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花粉生活力测定方法研究进展摘要:总结了花粉活力测定的染色法、离体萌发法以及田间授粉法等的原理和应用并分析了各种方法的优缺点。
关键词:花粉花粉活力测定方法花粉是高等植物的雄性配子体,在有性繁殖过程中起到传递雄性亲本的遗传信息。
花粉不仅是植物遗传、育种、进化、生殖的重要研究对象,也是孢粉分析、蜂群培育、药物制造、医疗及生理实验的重要材料。
花粉活力是花粉具有生长、萌发、或发育的能力。
在农业生产及农业常规杂交育种的中,研究花粉的生活力和育性是不可缺少的基础性工作。
农业生产和育种工作通常会遇到花期不一致带来的困难,为解决这一难题,保存花粉的活力成为重要手段,而在贮藏花粉之前必须先检测花粉的活力。
不同种类植物花粉的自然寿命、适宜的贮藏方式及花粉活力适宜的测定方法不同。
因此,掌握花粉活力的检测方法对提高育种效率有较高的作用和意义。
综合前人的研究结果,花粉生活力的检测方法可以分为四大类:①染色法;②萌发测定法;③田间授粉检测法;④形态测定法、无机酸检测法。
1染色法1.1TTC 染色法TTC 即 2,3,5-氯代三苯基四氮唑,它是一种氧化还原染料,水溶液无色。
基本原理是 [1]:当 TTC 渗入细胞后, 遇到活细胞里的脱氢酶接受氢离子,由无色的氧化型变成红色还原型不溶于水的化合物,由此来判断花粉的生活力。
具体操作步骤:①配制 PH 为 7.17的磷酸缓冲液。
称取 0.832克磷酸氢二钠和0.273克的磷酸二氢钾溶于 100ml 的蒸馏水中,调整 pH 为 7.17。
② TTC 溶液配制。
依据不同植物称取 0.02~1.0g 的 TTC 溶于 100ml 的磷酸缓冲液中, 于棕色瓶中黑暗处保存。
③染色。
取少量花粉置于载玻片上,加上一滴 TTC 溶液,用镊子搅拌均匀,盖上盖玻片,然后放置于 35℃的恒温箱中染色 15~20min 。
④镜检。
于 10×10倍镜下观察,凡具有活力的花粉被染成红色,部分丧失活力的呈现粉红色,无色的是的或不育的花粉粒。
胡桃(Juglans regia L.)具有较高的营养价值，中国以加工胡桃仁为主，主要产品有核桃仁食品、核桃油、胡桃保健品等，充分体现了胡桃种植、加工的巨大食用价值[1]。
分心木，又名胡桃衣、胡桃夹、胡桃隔，质地较脆，味道略苦[2]，含有黄酮、多糖、皂苷、生物碱、氨基酸等多种活性成分[3],可用于治疗慢性肾炎、失眠、前列腺炎、遗精、小便频急、糖尿病等[4-9]。
结合近年来相关文献中的内容，总结核桃分心木活性成分及其功效。
1 活性成分核桃分心木在中国、伊朗等国的古代医药中均有一定的效用，近年来相关研究更多关注核桃分心木的活性成分，研究者们通过响应面分析法（Box-Benhnken）、液质联用技术、回流提取、超声波辅助提取、微波辅助提取、酶辅助提取等提取方法[10-13]分离提取核桃分心木中的活性成分，并取得了相关成果。
1.1 黄酮类在众多研究结果中，黄酮类单体是分心木中目前分离到的主要成分[13]。
根据LIU R X 等研究，核桃分心木中能够提取出槲皮素、二氢槲皮素、槲皮苷等主要成分[12-21]，这些化学物质中，不仅有植物界广泛分布的槲皮素、槲皮苷等，还有较为少见的二氢槲皮苷，且其含量相对较高。
见表1。
表1 分心木中主要的黄酮类活性成分单体名称分子式含量范围（μg/g）参考文献槲皮素C 15H 10O 7 4.76～17.43[12][14][15][16][17]二氢槲皮素C 15H 12O 733.99～153.31[12][14][15][16]槲皮苷C 21H 20O 11145.42～983.58[12][18] 异槲皮苷C 21H 20O 1220.89～116.68[12][14]儿茶素C 15H 14O 6251.69～693.32[12][19] 杨梅素C 15H 10O 811.22～28.13[12]柚皮素C 15H 12O 589.50～115.72[12][20]金丝桃苷C 21H 20O 12 4.20～60.27[12][14]落新妇苷C 21H 22O 119.19～31.62[12]（2S，3S）-花旗松素-3-O-α-D-阿拉伯呋喃糖苷C 20H 20O 11519.60～2181.84[12][19][21]Research progress on active components and efficacy of diaphragma juglandis fructus Liu Peng, Liu Ruiting, WangZhen, Hu Benxiang. Shangluo V ocational and Technical College, Shangluo 726000, China【Abstract 】Juglans regia L. is a plant of the genus Juglans in the family Juglans, which is one of the most widely distributed economic tree species in China. Walnut distraction wood is the wooden membrane in the walnut kernel of the walnut plant, which contains amino acids, proteins and other nutrients and flavonoids, soaps, alkaloids, phenols and other active substances. However, as a non-edible part, walnut distraction wood is generally discarded. Therefore, walnut distraction wood is expected to play a greater role in medicine, industry, food and other fields in the future. In this paper, the related studies on the active components and functions of walnut pistachio in recent years are systematically reviewed, so as to provide reference for the next experimental and clinical research.【Key words 】Diaphragma juglandis Fructus; Active ingredients; Effect 核桃分心木活性成分及其功效研究进展刘鹏 刘睿婷 王震 胡本祥基金项目：2017年陕西省重点研发计划项目（编号：2017NY-195）作者单位：726000 陕西省商洛市，商洛职业技术学院（刘鹏、王震）；中山大学中山医学院（刘睿婷）；陕西中医学院附属医院（胡本祥）【摘要】 胡桃是胡桃科胡桃属植物，是中国经济树种中分布最广的树种之一。
第２９卷第２期２ ０ １ ４年６月河 北 林 果 研 究ＨＥＢＥＩ ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＦＯＲＥＳＴＲＹ ＡＮＤ ＯＲＣＨＡＲＤ ＲＥＳＥＡＲＣＨＶｏｌ．２９Ｎｏ．２Ｊｕｎ．２ ０ １ ４ 文章编号：１００７－４９６１（２０１４）０２－０１４４－０６ ＤＯＩ：１０．１３３２０／ｊ．ｃｎｋｉ．ｈｊｆｏｒ．２０１４．００３２早实核桃开花授粉特性研究赵建建１，李美美１，赵福洞１，马华冰１，李保国１，２，齐国辉１，２（１河北农业大学林学院，河北保定０７１０００；２河北省核桃工程技术研究中心，河北临城０５３４００）摘要：为了给核桃花粉的保存、人工授粉及授粉树的配置提供理论依据，测定了绿岭、辽宁１号、鲁果１号、绿早、中林１号、上宋６号等６个早实核桃品种花粉的形状、大小、生活力，并对绿岭核桃进行了授粉试验和授粉适期试验。
结果表明：早实核桃花粉粒形状为近圆形至圆形，圆形花粉约占２０．４１％；花粉粒的平均直径为３９．６０μｍ，品种间、品种内均存在一定的差异，其中花粉粒平均直径最大的品种是辽宁１号，为４３．３２μｍ，最小的品种是中林１号，为３６．６７μｍ；６个品种的花粉均有较强的生活力，在－２０℃冷冻条件下保存至第１８０天时花粉活力仍在２０％以上，在常温条件下花粉仅能保存８ｄ左右；在柱头呈倒“八”字形时授粉，坐果率为２９．８２％，显著高于柱头反卷时的２１．３９％。
关键词：核桃；物候期；授粉；花粉生活力中图分类号：Ｓ ６６４．１文献标志码：ＡＲｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ ａｎｄ ｐｏｌｌｉｎａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｐｒｅｃｏｃｉｏｕｓ ｗａｌｎｕｔＺＨＡＯ Ｊｉａｎ－ｊｉａｎ１，ＬＩ Ｍｅｉ－ｍｅｉ１，ＺＨＡＯ Ｆｕ－ｄｏｎｇ１，ＭＡ Ｈｕａ－ｂｉｎｇ１，ＬＩ Ｂａｏ－ｇｕｏ１，２，ＱＩ Ｇｕｏ－ｈｕｉ１，２（１ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ，Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ，Ｂａｏｄｉｎｇ０７１０００，Ｃｈｉｎａ；２ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｗａｌｎｕｔ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ，Ｌｉｎｃｈｅｎｇ０５４３００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｗａｌｎｕｔ ｐｏｌｌｅｎ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ，ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｐｏｌｌｉ－ｎａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｏｌｌｅｎｉｚｅｒ ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｐｏｌｌｅｎ ｓｈａｐｅ，ｓｉｚｅ，ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ６ｐｒｅｃｏｃｉｏｕｓ ｗａｌｎｕｔｃｕｌｔｉｖａｒｓ ｏｆ ｌｖｌｉｎｇ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ １，Ｌｕｇｕｏ １，Ｌｖｚａｏ，Ｚｈｏｎｇｌｉｎ １ａｎｄ Ｓｈａｎｇｓｏｎｇ ６ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉ－ｎａｔｅｄ，ａｎｄ ｔｈｅ ｔｒｉａｌｓ ｏｎ ｐｏｌｌｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｐｅｒ ｐｏｌｌｉｎａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｆ ｌｖｌｉｎｇ ｗａｌｎｕｔ ｗｅｒｅ ｃａｒｒｉｅｄｏｕｔ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｓｈａｐｅｓ ｏｆ ｐｒｅｃｏｃｉｏｕｓ ｗａｌｎｕｔ ｐｏｌｌｅｎ ｇｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｎｅａｒｌｙｒｏｕｎｄ ｔｏ ｒｏｕｎｄ，ｗｉｔｈ ｒｏｕｎｄ ｐｏｌｌｅｎ ａｃｃｏｕｎｔｉｎｇ ｆｏｒ ａｂｏｕｔ ２０．４１％．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｏｆｔｈｅ ｐｏｌｌｅｎ ｇｒａｉｎ ｗａｓ ３９．６０μｍ，ｔｈｅｒｅ ｅｘｉｓｔｅｄ ｓｏｍｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｃｕｌｔｉｖａｒｓ ａｎｄ ｗｉｔｈ－ｉｎ ｔｈｅ ｃｕｌｔｉｖａｒｓ，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｏｆ Ｌｉａｏｎｉｎｇ １ｐｏｌｌｅｎ ｇｒａｉｎ ｗａｓ ｔｈｅ ｌａｒｇｅｓｔ，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ４３．３２μｍ，ａｎｄ ｔｈａｔ ｏｆ Ｚｈｏｎｇｌｉｎ １ｗａｓ ｔｈｅ ｓｍａｌｌｅｓｔ，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ３６．６７μｍ．Ｔｈｅ ｐｏｌｌｅｎ ｖｉａｂｉｌｉ－ｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ６ｐｒｅｃｏｃｉｏｕｓ ｗａｌｎｕｔ ｃｕｌｔｉｖａｒｓ ｗａｓ ｓｔｒｏｎｇ，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｓｔｉｌｌ ａｂｏｖｅ ２０％ｗｈｅｎ ｓｔｏｒｅｄｕｎｄｅｒ－２０℃ｆｏｒ １８０ｄｗｈｉｌｅ ｕｎｄｅｒ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｔｈｅ ｌｏｎｇｅｓｔ ｓｔｏｒａｇｅ ｐｅｒｉｏｄ ｔｏ ｋｅｅｐ ｔｈｅｐｏｌｌｅｎ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｗａｓ ｏｎｌｙ ａｂｏｕｔ ８ｄ．Ｗｈｅｎ ｐｏｌｌｉｎａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｓｔｉｇｍａ ｉｎ ｉｎｖｅｒｔｅｄ ｅｉｇｈｔ ｓｈａｐｅ ｐｅｒｉ－ｏｄ，ｔｈｅ ｆｒｕｉｔ ｓｅｔｔｉｎｇ ｒａｔｅ ｗａｓ ２９．８２％ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ２１．３９％ｆｒｕｉｔ ｓｅｔｔｉｎｇ ｒａｔｅ ｏｆｔｈｅ ｓｔｉｇｍａ ｉｎ ａｎｔｉ－ｒｏｌｌ ｓｈａｐｅ．Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｗａｌｎｕｔ；ｐｈｅｎｏｌｏｇｙ；ｐｏｌｌｉｎａｔｉｏｎ；ｐｏｌｌｅｎ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ收稿日期：２０１４－０３－１２；修改稿收期：２０１４－０４－０２基金项目：河北省科技支撑计划项目“河北省山区核桃产业技术创新与示范体系建设”（１４２３６８１１Ｄ）。
花粉的采集与保存、形态观察及生活力测定1.上述方法是否适合于所有植物花粉活力的测定？答：否。
形态观察法只适用于测定新鲜花粉的生活力，不适用于测定贮藏的花粉，体积较小的花粉和形态结构不规则的花粉，这都会影响实验结果。
染色观察法不适用于测定花粉颜色与染色结果相近的植物花粉活力，会对观察有一定的干扰。
另外，碘－碘化钾染色法不能准确表示花粉的活力，也不适用-KI 于研究某一处理对花粉活力的影响。
因为核期退化的花粉已有淀粉积累，遇I2呈蓝色反应。
另外，含有淀粉而被杀死的花粒遇I-KI也呈蓝色。
2培养基发芽法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定，不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发。
不同种类植物花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同，应依植物种类而改变培养条件。
2.哪种方法更能准确反应花粉的活力？答：个人认为发芽实验法更能准确反应花粉活力，虽然发芽试验法更为麻烦一些，但其结果更接近花粉的自然生活力，能较为直接的反应花粉的萌发率。
3.还有哪些方法可以用来检测植物花粉活力？答：①醋酸洋红染色法。
此法的染色原理是靠花粉中的脱氢辅酶而染色，有活力的花粉被染成红色，部分失去活力的呈现粉红色，而无活力或不育的花粉无色。
②过氧化物酶染色法。
此法又称联苯胺染色法,是根据花粉中过氧化物酶的活性来判断花粉的活力。
由于有活力的花粉含有活跃的过氧化物酶，所用试剂与过氧化物酶发生氧化反应而染色，有活力的花粉被染成红色，无活力的花粉则呈现黄色或无色透明。
③MTT染色法。
MTT染色法是根据花粉粒中脱氢酶的活性判断花粉生活力，镜检时,花粉呈现蓝色表明花粉有活力。
④FCR染色法。
此法也叫荧光染料反应法，其基本原理是荧光染料本身不产生荧光，无极性，并能自由地透过完整的原生质膜。
当此种染料进入原生质后，即被醋酶作用形成一种能产生荧光的极性物质一荧光素。
由于荧光素不能自由地出人原生质膜，而只在细胞内积累，因此可以根据花粉产生荧光的情况来判断花粉的生活。
贮藏温度和贮藏时间对北细辛花粉活力的影响研究王志清;张舒娜;于营;邢丽伟;马琳;张亚玉【期刊名称】《特产研究》【年(卷),期】2016(038)001【摘要】本试验对不同贮藏温度、不同贮藏时间条件下北细辛花粉的活力进行了研究。
结果表明，在4℃条件下贮藏2d～7d ，花粉活力由80.57％降低至79.93％，不同贮藏天数下的花粉活力差异不显著（ P＞0.05）。
在15℃条件下贮藏2d的花粉活力明显高于其它4种温度条件下的花粉活力（ P＜0.05）；贮藏2d～7d ，花粉活力由85.93％下降至66.56％；贮藏1d～4d的花粉活力差异不显著（P＞0.05）。
花粉在4℃、15℃、20℃、25℃及28℃等5种不同温度下贮藏3d ，4℃和15℃条件下的花粉活力差异不显著（P＞0.05），花粉活力保持在80％以上；20℃、25℃和28℃下的花粉活力差异不显著（P＞0.05），随着贮藏时间的延长，5种不同温度下贮藏的花粉活力差异越来越显著（ P＜0.05）。
20℃和25℃下贮藏7d的花粉活力低于50％。
28℃下贮藏7d ，活力低于10％。
【总页数】4页(P23-26)【作者】王志清;张舒娜;于营;邢丽伟;马琳;张亚玉【作者单位】中国农业科学院特产研究所，长春 130112;中国农业科学院特产研究所，长春 130112;中国农业科学院特产研究所，长春 130112;中国农业科学院特产研究所，长春 130112;中国农业科学院特产研究所，长春 130112;中国农业科学院特产研究所，长春 130112【正文语种】中文【中图分类】S567.23【相关文献】1.贮藏时间和温度对甘蓝型油菜种子活力及脂肪酸含量的影响 [J], 陈新军;胡茂龙;戚存扣;浦惠明;张洁夫;陈松;高建芹;顾惠;付三雄;龙卫华2.贮藏时间对茶树花粉生活力的影响 [J], 应华军3.不同贮藏时间及花瓣张开角度对番茄花粉活力的影响 [J], 李定蓝;唐太菊;李玥;梁凤娇;王辉4.干燥条件及贮藏时间对烟草花粉活力的影响 [J], 古吉;乔雨;郑昀晔;马文广5.贮藏温度和贮藏时间对垂柳种子生活力的影响 [J], 曹帮华;史峻峰;张鑫;李业宇;祁琳;秦光华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
核桃种质资源与良种选育研究的开题报告一、研究背景和意义核桃是一种重要的果树，有着广泛的应用价值。
而核桃种质资源及其良种选育研究是核桃产业持续发展的关键。
核桃作为一种长寿树种，其种质资源具有丰富多样、分布广泛等特点。
但由于传统的核桃栽培方式较为落后，核桃品种的质量得不到充分体现。
为了加强核桃种质资源的开发与利用，推广适应不同地域环境的良种，提高核桃的产量和品质，建立核桃产业的可持续发展体系，本研究拟建立一套完整的核桃种质资源与良种选育体系，以期为核桃产业的高效发展提供科学支撑和技术保障。
二、研究内容和步骤1.核桃种质资源的调查与收集。
通过采集、整理、筛选、鉴定各地区的核桃种质，并在不同地域环境中进行生长适应性鉴定，为后续核桃良种选育提供基础材料。
2.核桃优良品种的筛选及评估。
通过对各地区的核桃优良品种进行评估，选择出具有多个抗病、高产、优质等品质的高产优质核桃品种。
3.核桃优良品种的选育。
在调查、收集和评估得出的核桃优良品种的基础上，利用相关技术手段进行交配和育种，培育出新的核桃优良品种。
4.根据地域环境和市场需求，对核桃优良品种进行区域适应性试验。
通过对各地区不同环境条件下的核桃优良品种进行区域适应性试验，选择适应性强、产量高的核桃优良品种，在各地发展核桃产业。
5.核桃优良品种的推广应用。
在完成品种选育及适应性试验后，根据核桃产业的发展需求，颁布推广该种核桃优良品种，为当地农户提供种植技术培训，推进协会版块儿的合作，达到推广应用的效果。
三、研究方法1. 核桃种质资源的调查与收集方法考察核桃的所在区域，收集不同区域的核桃品种和生物资源；对居住地的核桃条件进行全面评估，定位核桃种质资源品种；对筛选出来的品种进行评测，整理为核桃种质资源数据库，建设相应平台，方便核桃种质资源之间的信息共享。
2. 核桃优良品种的筛选及评估方法通过选择地方优势核桃品种，结合现代栽培技术，进行综合评定。
本研究拟采用综排法进行核桃品种的筛选及优劣评价。
核桃不同品种花粉生活力及其贮藏条件研究作者：王锦锋来源：《安徽农业科学》2014年第02期摘要[目的]测定核桃不同品种花粉的生活力，并研究其贮藏条件。
[方法]采用固体培养基和液体培养基测定维纳、元丰、香玲、丰辉和当地核桃5个品种的花粉生活力，并对贮藏条件进行考察。
[结果]固体培养基测定的花粉生活力普遍高于液体培养基0.98%～2.51%。
5个品种均在2.5%蔗糖溶液中萌发率高；花粉最适宜的贮藏条件为-20 ℃、遮光。
核桃不同品种的花粉生活力存在显著差异（P关键词核桃（Juglans regia L.）；花粉生活力；贮藏条件中图分类号S664.1文献标识码A文章编号0517-6611（2014）02-00392-03Abstract [Objective] To study different varieties of walnut pollen viability and storage conditions. [Method] Pollen vitality of 5 walnut cultivars of Weina， Yuanfeng， Xiangling， Fenghui，Dangdihetao were determined by solid and liquid medium. [Result] The results showed that the determination of solid medium of pollen vitality were higher than liquid medium at the level of 0.98% to 2.51%， so the pollen vitality of determination in solid medium was more suitable； five varieties high germination rate in 2.5% sucrose solution； pollen optimum storage conditions for -20 ℃， the shading； there exited significant deviation of pollen vitality of walnut cultivars， the varieties in the same medium， Weina had the highest vitality of pollen reached 12.3%， the second was Fenghui，Yuanfeng， Xiangling， minimum of local walnut was 3.9%. [Conclusion] Solid medium is more suitable for determination of pollen viability. On the same medium， Weina pollen viability is the highest.Key words Walnut； Pollen vitality； Storage conditions核桃（Juglans regia L.）属于壳斗目胡桃科（Juglandaceae）植物。
其核桃仁具有丰富的营养成分和药用保健功能，是世界著名的4大干果之一。
据报道，2010年，我国核桃以种植面积240万hm2、产量超过百万吨，雄踞全球之首。
核桃分布于我国26个省（市、区），近1 000个品种、优系，由于国家大力扶持的产业政策和规划布局，核桃成为我国主要的经济作物之一。
核桃是典型的雌雄同株异花植物[1]，风媒花，自然条件下授粉坐果率低，异花授粉能提高核桃的坐果率和果实品质。
因此，要获得优质高产的核桃，合理配置授粉树，并进行辅助授粉显的极为重要。
在我国北方地区，恶劣的环境条件，尤其是刮大风、晚霜危害，是当地核桃优质高产的主要限制因素之一。
为此，试验研究核桃不同品种花粉生活力（所谓花粉生活力即花粉具有存活、生长、萌发或发育的能力[2]）的大小以及适合的花粉贮藏条件，对人工辅助授粉、核桃授粉树的配置及核桃花粉的贮藏提供理论依据，对庆阳核桃生产健康发展具有良好的指导作用。
目前，对于花粉生活力测定方法的研究较多，其中以离体培养法较为准确、简单、迅速、合理，并可完全定量[3]。
试验采用离体培养法研究核桃花粉的生活力，离体培养的基本原理是根据花粉离体培养时的萌发率判定其生活力。
萌发率高则生活力强；反之，生活力就低。
离体培养法的培养基有固体和液体培养基2种，培养基的配方多样，但多以硼酸，蔗糖作为基本成分，固体培养基还需加入琼脂作为凝固剂。
硼酸中的硼元素为微量元素之一，其作用是促进花粉管的萌发[4]，作用机理是硼酸能够增加花粉对糖的吸收、运转和代谢，形成糖硼酸复合体，增加氧的吸收，并促进构成花粉膜的成分——果胶物的合成；蔗糖提供花粉萌发的能量和营养。
前人对于核桃花粉散出的原因及相关研究很少，而庆阳对核桃品种花粉生活力的研究就更少。
试验以庆阳核桃生产中的的5个核桃品种为研究对象，旨在对这5个核桃品种的花粉生活力大小进行研究，进而研究影响核桃花粉生活力贮藏的条件，为庆阳核桃生产配置最佳授粉品种提供理论依据。
1材料与方法1.1材料1.1.1研究对象。
8年生的维纳、元丰、香玲、丰辉以及庆阳当地核桃5个品种，生长正常，无严重的病虫危害，除当地核桃外，其他4个品种是2003年引自山东果树研究所的核桃品种。
供试验花粉于2012年5月4日采自庆阳市西峰区肖金镇林颖科技农业合作社的核桃园内，采集由绿变黄、小花分散、花药杏黄色但未散粉的雄花序带回试验室，放在干燥的报纸上，在室温下晾干，待花药开裂，花粉全部散出后，用0. 25 mm的土壤筛筛出花粉，收集于青霉素小瓶中备用。
1.1.2主要仪器。
培养皿，购自北京宏昌信科技有限公司；恒温培养箱，购自上海和呈仪器制造有限公司。
1.1.3主要试剂。
琼脂、蔗糖、硼酸等均为国产分析纯，市售。
1.2方法1.2.1试验地条件。
试验地位于庆阳市西峰区肖金镇南部距市区15 km，在202省道、西汾高速公路旁边，交通方便，果园占地面积6.67 hm2，属黄河中游内陆地区，地势平坦，土壤肥沃，年日照2 400～2 600 h，年降水400～600 mm，年均气温8.8 ℃，极端最高气温39.6 ℃，极端最低气温-22.6 ℃，适合多种果树生长。
1.2.2不同形态的培养基培养花粉。
培养基形态分为固体培养基和液体培养基2结果与分析2.1不同形态培养基对核桃不同花粉生活力的影响图1表明，培养基的形态是影响花粉萌发的重要因素，核桃同一品种的花粉在固体和液体培养基上的萌发率有所不同。
固体培养基条件下各品种花粉生活力普遍高于液体培养基条件下的花粉生活力，维纳、丰辉、元丰、香玲和当地核桃分别提高了2.51%、2.40%、1.89%、0.98%和1.22%。
固体培养基测定的花粉生活力高于液体培养基1.6至2.1倍。
所以在进行花粉发芽试验时，最好选用固体培养基，不过液体培养基的配制较为简便，并且不易失水。
图1不同形态培养基花粉生活力比较2.2不同蔗糖浓度对核桃不同品种花粉生活力的影响图2表明，不同蔗糖浓度间，花粉的萌发率有显著差异（P图2不同蔗糖浓度花粉生活力的比较2.3不同温度光照条件对核桃花粉生活力的影响由表1可知，在同一贮藏条件下，花粉萌发率随贮藏时间的延长而下降。
在贮藏5 d后，常温遮光、常温不遮光、4 ℃遮光、4 ℃不遮光条件下的花粉生活力均为0，即核桃花粉不再萌发；-20 ℃遮光条件核桃花粉的生活力仍可达到1.72%，-20 ℃不遮光的萌发率也有0.69%。
因此，花粉的贮藏在低温遮光条件下，其生活力能够维持较好，核桃花粉适于在-20 ℃遮光条件下贮藏。
3结论与讨论3.1结论研究结果表明，固体培养基测定的花粉生活力高于液体培养基，分析可能是在液体培养基中，花粉由于吸收水分，重量增加，沉积在培养基底部，由于空气含量较少，影响花粉粒呼吸，导致花粉萌发率低，或是辅助物质在不同培养中扩散速度不同造成的；并且在观察的过程中，发现固体培养基播种后花粉粒的位置固定，便于观察计数，而液体培养基由于观察过程中花粉粒在培养基中深浅不一，随着培养基移动，难于计数。
所以固体培养基较为适合测定花粉的生活力，这与赵长星等的研究结果相同。
国内外研究表明，在花粉萌发和花粉管的伸长过程中，蔗糖不仅提供花粉萌发所需能量，还提供营养，也可以维持花粉与培养基成分之间的渗透平衡，蔗糖浓度过低过高均不适合花粉萌发，高浓度的蔗糖会改变花粉管细胞膜的透性，使得花粉质壁分离，抑制花粉萌发伸长，过低花粉壁破裂内含物散出。
通过试验可知，对于核桃花粉生活力的测定，以蔗糖浓度为2.5%最为适合。
研究发现，低温遮光条件对于花粉的贮藏有利，并且温度越低，越利于花粉的保藏，低温能延长花粉的贮藏期限，原因是低温降低了花粉的酶活性和呼吸强度。
因此为了能够更好地贮藏花粉，在生产过程中，根据生产需要，确定合理的贮藏低温，以利于核桃产品生产过程中，核桃树的授粉受精，以期生产出高质量高产量的产品，近年来的研究表明，在超低温度（-180～-270 ℃）下，花粉的生活力可以长期贮藏，大多数植物的花粉在-20 ℃下即可保持其生活力。
试验结果表明，维纳的花粉生活力最高，其次是丰辉，元丰，香玲，当地核桃最低，这不仅与各品种对培养条件的适应性有关，更多的是核桃品种自身的生长发育等条件相关，能够真实的反映出维纳在庆阳当地条件下的种植优势。
3.2讨论研究过程中发现，随着花粉贮藏时间的延长以及花粉发芽试验培养时间的延长，花粉的萌发率下降，内容物散出率上升，但二者并没有直接的联系，其根本原因是蔗糖浓度过低，分析花粉内容物散出的具体原因可能是：（2）花粉贮藏一段时间后，培养时由于内外渗透压不平衡导致花粉粒，膨胀破裂；（2）花粉在培养基中培养一段时间后，培养过程中，培养基失水导致的；（3）可能由于花粉粒萌发孔的相关原因。
具体原因有待于进一步进行试验认真研究分析。
目前对于核桃花粉生活力的测定研究较多，但对相关理论的研究较少，对于影响花粉贮藏的外部环境因素研究较多，但对花粉的内部因素的影响研究不多，以后可以从这2个方面进行试验设计，进行相关研究。
在试验的过程中，由于培养基的失水问题，培养的时间一般较少，以后研究中可以从这方面入手进行研究，培养时间的适当延长，可以观察到更多的花粉发芽，提高试验的精确度。
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