脑膜炎奈瑟氏菌及其检测方法

疾病名：脑膜炎奈瑟菌肺炎英文名：neisseria meningitidis pneumonia缩写：别名：脑膜炎萘瑟氏菌肺炎；脑膜炎双球菌肺炎疾病代码：ICD：A39.8概述：脑膜炎奈瑟菌(neisseria meningitidis)主要引起流行性脑脊髓膜炎，至于脑膜炎奈瑟菌肺炎，有不少人认为是继发于脑膜炎奈瑟菌败血症的一种少见的化脓性迁徙合并症。

实际上，1907 年首次报告后，已有许多资料表明脑膜炎奈瑟菌可作为原发性下呼吸道感染的致病菌，引起原发性脑膜炎奈瑟菌肺炎。

该菌又称脑膜炎双球菌，为需氧革兰阴性球菌，普通培养基上不生长，选择性培养基利于痰标本中脑膜炎奈瑟菌的分离和鉴定。

根据菌体荚膜层的多糖，目前至少可分 13 种血清型。

其中A.B.C.X.Y.Z 和W-135 型在临床上日趋重要。

据统计资料分析，过去 10 余年中在普通人群及医院内人群中，引起呼吸系统感染的血清型为Y 型和W-135 型，其传播途径主要通过飞沫直接从空气传播，呼吸道感染了流感病毒或腺病毒的人群更具有易感性。

其病理改变为渗出性化脓性炎症，沿肺泡或支气管肺泡分布，个别呈大叶浸润甚至肺组织坏死和脓肿形成。

流行病学：人类是惟一的传染源，病原菌存在于患者或带菌者的鼻咽部，带菌者对周围人群的危险性大于病人。

在非流行期间人群带菌率不到 5%，但最近有资料认为人群带菌率可高达5%～15%。

在流行期间人群带菌率显著增高，可达50%~ 100%。

在年青人集中的人群中如军队、学校等处，脑膜炎奈瑟菌感染极易引起流行。

脑膜炎奈瑟菌所致呼吸系疾病是在本世纪初被认识的，尤其是在1918～1919 年流感流行期间，脑膜炎奈瑟菌是重要的呼吸道病原菌。

此后，由脑膜炎奈瑟菌引起的肺炎很少有报道。

直至70 年代，随着细菌检测技术的进步，有关脑膜炎奈瑟菌肺炎的报道才不断增多，如Y 型脑膜炎奈瑟菌肺炎曾在某军事基地有过暴发流行。

据统计资料分析，过去 10 余年中，在普通人群及医院内人群中，引起呼吸系统感染的血清型为Y 型和W-I35 型，其传播途径主要通过飞沫直接从空气传播。

附件7 脑膜炎奈瑟菌实验室检测操作规范一、脑膜炎奈瑟菌鉴定程序和标准1、 脑膜炎奈瑟菌细菌鉴定程序脑膜炎奈瑟菌的鉴定通常是通过在CAP 和BAP 上生长物通过革兰染色镜检和生化反应检测以确定是否为脑膜炎奈瑟菌，在此基础上再通过脑膜炎奈瑟菌分群诊断血清进行血清分群。

图xx 脑膜炎奈瑟菌鉴定程序2、 脑膜炎奈瑟菌感染确诊实验室检测疑似流脑病例具有以下实验室检测结果之一，即可确诊：1. 培养：自脑脊液或血液标本中分离到脑膜炎奈瑟菌。

2. 乳胶凝集检测：采用乳胶凝集检测试剂盒，脑脊液标本乳胶凝集检测结果BAP,CAP 生长物革兰氏染色为阴性双球菌氧化酶反应阳性，进行生化鉴定 阴性，非脑膜炎奈瑟生化鉴定（糖氧化）Glu Mal Lac Suc＋ ＋ － －阳性，为脑膜炎奈瑟菌进行血清分群 阴性，非脑膜炎奈瑟菌A 、B 、C 、H 、I 、K 、L 、W135、X 、Y 、Z 、Z ´(29E)不同血清群阳性，目前Bio-Rad乳胶凝集检测试剂盒能检测A群、B群、C群和W135/Y群脑膜炎奈瑟菌感染。

3.PCR检测：脑脊液标本或血液标本PCR扩增特异性脑膜炎奈瑟菌DNA 片段阳性。

通过ctrA基因扩增，鉴定脑膜炎奈瑟菌，通过扩增orf-2、sia D(B)、sia D(C)、sia D(Y)、sia D（W135）等基因片段鉴别不同的血清群，或通过Real-time PCR检测出特异性基因片段阳性。

4.血清IgG抗体滴度4倍增高：恢复期血清抗体滴度较急性期4倍增高。

二、脑膜炎奈瑟菌标本接种培养（一）脑脊液标本1．脑脊液标本预处理脑脊液标本送到实验室后，应立即离心，2000rpm，20min，用巴斯德吸管吸取上清，进行乳胶凝集实验检测抗原。

离心后的沉淀进行剧烈振荡或充分混合。

取1滴沉淀准备革兰染色，1滴划线接种原始培养基。

（注意:如果获得的脑脊液不足1mL则不进行离心，直接用其进行革兰染色和涂板培养）。

脑膜炎奈瑟菌肺炎（脑膜炎萘瑟氏菌肺炎，脑膜炎双球菌肺炎）简介脑膜炎奈瑟菌肺炎是一种由奈瑟菌（又称为萘瑟氏菌或双球菌）引起的感染疾病，通常表现为脑膜炎和肺炎症状。

奈瑟菌是一种革兰氏阴性细菌，可以引起严重的传染病，包括脑膜炎、败血症和肺炎等。

本文将介绍脑膜炎奈瑟菌肺炎的病因、临床表现、诊断和治疗等方面内容。

病因脑膜炎奈瑟菌是导致脑膜炎奈瑟菌肺炎的致病菌，主要通过空气飞沫传播，感染途径包括呼吸道、伤口或接触感染者的分泌物等。

奈瑟菌在一些特定人群中很常见，例如婴幼儿、老年人和免疫系统较差的个体更容易感染。

临床表现脑膜炎奈瑟菌肺炎的临床表现各异，主要症状包括高热、头痛、呼吸困难、嗓子痛、咳嗽、乏力、恶心呕吐等。

严重感染可能导致谵妄、昏迷，甚至危及生命。

诊断诊断脑膜炎奈瑟菌肺炎需要进行病史询问、体格检查和实验室检查。

其中，脑脊液检查、血液培养、呼吸道分泌物培养等是常用的诊断方法。

影像学检查如X射线、CT扫描等可帮助评估肺部是否受累。

治疗脑膜炎奈瑟菌肺炎的治疗主要包括抗生素治疗、对症治疗和支持疗法。

抗生素通常选择针对奈瑟菌有效的药物，如头孢哌酮/舒巴坦、大环内酯类药物等。

对症治疗包括降温、保持充分水分、控制呼吸等。

在重症患者中，可能需要进行呼吸机辅助通气或其他支持治疗。

预防预防脑膜炎奈瑟菌肺炎的措施包括接种疫苗、保持良好的个人卫生习惯、避免接触感染者的呼吸道分泌物、及时治疗感染等。

对于易感染群体，如老年人、儿童和免疫系统较差者，更需要加强预防措施。

结语总的来说，脑膜炎奈瑟菌肺炎是一种严重感染疾病，对治疗和预防都提出了挑战。

及时的诊断和治疗对于降低病情严重程度和减少并发症的发生至关重要。

公众应增强对该疾病的认识，尤其是在疫情期间要注意保持个人卫生，避免接触感染源，有效预防脑膜炎奈瑟菌肺炎的发生。

脑膜炎奈瑟菌体外敏感性试验第二次报告试验材料1.菌株来源：中国CDC送检的22株脑膜炎奈瑟菌，原始编号1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19，20，21，222.送检时间：2005年2月10日试验方法a)琼脂稀释法：严格按临床实验室标准化研究所〔CLSI/NCCLS〕2005年推荐的指南进行，培养基为含5%羊血的Mueller-Hinton 琼脂b)试验的抗生素种类：i.治疗用药组：青霉素，氨苄西林，头孢曲松，头孢噻肟，美洛培南，氯霉素，ii.预防用药组：阿奇霉素，米诺环素，环丙沙星，左氧氟沙星，TMPco(甲氧苄啶/磺胺甲恶唑)和利福平。

c)敏感性判定折点：2005年2月12日，通过Email从美国Teresa Stitely, Manager (Focus Bio-Inova,Inc.) 和CLSI/NCCLS委员Thomsons教授获得2005年CLSI/NCCLS推荐的脑膜炎奈瑟菌最新判定标准。

见表1表1. CLSI/NCCLS 2005年推荐的12种抗生素对脑膜炎奈瑟菌的判定折点（ug/ml）结果试验结果分两部分1.12种抗生素对22株脑膜炎奈瑟菌的体外抗菌活性，MIC试验结果见表2，2. 12种抗生素对22株脑膜炎奈瑟菌的MIC（ug/ml）分布的柱状图，见图形所示表2. 12种抗生素对22株脑膜炎奈瑟菌的体外抗菌活性结果抗生素判定折点耐药％中介％敏感％MIC50MIC90MIC(ug/ml)平均值MIC 范围(ug/ml)治疗用药组敏感≤耐药≥Penicillin G（青霉素G）0.06 0.5001000.0160.0320.0210.016 – 0.032 Ampicillin（氨苄西林）0.12 2001000.0160.0160.0170.016 – 0.032 Meropenem（美洛培南）0.25 －001000.0160.0160.0160.016 – 0.016 Ceftriaxone（头孢曲松）0.12 －001000.0160.0160.0160.016 - 0.016 Cefotaxime（头孢噻肟）0.12 －001000.0160.0160.0160.016 – 0.016 Chloramphenicol（氯霉素） 2 8001000.510.623.5 – 1预防用药组Minocycline（米诺环素） 2 －001000.1250.250.1510.125 - 0.25 Azithromycin(阿奇霉素) 2 －001000.0320.0320.030.016 – 0.25 Rifampin（利福平）0.5 2001000.0320.0640.0280.004 - 0.125 Levofloxacin (左氧氟沙星)0.032 0.12572.7027.30.250.250.1040.008 – 0.25 Ciprofloxacin（环丙沙星）0.032 0.12572.7027.30.1250.1250.0490.004 – 0.125 Trimethoprim/Sulfamethoxazol（甲氧苄啶/磺胺甲恶唑，TMPco）0.125 0.51000024 2.5820.5 - 128敏感耐药治疗用药敏感耐药治疗用药敏感不敏感治疗用药敏感不敏感治疗用药敏感耐药治疗用药敏感不敏感治疗用药预防用药敏感耐药敏感不敏感预防用药预防用药敏感不敏感敏感不敏感预防用药敏感耐药预防用药敏感耐药预防用药敏感不敏感敏感不敏感结 论中国CDC 送检的22株脑膜炎奈瑟菌体外敏感试验结果：按临床实验室标准化研究所(CLSI/NCCLS)推荐的治疗用药组和预防用药组进行分析总结：治疗用药组：青霉素，氨苄西林，美洛培南，头孢曲松，头孢噻肟和氯霉素，在体外表现出高度敏感，未发现耐药的菌株。

医院微生物室中枢神经系统感染病原体检验操作规程
l、标本采集以无菌方法采集脑脊液2～5ml，盛于无菌瓶中送检。

2、直接检查脑脊液可直接涂片、革兰染色或抗酸染色等，然后镜检。

无色透明的脑脊液，应作离心取沉淀物涂片、染色镜检。

3、检验步骤：
3.1、一般细菌涂片检查除结核性脑膜炎外，由其它细菌引起的化脓性脑膜炎，脑脊液明显混浊，可直接涂片，革兰染色镜检。

无色透明的脑脊液，应离心后涂片、染色、镜检，根据染色及形态特征可初步提示细菌的种类。

结核分枝杆菌涂片检查：取脑脊液的离心沉淀物(3000r／min。

30min)作抗酸染色。

新型隐球菌涂片检查：取脑脊液的离心沉淀物作墨汁负染色。

3.2、分离培养用接种环挑取混浊脑脊液或经离心沉淀的沉淀物，分别接种于血平板、巧克力平板，巧克力平板应置
- 1 -
于CO 2环境中35℃培养18～24小时。

脑脊液也可直接注入血培养瓶。

4、检验程序 脑脊液
直接涂片
分离培养 （取离心沉淀）
不染色标本 染色标本 血平板、巧克力 沙氏培养基 （5%CO 2环境） 血平板
动力试验 革兰染色 抗色染色
墨汁染色 脑膜炎奈瑟菌
脑膜炎奈瑟菌
A T
B Expression ATB 鉴定药敏试条 鉴定药敏试条
5、脑脊液培养常见病原菌
革兰阳性菌革兰阴性菌
金黄色葡萄球菌脑膜炎奈瑟菌
A、B群链球菌卡他布兰汉菌
肺炎链球菌流感嗜血杆菌
结核分支杆菌肠杆菌科菌种
产单核李斯特菌脑膜败血性黄杆菌
新型隐球菌假单胞菌
白色念珠菌
2。

流行性脑脊髓膜炎的病因治疗与预防流行性脑脊髓膜炎（epidemiccerebrospinalmeningitis）流脑是由脑膜炎双球菌引起的化脓性脑膜炎。

致病菌通过鼻咽侵入血液循环，形成败血症，最终局限于脑膜和脊髓膜，形成化脓性脑脊髓膜病变。

主要临床表现为发热、头痛、呕吐、皮肤瘀伤、颈部强直等脑膜刺激。

脑脊液呈化脓性变化。

1.脑膜炎球菌属于奈瑟氏菌，是革兰阴性球菌，呈卵圆形，常成对排列。

这种细菌只存在于人体内，可以从带菌者的鼻咽、患者的血液、脑脊液和皮肤瘀伤中检测出来。

脑脊液中的细菌在中性粒细胞中很常见，只有少数在细胞外。

普通培养基不易生长，在含有血液、血清、渗出物和卵黄液的培养基中生长良好，一般为5%～10%二氧化碳生长得更好。

这种细菌对寒冷、干燥和消毒剂非常敏感。

它很容易在体外死亡，细菌可以形成自己的溶解酶，所以它必须在收集标本后立即接种疫苗。

2、病原菌从鼻咽侵入人体。

如果人体免疫力强，可以迅速杀灭病原菌或成为带菌状态；如果体内缺乏特异性杀菌抗体或细菌毒性强，细菌可以从鼻咽粘膜进入血液，发展为败血症，进而累及脑脊髓膜，形成化脓性脑脊髓脑炎。

3.败血症期间，细菌经常侵入皮肤血管内壁，引起栓塞、坏死、出血和细胞浸润，导致瘀斑或瘀斑。

由于血栓形成、血小板减少或内毒素作用，内脏出血程度不同。

4.暴发性败血症是一种特殊类型，过去被称为华-佛氏综合征曾被认为是由双侧肾上腺皮质出血和坏死引起的急性肾上腺皮质衰竭。

已证明肾上腺皮质功能大多未衰竭，在发病机制中不起主要作用，脑膜炎球菌脂多糖内毒素可引起微循环障碍和内毒素性休克，进而导致播散性血管凝血（DIC）它的主要病理基础。

5.暴发性脑膜脑炎的发生和发展也与内毒素有关。

Ⅲ免疫球蛋白、补体和脑膜炎球菌抗原沉积也可能在发病机制中发挥一定作用，如免疫球蛋白、补体和脑膜炎球菌抗原沉积。

脑膜炎球菌主要引起隐性感染。

据统计，60%—70%.无症状带菌者约300%深呼吸感染和出血型%典型流脑病人的潜伏期为1-10天，一般为2-3天。