发酵培养基灭菌和蒸煮一、培养基灭菌的要求微生物发酵工业自从采用纯种培养技术以后,产品的产量和质量都有了很大提高,但对于防止发酵生产全过程的杂菌污染的要求也更高了。
在整个发酵过程中,只允许生产菌存在和生长、繁殖,不允许任何其他微生物存在。
特别是在种子逐级扩大培养、转接过程中和发酵的前、中期,一旦污染了杂菌,会在短时间内与生产菌抢夺营养物质,严重影响和干扰生产菌的生长和发酵作用。
培养基和设备灭菌是否彻底直接关系到生产过程的成败,轻则导致所需产品的产量锐减、质量下降、分离提取困难;重则使全部培养液变质,导致培养基报废,得不到产品,使生产处于不正常状态,造成经济上的严重损失。
因此,为了保证发酵培养过程正常进行,无论是在实验室还是在工业生产中,在接种要培养的生产菌株之前,必须对培养基、流加的原料、消泡剂、生产设备、管道、空气系统进行严格的灭菌,杀死所有非生产用微生物。
同时,要对生产环境,即车间、器具、厂区等进行消毒,防止杂菌和噬菌体的污染。
在发酵生产实践中,掌握消毒与灭菌的技术、原理和方法具有非常重要的意义。
工业生产中,消毒与灭菌的方式因发酵生产方法和所用原料的不同而不同,固态发酵的培养基灭菌常与固体物料的蒸煮熟化相结合,而液态深层发酵的培养基灭菌、生产设备和管道灭菌均采用蒸汽湿热灭菌。
二、灭菌技术随着发酵技术应用范围的扩大,许多新型灭菌技术在发酵工业领域得到广泛应用,如超高压灭菌技术、臭氧灭菌技术、超声波灭菌技术、微波灭菌技术。
1、湿热灭菌尽管灭菌的方法很多,但发酵工业生产中对培养基和设备的灭菌,以湿热灭菌法应用最普遍,灭菌效果最好。
在利用蒸汽对培养基灭菌的过程中,由于蒸汽冷凝时会释放出大量的潜热,并具有强大的穿透能力,在高温和存在水分的条件下,微生物细胞内的蛋白质极易变性或凝固而引起微生物的死亡,湿热灭菌法在培养基灭菌中具有经济和快速的特点。
但高温虽然能杀死培养基中的杂菌,同时也会破坏培养基中的营养成分,甚至会产生不利于菌体生长的物质。
