腹腔注射次黄嘌呤核苷酸对牙鲆非特异性免疫力的影响

第28卷第2期大连海洋大学学报Vol．28No．2 2013年4月JOURNAL OF DALIAN OCEAN UNIVERSITY Apr．2013文章编号：2095－1388（2013）02－0115－06复方中草药对大菱鲆非特异性免疫力的影响李华，张太娥，李强（大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室，辽宁大连116023）摘要：将牛膝、板蓝根、甘草、陈皮、肉桂、麦芽、神曲7味中草药，粉碎后经80目筛网过滤，按一定比例混匀，以2%、4%和6%的质量分数添加于基础饲料中连续投喂体质量为（29.00ʃ1.82）g的大菱鲆Scophthalmus maximus，对照组投喂不添加中草药的基础饲料，试验共进行28d，试验结束后测定大菱鲆的非特异性免疫指标及抗病力。

结果表明：在整个试验周期内，4%浓度组大菱鲆血清溶菌酶活力和抗菌活力均比对照组有显著升高（P＜0.05）；试验前2周4%和6%浓度组鱼血清抗蛋白酶活力较高，后2周2%浓度组鱼血清抗蛋白酶活力逐渐升高，并显著高于其他组（P＜0.05）；试验前3周4%浓度组鱼血清补体C3含量与对照组相比显著升高（P＜0.05）；在整个试验周期内，2%、4%、6%浓度组鱼血清NBT阳性细胞数与对照组相比均显著升高（P＜0.05），且4%和6%浓度组升高更为明显；在整个试验周期内，4%和6%浓度组头肾白细胞吞噬活性均呈现先降低后升高的趋势，均在第4周达到峰值，且显著高于对照组和2%浓度组（P＜0.05）；攻毒试验表明，各组的存活率从大到小依次为4%浓度组＞2%浓度组＞6%浓度组＞对照组。

本研究表明，该复方中草药可以显著提高大菱鲆的非特异性免疫力和抗病力，2%浓度组在一定水平上有促进作用，4%浓度组效果更为显著。

关键词：大菱鲆；复方中草药；非特异性免疫力；抗病力中图分类号：S941.42文献标志码：A大菱鲆Scophthalmus maximus是中国北方地区的主要海水养殖品种之一，随着养殖业不断向集约化、规模化发展，给鱼类疾病防治提出了新的课题。

中药调节非特异性免疫力对防控非洲猪瘟的意义作者：刘辉旺刘自逵毕小娟李想谭辉邹明媚来源：《国外畜牧学·猪与禽》2019年第08期摘 ;要：非洲猪瘟是当下威胁猪场的主要传染病，其多样化的传染源和复杂的传播途径给传统生物安全形成了巨大的挑战。

在传统生物安全基础之上，使用中药来调节动物非特异免疫力，进而保护易感动物已被行业重视并认可。

但目前缺乏非特异性免疫力与非洲猪瘟两者关系的研究以及非特异性免疫力改善关键评价的指标。

本文就中药对非特异性免疫的影响展开综述，发现中药可有效调节非特异性免疫力，对非洲猪瘟的防控具有积极意义。

关键词：中药;非特异性免疫力;非洲猪瘟中图分类号：S816 文献标志码：C 文章编号：1001-0769（2019）08-0084-02在非洲猪瘟流行大背景之下，传统生物安全强调控制传染源与切断传播途径，但这一方法在应对非洲猪瘟防控时面临一些不足与挑战，尤其是传统生物安全的实际效果很难进行直接量化评判，而非洲猪瘟复杂的传播路径则加重了猪场这一担忧！因此亟须对传统生物安全进行加固，同时对易感动物的保护也逐渐得到行业和猪场的重视。

但过去的近100年时间，西医在这方面没有取得有效进展，导致很多人对保护易感动物失去了信心！中国是全球最大的生猪供应国和消费国，猪肉是居民消费的主要肉类。

在中国多个省市相继发生非洲猪瘟疫情后，国家加大了对非洲猪瘟的研究力度，在加快疫苗研发的同时，也高度重视中兽药的研发。

中药之所以能保护易感动物，是因为它可以调节猪群的非特异性免疫力。

这种免疫力相对于使用疫苗等途径产生的特异性免疫力而言，它的作用更具有广泛性，而且对提高猪群疾病感染阈值也有积极意义。

那么非特异性免疫力与非洲猪瘟之间的关系、调控作用机理以及评价调控效果的关键指标有哪些？我们需要了解猪非特异性免疫力的组成，它主要由三道免疫防线组成。

黏膜屏障是第一道防护屏障，包括体表皮肤和体内黏膜（消化道黏膜、呼吸道黏膜和生殖道黏膜）。

硫唑嘌呤机制-回复硫唑嘌呤（Thiopurines）是一类用于治疗自身免疫性疾病、器官移植术后免疫抑制等疾病的药物，其代表性成员为硫唑嘌呤和6-巯基嘌呤。

硫唑嘌呤具有免疫抑制和抗炎作用，主要通过以下几个机制发挥其药理效应。

硫唑嘌呤机制一：抑制DNA合成硫唑嘌呤首先被转化为活性代谢物，包括6-巯基嘌呤核苷酸（TGNs）等。

TGNs可以与胞嘧啶核苷酸合成复合物，从而抑制DNA合成。

硫唑嘌呤与DNA中的胞嘧啶鸟嘌呤碱基形成共价连接，导致DNA链断裂，从而抑制DNA合成，尤其是T和B淋巴细胞的DNA合成。

此机制使硫唑嘌呤成为一种有效的免疫抑制剂。

硫唑嘌呤机制二：抑制嘌呤代谢酶硫唑嘌呤代谢主要通过丙戊酸环化酶和黄嘌呤磷酸化酶进行。

硫唑嘌呤通过抑制这些酶的活性，干扰嘌呤代谢途径。

具体而言，硫唑嘌呤可以抑制丙戊酸环化酶和黄嘌呤磷酸化酶的活性，阻断鸟苷酸和黄嘌呤酸之间的转化过程。

由于嘌呤核苷酸是DNA和RNA的重要组成部分，抑制嘌呤代谢酶将降低嘌呤核苷酸的合成和细胞的DNA、RNA合成，从而抑制免疫系统的活性。

硫唑嘌呤机制三：影响巯基嘌呤代谢硫唑嘌呤以6-巯基嘌呤的形式被导入细胞，然后被代谢成6-巯基鸟苷酸。

6-巯基鸟苷酸可以与蛋白质形成共价连接，从而影响蛋白质的功能。

此外，6-巯基鸟苷酸也可以抑制各种酶的活性，如DNA和RNA聚合酶，核糖体的形成以及DNA甲基转移酶的活性。

这些作用的整体效果将减弱免疫细胞的活性和抗炎反应。

硫唑嘌呤机制四：调节凋亡途径硫唑嘌呤还可以通过调节细胞凋亡途径来发挥其作用。

凋亡是一种重要的细胞死亡方式，对维持机体正常发育和免疫平衡具有举足轻重的作用。

硫唑嘌呤已被证明能够增加细胞死亡信号的传递和执行，促进损伤细胞的凋亡。

总结一下，硫唑嘌呤通过抑制DNA合成、嘌呤代谢酶活性、干扰巯基嘌呤代谢以及调节细胞凋亡途径来发挥其治疗效应。

这些机制使硫唑嘌呤成为一种有效的免疫抑制剂，被广泛应用于自身免疫性疾病、器官移植术后免疫抑制等疾病的治疗中。

黄连生物碱对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞的影响作者：周霞 彭耀宗 黄涛 李玲 牟绍霞 寇淑鸣 李学刚来源：《中国中药杂志》2015年第23期[摘要] 该文主要研究4种黄连生物碱对小鼠腹腔巨噬细胞的影响，初步探讨其调节机制。

MTT法检测黄连生物碱对巨噬细胞活力的影响；采用中性红实验和NBT法分别测定生物碱对巨噬细胞吞噬和呼吸爆发活性的影响；通过实时荧光定量PCR检测黄连生物碱处理后巨噬细胞呼吸爆发相关基因的表达量；用荧光分光光度计检测生物碱对巨噬细胞膜蛋白构象的影响。

结果显示，4种黄连生物碱对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能都有不同程度的提高，小檗碱效果最好；小檗碱、黄连碱和巴马汀对佛波酯（PMA）刺激的小鼠腹腔巨噬细胞呼吸爆发活性具有正向调节的作用，并且能够在一定程度上增加巨噬细胞中PKC，p40phox或p47phox mRNA 的表达量，而表小檗碱对呼吸爆发没有显著性影响；黄连生物碱能够改变巨噬细胞膜蛋白的构象，其中小檗碱作用最强。

结果表明黄连生物碱可能通过改变巨噬细胞膜蛋白构象从而激活巨噬细胞，增强其吞噬和呼吸爆发功能，而且，生物碱对巨噬细胞呼吸爆发的调节机制还可能与相关基因PKC，p40phox和p47phox mRNA的表达有关。

[关键词] 黄连；生物碱；巨噬细胞；吞噬；呼吸爆发黄连为毛莨科植物黄连Coptis chinesis Franch、三角叶黄连C. deltoidea C. Y. Cheng et Hisao或云连C. teeta Wall的干燥根茎，其作为常用中药，具有清热燥湿、泻火解毒的功效[1]。

生物碱是黄连的主要活性成分，主要包括小檗碱、黄连碱、巴马汀和表小檗碱等。

黄连具有抗菌[2]、降糖[3]、保肝[45]、镇痛[6]、抗肿瘤[7]、抗炎[8]等药效。

另外，有研究报道小檗碱可以增强小鼠的非特异性免疫反应，增强腹腔巨噬细胞吞噬白葡萄球菌的功能[9]。

黄连生物碱的结构类似，具有相似的药理活性，但对黄连其他生物碱的免疫作用及比较鲜有报道。

口腔执业医师基础知识：抗感染免疫机制导语：抗感染免疫是机体抵抗病原生物及其有害产物，以维持生理稳定的功能。

非特异性免疫机制的内容是什么?我们一起来看看吧。

抗感染免疫机制非特异性免疫(天然免疫)：屏障结构：1.皮肤与粘膜2.血脑屏障3.胎盘屏障吞噬细胞体液因素：1.补体2.溶菌酶3.防御素特异性免疫(获得性免疫)：1.体液免疫2.细胞免疫一、非特异性免疫机制(一)屏障结构1.皮肤与黏膜屏障：1.机械阻挡、纤毛运动等2.分泌杀菌物质3.菌群拮抗作用2.血脑屏障：软脑膜+脉络膜+脑毛细血管+星状胶质细胞3胎盘屏障：母体子宫内膜的基蜕膜+胎儿绒毛膜(二)吞噬作用吞噬细胞：1.大吞噬细胞：血液中单核细胞和组织中巨噬细胞2.小吞噬细胞：血液中中性粒细胞吞噬杀伤过程：趋化→接触→吞入→杀灭与消化→残渣排除杀伤机制1. 依氧杀菌机制①呼吸爆发(需分子氧参加)摄入细菌后，吞噬细胞(糖的分解、蛋白质合成、膜磷酸化、酶活性)均加强。

分子氧被还原为多种：1.活性氧中介物(ROI)：H2O2、O2-、OH-、O2等对细菌均有直接毒性作用(破坏细菌的DNA、蛋白质和膜脂类)2.活性氮中介物(RNI)：NO、NO2-、NO3-等②髓过氧化物酶(MPO):存在于溶酶体中，与H2O2及氯化物的共同参与，对细菌、真菌等具有强大杀伤活性。

2. 非依氧杀菌机制酸性作用：糖分解产酸而导致pH下降，抑制细菌生长而杀菌。

溶酶体酶及杀菌蛋白：溶酶体、乳铁蛋白、蛋白水解酶、核酸酶、酯酶等对细菌有杀伤、消化、分解作用。

吞噬作用的后果完全吞噬：病原体在吞噬溶酶体内被杀灭、消化、排除残渣的过程。

(5-10分钟死亡，30-60分钟破坏)不完全吞噬：只被吞噬，却不被杀死。

对机体不利：1.病原体得以保护、不受抗体、药物的作用2.病原体在吞噬细胞内增殖，导致吞噬细胞死亡3.随吞噬细胞游走造成更广泛的.扩散。

组织损伤：吞噬过程中，溶酶体酶(水解酶)也能破坏邻近的正常组织，造成组织损伤和炎症反应。

某理工大学《普通生物化学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（275分，每题5分）1. 逆转录酶既具有DNA聚合酶活性，也具有RNA聚合酶活性。

（）答案：错误解析：2. 蛇毒磷酸二酯酶和牛脾磷酸二酯酶都是内切酶。

（）答案：错误解析：3. 真核生物RNA聚合酶Ⅰ催化的基因转录产物是多顺反子。

（）答案：正确解析：RNA polⅠ催化28SrRNA、18SrRNA、5.8S rRNA的转录，这三种rRNA共享一个启动子，作为一个多顺反子由RNA pol Ⅰ催化合成，经历复杂的后加工过程后，释放出各个rRNA。

4. 生物体中遗传密码子的第二个碱基具有摆动性。

（）答案：错误解析：生物体中遗传密码子的第三个碱基具有摆动性。

5. 许多蛋白质的三维结构不是由其一级结构决定的，而是由分子伴侣决定的。

（）答案：错误解析：蛋白质的一级结构对高级结构起决定性作用，分子伴侣在蛋白质折叠过程起辅助作用。

6. 只有单细胞生物中发生的突变可以遗传给后代。

（）答案：错误解析：多细胞生物生殖细胞中发生的突变也可以遗传给后代。

7. 四级结构是蛋白质保持生物学活性的必要条件。

（）[中山大学2018研]答案：错误解析：具有三级结构的单体蛋白质就具有生物学活性，而组成蛋白质四级结构的亚基同样具有三级结构，当其单独存在时不具有生物学活性，因此四级结构不是蛋白质保持生物学活性的必要条件。

8. ATP是ATCase的别构抑制剂。

（）答案：错误解析：ATP是ATCase的激活剂。

9. fMettRNAfMet的合成是由对fMet专一的氨酰tRNA合成酶催化的。

（）答案：错误解析：fMettRNAfmet的合成分两步，首先MettRNAfmet合成酶催化Met与tRNAfmet生成MettRNAfmet；再由酰基转移酶催化MettRNAfmet甲酰化为fMettRNAfmet。

爱德华菌免疫刺激下牙鲆相关基因的表达分析爱德华菌（Edwardsiella tarda）是一种常见的水产动物病原菌，会导致多种水产动物的疾病，其中包括牙鲆（Paralichthys olivaceus）。

针对这种情况，很多研究都在寻找有效的免疫刺激方法来提高牙鲆的抗病能力。

爱德华菌免疫刺激被证明可以有效地提高牙鲆对病原菌的抵抗力。

本文旨在利用转录组学的方法，对爱德华菌免疫刺激下牙鲆的相关基因表达进行分析，以深入研究其抗病机制。

一、研究背景牙鲆是一种重要的经济水产资源，但受到各种病原菌的威胁，容易发生疾病。

爱德华菌是导致牙鲆细菌性病害的重要病原菌之一，对养殖业造成了严重的危害。

了解牙鲆免疫机制、寻找提高其抗病能力的方法对于养殖业具有重要的意义。

爱德华菌免疫刺激已被证明可以有效地提升牙鲆的免疫能力，使其对爱德华菌等病原菌产生更强的抵抗。

研究爱德华菌免疫刺激对牙鲆基因表达的影响，有助于深入了解其抗病机制，为进一步提高牙鲆的抗病能力提供理论依据。

二、研究方法本研究使用转录组学的方法，通过RNA测序技术来分析爱德华菌免疫刺激下牙鲆的基因表达情况。

具体步骤如下：1. 样品处理：将牙鲆分为实验组和对照组，实验组施加爱德华菌免疫刺激，对照组不进行刺激处理。

在一定时间后，采集两组牙鲆的肝脏组织样品。

2. RNA提取：从采集的牙鲆肝脏组织中提取总RNA，并进行质量检测和纯度检测。

3. RNA测序：将提取的RNA样品进行文库构建，然后进行高通量RNA测序，获取大量的转录组数据。

4. 数据分析：分析转录组数据，包括基因表达差异分析、GO富集分析、通路富集分析等。

5. 结果验证：通过实时荧光定量PCR（qPCR）对RNA测序结果进行验证。

三、研究发现通过上述方法，我们获得了爱德华菌免疫刺激下牙鲆的基因表达数据，并进行了初步的分析。

研究发现了一些与免疫相关的关键基因，这些基因在爱德华菌免疫刺激下呈现出显著的差异表达。

进一步的功能富集和通路富集分析表明，在爱德华菌免疫刺激下，牙鲆的免疫相关基因表达得到了显著的调控。