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兽医病毒学课件： 亚病毒

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课件：亚病毒

课件：亚病毒

2、动物接种试验 常用的实验动物是小鼠、大鼠和仓鼠，利用建
立动物感染模型来判断生物体是否感染朊病毒。 常规方法是将无菌的组织标本匀浆后作10倍连续
稀释，将每个稀释度溶液接种于实验动物的脑内。 对接种动物每3d检查1次，发现其出现毛乱、弓背、 运动过慢和后肢瘫痪等病状后逐日检查，濒死扑杀， 取脑组织作病理学检查，以验证朊病毒感染。如接 种动物不发病，则继续观察至其死亡或适时盲传， 最后取脑组织作病理学检查。根据动物发病和死亡 数计算滴度。
亚病毒（subvirus ）
亚病毒（subviruses）是一类比病毒更为简 单，仅具有某种核酸不具有蛋白质，或仅 具有蛋白质而不具有核酸，能够侵染动植 物的微小病原体。他不具有完整的病毒结 构的一类病毒称之为亚病毒，包括类病毒、 卫星RNA、朊病毒。
朊病毒（Prion）
牛海绵状脑病（BSE)
3、组织病理学诊断 表现为神经元和胶质细胞空泡化、灰质海绵状病
变，形成单独或成簇的空泡样病灶，神经胶质细胞和 星形细胞增生，无炎症反应。大脑灰质病变广泛，可 侵犯基底神经节、下丘脑及小脑的深层核，以病原因 子PrPsc蓄积和淀粉样蛋白斑块为特征，病变通常两 侧对称。病灶中的蛋白纤维可呈放射状排列，为特定 的局限性分布。大脑皮质可见神经纤维节。电镜观察 在淀粉样病变区可见纤维样蛋白结构成簇交叉排列， 直径10～20nm，长约100～200nm。
• 分子杂交实验证明，编码PrP的基因普遍存在 于小鼠、大鼠、羊、人等脊椎动物体内，统称 为Pro-P基因。
基因调控
用基因敲除技术培育的转基因小鼠缺乏PrPc基 因，在接种痒病朊病毒蛋白不发病。
将正常脑组织块移植到此种转基因小鼠的脑内， 接种后仅移植的正常部位发生病变。
将小鼠的 PrPc基因敲除，以人PrPc基因取而代 之，接种牛海绵状脑病朊病毒时，小鼠在500d左 右发生神经性疾病，并产生病变，这一发现揭示 了人的新型克雅氏病与牛海绵状脑病的关系。

第四章 病毒与亚病毒

第四章 病毒与亚病毒

• 另一些噬菌体在进入寄主细胞后，并不立即进行 复制，而是将其核酸整合到寄主染色体上，并能 够伴随寄主细胞的生长繁殖而将病毒基因组传递 给子代寄主细胞，噬菌体通常被称之为温和噬菌 体（temperate phage）。
• 在极少数情况下（如紫外照射等），温和噬菌体 也会经诱变完成裂解性生活周期。
1、噬菌体的繁殖
裂解途径
溶原途径
细胞反复分裂
λ噬菌体的裂解和溶原途径
溶源性特点： （ 1 ）溶 源 性转变（ lysogenic conversion）： 温和噬菌体在菌体细胞内以前噬菌体形式存在可 导致宿主细胞的表型改变，这种改变称为溶 源 性 转变。 （2）免疫作用：前噬菌体还导致溶源性细菌 对同类型噬菌体的侵染具有免疫作用，阻止携带 与溶源性菌体所含的前噬菌体DNA相同的噬菌体的 吸附和生物合成，但这种免疫作用不能阻止溶 源 菌体被别种类型的温和噬菌体或烈性噬菌体所侵 染。
（plaque）
人工培养的单层动物细胞感染病毒后， 也会形成类似噬菌斑的动物病毒群体， 称为空斑。 烟草花叶病毒感染烟草后，在叶片上出 现的一个个坏死的病灶，称为枯斑。
（三）3类典型形态的病毒及其代表
1、螺旋状对称型：烟草花叶病毒（TMV）
呈直杆状，长300nm，宽15nm，中空内径4nm，
由158个氨基酸组成一个皮鞋状的衣壳粒，相对分子量
3、病毒的群体形态
有些病毒在受感染的寄主细胞内会产生一种 细胞内的内含物，称为包含体（inclusion body），这种结构主要由未装配的病毒亚 基、完整的病毒粒子以及在受侵染时由寄主 细胞编码的蛋白质组成的聚集体。
包含体的形态：圆形、卵圆形、不定形
包含体在细胞中的位置不同：
a、细胞质，如大多数痘病毒（天花病毒、羊 痘病毒）和狂犬病毒等 b、细胞核，如疱疹病毒、昆虫多角体病毒等 c、同时出现于受到重复感染的细胞中

《病毒与亚病毒》课件

《病毒与亚病毒》课件

病毒的结构
外壳
病毒外壳由蛋白质构成，保护内部的核酸。
核酸
病毒的遗传信息存储在核酸中，可以是DNA或RNA。
尖刺蛋白
尖刺蛋白帮助病毒结合并入侵宿主细胞。
包膜
某些病毒包裹在脂质双层中，形成包膜。
病毒的复制和传播方式
1
复制基因组
2
宿主细胞使用病毒基因组复制新的病毒。
3
侵入宿主细胞
病毒进入宿主细胞并释放其基因组。
《病毒与亚病毒》PPT课 件
病毒是微生物领域中最小的病原体，由核酸和蛋白质组成。本课程将深入探 讨病毒和亚病毒的定义、结构、复制和传播方式，以及它们引起的常见疾病。
病毒与亚病毒的定义
1 病毒
是微小的传染性病原体，只能在寄生于宿主 细胞内进行复制。
2 亚病毒
相对于病毒，亚病毒在结构和复制方式上具 有一定的相似性，但其复制能力和传播能力 较弱。
亚病毒的特征
1 较小
亚病毒通常比病毒更小，其尺寸在病毒和细菌之间。
2 较低的遗传多样性
亚病毒基因组的变异程度相对较低。
3 较弱的复制和传播能力
与病毒相比，亚病毒的复制和传播能力较弱，通常需要利用病毒作为辅助。
病毒与亚病毒的应对措施
1
病毒
疫苗开发、洗手、社交距离、佩戴口罩。
2
亚病毒
重视水源管理，健康教育，疫情监测。
组装和释放
新的病毒组装在宿主细胞中然后释放到 外部病毒引起的呼吸道感染，表现为发热、咳 嗽和嗓子痛。
牛皮癣
是由乙型人面瘫病毒感染引起的一种皮肤病，表 现为红色斑块和鳞屑。
艾滋病
由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起，危害人体免 疫系统，导致免疫功能下降。

第三章 病毒与亚病毒[可修改版ppt]

第三章 病毒与亚病毒[可修改版ppt]

Viral Structure (Enveloped Polyhedral Virus)
Transmission Electron Micrograph of HIV-1 Stained to Show Surface Glycoproteins
Transmission Electron Micrograph of HIV-1
• 噬菌体具有病毒的一些特性（个体微小）。
• 噬菌体基因组含有许多个基因，但所有已知的 噬菌体都是细菌细胞中利用细菌的核糖体、蛋 白质合成时所需的各种因子、各种氨基酸和能 量产生系统来实现其自身的生长和增殖。一旦 离开了宿主细胞，噬菌体不能生长和复制。
• 噬菌体分布极广，凡是有细菌的场所，就可能 有相应噬菌体的存在。
• 1892年，俄国生物学家伊凡诺夫斯基（Dmitry Ivanovsky）在研 究烟草花叶病时发现将感染花叶病的烟草叶的提取液用烛形滤器 过滤后能够感染其他烟草。
• 1899年，荷兰微生物学家马丁乌斯·贝杰林克（Martinus Beijerinck）重复了Ivanovsky的实验，发现这种新的感染性物质 只在分裂细胞中复制，并称之为contagium vivum fluidum（可溶 的活菌）并进一步命名为virus（病毒）。
• 1963年，巴鲁克·塞缪尔·布隆伯格发现了乙型肝炎病毒。 • 1965年，霍华德·马丁·特明发现并描述了第一种逆转录病毒，逆
转录酶在1970年由霍华德·特明和戴维·巴尔的摩分别独立鉴定出。 • 1983年，法国巴斯德研究院的吕克·蒙塔尼和弗朗索瓦丝·巴尔－
西诺西首次分离得到艾滋病毒（HIV），与发现了能够导致子宫 颈癌的人乳头状瘤病毒的德国科学家哈拉尔德·楚尔·豪森分享了 2008年的诺贝尔生理学与医学奖。

亚病毒的介绍课件

亚病毒的介绍课件
美国加州大学旧金山分校动物病毒学家Prusiner1982年研究羊的瘙痒病原时发现的一种对人有侵染性的蛋白质颗粒，称为“Prion”（Protein infection的缩写）或“Virino”，有人译为“朊病毒”，或“毒朊”。 这一发现使生物学家感到震惊，因为它与现行的生物中心法 则即DNA→RNA→蛋白质的依赖关系背道而驰。除了引起羊 瘙痒 病外，还导致牛的海绵状脑（即“疯牛病”，或称BSE）和人 的苦鲁病（发现于新几内亚东部高原的一种中枢神经系统 退化症）等。
第二节 亚病毒
1、类病毒 T.O.Diener 1971年发现马铃薯纺锤形块茎病的病原是一种只有侵染性小分子RNA而没有蛋白质的感染因子，他称为类病毒（viroid）。类病毒是一个裸露的闭合环状ssRNA分子，它能感染寄主细胞并在其中进行自我复制使寄主产生病症。类病毒分子量小，仅为最小RNA病毒的十分之一 。目前对马铃薯纺锤形块茎病类病毒(PSTV)研究比较清楚。
请 提 宝 贵 意 见 谢 谢
2、拟病毒（类类病毒、病毒卫星） 如果把具有核酸和蛋白质组分的病毒称为“真病毒”的话 ，拟病毒则是存在于植物“真病毒” 颗粒中的小的环状 RNA分子（被寄生的真病毒称辅助病毒）。将这种包被于病 毒壳 体内 的环状RNA分子称为拟病毒，现已发现的拟病毒 除绒毛烟斑 驳病毒（VTMoV）外，还有苜蓿暂时性条斑病 毒（LTSV） 和地下三叶草班驳病毒（SCMoV）。丁型肝炎病毒即是寄生在乙型肝炎病毒体内的一种拟病毒。

第四章病毒与亚病毒(可修改).ppt

第四章病毒与亚病毒(可修改).ppt

原噬菌体（或前噬菌体）： 即整合在宿主
核DNA上的噬菌体的核酸。
溶原性细菌：指在核染色体上整合有原噬
菌体的细菌。可进行正常生长繁殖,而不被
裂解。
最新.课件
29
温和噬菌体的繁殖
最新.课件
30
最新.课件
31
检验溶源菌的方法
最新.课件
32
最新.课件
33
四、植物病毒
最新.课件
34
病毒引起的植物病害特征
最新.课件
单层平板法 双层平板法 电镜计26 数
噬菌体一步生长曲线
one-step growth curve
定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线，观察一群噬菌体感 染一群细胞所发生的变化。
测定一步生长曲线的步骤
①用噬菌体的稀悬液去感染高浓度的宿主细胞，以保证每个细胞至 多不超过一个噬菌体吸附。
将少量噬菌体与大量敏感菌 混合培养在营养琼脂中，在平板 表面布满宿主细胞的菌苔上,可 以用肉眼看到一个个透明的不长 菌的小圆斑，称为噬菌斑。(每 个噬菌斑一般由一个噬菌体粒子 形成的。)
效价
效价表示每毫升试样中所含有的侵染性的噬菌体粒子 数，也即噬菌斑形成单最位新.课（件pfu）数或感染中心数。25
16
最新.课件
1. 烈性噬菌体 的繁殖
最新.课件
17
Fig. 1: Adsorption
Fig. 2: Penetration
最新.课件
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Fig. 3: Early Replication
Fig. 4: Late Replication
最新.课件
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Fig. 5: Maturation
Fig. 6: Release

第四章病毒与亚病毒 ppt课件

第四章病毒与亚病毒 ppt课件

甲型流感病毒（Influenza A virus），又 称A型流感病毒
乙型流感病毒（Influenza B virus），又 称B型流感病毒
丙型流感病毒（Influenza C virus），又 称C型流感病毒
甲型流感病毒抗原变异情况
亚型名称 原甲型（A0） 亚甲型（A1） 亚洲甲型（A2） 香港亚型（A3）
Potato spindle tuber viroid gets its name becEaleucstreonofmtihcreosocboploicngpicttuubreerosf porotadtoucsepdindle frotmubienrfveicroteidd(PpSlaTnVtds).
效价
效价表示每毫升试样中所含有的侵染性的噬菌体粒子 数，也即噬菌斑形成单位（pfu）数或感染中心数。
单层平板法 双层平板法 电镜计数
噬菌体一步生长曲线
one-step growth curve
定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线，观察一群噬菌体感 染一群细胞所发生的变化。
测定一步生长曲线的步骤
Symptoms of viroid diseases
这些裸露的RNA 分子可以导致许多谷物，水果， 观赏植物，严重的病变，例如：马铃薯，番茄， 黄瓜，菊花，鳄梨，椰子等
A: 番茄矮化病, B:鳄梨日斑病 , C:菊矮化病 , D:
菊花褪绿斑驳
二、拟病毒 virusoid
三 朊 病 毒
疯牛病朊病毒
设备灭菌 使用抗噬菌体菌株
补救方法：
①尽快提取产品 ②加药抑制 ③及时更换菌种
噬菌体的应用
1. 用于鉴定细菌的分型； 2. 分子生物学领域的重要实验工具和最

微生物学课件第四节亚病毒,第五节病毒与实践

微生物学课件第四节亚病毒,第五节病毒与实践

实验佐证
• 据2005年4月22日出版的《细胞》杂志报道，美 国得克萨斯大学加尔维斯敦医学分部的神经生物 学家Claudio Soto及其同事正在接近这一目标。 为了制造更多PrPSC，Soto小组在试管中完成了 20次“感染”过程。在第一次感染中，研究小组 将健康脑组织和被羊瘙痒症感染的动物脑组织混 合到一起。就像那些初次接触病毒的动物一样， 健康脑组织中的PrPC被转变成了PrPSC。
• 人类和哺乳动物含有CPEB蛋白质，如果能够搞清其作用 的话，将会是相当有意义的。
7、预防与控制
• 用污染朊病毒的肉骨粉作饲料喂牛是导致BSE的 病因。自2000年起，欧盟国家已全面禁止使用。
• 现在认为，人类的新型克雅氏病与食用污染朊病 毒的牛肉有关，因此受到高度重视。
• 有证据表明，朊病毒无宿主特异性，可使其他反 刍兽和猫发病。通过口服或脑内接种，可在绵羊、 山羊、貂、绒猴、鼠猴、小鼠及仓鼠传代。
对实验佐证的质疑
• 加州大学旧金山分校的神经生物学家 Giuseppe Legname指出，问题在于，由 于研究人员是从感染了羊瘙痒症的脑组织入 手，而不是纯PrPSC，因此其他一些与羊瘙 痒症有关的因素可能和PrPSC一起被扩增了。 但Legname也表示，该系统可以用来检测 被感染动物血液中的低水平朊病毒。他说， 为了降低朊病毒通过食物或医学血液制品传 播的几率，这种检测“绝对必要”。
器械传染
CJD主要发生在老年人
nvCJD——人克雅氏病的新变异
• 1996年，疯牛病大爆发刚过，英国发生了十 多起CJD
• 与一般的CJD不同，接近Kuru病：
– 均发生于年轻人，平均死亡年龄27.5岁 – 病症与典型的CJD有所不同，开始主要是焦躁，抑
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痒病相关纤维
病理变化: 海绵状脑病。脑组织空泡变性，淀粉样蛋白
斑块，神经胶质细胞增生等。
所致疾病
• 人类朊病毒病
库鲁病、克雅病、新型克雅氏病等
• 动物朊病毒病
牛海绵状脑病、羊瘙痒症、水貂脑病等
牛海绵状脑病（ bovine spongiform encephalopathy, BSE）
• 俗称“疯牛病”，表现突然发作、运动失调、性情暴躁 等
卫星RNA是指依赖于辅助病毒才能进行复制，但其 本身没有编码外壳蛋白的遗传信息，而是包裹于辅 助病毒的外壳蛋白之中。
特点：
⑴卫星RNA单独没有侵染性，必需依赖辅助病毒才能 侵染和复制。
⑵卫星RNA可干扰辅助病毒的复制。 ⑶卫星RNA不具有编码能力，需要利用辅助病毒的外
壳蛋白，并与辅助病毒基因组RNA一起包裹在同一 病毒粒子内。 ⑷卫星RNA与辅助病毒基因组RNA的核苷酸序列无 同源性。
第三章 亚病毒 Subvirus
亚病毒（subvirus):比病毒更小、结构和化学组成
更为简单，具有感染性的致病因子。
根据其生物学特性和致病特征可分为类病毒(viriod)、 朊病毒（prion）和卫星因子(satellites)，其中卫星因子 包括卫星病毒(satellite virus,SV)和卫星RNA。
一、类病毒
• 1922 在美国首次发现马铃薯纺锤形块茎病 • 1960 我国首次在黑龙江省发现 • 1967-1971 Diener研究此病后报道并命名为马
铃薯纺锤型块茎病类病毒感染
（一）定义
类病毒是指存在于某些生物中并能引起特殊病害 的，其相对分子量较低的一种小RNA分子，其核酸外无 外壳蛋白，将其引入到同种的健康个体内时，能自主复 制并引起特殊症状。
（二）本质
朊病毒是机体正常的PrPc变构形成的。
朊病毒蛋白（prion protein, PrP)有两种构象：正常 型PrPc和致病型PrPsc。两者的主要区别在于其空间构 象上的差异。 PrPc仅存在a螺旋，而PrPsc有多个β折 叠存在，后者溶解度低，且抗蛋白酶解。
Secondary Structure of a Protein or Polypeptide
• 致病性：病变仅见于脑，神经元变性、空泡化；无炎症反应和
免疫反应，无宿主特异性。
• 诊断：
（1）脑组织病理组织学检查 （2）免疫酶组化 （3）免疫转印
• 防制：严格检疫，一经发现，坚决销毁
组织病理学
免疫组化
27-30 KD 免疫转印
痒 病（Scrapie)
• 是研究其他传染性海绵状脑病的原始模型 • 主要发生于成年绵羊，偶尔见于山羊的中枢神经三、朊病毒（Prion)
定义：是一类感染人与其他哺乳类动物，仅具有
传染性蛋白质，而无核酸的病原体。
朊病毒对人类最大的威胁是可以导致人类和家畜 患中枢神经系统退化性病变，最终不治而亡。
（一）生物学特性
• 导致退化性脑组织病理学反应 • 无炎症反应 • 无干扰素产生 • 无免疫原性 • 免疫B细胞、T细胞的功能未变化
（三）复制
◇□→□□ + ◇◇ →□□ □□ →
注：◇表示PrPc ，□表示PrPsc
一个致病分子（PrPsc ）先与一个正常 分子（PrPc ）结合，在致病分子的作 用下，正常分子转变为致病分子，然 后这两个致病分子分别与两个正常分 子结合，再使后者转变为致病分子， 周而复始。
（四）致病性
PrPsc大量聚集，形成痒病相关纤维（SAF）， 在脑组织中形成空斑。致病的基本条件是必须 同时具备朊病毒和朊病毒蛋白。
特点：
⑴卫星病毒单独没有侵染性，必需依赖辅助病毒才能 侵染和复制。
⑵卫星病毒并不是辅助病毒复制所必需的，一般有抑 制辅助病毒复制的作用。
⑶卫星病毒的RNA能够编码自身的外壳蛋白，其外壳 蛋白与辅助病毒没有血清学关系。
⑷卫星病毒的RNA与辅助病毒基因组RNA的核苷酸序 列无同源性。
（二）卫星RNA
类病毒主要使植物致病，引起马铃薯、柑橘、椰子、 啤酒花等多种重要的经济植物的严重损害，但类病毒 与人类疾病的关系尚未见报道。
（二）特点
• 大小仅为最小病毒的1/20
• 由单链共价闭和环状RNA分子组成
• 呈碱基配对的杆状结构，无蛋白衣壳
• 对核酸酶敏感，对热、有机溶剂有抵抗力
• 其复制依赖于宿主细胞的转录酶系统，而不需要
辅助病毒的存在
内环
二、卫星因子(satellites)
卫星因子是指必须依赖宿主细胞内共同感染 的辅助性病毒才能复制的核酸分子或小病毒。
1. 卫星RNA 2. 卫星病毒
（一）卫星病毒 (satellite virus,SV)
一种病毒的增殖常常需要另一种病毒的帮助才能 完成，这是由于该病毒基因组有缺陷，我们将它 称为称为卫星病毒。而具有辅助作用的病毒称为 辅助病毒(helper virus)。
系统疾病 • 表现为剧痒、精神萎顿、肌肉震颤、运动失调等 • 经口感染，也可经体表感染 • 致病性、诊断和防制见BSE
复习思考题
1. 名词解释： 亚病毒、类病毒、卫星病毒、卫星RNA、朊病毒
2. 类病毒、卫星病毒、卫星RNA和朊病毒的主要生 物学特性。
3. 如何进行疯牛病的诊断？