第四篇 动物病毒学第五版

说明：红色加下划线的是罗老师最后上课说的（基本上包括），红色的是老师平时上课时说的要掌握的，大家对着课件划一划吧，若有遗漏的，可以和我说哈要强调的是DNA病毒和RNA病毒的分类很重要：(如下)具有分段基因组的病毒：正粘病毒科：布尼病毒科：砂粒病毒科呼肠孤病毒科：双RNA病毒科：用于病毒的分离与培养：细胞培养、鸡胚和实验动物病毒有两种形式：一是存在于细胞外的具有感染性的病毒粒子，二是存在于细胞内的可以增值的基因组天花是人类历史上第一个用疫苗消灭的传染病。

根据病毒的宿主性质将其分为：✓动物病毒(animal virus)✓植物病毒(plant virus)✓细菌病毒(bacteria virus), 即噬菌体(bacteriophage or phage)病毒的结构组成衣壳（capsid）：在病毒的结构组成中，包围着病毒核酸及其结合蛋白的蛋白质鞘，由许多原体以次级键结合形成，具有保护病毒核酸的作用，同时也是病毒核酸由一个宿主细胞转移到另一个宿主细胞的工具。

包膜(囊膜)（envelope）: 覆盖在病毒核衣壳外的脂蛋白膜。

其组成成分主要来自宿主细胞，是病毒的核衣壳在感染细胞内穿越核膜或在感染细胞表面“出芽”时由细胞膜获得。

病毒衣壳的对称形式1、二十面体对称（icosahedral symmetry）2、螺旋对称(helical symmetry)3、复合对称壳体(complex symmetry)1、二十面体对称（icosahedral symmetry）5、3、2构型，或5、3、2次轴对称二十面体对称有12顶、20面和30棱✓以顶点为轴旋转72°，其形不变，要转5 次复位✓以面为中心，旋转120°，其形不变，要转3次复位✓以棱为中心，旋转180°，其形不变，要转2次复位故又称5、3、2构型，或5、3、2次轴对称✓DNA病毒：虹彩病毒、疱疹病毒、腺病毒、乳多空病毒、细小病毒、圆环病毒、非洲猪瘟病毒、嗜肝DNA病毒✓RNA病毒：呼肠孤病毒、双RNA病毒、小RNA病毒、杯状病毒、戊肝病毒、披膜病毒、黄病毒、动脉炎病毒、反转录病毒2、螺旋对称(helical symmetry)副流感病毒的破碎病毒粒子，箭头所指为螺旋对称的核衣壳，右图为模式图呈螺旋对称的多为有囊膜的病毒，在动物病毒中螺旋对称的病毒均属有囊膜的单股RNA病毒。

动物病毒学课程论文王小小：电镜技术在动物病毒检测中的应用电镜技术在动物病毒检测中的应用王小小摘要：对于常见动物病毒的检测，常使用的方法是血清学检测、生物学接种及病原分离等。

但对于一些新生疫病的检测，尤其用血清学检测时，于手中不一定具备与该疫病相对应的抗体，往往不能马上进行检测。

为了及时控制和扑灭新生疫病，必须尽快地确定病原。

电子显微技术问世及其在病毒检测中的应用解决了这一难题。

在国内外学者研究的基础上，就应用电镜技术检测动物病毒过程中的取样部位及时间、制样方法、电镜下病毒的识别方法及常见病毒的形态特征和鉴别要点进行归纳总结，为同行们使用电镜技术检测动物病毒提供一定的理论基础。

关键词：电镜技术，动物病毒，取样，制样，检测前言已有学者应用电镜技术对形态特征性强的动物病毒感染的动物病毒病进行了诊断[1]。

尤其对于混合感染的和新发现的病毒病的检测，电镜技术优于优于其他任何一种方法[2]。

虽然常规的血清学特异性诊断是比较快速和准确的,但一次只能检出一种病原,且对于新生疫病,当手头上不具备相应的血清时,更是束手无策[3]。

若使用电镜进行检测,凡在病料中有什么样的病原就能检出什么病原。

因此，对病料的取样部位及时间、制样方法、电镜下病毒的识别方法的探索，对于使用电镜技术检测动物病毒具有一定的理论意义及现实指导意义。

1.病料的取样部位及时间[2,3] 要想获得高检出率，病料的取样部位及时间是关键。

取材应根据各种病毒在动物体内分布的位置特点来确定，采集相应的组织或在特定部位取材,且要力求准确。

例如，鸡传染性法氏囊病病毒采取感染鸡的法氏囊粘膜层，猪传染性胃肠炎病毒最好取感染仔猪的小肠粘膜层等。

如取材的组织或部位不当,则很难观察到病毒。

另外所采集的样品尽量以最快的方式送往实验室。

取材时间应根据观察目的而定,一般在感染中期容易发现病毒，但也有的病毒在感 1 王小小：电镜技术在动物病毒检测中的应用染的初期也能较容易地找到病毒。

1、疾病概论一、正常机体具有的特征⒈各器官系统机能活动协调。

⒉与外界环境保持动态平衡。

而机体在致病因素作用下，引起机体以上协调和平衡能力被破坏，导致：致病因素对机体损伤，机体对抗致病因素的抗损伤的复杂的斗争过程。

疾病：机体在致病因素作用下所发生的损伤与抗损伤的斗争过程；表现为机体代谢、形态的变化，畜体生产能力下降、经济价值降低。

二、致病因素与抗病因素致病因素：(一)生物性因素病原性微生物（病毒、支原体、立克次体、细菌、螺旋体、霉菌）寄生虫（原虫、蠕虫）所引起的疾病有一定潜伏期，有一定规律的病程，一定器官特异性病变，有传染性。

㈡物理因素：是疾病的启动因素。

机械力（创伤、震荡、骨折、脱臼、内源性肿瘤、包囊压迫）与力强度、力性质及力作用的部位、范围、持续时间有关。

热射病：高温高湿对全身的作用，日射病：脑的温度升高引起（波长600-1000nm的红外线可穿透颅骨）光照病：动物体内有光感物质，如卟啉、荧光素、伊红、叶绿素存在，则机体对普通光线感受过敏，引起皮肤疹块和坏死（感光过敏症）。

电流（电击伤），光线（电光性眼炎），声波（噪音性耳聋），电离辐射（放射病），大气压（高山反应、潜水病），温度（烧伤、冻伤）㈢化学因素：强酸，强碱，毒物中毒（氯，CO、SO2、有机磷农药），超剂量药物。

取决于毒物的性质，进入部位、溶解度、浓度以及动物年龄、种类、性别、营养状况、管理水平和个体反应性。

㈣营养性因素：营养↑→肥胖症→动脉粥样硬化营养↓→营养不良如：抗体↓蛋白质↓→吞噬↓吞噬活性↓→易得感染VitB1缺乏→脚气病；VitD缺乏→佝偻病；缺碘→甲状腺肿㈤应激性因素：转群、疫苗注射、打耳号、拥挤。

㈥遗传因素⑴直接遗传：遗传物质改变直接引起遗传性疾病，例如:先天愚型，血友病，色盲。

⑵遗传易感性：指具有易患某种疾病的遗传素质，在一定的环境因素作用下，机体才发生相应的疾病，如蚕豆病（G-6-PD 缺乏），高血压病，糖尿病等。

㈦先天因素：能损害发育胎儿的化学物质，药物及病毒，可致胎儿畸形或缺陷。

《动物病毒学》实验课讲稿任课教师：方六荣讲课对象：2002级动物医学专业1-4班讲课时刻：2004.09-2005.01目录实验一鸡胚接种 (1)实验二传代细胞培育与病毒在传代细胞中的培育 (6)实验三原代细胞培育 (9)实验四病毒TCID50的测定 (11)实验五中和实验 (13)实验一鸡胚接种一、实验目的了解鸡胚的大体结构与功能及鸡胚接种的方式，把握经常使用的鸡胚接种方式。

二、鸡胚接种的作用要紧用于：①分离病毒，并依照病变初步鉴定病毒②培育病毒，制造抗原和疫苗③测定各毒株之间的抗原关系（用鸡胚作中和实验和交叉爱惜实验）④测定病毒毒力三、材料1、鸡胚10日龄2、病毒鸡传染性支气管炎病毒（IBV）3、照蛋灯4、打孔器5、石蜡6、注射器7、蛋座8、酒精棉球、碘酊棉球四、鸡胚用于病毒培育的优缺点（一）优势1、组织分化程度低2、可选择不同的日龄和接种途径3、病毒易于增殖4、感染病毒的组织和液体中含大量病毒5、容易搜集和处置6、来源充沛7、设备和操作简便易行（二）缺点1、胚内可能污染细菌和病毒沙门氏菌、禽白血病病毒、新城疫、禽脑脊髓炎病毒2、母源抗体3、许多病毒在鸡胚中增殖缺乏特异性的感染指针五、鸡胚的结构与功能1、卵壳上有细孔，进行气体互换2、壳膜使气体分子和液体分子在内外两方面进行互换。

3、气室呼吸和调剂压力4、绒毛尿囊膜起胚胎呼吸器官的功能，氧气的互换是在膜的血管内通过卵壳孔而进行的。

5、尿囊腔胚胎的排泄器官，内含有尿囊液，初为透明液体，是单纯生理盐溶液，以后尿囊液中尿酸盐迅速增加，胚胎发育到第12-13天后，尿囊液开始变得混浊。

6、羊膜与羊膜腔其中盛有羊水，胎体浸泡于其中7、卵黄在胚胎发育初期供给鸡胚营养。

8、卵白在胚胎发育晚期供给鸡胚营养。

六、受精卵的选择1、最好是来自SPF鸡群，以降低母源抗体的阻碍。

2、受精卵的壳最好是白色的，以便于检卵。

3、受精卵必需新鲜，保留在5-20℃不要超过10天，保留一个月的受精卵，孵化率快要于零。

动物病毒学重点知识点为什么病毒必须在活的敏感细胞内才能生长繁殖?答:因为:1病毒本身没有合成蛋白质的场所一核糖体,故必须借助宿主细胞的核糖体合成蛋白质;2由于病毒缺乏完整而又必须的酶,故必须借助细胞的某些酶才能复制;3只有敏感细胞上才有病毒的受体,病毒与受体结合后才能进入细胞内生长繁殖。

简述病毒复制的基本过程。

答:病毒复制的基本过程为:1吸附,即病毒颗粒与细胞膜的受体发生相互作用后病毒颗粒特异性地吸附于宿主细胞表面;2穿入,病毒吸附于宿主细胞膜后以各种不同的方式进入细胞,此即穿入;3脱壳,病毒在宿主细胞内脱去核壳,病毒核酸随后进入细胞的一定部位;4病毒大分子的生物合成,病毒基因组进入宿主细胞后,一方面表达与合成病毒复制过程中所必需的结构蛋白和非结构蛋白,另一方面进行复制合成子代病毒核酸;5装配与释放,病毒核酸与壳体蛋白合成完毕后,在细胞核内或胞浆内装配成熟为病毒颗粒(核衣壳),此即子代病毒体,然后子代病毒体以不同方式从感染细胞中释放到细胞外环境。

简述病毒鉴定的基本原则。

答:鉴定病毒的基本原则包括:根据病毒的生物学特性如病毒的形态、大小与结构等加以鉴定;根据病毒的宿主范围及受染宿主的症状加以鉴定;根据病毒的理化性质如核酸的类型及其对理化因素的抵抗能力等加以鉴定:根据病毒的血清学反应加以鉴定。

流感病毒的快速诊断方法有哪几种?答:(1)免疫方法检测标本中抗原如IFA、EIA及放射免疫技术均可检测培养物及标本中的抗原。

(2)分子杂交检测病毒RNA。

(3)RT-PCR检测培养物及标本中流感病毒RNA,并能进行病毒分型及分亚型。

(4)免疫电镜技术。

目前最常用的培养病毒的方法是细胞培养。

根据细胞来源和性状的不同可分为三类:(1)原代细胞:新鲜组织经胰酶消化后形成单细胞，加入培养液后37?培养，数日可贴壁长成单层细胞，即为原代细胞培养。

原代细胞经胰酶消化后再传一次即为次代细胞培养。

原代细胞培养可用于多种病毒分离和疫苗的制备。

禽源冠状病毒感染情况概述庄青叶;陈继明;王楷宬【摘要】Based on epidemiological investigation,surveillance,gene analysis of coronaviruses in birds in the world,coronavirus infections and the related diseases in avian were summarized in this paper. Avian-origin coronavirus has a very complex population with abundantdiversity,involving viruses in Gammacoronavirus and Deltacoronavirus at least. Avian infectious bronchitis virus existed and was endemic in almost all chicken-producing countries. Turkey coronavirus,duck coronavirus,goose coronavirus,pigeon coronavirus were already detected in avian and some of these were pandemic. A few other Deltacoronavirus were only detected in wildfowl .%以国内外对冠状病毒在禽类中的流行病学调查、监测和基因分析等研究报道为基础，从病毒分类学角度，对各“种”冠状病毒在禽类中的感染情况和引起的相关疾病进行简要概述。

全球在禽类中发现的冠状病毒种类较多，至少涉及丙型和丁型冠状病毒属。

其中，鸡传染性支气管炎病毒几乎在全球所有养鸡国家中存在，并呈地方性流行；火鸡冠状病毒、鸭冠状病毒、鹅冠状病毒、鸽冠状病毒也在禽类中被发现，部分病毒已在禽群中流行；其他丁型冠状病毒属病毒仅在少数野鸟中被发现。