15ml 提取，合并洗液，蒸干，用甲醇溶解并定容10ml量瓶中，定容至刻度，即得。
2.3 专属性实验分别吸取2.2.1， 2.2.2及2.2.3项下的溶液各10μl,注入液相色谱中，记录色谱图，见图1.阿魏酸峰与其它组分峰分离良好，阴性对照无干扰。
2.4 线性关系考察:精密量取上述2.2.1的贮备液2ml置于25ml
棕色容量瓶中，并定容至刻度，摇匀。
分别进样5μl,10μl，15μl,20μl,25μl记录色谱峰面积。
以峰面积为纵坐标，以阿魏酸的重量为横坐标。
进行线性回归，得回归方程：y=5447.6x-500
r=0.9999。
结果表明，阿魏酸在50.1ng～250.5ng范围内呈良好的
线性关系。
2.5 精密度考察:分别吸取同一对照品溶液10μl，连续进样5次，依法测定，峰面积的rsd为0.3%，表明仪器精密度良好。
2.6 重复性试验:取同一批号样品溶液，精密量取5份，照供试品含量测定项下方法进行测定，rsd为 1.2%。
2.7 稳定性试验:精密吸取新配制的供试品溶液10μl，在0，2，4，6，12h进样，计算阿魏酸的峰面积rsd为0.9%，结果表明阿魏酸在12h内稳定。
2.8 加样回收试验:精密量取空白样品9份，分别加入1.0ml，2.0ml，
3.0ml浓度为0.1252mg/ml的阿魏酸对照品溶液，照供试品溶液制备测定项下制备并测定，计算回收率，加样回收率为98.7%，rsd=0.8%(n=9)
2.9 样品测定:分别精密量取10 ml样品溶液，照2.2.2项下方法，进行测定，计算样品中阿魏酸的含量，结果见表2
3 讨论
本实验采用了甲醇、乙醚、乙酸乙酯提取、用盐酸调ph值后再用乙醚或乙酸乙酯提取等多种提取方法。
最后确定为用盐酸调
ph(1～2)后再用乙醚提取，这种提取方法杂质少、较完全。
参考文献
［1］湖南省药检所起草的文件［s］
［2］刘伟,王洋.hplc法测定当归片中阿魏酸的含量［j］.黑龙江医药. 2011，?24(1)：9-10?
［3］莫亚雄1 , 杜利云.高效液相色谱法测定柏子养心片中阿
魏酸的含量［j］. 云南中医中药杂志.2011，32（1）：58-59。
