实验七注射剂及眼药水的制备目的要求：1 了解玻璃安瓿质量检查的要求，并学会玻璃安瓿的质量检查。
2 掌握手提式热压灭菌器的构造及使用方法。
3．了解灌装药液前空安瓿的处理工艺。
4．通过盐酸普鲁卡因注射液的制备掌握注射剂的制备工艺过程。
5．熟悉注射剂成品质量的检查方法。
6．通过氯霉素眼药水的制备，掌握眼药水的一般要求和配制方法。
一、玻璃安瓿的质量检查实验指导：盛装注射液的安瓿，其表面长期与药液接触，互为影响，往往使注射剂质量发生变化，如pH值的改变、沉淀、变色、脱片等。
这些现象与玻璃的理化稳定性有关，而玻璃的理化稳定性又取决于其化学组成。
玻璃是由SiO2、B2O3、Al2O3、CaO、Na2O、BaO等熔成的固体溶液。
目前制造的玻璃，根据它们的成分，可分为中性玻璃、含钡玻璃与含锆玻璃三种。
中性玻璃是低硼硅酸盐玻璃，化学稳定性好，用作pH接近中性或弱酸性注射剂的容器。
含钡玻璃和含锆玻璃，化学稳定性好，可作为pH为碱性注射剂的容器。
为了保证注射剂的质量，安瓿使用前都必须通过物理和化学方面的检查，应符合GB4771-84《药用玻璃及其玻璃容器碱溶出量试验法》的有关规定。
本次实验着重掌握安瓿化学稳定性检查的试验方法。
实验内容：（一）玻璃安瓿的化学稳定性检查每人取20支空安瓿进行割口、圆口、烘干、然后分别取6支做下列几项试验：1．耐酸性能检查取6支已洗净烘干后的安瓿分别注入0.01mol/L盐酸液至正常装量，熔封，剔除含有玻璃屑、纤维及白点等异物的安瓿，置热压灭菌器内，在121℃,97kpa加热30分钟，放冷取出检查，不得有易见的脱片。
2．耐碱性能检查根据不同注射剂性质的要求，可选择下列一项进行检查：另取6支已洗净烘干安瓿。
（1）分别注入0.004%(0.001mol/L)氢氧化钠溶液至正常装量，熔封，剔除含有玻璃屑、纤维及白点等异物的安瓿，置热压灭菌器内，在121℃,97kpa加热30分钟，放冷取出检查，不得有易见的脱片。
（2）用0.3%(0.0075mol/L)氢氧化钠溶液，照上述方法检查，不合格安瓿不得超过2%。
3．中性检查（1）浓甲基红试液的配制：取甲基红40mg，加乙醇75ml与0.02mol/L氢氧化钠液适量（约3.75ml）至其pH为5.2，再加新沸过的冷蒸馏水适量，使成100ml即得。
（2）甲基红酸性溶液的配制：取上述甲基红液20ml，加新沸放冷的蒸馏水950ml，加0.02mol/L盐酸液适量（约3.8ml）至pH为4.2，添加适量新沸过的冷蒸馏水使全量成1000ml 即得。
（3）检查法：取6支已洗净烘干后之安瓿分别注入甲基红酸性溶液至正常装量，熔封，置热压灭菌器内，在121℃,97kpa加热30分钟，放冷取出检查，安瓿内甲基红酸性溶液的pH值应为4.2-6.2。
（二）手提式热压灭菌器的使用1．手提式热压灭菌器的结构包括主体、消毒锅、盖、安全阀、放气软管、压力表等。
其主体及盖采用铝合金的铸件，消毒锅采用铝板压制成，总重量12公斤，消毒锅直径28厘米，深28厘米，容积约18升。
2．使用方法（1）将欲消毒物品包扎后放入消毒桶内的筛板上。
（2）在主体内加水3升。
（3）将消毒桶放入主体内，此时水不应该倒入消毒桶内，盖上软管插入消毒桶的槽内，盖上的螺栓紧固槽应与主体的螺栓槽对正，然后顺序地将相对方位的翼形螺母均匀旋紧，使盖与主体密合。
（4）将消毒器放在热源上加热，开始时将放气阀放在垂直开放位置，消毒器内空气会随着加热由此阀孔逸出，当水煮沸时有一股较急蒸汽冲出，将放气阀关闭，此时消毒器内压力随着继续加热而上升，在压力表上指示出来。
当器内压力至所需范围时，适当调整热源，使之维持恒压，并开始计算时间。
（5）待灭菌时间到达，除去热源，使其自然冷却，待压力回复到零时，将放气活门打开，待气放完，开启盖子。
注意：热压灭菌器为受压容器，使用时务必谨慎细致以免发生危险事故。
二、盐酸普鲁卡因注射剂的制备实验指导：注射剂是一类供皮下、肌肉、静脉、脊髓等注射的灭菌溶液。
具有奏效迅速等优点。
注射剂的生产和质量都有别于其他制剂，要求更为严格，以保证用药安全、有效。
对注射剂的基本质量要求是：（1）无菌（2）无热原（3）含量合格（4）pH合格（5）澄明度合格（6）稳定无毒性（7）等渗为达到上述要求，制备时应尽量在避菌、避尘的条件下进行，原料药品及溶媒应严格要求，灭菌操作应确实掌握温度、时间以达到完全灭菌要求。
实验内容：（一）2%盐酸普鲁卡因注射液的制备处方：盐酸普鲁卡因 2.0g氯化钠0.5g注射用水加至100ml制法：取氯化钠加注射用水约90ml，溶解后加入盐酸普鲁卡因使溶，用稀盐酸调节pH 至4.2-4.5，加注射用水到100ml。
用3号垂熔玻璃漏斗过滤澄明，灌注于2ml安瓿中，熔封，100℃，30分钟灭菌，检漏。
注：1.盐酸普鲁卡因注射液水溶液不稳定，易发生水解，水解反应受溶液pH值影响很大，属于酸碱催化反应，在pH 2.3以上为OH -催化，PH 2.3以下为H+催化。
盐酸普鲁卡因水溶液最稳定pH值为3.4。
由于盐酸普鲁卡因注射液灭菌后水解产生对氨基苯甲酸，使溶液pH值下降，在生产上控制pH值为4.2-4.4。
2. 除pH值外，加热亦能促进盐酸普鲁卡因的水解。
盐酸普鲁卡因注射液通常用100℃30分钟灭菌，温度增高或灭菌时间延长，都会引起注射液变黄。
由于盐酸普鲁卡因分子结构中含有伯胺基，水解后产生对氨基苯甲酸，在酸性溶液中加热脱羧生成苯胺，苯胺氧化生成有色物质。
对氨基苯甲酸在PH值6时脱羧最快，故本品pH值不能超过6。
光线以及铜、铁、镉、钴等金属离子能促进其氧化。
（二）成品质量检查1．澄明度检查将检漏合格之安瓿冲洗干净后用干布擦净，放在澄明度检查灯下，目视检查，不得有易见到的玻璃屑、纤维、白点等。
结果记录于表：2．测定pH值应为4.2-4.5。
3．含量测定本品应含盐酸普鲁卡因（C13H20O2N2HCl=272.78），为标示量的95%~105%。
操作步骤：精密量取本品2ml，加中性醇3至5ml，酚酞指示液1滴，以0.1mol/L氢氧化钠溶液滴定至粉红色。
计算：1ml0.1mol/LNaOH溶液相当于0.02728g 盐酸普鲁卡因。
样品所须滴定液1.46ml±5%为1.39-1.53ml。
百分含量mol/L.V NaOH×13.644．安瓿的印字和包装每支安瓿上印清品名、规格、主药含量及批号，然后装盒。
三、氯霉素眼药水的制备实验指导：滴眼剂是专用于眼部的液体制剂，大部分为真溶液，少数为混悬液。
一般作眼部的杀菌、消炎、收敛、扩瞳、局麻、保护等用。
由于眼部组织柔嫩，敏感的特点，滴眼剂有如下的质量要求：（1）为澄明溶液，无玻璃屑。
（混悬剂的滴眼剂粒径要求小于15um）。
（2）与泪液等渗（3）pH除个别为了保护主药稳定性和增加主药溶解度而稍有出入外，一般为5.5-7.8。
（4）无菌，应符合药典无菌检查标准，因眼用溶液为多剂量剂型，为防止使用过程中的污染，常需加入防腐剂。
（用于眼外伤和眼手术一类的则不允许加入防腐剂）。
为保证眼用溶液的无菌要求，可采用下述方法（1）主药性质稳定者配滤的眼用溶液灭菌分装。
（2）主药不耐热的，采用无菌操作制备。
（3）用于眼部手术和眼外伤制剂，必需制成单剂量制剂，进行灭菌。
氯霉素在结晶状态下很稳定，干燥粉末密闭二年，抗菌效力几乎不变。
溶液煮沸5小时，效价几乎无显著影响，但在显著碱性pH>8或酸性下水解较快。
在弱酸性水溶液中较稳定，最稳定pH为6。
此外，氯霉素可被磷酸盐、醋酸盐等催化水解，因此本品常用硼酸盐为缓冲液，pH为6左右。
据报导，氯霉素在pH6时，100℃加热30分钟，随后迅速冷却，分解约3-4%；115℃加热30分钟则分解15%。
在25℃pH=6时，K=7.5×10-9秒，t1/2=3个月。
为此，本实验采用硼酸盐作缓冲液，使pH达6左右，并与泪液等渗，配制方法采用溶液过滤后灭菌，再采用无菌操作柜进行无菌分装，本品有效期为三个月。
实验内容：一、0.25%氯霉素眼药水处方：氯霉素0.25g硼酸 1.90g硼砂0.052g尼泊金0.1g蒸馏水加至100ml二、制法（一）容器处理1．玻璃眼药水瓶，玻管及玻璃容器等，先用洗涤剂洗刷干净，沥干水分，然后用清洁液浸泡，水洗，再用蒸馏水淋洗，最后160℃灭菌1小时，避菌贮藏。
2．橡皮塞和橡皮管处理：用1%盐酸煮沸15分钟，取出用水捏洗数次，再用1%碳酸钠煮沸15分钟，捏洗数次，漂净，用蒸馏水淋洗，再加蒸馏水煮沸30分钟，备用。
涤纶纸逐张分开后，用蒸馏水煮沸半小时，最后以滤清的注射用水漂洗至净，浸泡备用。
3．无菌操作柜用新洁尔灭（1：1000）消毒好备用。
手用肥皂洗净后，再用新洁尔灭浸泡。
（二）配制1．配液——称取硼酸，硼砂置洗净的容器中，加注射用水约90ml，加热至40~43℃，搅拌使完全溶解，然后加入氯霉素和尼泊金使溶解，加水至全量，3号垂熔漏斗过滤，滤液用250ml盐水瓶收集，收集好后，立即盖上涤纶纸，塞好橡皮塞，用纱布扎好，100℃30分钟灭菌。
测含量及pH略）2．无菌分装——操作者的手经消毒后，戴上已消毒的塑料袖套，伸进无菌操作柜内操作。
打开大包装消毒的盐水瓶，将溶液分装在已塞上小头的滴眼瓶中，塞上橡皮塞，分装完毕后检查澄明度，贴瓶签，即得。
思考题：1．影响注射剂成品率的因素有哪些？2．盐酸普鲁卡因注射液制备中要调节pH值，它的目的是什么？3．写出氯霉素的化学结构式，试说明氯霉素在水溶液中效价下降的原因。
4．处方中硼酸、硼砂、尼泊金起什么作用？。
