人脑血管平滑肌细胞培养

网络出版时间：2020-10-99：17网络出版地址：h ttps：//ki.oet/kcms/demO/34.1045.R.202012001520.410.UtmlIL-H调控血管平滑肌细胞TNF-a IL-3JL-3的表达罗欣，周宏*，顾亚男,李名聪，李昱昊,张胜权摘要目的初步探讨白细胞介素((6)-1调控血管平滑肌细胞(VSMC)中肿瘤坏死因子a(TNF-A)、I6V、I6D表达及其机制。

方法以不同浓度的I6D8(3、14、34、100ny/ml)处理VSMC,采取不同时间，通过Re/kC/e PCR分析TNF a、I6V、、LV mRNA水平的表达;ELISA方法分析TNF a、I6A、I6D蛋白水平表达;用特异性抑制剂分别阻断P38和AKT 信号通路，通过Western blot分析这9条信号途径激活情况及对TNF a、ILA、ILA蛋白表达的影响。

结果不同浓度的ILD3能促使VSMC中TNF a、、LA、、LA mRNA水平表达升高,表现出剂量依赖效应;ILD8(30ny/ml)以时间依赖的方式增加3种细胞因子的mRNA及蛋白水平表达。

Western 4/结果显示IL-13能够激活p38和AKT；特异性阻断剂分析显示：1LA8调控TNF a、、LA、IL-8的表达部分依赖该9条信号途径的激活。

结论ILD8部分依赖y33和AKT信号通路的活化从而促使VSMC中TNF a、ILA、ILV3种炎症因子表达增高。

关键词白细胞介素A3；血管平滑肌细胞;细胞因子;信号转导途径中图分类号R349.10文献标志码A文章编号1000-1492(2020)12-1901-05 doi：10.19405/j.c/bl.issnl000-1499.2020.10.41白细胞介素(intekeubin2))-1是促炎症因子,位于人类基因1号染色体，一个24Un的前体,被caspaseT切割成1ku J］。

单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、内皮细胞以及皮肤角质形成细胞均能表达16-18o1ku的16-18通过与靶细胞膜上特异性受体结合激活相应的信号途径而发挥作用J］。

血管类器官共培养-概述说明以及解释1.引言1.1 概述血管类器官共培养是一种新兴的研究领域，旨在模拟和研究人体内血管系统的结构和功能。

血管系统在人体中起着极其重要的作用，它通过输送血液和氧气，为身体各个组织和器官提供养分和氧气供应，同时也负责排除废物和二氧化碳。

因此，对血管系统的研究具有非常重要的意义。

血管类器官共培养技术利用生物工程学和组织工程学的方法，通过在体外培养细胞和组织，模拟和重建出类似于真实血管系统的结构和功能。

这项技术的出现为血管类器官研究带来了新的机遇和挑战。

在血管类器官共培养中，研究人员通常会选择包括内皮细胞、平滑肌细胞和间质细胞在内的多种细胞类型进行培养。

通过调节细胞的比例和组织架构，可以构建出具有不同层次和结构的血管系统模型。

这些模型可以用于研究血管系统的发育过程、功能表达以及与其他组织和器官的相互作用等方面。

本文将重点介绍共培养技术在血管类器官研究中的应用，探讨其对于理解血管系统的意义和前景。

此外，我们还将讨论发展血管类器官共培养所面临的一些挑战，并提出相应的解决方案。

通过深入探讨这些内容，我们希望能够进一步推动血管类器官共培养技术的发展，为临床治疗和生物医学研究提供新的思路和方法。

1.2文章结构文章结构部分的内容可以写成以下形式：1.2 文章结构本文将按照以下结构进行叙述和讨论：第二部分正文将主要介绍血管类器官的定义和意义，探讨血管类器官在生物学和医学研究中的重要性。

通过分析血管类器官的特点和功能，我们可以更好地理解其在机体生理和疾病发展中的作用，从而为疾病预防和治疗提供新的思路和方法。

第三部分正文将重点讨论共培养技术在血管类器官研究中的应用。

共培养技术是一种基于细胞和组织共生关系的研究方法，通过在体外模拟血管和其他器官之间的相互作用，可以更好地研究血管类器官的功能和疾病机制。

我们将探讨共培养技术在心血管疾病、肿瘤血管生成等方面的应用，并介绍其在器官移植和再生医学领域的前景。

华中科技大学硕士学位论文Mfn2基因对血管平滑肌细胞周期的影响硕士研究生黄晴导师郭小梅教授中文摘要目的：研究线粒体融合蛋白-2(Mitofusin-2，Mfn2）对大鼠主动脉血管平滑肌细胞（rat vascular smooth muscle cells, rVSMCs）周期及细胞周期调控蛋白表达水平的影响，探讨其可能机制。

方法：体外培养rVSMCs，随机分为5组，以胸腺嘧啶核苷（thymidine）和诺考达唑（nocdazol）干预，分别作用不同时间，利用双胸苷阻断和血清饥饿法使rVSMCs达到细胞同步化，收集G0/G1期、G1/S期、S期和G2/M期平滑肌细胞，光学显微镜观察rVSMCs的形态学变化，流式细胞仪鉴定细胞周期；利用免疫印记（Western-Blot）方法检测Mfn2以及Ras信号通路中胞外信号调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）的蛋白表达和细胞周期调控因子Cyclin D、Cyclin E及CDK1的活性，并分析其相关性。

结果：（1）光学显微镜观察药物对rVSMCs生长的影响：随着胸苷阻断与释放不同时间，G1/S期和S期细胞体积比非干预组稍增大，显示其正处于DNA合成期，G2/M期绝大部分细胞变大变圆，显示其正处于有丝分裂阶段，G0/G1期细胞形态与非干预组相比无明显差异。

（2）流式细胞仪鉴定细胞周期：采用血清饥饿法、双胸苷阻断法和诺考达唑阻抑法分别获得了同步化的rVSMCs，各组DNA含量百分比均达到要求。

血清饥饿法得到以G0/G1期为主的rVSMCs 细胞群(P<0.01)，提示rVSMCs主要同步化于静止期；双胸苷阻断14h得到以G1/S期为主的细胞群(P<0.05)，提示rVSMCs主要同步华中科技大学硕士学位论文化于G1/S交界期；双胸苷阻断14 h后以10％小牛血清刺激6 h后细胞群以S期为主(P<0．01)，提示rVSMCs主要同步化于S期即DNA合成期；诺考达唑阻滞12h得到以G2/M期为主的细胞群(P<0．01)，提示rVSMCs主要同步化于G2/M期。

血管平滑肌细胞收缩标志基因你有没有想过，血管里那些我们看不见的平滑肌细胞，竟然像小工人一样，每天都在辛勤地工作？它们有个神奇的本领，就是能让血管收缩或扩张，保持我们身体的血液流动顺畅。

嗯，别小看这些平滑肌细胞，它们可不是小打小闹的角色。

血管平滑肌细胞的收缩是我们身体维持正常血压、保证血液循环的关键之一。

要是它们出问题了，那可就麻烦大了，不仅影响血压，甚至还可能导致各种心脑血管疾病。

这时候，有几个基因就变得特别重要了。

没错，今天就跟你聊聊这些“收缩标志基因”，听起来很高级对吧？别着急，我们慢慢聊。

你知道这些细胞是怎么工作的吧？血管平滑肌细胞其实是有收缩和放松的能力，就像一群小弹簧，有时它们紧绷绷的，有时又松松弛弛的。

它们的这个工作状态，可是受很多基因的控制。

最著名的几个标志基因包括了ACTA2、MYH11和CNN1。

别看这些基因名字一堆字母，实际上它们的作用就像是“工厂里的指挥官”，在给血管平滑肌细胞发号施令。

比如ACTA2，它就像一个“超级激励者”，一旦它“喊动”了，平滑肌细胞立马就会收缩，血管也随之变窄，血压自然就上升了。

哎呦，这可不是简单的事情，血压一高，心脏就要更拼命地工作，这种情况长期下来，谁受得了？也不是说所有收缩都不好。

血管的收缩其实有时是非常有必要的，比如在运动时，血液流量需要加快，血管自然就会收缩，让更多的血液流向我们的肌肉和心脏，提供所需的氧气和营养。

这时候，ACTA2和MYH11就派上了大用场。

它们让平滑肌细胞收缩，血管变小，血流加速，供氧能力提高，简直就是为我们的运动表现加油。

不过，这一切得有个限度。

就像车子开得太快，刹车不及时，肯定会出事。

同样的，如果这些基因的表达不稳定，收缩过度，就会引发一些麻烦。

有时候这些基因表达的过度，血管平滑肌细胞就会变得过于紧张，不愿放松，导致血管长期处于收缩状态。

这种情况可不是什么好事，时间一长，血管就会变得僵硬，甚至会形成动脉硬化，给我们的心脑血管健康带来极大的隐患。

心血管细胞的生物学特征及其在心脑血管疾病中的作用心血管疾病是当前全球范围内最常见的致病因素之一，其发病率和死亡率持续升高，给人们的健康带来了巨大的威胁。

心血管细胞作为构成人类血管内膜的主要细胞，对于维持血管结构和功能，以及心脑血管疾病的发展起着至关重要的作用。

本文将简述心血管细胞的生物学特征及其在心脑血管疾病中的作用。

一、心血管细胞的特征1. 血管内皮细胞血管内皮细胞是血管内膜的主要成分，是血管径路内重要的物质交换和信号传递系统。

血管内皮细胞主要特征为：单层扁平细胞，线条整齐，无明显细胞器突出，表面有微绒毛，可在不同环境下表现出不同的功能，如：调节内皮细胞向纤维素和胶原的不同亲和力来调控血管张力。

2. 血管平滑肌细胞血管平滑肌细胞是心血管系统中唯一的具有收缩功能的设计生物，同时也是血管重要的细胞成分。

其主要特征为：有向膜面的胞体分支较多，紧紧纠缠在一起，有完整的细胞膜，胞内有丰富细胞器、线粒体和钙离子储存腔等结构。

3. 血管神经细胞血管神经细胞负责传递神经信号，解调和反馈同步、敏锐、精确，以实现血管的精细化调节和控制。

其主要特征为：分布于全身微弱的感觉神经末梢终端，形成复杂纵横交错的神经网状结构。

二、心血管细胞在心脑血管疾病中的作用1. 血管内皮细胞的作用血管内皮细胞不仅构成了血管内膜的主要成份，同时还具有多种生理功能，例如，血管内皮细胞可以释放细胞因子参与白细胞黏附，同时也可以调节血管扩张和收缩，维持血液流动的稳定，对抗血管内环境的病理变化，如斑块形成和血栓形成等。

2. 血管平滑肌细胞的作用血管平滑肌细胞具有收缩和松弛的能力，它们的活动状态可以影响血管张力，从而调节血流动力学，达到维持正常血压和血流量的目的。

血管平滑肌细胞在早期心脑血管疾病中可发生异常收缩，例如动脉粥样硬化可导致血管平滑肌细胞易脱落，并导致不适当的收缩。

3. 血管神经细胞的作用血管神经细胞密切参与心血管系统的自主神经调节，确定血管张力，维持血流量的水平和稳定性，维持血液的正常动力学。

血管平滑肌细胞表型对动脉粥样硬化斑块稳定性的影响崔源源,赵福海摘要血管平滑肌细胞(SMCs)是血管管壁的主要组成部分㊂SMCs表型与动脉粥样硬化斑块的稳定性密切相关,SMCs是构成斑块纤维帽的主要成分,较厚的纤维帽有利于增加斑块稳定性;相反,SMCs表型若转换为巨噬细胞样表型,可诱导纤维帽变薄,核心坏死增大,从而增加斑块不稳定性㊂SMCs表型转换机制与衰老㊁DNA损伤和凋亡有关㊂综述SMCs表型转化机制,通过调控SMCs表型以增加斑块稳定性,减少斑块破裂风险,降低不良心血管事件发生率㊂关键词动脉粥样硬化;血管平滑肌表型;稳定性;斑块;综述d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2023.04.015Effects of Vascular Smooth Muscle Cells on Atherosclerotic Plaque StabilityCUI Yuanyuan,ZHAO FuhaiNational Clinical Center for Chinese Medicine Cardiology,Institute of Cardiovascular Diseases,China Academy of Chinese Medical Sciences,Center of Cardiovascular Diseases,Xiyuan Hospital,China Academy of Chinese Medical Sciences,Center of Cardiovascular Diseases,Beijing100091,ChinaCorresponding Author ZHAO Fuhai,E-mail:139****************Abstract Vascular smooth muscle cells(SMCs)were a major component of the vascular wall.SMCs phenotype was closely related to the stability of atherosclerotic plaque.SMCs were the main component of plaque fibrous cap,and thicker fibrous cap was beneficial to plaque stability.Conversely,phenotypic conversion of SMCs to a macrophage-like phenotype induce a thin fibrous cap and an enlarged necrotic core,thereby increasing plaque instability.Mechanism of phenotypic transition in SMCs was related to aging,DNA injury,and apoptosis.Regluation of the mechanisms of phenotypic transformation of SMCs could reduce the incidence of adverse cardiovascular events by modulating the phenotype of SMCs to increase plaque stability and reduce the risk of plaque rupture. Keywords atherosclerosis;vascular smooth muscle phenotype;stability;plaque;overview不稳定斑块破裂及血栓形成是发生不良心血管事件的关键因素,因此,增加斑块稳定性是防治心血管事件的主要靶点㊂血管平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMCs)是构成斑块纤维帽的主要成分,与斑块的稳定性密切相关,一方面,SMCs通过迁移增殖包围坏死核心,形成纤维帽以稳定斑块;另一方面,在斑块进展过程中,SMCs表型发生异常转化,正常SMCs数量减少,使纤维帽变薄,增加斑块破裂风险㊂随着对SMCs病理生理的深入研究,SMCs参与斑块纤维帽和坏死核心的发生发展,在斑块稳定性方面发挥了重要作用㊂综述SMCs表型转化机制,通过调控SMCs 表型以增加斑块稳定性,减少斑块破裂风险,降低不良心血管事件发生率㊂基金项目国家自然科学青年基金项目(No.82104668);中国中医科学院基本科研业务费优秀青年科技人才(创新类)培养专项(No.ZZ14-YQ-009);中国中医科学院博士研究生创新人才培养基金项目资助(No.CX201701)作者单位国家中医心血管病临床医学研究中心,中国中医科学院心血管病研究所,中国中医科学院西苑医院心血管病中心(北京100091)通讯作者赵福海,E-mail:139****************引用信息崔源源,赵福海.血管平滑肌细胞表型对动脉粥样硬化斑块稳定性的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志,2023,21(4):670-672.1SMCs表型对斑块性质的影响斑块的组成成分在血栓介导的急性冠状动脉事件中较血管狭窄严重程度更明显㊂易损斑块含有较高的脂质水平㊁较多的巨噬细胞数量及较薄的纤维帽㊂稳定斑块向不稳定斑块发展可能与SMCs标志物数量减少和以巨噬细胞标记的细胞数量增加有关[1]㊂在SMCs向内膜层迁移之前,SMCs需要从收缩表型转换为合成表型,这个过程称为表型转换㊂在动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)背景下,SMCs表型转向促炎/巨噬细胞样表型,增加了斑块的不稳定性,因此, SMCs在斑块易损性中发挥着重要的作用㊂功能性SMCs对维持纤维帽厚度和斑块稳定性至关重要[1]㊂Watson等[2]建立了一种多期模型以探讨SMCs在AS斑块的影响,结果显示,SMCs聚集在内皮和纤维帽附近,从而影响纤维帽厚度改变;纤维帽厚度对SMCs凋亡与招募之间的平衡及SMCs扩散与SMCs趋化之间的平衡尤为敏感㊂为了进一步了解不同斑块中SMCs招募的区别,Jacobsen等[3]在增强绿色荧光蛋白(eGFP)+载脂蛋白E(ApoE)-/-和ApoE-/-小鼠血管中膜层中以马赛克方式标记SMCs表达,结果显示,在纤维帽中,SMCs表型标记为平滑肌α-肌动㊃076㊃C H I N E S EJ O U R N A L O FI N T E G R A T I V E M E D I C I N E O N C A R D I O-C E R E B R O V A S C U L A R D I S E A S E F e b r u a r y2023 V o l.21 N o.4蛋白(α-actin)(ACTA2+);在斑块中,SMCs表型表现为多样的ACTA2-型,包括软骨细胞样细胞㊁含有脂质和晶体物质样细胞,提示在空间上内皮细胞附近的SMCs表型为ACTA2+,斑块内SMCs表现为泡沫状样和软骨细胞样㊂细胞外基质(extracellular matrix,EMC)主要由SMCs产生,是构成纤维帽的重要成分之一㊂EMC由不同类型的弹性蛋白纤维和胶原组成,其中Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达水平较高[4-5]㊂胶原蛋白为纤维帽提供了抗拉强度,Ⅷ胶原蛋白是一种短链胶原蛋白,参与斑块稳定性㊂Lopes等[6]在Ⅷ型胶原敲除ApoE小鼠(Col8-/-小鼠;ApoE-/-)中发现,在损伤的动脉血管中, SMCs迁移增殖降低,Ⅰ型胶原纤维积累减少,斑块纤维帽较薄,且斑块内富含大量的脂质坏死核心;相反,巨噬细胞积累不受影响㊂Gomez等[7]通过白细胞介素1β(IL-1β)抗体观察ApoE-/-小鼠晚期AS斑块中SMCs变化,结果显示,斑块稳定性指数下降,包括SMCs含量下降40%,ACTA2+覆盖率下降超过50%,胶原含量下降30%,相反,纤维帽内巨噬细胞含量增加50%㊂在进展斑块中,死亡的巨噬细胞和SMCs释放脂质,脂质积聚在斑块中心形成坏死核心,可增加斑块不稳定性㊂泡沫细胞的形成取决于细胞释放过量胆固醇能力,其成分是由膜脂转运蛋白A TP结合盒转运蛋白A1 (ABCA1)相关㊂Pan等[8]利用小鼠和人类AS斑块的SMCs图谱和单细胞RNA测序观察SMCs表型转化过程,结果表明,SMCs可分化为巨噬细胞样和纤维软骨细胞样细胞㊂人类冠状动脉切片中,采用细胞特异性标志物鉴别细胞类型,结果显示,在泡沫细胞丰富的病变中,50%的泡沫细胞来自SMCs;同时标志巨噬细胞标志物CD68和SMC标志物SMα-actin表明,晚期AS病人中,40%的CD68阳性细胞起源于SMCs[9]㊂这项研究提示,在AS斑块中,被鉴定为单核细胞来源的巨噬细胞实际来源于SMCs㊂SMCs来源的泡沫细胞介导的受体涉及氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)摄取和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)反向转运㊂体外研究表明,利用ox-LDL干预SMCs可诱导典型的泡沫细胞形成,这个过程与SMCs向合成表型SMCs转变有关[10]㊂在早期和晚期AS病变中,SMCs胆固醇代谢降低,ABCA1表达特异性下降,而在髓系细胞系中尚未观察到这一现象㊂Zhao等[11]在高脂喂养的ApoE 小鼠中发现,泡沫细胞的形成是通过激活SMCs中的ABCA1表达而形成,与巨噬细胞无关㊂因此,SMCs 作为胆固醇过量积累的场所,可转化为巨噬细胞[9]㊂上述研究提示,SMCs表型可转化为巨噬细胞样表型,参与斑块坏死核心的发生发展㊂2SMCs表型转化的相关机制巨噬细胞凋亡㊁坏死㊁衰老和自噬有助于扩大坏死核心,导致斑块不稳定或易破裂[12]㊂Su等[13]利用机械牵拉诱导小型猪动脉血管SMCs凋亡,证明SMCs 表达较高水平的Bcl-2-asscociated死亡因子(BAD)和明显的细胞丢失;同时显示,在牵拉过程中,不同表型的SMCs中BAD增高,相反,通过过表达Bcl-2,BAD 促凋亡作用被抑制,表明在机械牵张作用下分化的SMCs高凋亡水平取决于其内在的BAD水平㊂衰老对斑块的发展和形态有多重影响㊂Wang 等[14]研究SMCs特异性表达端粒重复序列结合因子2 (TRF2)功能突变体的转基因小鼠,结果显示,TRF2下调可增加体内AS进展和斑块坏死核心形成,过表达TRF2可增加纤维帽厚度,减少坏死核心,表明TRF2过表达可避免SMCs衰老,减少DNA损伤,提示AS 斑块中SMCs的衰老与TRF2的丢失有关㊂自噬降解在维持正常的细胞稳态和能量平衡中发挥作用,也是调节血管功能必需的㊂在SMCs中自噬活性缺陷导致新内膜形成㊂肿瘤坏死因子(TNF)-α通过调节自噬诱导SMCs表型转换,其机制与增加微管相关蛋白轻链3α(LC3)-Ⅱ和降低p62水平有关;相反,抑制自噬可抑制TNF-α诱导的SMCs表型改变[15]㊂采用血小板衍生生长因子(PDGF)干预SMCs 导致SMCs收缩表型标记表达减少,合成表型标记表达上调;抑制自噬可稳定收缩表型,防止肌动蛋白丝紊乱,表明自噬对血管病变中SMCs转化为合成表型至关重要[16]㊂基于SMCs表型调控对AS斑块转归的重要作用,进一步研究SMCs表型相关基因㊂转录因子21 (TCF21)是一个基本的螺旋-环-螺旋转录因子,是位于冠状动脉粥样硬化性心脏病相关位点6p23.2的致病基因㊂TCF21在前体心外膜细胞中表达,这些细胞可产生心肌成纤维细胞和SMCs[17]㊂在AS中,TCF21通过调控细胞向成纤维细胞基因表达程序调控相关作用㊂Wirka等[17]研究发现,在表型调节过程中,SMCs 上调TCF21并转化为成纤维细胞样表型,而TCF21缺失抑制这种表型转变㊂基于TCF21缺失导致病变和保护性纤维帽的纤维肌细胞减少,TCF21可能通过促进SMCs转化为成纤维细胞发挥保护作用㊂Nagao 等[18]进一步研究表明,TCF21通过直接与TCF21-心肌相互作用,拮抗心肌素(YMOCD)和血清反应因子(SRF)的关联,从而促进SMCs中成纤维细胞表型㊂㊃176㊃中西医结合心脑血管病杂志2023年2月第21卷第4期Chen等[19]研究显示,半胱氨酸蛋白2(Csrp2)有助于调节SMCs表型,Csrp2启动子活化和SM-αactin在新生内膜细胞中表达,表明Csrp2可能有助于斑块稳定性㊂Aherrahrou等[20]量化了12种AS相关表型,这些表型涉及钙化㊁增殖和迁移,结果显示,高黑色素瘤抑制活性蛋白3(MIA3)表达可能促进AS中SMCs表型转变(包括提高增殖),这对形成或维持保护性纤维帽至关重要㊂3治疗纤维帽远比预期更具可塑性,识别SMCs表型,防治SMCs转化为不利斑块稳定性的表型对减缓AS斑块进展具有重要作用㊂由于SMCs是构成纤维帽厚度和结构完整性的重要部分,SMCs在斑块稳定性中有部分保护作用㊂因此,斑块的含量和斑块SMCs的表型特征认为是斑块的重要决定因素[21]㊂胰岛素样生长因子(IGF)-1作为动脉粥样硬化的一个潜在重要因子受到了广泛关注㊂在ApoE-/-小鼠中使用稳定IGF-1的模拟物Long R3IGF-1干预,可减少血管狭窄和斑块坏死核心,并使早期AS的纤维帽/坏死核心比值增加1倍㊁在晚期斑块中,Long R3IGF-1通过调节SMCs转换和改变SMCs表型,使斑块中SMCs含量增加2倍以上,并显著降低了斑块内出血发生率[21]㊂Sukhanov等[22]在ApoE-/-小鼠SMCs和成纤维细胞中敲除IGF-1受体(IGF1R),结果显示,AS斑块中胶原蛋白减少,斑块纤维帽变薄,斑块坏死核心增大㊂在AS斑块中证实了不同表型标记的SMCs衍生细胞,开启了SMCs来源的细胞根据环境在不同表型状态之间相互转化,通过调节SMCs表型可增加斑块稳定性,减少不良心血管事件发生㊂参考文献:[1]BASATEMUR G L,JØRGENSEN H F,CLARKE M C H,et al.Vascular smooth muscle cells in atherosclerosis[J].NatureReviews Cardiology,2019,16(12):727-744.[2]WATSON M G,BYRNE H M,MACASKILL 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•664•中华老年心脑血管病杂志2021 年6 月第23 卷第 6 期Chin J Geriatr Heart Brain Vessel Dis.Jun 202 1.Vol 23.No. 6•综述•血管平滑肌细胞在血管衰老发生发展过程中作用的研究现状李晶，谢文辉，柯一郎，洪华山关键词：肌，平滑，血管；肌细胞，平滑肌；衰老；细胞外基质；脉搏波分析2019年，L a u r e n t等1首次提出超常血管衰老（s u p e r­n o r m a l v a s c u l a r a g i n g’S U P E R N O V A)概念，S U P E R N O V A指不受危险因素影响，因颈-股动脉脉搏波传导速度（c a r o t i d-f e m o r a l p u l s e w a v e v e l o c i t y，c f P W V)值极低而生成一种保护表型。

U u r e n t等还依据c f P W V值将早发血管衰老（e a r l y v a s c u l a r a g i n g，E V A)和S U P E R N O V A作为血管衰老分布的2个极端来处理。

血管平滑肌细胞（v a s c u l a r s m o o t h m u s­cle cell.s，V S M C)作为 血管的重要组成部分，在血管衰老中扮演重要的角色。

现将血管衰老分为E V A，正常血管衰老(n o r m a l v a s c u l a r a g i n g，N V A)以及S U P E R N O V A 3 种类型，对V S M C在血管衰老及其不同类型发生发展的作用和机制的研究进展进行综述。

1细胞衰老与V S M C1.1细胞衰老细胞衰老也称为H a y f l i c k极限，指永久性细胞生长停滞。

细胞衰老可分为复制性衰老及应激性衰老，前者与端粒缩短有关，后者与D N A损伤、染色质扰动、癌基因诱导、应激等其他因素相关。

70%的人血管都在堵，太要命了！得立即疏通啊，方法就在这里！当血管堵塞不足70%时，人体无任何感觉，当堵塞超过70%进入晚期时，人体才会有不良感觉。

按照血管横断堵塞的程度，一般分为：堵塞初期：堵塞30%无症状堵塞中期：堵塞达50%无症状堵塞晚期：堵塞达70%出现症状。

血管堵塞70%时出现的主要症状分为四种：一、脑血管堵塞出现头晕、白天发困、记忆力减退。

二、心血管堵塞出现脑闷、气喘、心慌。

三、血管堵塞出现腰背发酸。

四、肢体血管堵塞] 手脚发麻发凉乏力。

上述症状也是高血脂所出现的症状。

高血脂会造成哪些后果呢？如果血脂高不及时控制，血管会日益堵塞和硬化，造成严重后果：一、脑血管硬化（中风、脑益血、脑血栓）二、心血管硬化（冠心病、心肌梗塞）三、血脂堆积（脂肪肝）四、肾血管硬化（肾结石、肾衰竭）五、血管堵塞（血压升高）六、下肢血管硬化（瘫痪、肢坏死）血管是这样堵塞起来的！很多人以为，只有到老了的时候，才为我们的血管操心。

殊不知，血管斑块变大，从30岁以后就加速了，再加上现代人活得越来越累、吃得越来越不健康、运动得越来越少，不知不觉中加速了血管的衰老和损坏。

今天小编来告诉大家：为什么我们的血管一天天的堵塞？可有些人的血管不免让人捏一把汗，就像家中的自来水管一样，用的时间长了，管道内壁就要结垢、生锈，逐渐导致管道受阻而无法供水。

血液中的“水垢”是指胆固醇、甘油三酯等，它们在血管壁上越积越多，形成如同黄色小米粥样的斑块。

久而久之，使血管壁弹力下降，血液流动受阻，最终因缺血而引起心、脑血管病。

血管”天敌“黑名单！1、餐餐大鱼大肉，血管容易堵。

三四十岁的人常在外面应酬，餐馆里的菜多用“高油、高盐、高糖”和“浓油赤酱”炮制出来，导致血管里的脂肪越来越多，容易将血管堵塞。

2、昼夜颠倒，打乱血管生物钟。

三十岁以上的人大多是单位的中流砥柱，不可避免地成为“熬夜族”。

从养生角度来说，晚上11时到凌晨四五点钟，是保证肝脏代谢血流的时间。

葛根素对血管平滑肌细胞迁移的影响柴欣楼;王伟;王绿娅;张永生【摘要】@@ 冠脉形成术造成了血管内皮细胞损伤,加速了血栓的形成.附壁血栓的形成,不仅造成血管的急性闭塞,而且为平滑肌细胞(vessel smooth musle cell,VSMC)的内迁提供了框架,增殖的VSMC由血管中层向内膜的迁移是内膜增厚的一个重要机制.在此过程中,细胞边缘存在大量基质金属蛋白酶(maxtrix metalloproteinases,MMPs)和纤维蛋白溶解酶,这2种物质可降解细胞外基质,加速VSMC的迁移[1].VSMC迁移的结果可导致内膜中VSMC的大量积聚和结缔组织的形成,进而促进新生内膜形成.【期刊名称】《世界中医药》【年(卷),期】2010(005)003【总页数】3页(P217-219)【关键词】葛根素【作者】柴欣楼;王伟;王绿娅;张永生【作者单位】北京中医药大学,北京市朝阳区北三环东路11号,100029;北京中医药大学,北京市朝阳区北三环东路11号,100029;北京市安贞医院;北京中医药大学,北京市朝阳区北三环东路11号,100029【正文语种】中文冠脉形成术造成了血管内皮细胞损伤，加速了血栓的形成。

附壁血栓的形成，不仅造成血管的急性闭塞，而且为平滑肌细胞 (vessel smooth musle cell，VSMC)的内迁提供了框架，增殖的 VSMC由血管中层向内膜的迁移是内膜增厚的一个重要机制。

在此过程中，细胞边缘存在大量基质金属蛋白酶(maxtrix metalloproteinases，MMPs)和纤维蛋白溶解酶，这2种物质可降解细胞外基质，加速 VSMC的迁移[1]。

VSMC迁移的结果可导致内膜中 VSMC的大量积聚和结缔组织的形成，进而促进新生内膜形成。

葛根素(Pur)为异黄酮类化合物，属于植物雌激素。

现代药理研究证明 Pur在心血管中具有多种功能，可扩张心、脑血管，降低血黏度，抑制血小板活性，降低血小板黏附率;可对抗 H2 O2引起的无血清培养的 VSMC凋亡及坏死[2]。

2021血管平滑肌细胞表型转化的诱导因素探讨（全文）血管平滑肌细胞（VSMCs）是大、中动脉中膜的主要组成部分，是保持血管壁的完整性以及维持血管张力的重要因素，可调节血压、血流量，其异常增殖和迁移造成的表型转化在心脑血管疾病中起着关键作用，是动脉粥样硬化、高血压、心衰、脑梗和血管动脉瘤等疾病的重要病理过程之一[1]。

目前，用于表型转化模型制备的VSMCs主要来源于实验动物（如大鼠、小鼠、兔）或人的血管，其中大鼠VSMCs因其易培养而应用广泛。

近年来，诸多学者研究在不同类型的诱导因素下各种VSMCs表型转化的具体机制，本文通过对这些研究现状进行归纳综述，为以后中药在此方面的研究和开发提供帮助。

1 VSMCs表型转化的概念及标志物VSMCs是一种来自胚胎发育时期中胚层的多功能性间叶细胞，周围由细胞外基质包围。

1989年，Baumbach等[2]首次提出“血管重塑”，发现血管的病理生理过程不仅是血管壁形态结构的改变，还有细胞的改变如VSMCs表型转化，从此VSMCs表型转化开始进入人们的视野。

根据VSMCs形态、功能及细胞标志蛋白的不同，VSMCs表型分为收缩表型（又叫分化表型）和合成表型（又叫去分化表型）两种。

与骨骼肌和心肌细胞不同，VSMCs是一种非终末分化的高度特异性细胞，其表型具有可调控性，通过分化或去分化可实现表型和功能的转化。

生理状态下，VSMCs 处于分化程度较高的收缩表型；当血管内膜受损或VSMCs受到生长因子、机械作用、血管活性物质等因素刺激时，VSMCs从分化表型转化为分化程度较低的去分化表型（合成表型），这一转化过程被称之为表型转化。

VSMCs表型转化的过程十分复杂，机制尚未完全阐明清楚，现大量证据表明其受多条信号转导通路的调节，如MAPK、PI3K/AKT、TGFβ/Smad、RhoA/Rock、Raf/MEK/ERK1/2以及cAMP/PKA通路等等。

1.1 收缩表型VSMCs正常情况下，VSMCs分化为不同的细胞群并获得具有成年特征的收缩表型，处于终末分化阶段，是一种稳定性表现。

胶原在动脉粥样硬化斑块中的作用研究进展刘娜;资晓宏【期刊名称】《浙江临床医学》【年(卷),期】2017(019)002【总页数】3页(P377-379)【作者】刘娜;资晓宏【作者单位】310016 浙江大学医学院附属邵逸夫医院下沙院区;410000 中南大学附属湘雅三医院【正文语种】中文动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是一种脂质堆积、炎症细胞浸润、细胞外基质增生为病理特征的慢性炎症过程［1］。

AS导致心脑血管意外在人类死亡原因中占重要地位，随着动脉粥样硬化研究的深入，动脉斑块的稳定性在心脑血管疾病的致病机制的作用逐渐清晰，不稳定斑块的突然破裂可直接栓塞下游的血管，裸露的含高凝物质的核心接触血液能迅速形成血栓导致缺血事件发生［2］。

研究表明颈内动脉存在粥样斑块者发生脑梗死的危险是不伴粥样斑块者的3倍，存在非钙化斑块及斑块表面不规则者发生脑梗死的危险性增加［3］。

在AS病变的不同阶段斑块展现出不同的结构和化学组成，斑块的稳定性与覆盖在脂核管腔面的斑块纤维帽的组成与厚度及分布情况密切相关［4］。

纤维帽的抗机械强度的能力越强，斑块就越稳定，而在纤维帽的细胞外基质中，胶原是重要的构成成分，所以胶原的产生增多形成硬化斑块是维持斑块稳定性的重要因素［5］。

目前胶原在动脉粥样硬化斑块形成中起的作用值得探讨，本文结合国内外最新进展做一综述。

胶原是最主要的细胞外基质成分，胶原蛋白是由三条肽链（α1、α2、α3）呈螺旋形缠绕而成的绳索状分子。

根据这三条肽链结构的不同，迄今已经发现了27种胶原，在动脉壁中其由内皮细胞、平滑肌细胞及成纤维细胞共同合成。

I、III型胶原蛋白是粥样斑块的主要成分，其与AS的相关性研究已经有较多报道［6］。

早在1987年Shekhonin及其同事［7］即提出各种类型胶原成分在动脉壁中的分布情况与AS的进展程度密切相关。

有研究发现I型胶原占动脉壁胶原总量的2/3，是动脉内膜和外膜最主要的成分，且在动脉中膜明显沉积，III型胶原占动脉壁胶原总量的比例随I型胶原不断蓄积与粥样硬化的发展而有轻度下降［8］。

血管平滑肌细胞分离及培养血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）是血管中膜的主要细胞成分。

具有增殖、迁移、合成并释放细胞基质的能力，在血管性疾病的发生进展中有重要作用。

目前已了解到血管平滑肌细胞的增殖和增生是动脉粥样硬化、高血压、冠状动脉腔内成形术后再狭窄等的主要病理表现。

利用体外培养血管平滑肌细胞可了解其正常和病态生物学特性及机制。

体外培养血管平滑肌细胞举行药物药理学方面的讨论。

体外培养血管平滑肌细胞可取材于不同动物及人胚胎或成体的不同部位的血管，按照讨论目的举行挑选。

血管平滑肌细胞分别培养办法较多，主要有簇拥细胞培养法、植块培养法、微血管培养法。

其中植块培养法可得到数量较多的平滑肌细胞而适用于药理讨论。

还可按照讨论需要将分别得到的平滑肌细胞举行蜕变培养、克隆培养、与内皮细胞共培养等。

【材料】 1．动物或人胚胎血管。

2．试剂 0.1%、0.1％,MEM 培养基（含10％新生牛血清，4mmo1/L，10万U/L和l00mg/L）。

Hanks 液（每1000m1含NaCl 8.00g, KCl 0.40g，CaCl 0.14g，MgS04·7H20 0.20g, KH2P04 0.06g, NaHC03 0.35g，glucose 1.00g，0.02g)。

3．器皿及仪器细胞培养用器皿，手术器械，净化工作台、C02孵箱、倒置显微镜、荧光显微镜等。

【办法】 1．簇拥细胞培养法（酶消化法）无菌术取颈或股动脉，于预冷Hanks液中洗涤3次，认真剥除血管表面结缔组织。

将血管纵向剖开移入另一装有0.1％胶原酶(D-Hanks配制）消化液的平皿中。

37℃消化30分钟后，认真剥离外膜及外层中膜并用小刀片轻轻刮除内膜，Hanks液冲洗后移入另一清洁的盛有消化酶平皿中（或剪成1 mm3组织块碎块，置离心管中）37℃消化2～3小时，时常轻晃，至组织呈絮状，收集细胞悬液并与5倍量含10％新生牛血清的培养基混合，终止消化。

韵涵生物科技有限公司专业专门提供各种细胞、原代细胞、肿瘤细胞、肿瘤耐药细胞、正常遗传变异细胞。

配套专业培养基：上皮细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、微血管、神经元细胞、系膜细胞、胶质细胞、成纤维细胞、心肌细胞、低血清无血清无动物成分细胞培养基等等；传统的常用培养基：DMEM、IMDM、M199、CMRL、BME、MEM等等；以及细胞培养用的相关试剂：赖氨酸、血清、胎牛血清、细胞冻存培养基、消化液、中和液等等。

一、原代细胞第一篇：人正常细胞S Cell System1000 HBMEC (Human Brain Microvascular Endothelial Cells) 人脑微血管内皮细胞1100 HBVSMC (Human Brain Vascular Smooth Muscle Cells) 人脑血管平滑肌细胞1200 HBVP (Human Brain Vascular Pericytes) 人脑血管周边细胞1300 HCPEC (Human Choroid Plexus Endothelial Cells) 人脉络丛内皮细胞1310 HCPEpiC (Human Choroid Plexus Epithelial Cells) 人脉络丛上皮细胞1320 HCPF (Human Choroid Plexus Fibroblasts) 人脉络丛纤维原细胞1400 HMC (Human Meningeal Cells) 人脑膜细胞1520 HN (Human Neurons) 人神经元细胞1530 HCGC (Human Cerebellar Granule Cells) 人小脑颗粒细胞1600 HOPC (Human Oligodendrocyte Precursor Cells) 人少突先驱胶质细胞1610 HOPC-os (Human Oligodendrocyte Precursor Cell-oligospheres) 人少突先驱胶质细胞（状态：球形）1800 HA (Human Astrocytes) 人星形胶质细胞1810 HAc (Human Astrocytes-cerebellar) 人小脑星形胶质细胞1900 HM (Human Microglia) 人小胶质细胞2.PNS Cell System700 HSC (Human Schwann Cells) 人雪旺细胞1710 HPNC (Human Perineurial Cells) 人周神经细胞3.Cardiac Cell System6000 HCMEC (Human Cardiac Microvascular Endothelial Cells) 人心脏微血管内皮细胞6100 HAEC (Human Aortic Endothelial Cells) 人大动脉内皮细胞6110 HASMC (Human Aortic Smooth Muscle Cells) 人大动脉平滑肌细胞6200 HCM (Human Cardiac Myocytes) 人心肌细胞6210 HCMa (Human Cardiac Myocytes-adult) 成人心肌细胞6300 HCF (Human Cardiac Fibroblasts) 人心脏纤维原细胞6310 HCFav (Human Cardiac Fibroblasts-adult ventrical) 人心脏纤维原细胞（来源：成人心室）6320 HCFaa (Human Cardiac Fibroblasts-adult atrial) 人心脏纤维原细胞（来源：成人心房）Coming Soon：HCVSMC (Human Cardiac Vascular Smooth Muscle Cells)! 人心血管平滑肌细胞4.Pulmonary Cell System(肺部）3000 HPMEC (Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells) 人肺微血管内皮细胞3100 HPAEC (Human Pulmonary Artery Endothelial Cells) 人肺动脉内皮细胞3110 HPASMC (Human Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells) 人肺动脉平滑肌细胞3120 HPAF (Human Pulmonary Artery Fibroblasts) 人肺动脉纤维原细胞3200 HPAEpiC (Human Pulmonary Alveolar Epithelial Cells) 人肺齿槽上皮细胞3210 HBEpiC (Human Bronchial Epithelial Cells) 人支气管上皮细胞3300 HPF (Human Pulmonary Fibroblasts) 人肺纤维原细胞3400 HBSMC (Human Bronchial Smooth Muscle Cells) 人支气管平滑肌细胞3410 HTSMC (Human Tracheal Smooth Muscle Cells) 人气管平滑肌细胞5.Hepatic Cell System（肝部细胞系）5000 HHSEC (Human Hepatic Sinusoidal Endothelial Cells) 人肝窦状腺内皮细胞5100 HIBEC (Human Intrahepatic Biliary Epithelial Cells) 人肝胆上皮细胞5200 HH (Human Hepatocytes) 人肝细胞5300 HHSteC (Human Hepatic Stellate Cells) 人肝星状细胞Coming Soon：HHSC (Human Hepatic Stem Cells)! 人肝干细胞Renal Cell System（肾部细胞系）4000 HRGEC (Human Renal Glomerular Endothelial Cells) 人肾小球内皮细胞4100 HRPTEpiC (Human Renal Proximal Tubular Epithelial Cellls) 人肾最接近管状上皮细胞4110 HRCEpiC (Human Renal Cortical Epithelial Cells) 人肾皮层上皮细胞4120 HREpiC (Human Renal Epithelial Cells) 人肾上皮细胞4200 HRMC (Human Renal Mesangial Cells) 人肾系膜细胞6.Gastrointestinal Cell System（胃肠部位细胞系）2700 HEEC (Human Esophageal Epithelial Cells) 人食管上皮细胞2710 HESMC (Human Esophageal Smooth Muscle Cells) 人食管平滑肌细胞2900 HIMEC (Human Intestinal Microvascular Endothelial Cells) 人肠微血管内皮细胞2910 HISMC (Human Intestinal Smooth Muscle Cells) 人肠平滑肌细胞2940 HCSMC (Human Colonic Smooth Muscle Cells) 人结肠平滑肌细胞Coming Soon：HGSMC (Human Gastric Smooth Muscle Cells)! 人胃平滑肌细胞7.Dermal Cell System（真皮细胞系）2000 HDMEC (Human Dermal Microvascular Endothelial Cells) 人真皮微血管内皮细胞2100 HEK (Human Epidermal Keratinocytes) 人表皮角化细胞2200 HEM (Human Epidermal Melanocytes-light) 人表皮亮黑素细胞2210 HEM (Human Epidermal Melanocytes-medium) 人表皮中黑素细胞2220 HEM (Human Epidermal Melanocytes-dark) 人表皮黑黑素细胞2300 HDF-f (Human Dermal Fibroblasts-fetal) 胎儿真皮纤维原细胞2310 HDF-n (Human Dermal Fibroblasts-neonate) 婴儿真皮纤维原细胞2320 HDF-a (Human Dermal Fibroblasts-adult) 成人真皮纤维原细胞Coming Soon：HELC (Human Epidermal Langerhans' Cells)!8.Adipose Cell System（脂肪细胞系）7210 HPA-v (Human Preadipocytes-visceral) 人前脂肪细胞（来源：内脏）7220 HPA-s (Human Preadipocytes-subcutaneous) 人前脂肪细胞（来源：皮下）9.Ocular Cell System（视觉部位细胞系）6510 HCEpiC (Human Corneal Epithelial Cells) 人角膜上皮细胞6520 HK (Human Keratocytes) 人角膜细胞6540 HRPEpiC (Human Retinal Pigment Epithelial Cells) 人视网膜色素上皮细胞6550 HLEpiC (Human Lens Epithelial Cells) 人晶状体上皮细胞6560 HIPEpiC (Human Iris Pigment Epithelial Cells) 人虹膜色素上皮细胞6570 HConF (Human Conjunctival Fibroblasts) 人结膜纤维原细胞6580 HNPCEpiC (Human Non-Pigment Ciliary Epithelial Cells) 人非色素睫毛上皮细胞Coming Soon：HCEC (Human Corneal Endothelial Cells)! 人角膜内皮细胞10.Urethral Cell System（尿道细胞系）4310 HBdSMC (Human Bladder Smooth Muscle Cells) 人膀胱平滑肌细胞Coming Soon：HBdMEC (Human Bladder Microvascular Endothelial Cells)! 人膀胱微血管内皮细胞11.Reproductive Cell System（生殖细胞系）7100 HAEpiC (Human Amniotic Epithelial Cells) 人羊膜上皮细胞7120 HAF (Human Villous Trophoblasts) 人长茸毛滋养层7130 HVT (Human Villous Mesenchymal Fibroblasts) 人长茸毛间叶纤维原细胞Coming Soon：HEEpiC (Human Endometrial Epithelial Cells)! 人子宫内膜上皮细胞12.Lymphatic Cell System（淋巴细胞系）2500 HLEC (Human Lymphatic Endothelial Cells) 人淋巴内皮细胞2530 HLF (Human Lymphatic Fibroblasts) 人淋巴纤维原细胞Coming Soon：HLBVEC (Human Lymphatic Blood Vessel Edothelial Cells)! 人淋巴血管内皮细胞13.Bone Cell System（骨细胞系）4600 HCO (Human Calvarial Osteoblasts) 人颅盖造骨细胞Coming Soon：HBMEC (Human Bone Marrow Endothelial Cells)! 人骨髓内皮细胞14.Skeletal Muscle Cell System（骨骼肌细胞系）3500 HSkMC (Human Skeletal Muscle Cells) 人骨骼肌细胞3510 HSkMSC (Human Skeletal Muscle Satellite Cells) 人骨骼肌卫星细胞3520 HSkMM (Human Skeletal Muscle Myoblasts) 人骨骼肌成肌细胞15.Oral Cell System（口部细胞系）2610 HOK (Human Oral Keratinocytes) 人口角化细胞2620 HGF (Human Gingival Fibroblasts) 人齿龈纤维原细胞2630 HPDLF (Human Periodontal Ligament Fibroblasts) 人齿根膜韧带纤维原细胞16.Hair Cell System（毛发细胞系）2400 HHDPC (Human Hair Dermal Papilla Cells) 人毛发真皮乳状突起细胞2410 HHGMC (Human Hair Germinal Matrix Cells) 人毛发真皮矩阵细胞2420 HHORSC (Human Hair Follicular Outer Root Sheath Cells) 人毛发小囊外根鞘细胞2430 HHIRSC (Human Hair Follicular Inner Root Sheath Cells) 人毛发小囊内根鞘细胞17.Umbilical Cord Cell System（脐带细胞系）8000 HUVEC (Human Umbilical Vein Endothelial Cells) 人脐静脉内皮细胞8010 HUAEC (Human Umbilical Artery Endothelial Cells) 人脐动脉内皮细胞8020 HUVSMC (Human Umbilical Vein Smooth Muscle Cells) 人脐静脉平滑肌细胞8030 HUASMC (Human Umbilical Artery Smooth Muscle Cells 人脐动脉平滑肌细胞19.Mesenchymal stem cell system（间叶干细胞系）7500 HMSC-bm (Human Mesenchymal Stem Cells-bone marrow) 人骨髓间叶干细胞7510 HMSC-ad (Human Mesenchymal Stem Cells-adipose) 人脂肪间叶干细胞7520 HMSC-he (Human Mesenchymal Stem Cells-hepatic) 人肝间叶干细胞Coming Soon：HMSC-cb (Human mesenchymal stem cells-cord blood)!20.Endothelial Cells（内皮细胞）6530 HREC (Human Retinal Endothelial Cells) 人视网膜内皮细胞Coming Soon：Human Dermal Vascular Smooth Muscle Cells! 人真皮血管平滑肌细胞第三篇Animal CellR1200 RPC (Rat Pituitary Cells) 大鼠垂体细胞R1400 RMC (Rat Meningeal Cells) 大鼠脑膜细胞R1510 RN-r (Rat Neurons-raphe) 大鼠脊神经元细胞R1520 RN-sn (Rat Neurons-substantia nigra) 大鼠黑质神经元细胞R1530 RN-s (Rat Neurons-striatal) 大鼠条纹神经元细胞R1540 RN-h (Rat Neurons-hippocampal) 大鼠海马趾神经元细胞R1550 RN-c (Rat Neurons-cortical) 大鼠皮层神经元细胞R1560 RGC (Rat Granule Cells) 大鼠颗粒细胞R1570 RN-vsc (Rat Neurons-ventral spinal cord) 大鼠腹侧脊髓神经元细胞R1580 RN-dsc (Rat Neurons-dorsal spinal cord) 大鼠脊髓神经元细胞R1700 RSC (Rat Schwann Cells) 大鼠雪旺细胞R1800 RA (Rat Astrocytes) 大鼠星形胶质细胞R1810 RA-c (Rat Astrocytes-cerebellar) 大鼠小脑星形胶质细胞R1820 RA-h (Rat Astrocytes-hippocampal) 大鼠海马趾星形胶质细胞R1900 RM (Rat Microglia) 大鼠小胶质细胞R2530 RLF (Rat Lymphatic Fibroblasts) 大鼠淋巴纤维原细胞R4100 RRTEpiC (Rat Renal Tubular Epithelial Cells) 大鼠肾导管上皮细胞R6200 RCM (Rat Cardiac Myocytes) 大鼠心肌细胞Coming Soon：RSC (Rat Schwann Cells)! 大鼠雪旺细胞第四篇传统和特殊培养基1.Classical media：传统培养基MEMM199DMEMHam's F10 & F12DMEM/F12RPMI 1640IMDM2.Low Serum Medium低血清培养基1801 AM：Astrocyte Medium 星形胶质细胞培养基6201 CMM：Cardiac Myocyte Medium 心肌细胞培养基1001 ECM：Endothelial Cell Medium 内皮细胞培养基4101 EpiCM：Epithelial Cell Medium 上皮细胞培养基2301 FM：Fibroblast Medium 纤维原细胞培养基5201 HepM：Hepatocyte Medium 肝细胞培养基2201 MelM：Melanocyte Medium 黒素细胞培养基1401 MenCM：Meningeal Cell Medium 脑膜细胞培养基4201 MCM：Mesangial Cell Medium 系膜细胞培养基7501 MSCM：Mesenchymal Stem Cell Medium 间叶干细胞培养基1901 MM：Microglia Medium 小胶质细胞培养基1621 OM：Oligodendrocyte Medium 少突胶质细胞培养基1631 OPCDM：Oligodendrocyte Precursor Cell Differentiation Medium 少突先驱胶质细胞区别培养基4601 ObM：Osteoblast Medium 造骨细胞培养基1201 PM：Pericyte Medium 周边细胞培养基7211 PreAM：Preadipocyte Medium 前脂肪细胞培养基1701 SCM：Schwann Cell Medium 雪旺细胞培养基3501 SkMCM：Skeletal Muscle Cell Medium 骨骼肌细胞培养基1101 SMCM：Smooth Muscle Cell Medium 平滑肌细胞培养基5301 SteCM：Stellate Cell Medium 星状细胞培养基7121 TM：Trophoblast Medium 滋养层培养基3.Serum-free Medium无血清培养基3201 AEpiCM：Alveolar Epithelial Cell Medium 齿槽上皮细胞培养基3211 BEpicM：Bronchial Epithelial Cell Medium 支气管上皮细胞培养基2311 FMsf：Fibroblast Medium 纤维原细胞培养基2101 KM：Keratinocyte Medium 角化细胞培养基1521 NM：Neuronal Medium 神经元细胞培养基1611 OsM：Oligosphere Medium 球状少突细胞培养基1601 OPCM：Oligodendrocyte Precursor Cell Medium 少突先驱胶质细胞培养基4.Animal Component-free Medium 无动物成分培养基2321 FMacf：Fibroblast Medium 纤维原细胞培养基2111 KMacf：Keratinocyte Medium 角化细胞培养基第六篇ReagentsCat.No. Code Description Quantity Price 0010 FBS Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 10 ml $14.00胎牛血清（人细胞测试）0025 FBS Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 25 ml $24.00 胎牛血清（人细胞测试）0500 FBS Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 500 ml $270.00 胎牛血清（人细胞测试）0103 T/E Trypsin/EDTA Solution 100 ml $15.50 胰蛋白酶-EDTA消化液0113 TNS Trypsin Neutralization Solution 100 ml $16.50 胰蛋白酶中和液0123 NECDS Non Enzymatic Cell Dissociation Solution 100 ml $15.50 非酶细胞裂解液0133 CFM Cell Freezing Medium 50 ml $34.50 细胞冻存培养基0143 SFCFM Serum-Free Cell Freezing Medium 50 ml $34.50 无血清细胞冻存培养基0203 TB Trypan Blue (0.4%) 50 ml $9.50 台盼蓝0303 DPBS Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline 500 ml $11.50 Dulbecco's磷酸缓冲盐0313 HBSS Hank's Balanced Salt Solution 500 ml $11.50 Hank's平衡盐溶液0403 PLL Poly-L-lysine, 1 mg/ml (500X) 1 ml $11.50 多聚赖氨酸0413 PLL Poly-L-lysine, 10 mg/ml 1 ml $50.50 多聚赖氨酸0503 P/S Penicillin/Streptomycin Solution 5 ml $10.50青链霉素溶液0513 CCGW Cell Culture Grade Water 500 ml $9.50 细胞培养级超纯水0703 BPE Bovine Pituitary Extract 25 mg $35.00 牛垂体抽提物0713 BPE Bovine Pituitary Extract 100 mg $125.00 牛垂体抽提物0803 ITS Insulin-Transferrin-Selenium (100X) 10 ml $25.10 胰岛素铁硒传递蛋白0813 L-Glu L-Glutamine Solution (200mM) 100 ml $15.10 L-谷氨酰胺第七篇Molecular biology1.DNA：Normal human primary cell cDNA 正常人主要细胞cDNA2.RNA：Normal Human Primary Cell total RNA 正常人主要细胞总RNA3.Proteins：Normal Human Primary Cell Lysate 正常人主要细胞溶解产物人类肿瘤细胞系统细胞名称中文名称头颈部肿瘤AM 人腺样囊性癌细胞（高转移）A2 人腺样囊性癌细胞Hep-2 人喉表皮癌细胞KB 人口腔上皮癌细胞CNE-2Z 人鼻咽癌母系细胞肺癌A549 人肺腺癌细胞肺793 人肺腺癌细胞SPC-A-1 人肺腺癌细胞H125 人肺癌细胞NCI-H460 人肺癌细胞LTEP-Sm1 人小细胞肺癌细胞(SCLC)NCI-H446 人小细胞肺癌细胞801-D 人巨细胞性肺癌细胞消化系统肿瘤HT-29 人结肠癌细胞SW620 人结肠癌细胞SW480 人结肠癌细胞LOVO 人结肠癌细胞HCT-8 人结肠癌细胞COLO205 人结肠癌细胞Ls-174-T 人结肠腺癌细胞CL187/CCL187 人大肠癌细胞PA319 人大肠癌细胞AsPc 人胰腺癌细胞HepG-2 人肝癌细胞QGY-7701 人肝癌细胞Bel-7402 人肝癌细胞SMMC-7721 人肝癌细胞BGC-803 人胃癌细胞SGC-7901 人胃癌细胞MGC-803 人胃癌细胞BGC-823 人低分化前胃癌细胞CaEs-17 人食管癌细胞妇科肿瘤MCF-7 人乳腺癌细胞ZR75-1 人乳腺癌细胞MDA-MB-435 人乳腺癌高转移细胞BCaP-37 人乳腺癌细胞LCC1 人乳腺癌细胞MX-1 人乳腺癌细胞T47D 人乳腺癌细胞A2780 人卵巢癌细胞OVCaR-3 人卵巢癌细胞HO-8910 人卵巢癌细胞COC1 人卵巢癌细胞HeLa 人宫颈癌细胞SiHa 人宫颈癌细胞泌尿系统肿瘤PC-3 人前列腺癌细胞PC-3M 人前列腺癌细胞DU-145 人前列腺癌细胞EJ 人膀胱癌细胞Ketr-3 人肾癌细胞神经系统肿瘤TG-905 人脑胶质母细胞瘤细胞U251 人神经胶质瘤细胞CRT 人神经胶质瘤细胞Y79 人视网膜母细胞白血病JK(Jurkat) 人淋巴细胞瘤细胞K562 人白血病细胞HL-60 人白血病细胞NB4 急性早幼粒细胞白血病细胞U937 人白血病细胞肉瘤OS－732 人骨肉瘤细胞HT1080 人成纤维肉瘤细胞黑色素瘤MV3 人黑色素瘤细胞A375 恶性黑色素瘤细胞M14 人黑色素瘤细胞横纹肌癌A673 人横纹癌细胞二、动物肿瘤细胞系统细胞名称中文名称白血病Friend 小鼠红白血病细胞M1 小鼠白血病细胞L1210 小鼠白血病细胞P388 小鼠白血病细胞NFS-60 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性L929 小鼠纤维母细胞P815 小鼠肥大细胞癌细胞肺癌Lewis 小鼠肺癌腹水瘤EAC 小鼠艾氏腹水癌细胞乳腺癌MA-891 小鼠乳腺癌高转移细胞骨髓瘤SP2/0 小鼠骨髓瘤细胞P3-X63-Ag8.653 小鼠骨髓瘤细胞淋巴瘤Yac-1 小鼠淋巴瘤细胞黑色素瘤B16F10 小鼠黑色素瘤高转移细胞B16BL6 小鼠黑色素瘤细胞肝癌H22 小鼠肝癌神经系统肿瘤C6 大鼠神经胶质瘤细胞PC12 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞三、正常细胞细胞名称中文名称VE 人血管内皮细胞EC-304 人血管内皮细胞HELF 人胚肺成纤维细胞293 人胚肾细胞293A 人胚肾细胞L-O2 正常肝细胞L929 小鼠成纤维细胞Ana-1 小鼠巨噬细胞CHL 中国仓鼠肺细胞CHO 中国仓鼠卵巢细胞Vero 绿猴肾细胞COS-7 SV40 转化的非洲绿猴肾MDCK 狗肾细胞四、肿瘤耐药细胞细胞名称中文名称MCF/Adr 人乳腺癌阿霉素耐药细胞株LCC9 人乳腺癌抗雌激素耐药株LCC2 人乳腺癌Tamoxifen耐药株MX-1/T 人乳腺癌紫杉醇耐药株A549/T 人肺腺癌紫杉醇耐药株BEL/FU 人肝癌氟尿嘧啶耐药株HCT-8/V 人结肠癌长春新碱耐药株KB/V 人口腔上皮癌长春新碱耐药株。

•642 •中华老年心脑血管病杂志2021年6月第23卷第6期Chin J (i e r i a t r Heart Brain Vesse丨丨)Ls,Jun 202 l,Vo丨23,No.6•基础研究.E3泛素连接酶32调控血管平滑肌细胞增殖及迁移的作用机制冯菲菲，谷敏.甘雪晴，李霜，孙雄山，杨大春摘要：的探讨K3泛素连接酶32(T r i m32)调控血管平滑肌细胞（V S M C)增殖与迁移的作用机制。

方敁选择 C57雄性野生型小鼠40只，其中10只小鼠从胸主动脉获得V S M C后，分为空白组、对照组、转染组、模型组、对照1组、转染1组和激动剂组（(3-c a t e n i n激动削同时处理）.后4组用重组人血小板衍生生长因子30 mg L干预24 h•再按分组分别转染阴性干扰s i C o n t r o l和siT rim32,用P C R和W e s t e r n丨)l o t检测各组T r i m32、p-catenin m R N A和蛋 白表达。

观察各组细胞增殖和迁移情况。

另30只小鼠左颈动脉损伤处理•取右、左颈动脉分为假手术组、假手术对照组、假手术转染组、损伤组、损伤对照组和损伤转染组，每组10只，按分组处理后，检测T r im32表达和血管内膜增生情况。

结系与空白组比较，模型组T r im32 m R N A和蛋白表达升高（1. 89±0. 30 uv 0. 99 士 0. 06,1. 82 士0. 30仍1. 02士0. 05.P<0.01 )。

与对照组比较•转染组细胞增殖、阳性细胞、(3-c a t e n i n蛋白表达降低•对照1组各项明显升高（P<0.05.P C0. 01);与转染1组比较，对照1组和激动削组阳性细胞升高（P<0. 01)。

与假手术组比较，损伤组T r i m32 m R N A和蛋白明显升高（P<0. 01)。