顶空液相微萃取／气相色谱-质谱检测葡萄酒中的氨基甲酸乙酯

葡萄酒中氨基甲酸乙酯的研究进展摘要：氨基甲酸乙酯（EC）是葡萄酒中的有毒物质。

本文讲述了葡萄酒中EC的毒性机理、生物合成途径，阐述了影响葡萄酒中EC含量的因素并相应提出了控制方法，最终叙述了世界各国对酒精饮品中EC的安全限量，为我国尽早制定相应安全标准提供了理论依据和参照的标准。

关键词：氨基甲酸乙酯；葡萄酒；合成途径；影响因素；限量标准Research progress of ethyl Carbamate in wineYANG Xue-wei1, Duan Xue-Rong, LI Hong-yu, DONG Xuan, ZHOU Guang-rong(COFCO Huaxia Great Wall Wine Co. Ltd., Changli 066600, China)Abstract: Ethyl Carbamate is a toxic substance in wine. This research summarized its toxic mechanism, biosynthesis pathways, and provided the relative control solution according to the influence factors to the content of EC in wine. In the final part, EC limit concentrations in alcohol drinks of some countries were given and provide reference standards and theoretical foundation for making our limitation in the future.Key words: ethyl Carbamate; wine; biosynthesis pathway; influence factors; limitation氨基甲酸乙酯（Ethyl Carbamate，EC），也称乌拉坦或尿烷（urethane），是发酵食品中的一种发酵副产物。

食品安全地方标准酒精饮料中氨基甲酸乙酯的测定气相色谱-质谱法1 范围本标准规定了酒精饮料中氨基甲酸乙酯的气相色谱-质谱测定方法。

本标准适用于白酒、啤酒、黄酒、葡萄酒等酒精饮料中氨基甲酸乙酯的测定。

本标准的检出限：当试样取2.0g时，本方法氨基甲酸乙酯含量的检出限为1.0μg/kg。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

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GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3 术语和定义酒精饮料系指供人们饮用的且乙醇含量在0.5%(vol)以上的饮料，包括各种发酵酒、蒸馏酒及配制酒。

4 原理酒精饮料加氨基甲酸乙酯同位素内标后，经过硅藻土固相萃取柱净化、洗脱，洗脱液浓缩后，用气相色谱—质谱仪测定，内标法定量。

5 试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

5.1无水硫酸钠(Na2SO4)：450℃灼烧4h，冷却后贮于干燥器中备用。

5.2CLE-硅藻土固相萃取柱：4000 mg/12 mL。

5.3正己烷(C6H14): 色谱纯。

5.4乙酸乙酯(C4H8O2): 色谱纯。

5.5乙醚(C4H10O): 色谱纯。

5.6甲醇（CH3OH）: 色谱纯。

5.7氨基甲酸乙酯标准品（C3H7O2N，CAS：51-79-6）：纯度>99.0％。

5.8D5-氨基甲酸乙酯(C3H7O2N-d5)。

5.95%乙酸乙酯-乙醚溶液（V/V）。

5.10D5-氨基甲酸乙酯溶液：准确称取适量的D5-氨基甲酸乙酯标准品，用甲醇配制成浓度为1.0 mg/mL的标准储备液，使用时用甲醇稀释至1.0μg/mL。

5.11氨基甲酸乙酯标准溶液：准确称取适量的氨基甲酸乙酯标准品，用甲醇配制成浓度为1.0 mg/mL的标准储备液，使用时用甲醇稀释至0.2μg/mL。

5.12氨基甲酸乙酯标准使用液：准确吸取0.2μg/mL氨基甲酸乙酯标准溶液 0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL，各加1.0μg/mL的D5-氨基甲酸乙酯溶液100μL，用甲醇定容至1.0 mL，得到浓度为20.0 ng/mL，40.0 ng/mL，80.0 ng/mL，120.0 ng/mL，160.0 ng/mL的标准使用液（含100.0 ng/mL D5-氨基甲酸乙酯）。

吉林省食品安全地方标准《酒精饮料中氨基甲酸乙酯的测定气相色谱-质谱法》编制说明（征求意见稿）吉林省疾病预防控制中心二〇一二年四月目录一、研究背景…………………………………………………………二、任务来源………………………………………………………三、制定标准的必要性和意义………………………………………四、标准化过程………………………………………………………五、制标原则…………………………………………………………六、标准主要条款的说明……………………………………………1、标准的名称………………………………………………………2、标准的范围………………………………………………………3、方法原理………………………………………………………4、前处理条件………………………………………………………5、仪器分析条件……………………………………………………6、检出限………………………………………………………7、线性范围……………………………………………………8、准确度、精密度……………………………………………七、标准验证情况说明……………………………………………八、验证结论……………………………………………九、本标准作为强制性地方标准的建议…………………………………十、贯彻标准要求和措施建议…………………………………十一、参考文献……………………………………………………一、研究背景氨基甲酸乙酯是一种具有遗传毒性及致癌性的物质, 存在于许多发酵食品( 如酱油、酵母、奶酪等)和酒精饮料( 如黄酒、白酒、葡萄酒等)中，可引起肺肿瘤、淋巴癌、肝癌、皮肤癌等，因此在2002 年就已成为FAO 重点监控物质。

北美等国家法规规定了不同酒精饮料中所含氨基甲酸乙酯的数量及水平。

目前, 我国随着人们生活水平的提高, 酒精饮料的消费量也逐年上升，但是对酒精饮料（包括黄酒、葡萄酒、白酒和啤酒）尚未制定氨基甲酸乙酯限量标准和检测方法，对氨基甲酸乙酯污染评估也尚未广泛开展。

液液萃取法测定葡萄酒中的氨基甲酸乙酯
孙霞;蒋玉梅
【期刊名称】《甘肃科技纵横》
【年(卷),期】2017(046)012
【摘要】以氨基甲酸丙酯为内标,经过液液萃取,并对液液萃取的前处理条件进行优化,结合GC/MS测定葡萄酒中氨基甲酸乙酯的含量.最佳检测条件:采用NaCl含量为40%,二氯甲烷用量20 mL×3次,经氮吹仪在30℃吹干后,用1 mL丙酮定
容,GC/MS进样分析.氨基甲酸乙酯含量在(100~1600 ng/mL)EC+800 ng/mLPC 范围内线性关系良好(R2=0.995),精密度试验结果相对标准偏差(RSD)值为2.4%,回收率为87.8%~97.0%,RSD值为2.13%~2.83%,表明该方法具有良好的精密度和准确性,适用于葡萄酒样品的定量分析检测.
【总页数】3页(P17-19)
【作者】孙霞;蒋玉梅
【作者单位】甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州730070;甘肃省食品检验研究院,甘肃兰州730030;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州730070
【正文语种】中文
【中图分类】TS207.3
【相关文献】
1.固相萃取结合GC/MS法测定葡萄酒中氨基甲酸乙酯 [J], 李华;冯丽丹;梁新红;王华
2.SLE结合GC-MS法测定葡萄酒中氨基甲酸乙酯 [J], 张万利;梁新红;冉军舰;孙俊良;莫海珍
3.多维气相/气质联用法测定葡萄酒中的氨基甲酸乙酯 [J], 刘伟;孙谦;范军;邓晓丽;李月琪;杨桂香;黄涛宏
4.GC/MS内标法测定葡萄酒中氨基甲酸乙酯含量 [J], 李刚;梁新红;葛晓虹
5.固相萃取-气相色谱法测定葡萄酒中的氨基甲酸乙酯 [J], 牛栋平;陶宁萍;李学惠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

气相色谱法测定酒中氨基甲酸乙酯
黄振波
【期刊名称】《粮食流通技术》
【年(卷),期】2016(003)006
【摘要】采用气相色谱法对市面黄酒中氨基甲酸乙酯(EC)含量进行测定.黄酒中氨基甲酸乙酯(EC)中色谱柱为HP-5(30.00 mm×0.25 mm,0.25μm),进样量为1μL,分流比为50∶1;选样口温度控制在200℃,柱温控制在170 ℃.结果表明:当EC质量浓度达到2～30 μg/mL时,其能够达到最佳线性关系,r=1.000;EC加样回收率为89.67％,相对标准偏差RSD为3.99％;10种黄酒样品中,只有2种测出含有EC.由此表明,在黄酒EC测定中气相色谱法具有一定的应用价值.
【总页数】3页(P74-76)
【作者】黄振波
【作者单位】河源市疾病预防控制中心,广东河源 517000
【正文语种】中文
【中图分类】TS261.7;O657.63
【相关文献】
1.气相色谱法测定酒中氨基甲酸乙酯 [J], 黄振波;
2.气相色谱-串联质谱法测定酒中氨基甲酸乙酯的含量 [J], 周勇;李晓明;梁德沛;杨晓云
3.气相色谱-正化学源-串联三重四极杆质谱法测定面包中氨基甲酸乙酯 [J], 黄敏兴; 高裕锋; 甄振鹏; 李硕聪; 庞扬海; 王小鹏; 余构彬
4.固相萃取-气相色谱法测定葡萄酒中的氨基甲酸乙酯 [J], 牛栋平;陶宁萍;李学惠
5.稳定性同位素稀释技术结合气相色谱-离子阱质谱法检测葡萄酒中的氨基甲酸乙酯 [J], 周萍萍;赵云峰;张珙;吴永宁
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葡萄酒中氨基甲酸乙酯检测方法的研究的开题报告一、选题背景葡萄酒是一种非常受欢迎的酒类饮品，其质量和安全性已经成为全球餐饮市场所关注的问题。

其中，氨基甲酸乙酯是一种常见的葡萄酒污染物之一，它可能产生毒性反应，对人体健康造成潜在危害。

因此，如何准确、高效地检测葡萄酒中的氨基甲酸乙酯，已成为重要的研究方向。

二、选题目的本课题旨在通过系统研究葡萄酒中氨基甲酸乙酯的检测方法，为餐饮市场提供一种高效、准确、经济的检测技术，保障葡萄酒的质量与安全。

三、选题意义1、提高葡萄酒的质量和安全性2、为生产企业提供技术支持与指导3、为葡萄酒市场的稳定发展提供保障四、研究内容1、文献综述：对国内外葡萄酒中氨基甲酸乙酯的检测方法进行全面调研和分析。

2、实验设计：选取适合的样品处理和分析方法，确定优化的反应条件和测定参数。

3、分析和验证：对选定的样品进行分析和验证，并对分析结果进行解释和评估。

五、研究方法1、样品制备：对样品进行前处理，包括去除杂质、分离和富集有关目标物等工序，以获得稳定、准确的检测结果。

2、液/气相色谱分析法：利用色谱分离技术进行样品的分离、富集与检测，结合质谱、红外等分析技术进行分子结构的解析和识别。

3、计量学方法：包括建立标准品浓度曲线、贝叶斯分类、人工神经网络等技术，提高检测结果的准确性和可靠性。

六、研究计划1、月份和时间节点第1-2个月：文献调研和综述第3-6个月：实验设计和方案制定第7-12个月：样品分析和鉴定，数据处理和测试结果分析2、预期进展第1-2个月：对国内外葡萄酒中氨基甲酸乙酯检测方法的调研完成，并完成文献综述报告。

第3-6个月：实验设计和样品处理方法优化完成，并建立分析方法。

第7-12个月：对样品进行分析和验证，并对数据进行处理和结果分析，完成论文撰写和答辩准备。

七、参考文献[1] 王志科，葡萄酒中氨基甲酸乙酯的检测与控制技术，食品安全质量检测，2016.[2] 聂明，葡萄酒中有害物质的检测与分析方法，中国食品学报，2018.[3] 王涛，液相色谱-二极管阵列检测氨基甲酸乙酯的研究，食品科学，2019.[4] 李伟，光电化学传感器用于葡萄酒中氨基甲酸乙酯的检测，分析测试技术与仪器，2017.[5] 周怀坤，葡萄酒中氨基甲酸乙酯的检测研究，广东食品与药品监督局，2015.。

液液萃取-气相色谱-质谱联用快速检测葡萄酒中14种农药残留王春利;李天宝;刘炜;郭盈希;冯志洪【期刊名称】《酿酒科技》【年(卷),期】2012(000)008【摘要】A method （GC-MS coupled with liquid-liquid extraction） for rapid determination of 14 kinds of pesticides residue in grape wine has been developed. Grape wine samples were extracted by n-hexane and ethyl acetate （1：1） without purification. The results suggested that such method displayed good linear relationships within 0.01 - 1Q mg/L and the relative coefficient was above 0.998, the average recoveries were in the range of 90.32-108.13 with RSD s〈10 % as the addition level was between 0.01 -1.0 mg/L, LOD ranged from 0.01 -0.10 mg/kg, and LOQ ranged from 0.001 -0.05 mg/kg.%建立了葡萄酒中14种农药残留的气相色谱-质谱联用选择离子模式进行监测的检测方法,样品采用正己烷∶乙酸乙酯（1∶1）萃取,无需净化。

该方法在0.01～10 mg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.998;在0.01～1.0 mg/L添加水平范围内,平均加标回收率在90.32～108.13之间;最低检出限（LOD）在0.01～0.10 mg/kg之间,定量检出限（LOQ）为0.001～0.05 mg/kg,相对标准偏差均小于10%。