高效液相色谱法应用论文
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高效液相流动相中高氯酸的作用
研究
湘潭大学硕士学位论文 (2006年)
高氯酸应用于高效液相色谱分析是一种有效的方法,它能够有效地改
变分子的结构,使分子的极性降低,从而增强液相流动相(LC)中分
子的吸附程度。
然而,高氯酸的作用机制在目前仍有待研究和了解。
本文旨在研究高氯酸在高效液相流动相中的作用机制以及七水钴酸酯(SMP)在LC分析中的应用。
本文研究了增加高氯酸溶液中有机物极性的值,并使用离子液体来检
测极性增加的程度。
此外,我们还研究了诸如甲基黄嘌呤(DMP)
和乙基磺酸(HESA)的极性物质与高氯酸的相互作用,以及它们
的能量谈判。
最后,我们使用多种LC比较其中乙基磺酸的溶度。
结果
表明,随着高氯酸的增加,所有的极性物质的溶度都随之增加。
通过本文的研究,可以看出高氯酸可以有效地增加有机物在液相流动
相中的极性,从而提高其分子的吸附度,提高分离效果。
在此基础上,七水钴酸酯也可以有效地提高它们在 LC 中的吸附度。
综上所述,本文研究了高氯酸在高效液相色谱分析以及七水钴酸酯在 LC 分析中的应用,获得了较好的研究结果。
高效液相色谱及其在药物分析中的应用摘要:高效液相色谱法的发展非常迅猛,许许多多的新方法不断涌现,它具有分离效率高,选择性好,分析速度快,操作自动化和应用范围广的特点。
本文主要简单介绍高效液相色谱的知识及其在药物分析中的广泛应用,通过实例描述了高效液相色谱法的优点。
高效液相色谱(HPLC)是结合经典液相色谱及气相色谱的分离原理。
由于与气相色谱法相比,高效液相色谱法具有下列主要优点:①不受试样的挥发性和热稳定性的限制,应用范围广②可选用不同性质的各种溶剂作为流动相,而且流动相对分离的选择性有很大作用,因此分离选择性高;③一般在室温条件下进行分离,不需要高柱温。
因而广泛应用于生物化学,生物医学,石油化工,合成化学,环境监测,食品卫生,以及商检,法检和质检等许多分析检验部门。
高效液相色谱不仅仅是一种有力的分析工具,而且越益成为分离制备和纯化的手段。
液相色谱在国内和国外已被广泛地应用于药物分析,尤其在我国,近十几年来HPLC方法越来越受到重视。
中国药典1985年版才规定使用,该版只有8个品种规定使用HPLC方法检测,到了1995版达到113个品种,2000版药典的应用达到了282种,2005版仅药典一部的应用达到了479种,涉及518项;药典二部中采用高效液相色谱法的品种有848种,较2000年版增加了566次,其中复方制剂、杂质或辅料干扰因素多的品种多采用高效液相色谱法。
2010年药典则更多的用液相色谱法取代了某些药物含量测定的薄层法,并引入了各式各样的检测器。
由此可见,我国高效液相色谱法在药物分析中的重要性。
1. 高效液相色谱仪的进展高效液相色谱(HPLC)是20世纪70年代迅速发展起来的一种分离分析技术,是目前各种色谱模式中应用最广的一个领域。
据估计,世界上几百万种化合物中除20%宜用气相色谱(Gc)分离分析外,其余80%的化合物,包括大(高)分子化合物、离子型化合物、热不稳定化合物以及有生物活性的化合物都可以用不同模式的HPLC(正相HPLC、反相HPLC、离子交换色谱和离子色谱、体积排除色谱、亲合色谱等)进行分离分析。
高效液相色谱法同时测定甘草中甘草酸、甘草苷、异甘草素的含量【摘要】目的建立同时测定甘草中甘草酸、甘草苷和异甘草素含量的方法。
方法采用高效液相色谱法对甘草粉末的67%甲醇提取物进行分析。
用C18反相色谱柱,1%磷酸水-乙腈梯度洗脱,对不同色谱峰分别采用248、276、360、370 nm紫外波长检测。
结果甘草酸的回归方程为Y=1×106X+16 220,r2=1;甘草苷的回归方程为Y=2×106X+49 444,r2=0.999 5;异甘草素的回归方程为Y=1×107X+4.466 7,r2=1。
甘草酸、甘草苷和异甘草素的加样回收率分别为98.01%、102.63%、98.18%。
结论本方法准确、稳定、可靠,可用于甘草中甘草酸、甘草苷和异甘草素3种成分的同时测定。
【关键词】甘草;甘草酸;甘草苷;异甘草素;高效液相色谱法;含量测定Abstract:Objective To develop a HPLC quantitatively test method of glycyrrhizin, liquiritin and isoliquritigenin simultaneously for licorice. Methods The 67% methanol extracts of licorice powder were analyzed by reverse-phase HPLC on an ODS column, using a gradient elution with a mixture of 1% H3PO4 and acetonitrile. The eluate was monitored by UV absorption at 248, 276, 360 and 370 nm. Results The linear equation of glycyrrhizin was Y=1×106X+16 220, r2=1. The linear equation of liquiritin was Y=2×106X+49 444, r2=0.999 5. The linear equation of isoliquritigenin was Y=1×107X+4.466 7, r2=1. The recovery rate of glycyrrhizin, liquiritin and isoliquritigenin was98.01%, 102.63% and 98.18% respectively. Conclusion The method is accurate, stable amd reliable, and can be used to determine the three main chemical contents simultaneously.Key words:Licorice;glycyrrhizin;liquiritin;isoliquritigenin;HPLC;content determination在甘草质量研究中,建立稳定可靠的甘草多种成分含量测定非常必要。
高效液相色谱法测定卡介菌多糖核酸中苯酚残留量【摘要】目的采用高效液相色谱法测定卡介菌多糖核酸注射液中苯酚的残留量。
方法色谱柱c18ods柱(250×4.6mm,5μm)。
流动相:水-甲醇(50:50v/v),流速为1ml·min-1270nm,柱温为25℃;进样量:10μl。
结果在5μg/ml-25μg/ml间,苯酚峰面积与浓度的线性方程为y=9.2766x-0.3115(r=0.9994),线性关系良好,检测限为0.04μg/ml,且卡介菌多糖核酸中苯酚能得到良好分离,重现性好。
结论本方法快速简单,结果准确,灵敏度高,且无污染。
【关键词】高效液相色谱;苯酚;卡介菌多糖核酸卡介菌多糖核酸(bcg-psn)是采用热酚法去除蛋白质,研制成的新一代卡介菌提取物,临床上广泛用于预防和治疗感冒、哮喘、慢性气管炎、病毒感染性疾病、自身免疫性疾病[1]该疫苗在制备过程中,使用有机溶剂苯酚。
苯酚是最简单的酚,为无色固体,有特殊气味,呈酸性,早期用气相色谱法或溴化容量法可分别测定各种酚类,由于操作过程繁琐,应用受到一定限制。
本文根据《中国药典》三部(2010版)对生物制品的质量控制要求[2][3]1 材料与方法1.1 药品与试剂卡介菌多糖核酸注射液、苯酚、无水乙醇、甲醇。
1.2 主要仪器高效液相色谱仪、电子天平、超声仪。
1.3 溶液制备1.3.1 对照品溶液取苯酚适量,精密称定。
置200ml量瓶中,加乙醇溶解并稀释定容,摇匀,作为对照品储备液。
分别精密量取储备液适量,加乙醇稀释为0-20μg/ml浓度的线性对照溶液。
1.3.2 供试品溶液精密取卡介菌多糖核酸注射液0.5ml,置2ml 离心管中,加乙醇1ml,超声5分钟,16000rpm离心5分钟,精密量取上清液作为供试品溶液。
1.4 色谱条件色谱柱c18ods柱(250×4.6mm,5μm)。
流动相:水-甲醇(50:50v/v),流速为1ml·min-1波长为270nm,柱温为25℃;进样量:10μl。
《液相色谱技术进行食品安全检验思考》1液相色谱技术进行食品安全检验的几点思考1.1实现对食品营养成分的检验一般情况下,液相色谱技术以高效液相色谱法为主,可对食品样品中的营养成分进行研究和鉴别,对食品中所含有营养成分的类型、含量等进行具体的分析,对营养成分进行明确的把握。
人体所需的蛋白质、脂肪酸、维生素、微量元素等都可利用液相色谱仪检测出来,进而对食品中所含成分的质量进行鉴定,以提高营养成分含量的科学性与合理性。
利用液相色谱技术进行食品营养成分的检验,其精确度相对较高,速度快、效率高,在脂溶性维生素含量低的食品检验中效果最佳,例如水果。
1.2实现对食品添加剂的检验对于食品安全问题来说,食品添加剂的检验也至关重要。
一些厂家为了提高食品的口味、延长食品的保质期,加入了过多的食品添加剂,改善了食品的口味和色泽,达到了防腐的目的,但是其中所含有的食品添加剂也会对人体健康构成威胁,注重对食品添加剂的检验也是保证食品安全的一项重要课题。
在食品安全领域,已经出现了多种利用液相色谱技术来进行食品检验的方式,可利用高效液相色谱技术实现对多种添加剂的分析和检验,像苯甲酸、山梨酸、糖精钠等主要的食品添加剂成分。
在进行高效液相色谱技术进行食品检验时,流动相可为乙腈-6%乙酸溶液,然后进行梯度洗脱环节,对其波长进行检测,18种添加剂的波长、线性指数在合理的范围内,线性系数高于0.99,标准差规定在2.44%-11.6%之间。
该过程操作相对简单,效率高,且仪器检测的精确度也非常高,在食品安全检验中取得了满意的效果。
1.3实现对残留农药的检验农药残留是导致食品安全问题频繁出现的主要原因之一。
如今,人们生活水平的提高,对食品的要求也越来越高,种植户为了获取更高的利益,满足消费者对食品的需求,喷洒大量的农药,导致农药残留现象的发生,对人们的身体健康构成了严重的威胁,食物中毒成为多见病、常见病。
为了更好的保证食品安全,应利用液相色谱技术对食品中所残留的农药成分进行检测,一旦发现立即切断食品供应来源。
武汉轻工大学毕业论文论文题目:鸡血浆中氟苯尼考的高效液相色谱检测方法Development of a HPLC for determinationof florfenicol in chicken plasma姓名:吕阳学号: 110703112院(系)动物科学与营养工程学院专业动物生物技术指导教师刘宇2015年6月1日目录摘要 (1)Abstract (2)第一章绪论 (3)1氟苯尼考的研究进展 (3)1.1氟苯尼考的药品信息 (3)1.2氟苯尼考的临床应用 (4)1.3氟苯尼考的检测方法 ..................................................... 错误!未定义书签。
2研究目的与意义 ....................................................................... 错误!未定义书签。
3研究内容 (6)第二章试验研究 ............................................................................. 错误!未定义书签。
1 材料与方法 .............................................................................. 错误!未定义书签。
1.1试验材料 ......................................................................... 错误!未定义书签。
1.2试验动物 ......................................................................... 错误!未定义书签。
1.3试验方法 (7)2 结果与计算 (8)2.1波长选取 (8)2.1工作曲线 (10)2.2回收率与精密度 ............................................................. 错误!未定义书签。
高效液相色谱法应用论文
【摘要】目的:探究高效液相色谱法在药物分析中的实际应用。
方法:研究高效液相色谱法在药物分析中的特点及其在药物成分中的
测定。结果:高效液相色谱法在药物分析中的应用范围较广泛,取得
了良好的效果。结论:高效液相色谱法拥有灵敏度高、专属性强等优
势特征,在药物分析领域内具有广阔的应用发展前景。
【关键词】高效液相色谱法;药物分析;应用;分离;药物成分
高效液相色谱法是一种发展于上世纪70年代的快速、高效分析分
离技术【1】。该方法通常以液体溶剂充当流动相,并密切结合气相色
谱法和液相色谱法分析分离的基本原理,具有见效快、高灵敏度、速
度快等优势特征。相较于气相色谱法,液相色谱法仅试剂制作成溶液
即可,而忽略了气化过程,所以,并不受到试剂挥发作用的影响和制
约。该方法也用作分析分离沸点高、热稳定性能低、相对分子质量较
大的有机物。本文主要研究高效液相色谱法在药物分析中的特点及其
在药物成分中的测定。
1高效液相色谱法在药物分析中的应用
1.1抗生素分析 抗生素通常是由微生物及其他办法所产生的一
种化学物质,在高度稀释的条件下依然具备抑制及消灭微生物的基本
功能。对抗生素进行分析、分离及定量检测是药物分析中难度较大的
领域,较普遍用到的办法为化学方法、分光光度法及微生物法等,然
而,这三类方法的弊端在于耗费时间较长、专一性欠佳【2】。目前运
用在临床中的一类酯类抗生素——阿奇霉素具备较广泛的抗菌谱,有
助于抑制流感嗜血杆菌、黏膜炎莫拉菌及肺炎链球菌等。在酸性条件
下,阿奇霉素的平稳性仍然较高,具备生物应用程度高、半衰期长及
吸收性优良的特征。据科学检测,PH值对分离阿奇霉素的影响较大,
在PH11左右的环境中拥有较显著的分离效果。高效液相色谱法具有
分析时长较少、流动相耗费少及质谱联用的特征,在阿奇霉素的检测
领域有着可靠的应用优势,通常所选的检测波长为215nm,在<5min
的时间段内即可使阿奇霉素完成基线分离,有效地节省了分析时间。
将该方法用到分析注射液及尿液中的阿奇霉素,效果显著。
1.2天然药物分析 天然药物源自植物、矿物质及动物,又以植物
类为主,因天然药物的化学组分相对多样化,其有效组分从一个到多
个不等,给维持药品自身的质量,建立相应的质量评估标准带来了不
小的困难。高效液相色谱法可经由分离检验天然药物的组分,进而检
测有效组分的具体含量。作为芸香科植物门的一类果实,吴茱萸具有
温脾止泻、温胃止吐的临床疗效,其水提取液内包含固定量的游离氨
基酸。在检测该游离氨基酸时,可运用高效液相色谱法,在室温环境
下将水-甲醇充当流动相,进而敏锐地检测含量【3】。
1.3天然药物及复方成药分析 增免扶正片是由党参、黄芪及当归
等十余类天然药物磨制而成,拥有活血养血、健脾开胃及益气生津的
临床效果,对于防衰老、抵抗疲惫及缺氧有着独特的作用,长时间服
用可增强机体的免疫力,强健体魄,延年益寿。该药对于肾虚、心脑
血管病、脂肪肝、慢性肝炎等有着较理想的预防效果。要检测包含当
归的复方制剂增免扶正片内阿魏酸的具体含量,可将柱温保持25℃、
检测的波长定位313nm,该办法简便易于操作,敏锐度较高【4】,重
复特性较佳,起效快。因化学药品的开发成本较高,毒副作用较大,
因此,近年来,人们更加关注植物药、草药、医药等天然类药物,纵
观全球药品市场,天然类药品的数量已达30%,高效液相色谱法必定
能为国家传统的中医药产品迈进现代化轨道、开辟国际市场提供强大
的技术支撑。
1.4高效液相色谱法在药物鉴别中的应用 在高效液相色谱法中,
药物组成成分的留存时长与其自身的性质及结构密切相连,药物不
同,因性质及结构的差异而在色谱图上的出峰顺序也各异,以此作为
定性的关键参数,并运用在药物鉴别中。通常情形下,在记录含量检
测项目的色谱图中,试品溶液主峰的保留时间需同对照品溶液主峰的
保留时间相同。
2高效液相色谱法在药物成分测定的应用
2.1药物残留测定 高效液相色谱法可对含量相对复杂的成分加
以定量分析,所以,该方法被普遍地运用到药物残留的检测之中【5】。
例如,利用高效液相色谱法检测尿液及血浆内的异烟肼时,以香草醛
充当衍生化试剂,把异烟肼经柱前衍生作为香草醛腙,并对处理之后
样品内的腙完成定量、定性分析,该办法精确、迅速,特别运用在药
物浓度的监测之中,具有较理想的应用价值。
2.2药物成分含量测定 运用高效液相色谱法检测合成药物及其
制剂的具体含量,可消除药物内的各种杂质,排除制剂内的附加剂及
共存药物对检测的影响。中药材及其制剂的组成成分相对复杂,对其
有效成分含量的检测也更多地运用到高效液相色谱法。另外,该方法
在农业药物的检测及药物代谢动力学等诸领域的研究也有着重要的
借鉴作用。
3讨论
综上所述,高效液相色谱法是当代分离检测的关键技术手段,因
其具备灵敏度高、简便快捷、专属性较强、分析速率快、分离效率较
高、检测自动化、运用范围较广泛、样品处理简易化等诸多优势,在
医药领域内必将拥有广阔的前景。在今后,该方法与其他技术的联合
应用必将成为必然,为药物分析走向正规化、精确化提供强有力的技
术支持。
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