小鼠结肠平滑肌细胞使用说明

离体动物平滑肌的实验方法
离体动物平滑肌的实验方法通常包括以下步骤：
1. 动物准备：选择适合实验的动物（如小鼠、大鼠等），进行麻醉、解剖和取出所需平滑肌组织。

2. 组织清洗：将取出的平滑肌组织放入含有适当缓冲液的离体器中，用缓冲液清洗组织，去除血液和组织残留物。

3. 组织切割：将清洗后的平滑肌组织切成适当大小的块状，并进行组织学检查以确保组织的完整性。

4. 实验操作：将切割好的平滑肌组织放入实验器中，进行实验操作，如测量平滑肌收缩力、电生理实验等。

5. 数据记录：记录实验结果并进行数据分析和统计。

需要注意的是，离体动物平滑肌的实验方法需要遵守相关的伦理和法律规定，确保动物实验的合法性和道德性。

小肠平滑肌的生理特性和药物的影响姓名：学号：班级：一、实验目的1.学习离体肠平滑肌器官灌流的实验方法。

2.观察豚鼠离体小肠平滑肌的一般生理特性。

3.观察药物对豚鼠离体小肠平滑肌生理特性的影响。

二、实验材料1.实验动物：豚鼠2.器材：小肠平滑肌恒温水浴装置，球胆（气泵或氧气筒），张力换能器，烧杯，温度计，注射器，注射针头，棉线，手术剪，培养皿，滴管。

3.药品：台式液，10-5mol/L乙酰胆碱，10-4mol/L苯海拉明，10-5mol/L磷酸组胺，10-3mol/L硫酸阿托品，1%BaCl2溶液。

三、实验方法和步骤1.豚鼠离体肠平滑肌的制备以手倒提豚鼠，用木槌猛击其头后部令其急死，立即剖开腹腔，轻轻剪取回肠，迅速置于冷台式液中，除去肠系膜，并将肠管剪成数段，用台式液将肠内容物冲洗干净，然后剪成小段备用。

注意操作应轻柔。

2.实验装置的准备此装置由恒温、供气、供液和排液以及记录部分组成。

浴槽内水温由恒温装置控制在37±0.5℃。

浴管与浴槽相连，以使浴管内营养液保持同样的恒温。

气源（充气气囊或气泵等）与浴管相连，气流量以1～2个小气泡为宜。

浴管下端与排液管相连，其上端管口处可随时充入新的恒温营养液。

3.标本连接及记录轻取一段标本，一端用线系在装置的小钩上，对角线方向将另一端用与张力换能器相连的小钩钩住，慢慢放入浴管中并调节其紧张度至适宜，此时标本通过张力换能器与计算机相连。

标本连接好后向浴管内充入37±0.5℃营养液，适应10~15min后，描记一段离体回肠平滑肌正常收缩曲线。

4.如果环境适宜，标本存活，适应10～15min后，描记一段正常曲线，然后按如下步骤给药。

5.加入药物观察并记录曲线1)加入10-5mol/L乙酰胆碱0.2ml，待收缩到最高点时，加入10-3mol/L硫酸阿托品0.1ml，然后再加入同量的乙酰胆碱，观察结果。

实验完毕后冲洗浴管三次。

2)加入10-5mol/L磷酸组胺溶液0.3ml，待收缩到最高点时，加入10-4mol/L苯海拉明0.3ml，3min后再加入同量的磷酸组胺溶液，观察结果。

小鼠肌肉注射操作要点理论说明以及概述1. 引言1.1 概述本文旨在探讨小鼠肌肉注射操作要点，通过理论说明和概述的方式向读者介绍该操作的原理、步骤以及相关注意事项。

小鼠肌肉注射作为一种常见的实验技术，在疫苗研究、药物试验以及生物学研究中发挥着重要作用。

正确的注射操作可以确保实验数据的准确性和实验结果的可靠性。

1.2 文章结构本文主要分为四个部分：引言、小鼠肌肉注射操作要点理论说明、小鼠肌肉注射操作要点概述以及结论。

以下将对各个部分进行详细介绍，以便读者能够全面了解小鼠肌肉注射操作。

1.3 目的本文旨在帮助读者全面了解小鼠肌肉注射操作，并掌握关键要点。

通过对注射原理、工具和材料准备、操作步骤以及注意事项和常见问题解答等方面内容的介绍，读者将能够更好地进行小鼠肌肉注射，在科研实验中取得更加准确、可靠的结果。

此外，本文还将展望未来研究方向，以期在该领域推动更深入的探索和发展。

2. 小鼠肌肉注射操作要点理论说明：2.1 注射原理：在小鼠实验中，肌肉注射是一种常见的给药途径。

它通过将药物直接注射到小鼠的肌肉组织中，使药物能够快速而有效地吸收和分布到全身。

相比于其他给药途径，如静脉注射或口服给药，肌肉注射具有操作简便、生物利用度高以及更好地控制剂量的优势。

2.2 工具和材料准备：在进行小鼠肌肉注射之前，需要准备以下工具和材料：- 注射器：选择合适大小的注射器，根据所需剂量选择不同容量的注射器。

- 针头：选用切割针头或者钝头针头，根据小鼠的体重和年龄选择合适长度和直径的针头。

- 药物：准备待注射的药物溶液或悬浮液。

- 小鼠：选择健康且符合实验要求的小鼠。

2.3 操作步骤：进行小鼠肌肉注射时，需要按照以下步骤进行操作：1. 麻醉小鼠：使用适当的麻醉方法（如吸入式麻醉或麻醉药物注射），确保小鼠处于无痛苦和不活动状态。

2. 注射部位准备：根据注射部位选择，将小鼠固定在实验台上。

可以选择背部、大腿肌肉或其他合适的注射部位。

实验四离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察研究报告实验目的：了解离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用。

实验原理：平滑肌是人体内的一种无志向的肌肉，它的收缩缓慢而持久。

平滑肌细胞结构简单，没有明显的横纹，受到多种神经递质和激素的作用，能够主动收缩和被动舒张。

平滑肌收缩主要是通过肌浆动力蛋白和肌动蛋白的互相作用实现的。

平滑肌受到交感神经的刺激时会发生兴奋，释放去甲肾上腺素，通过a受体使平滑肌收缩；受到副交感神经的刺激时会发生抑制，释放乙酰胆碱，通过m受体使平滑肌松弛。

实验材料：小白鼠，离体小肠，生理盐水，甲氧氯普胺，异丙肾上腺素，硝酸甘油。

实验方法：将小白鼠处死，取出小肠，清洗干净，将小肠切成长度为2-3厘米的小块，放入含有生理盐水的生理盐水槽中，将生理盐水槽装入37℃水浴锅中，调节温度和pH值。

用一对显微钳夹住小肠两端，逐渐拉紧，使小肠上的脂肪和血管清除干净。

将小肠固定在育满实验的组织夹板上，将另一头固定在能够测量肌肉张力的压力传感器上。

将压力传感器和记录仪连接好，记录肠道平滑肌张力的变化。

在实验过程中，添加甲氧氯普胺和异丙肾上腺素观察平滑肌的收缩和松弛，添加硝酸甘油观察平滑肌的松弛。

实验结果：实验中观察到小肠平滑肌具有稳定的基底张力，加入甲氧氯普胺使肠道平滑肌产生强烈的收缩，表明肠道平滑肌受到交感神经兴奋时能够产生收缩；加入异丙肾上腺素使肠道平滑肌产生松弛，表明肠道平滑肌受到副交感神经兴奋时能够产生松弛；加入硝酸甘油使肠道平滑肌产生松弛，表明硝酸甘油能够通过扩血管作用来产生松弛。

三种药物对肠道平滑肌的影响如图1所示。

实验结论：离体小肠平滑肌具有稳定的基底张力，受到交感神经兴奋时能够产生收缩，受到副交感神经兴奋时能够产生松弛；硝酸甘油能够通过扩血管作用来产生松弛。

这些药物可作为治疗肠道疾病的药物。

武汉普诺赛生命科技有限公司 Procell Life Science&Technology Co.,Ltd.使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：全国免费电话：400-650-3656销售电话：************销售邮箱：*****************.cn官方网站：CL-0493BV2（小鼠小胶质细胞）武汉普诺赛生命科技有限公司——您身边的细胞培养专家Copyright ©2020-2021 Procell Life Science&Technology Co.,Ltd. All Rights Reserved 细胞株培养扩增技术服务申明本公司受贵单位委托，进行细胞株的技术服务工作，并收取相应细胞株技术服务费用，细胞株技术服务具体项目清单见订购合同。

本公司提供完善的技术支持及售后服务，收到产品后处理方式及相应售后条款参见《细胞售后条例》。

收到常温细胞后如何处理？（细胞培养详细操作步骤请参照《普诺赛细胞培养操作指南》）1. 收到常温细胞后，及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。

2. 用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。

先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4. 静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5. 管内离心，吸去上清，管底沉淀加入80%，可接回原瓶培养，若大于80%6. 培养瓶或用移液器轻轻吹打使其脱落，若通过吹打的方式不易脱落的细胞则需要用胰蛋白酶消化后收集细胞传代。

7. 注意事项有疑问的，可跟我们的技术支持交流。

01年中国现代医学杂志贴壁法原代培养1.1细胞培养1.1.1培养液配制DMEM(美国Corning Cellgro公司),Hepes(15mmol/L),青霉素(100u/ml),链霉素(100mg/ml),优质胎牛血清(原代培养浓度20%,传代培养浓度10%,上海普飞澳洲胎牛血清)。

1.1.2培养器皿25cm2塑料培养瓶(Costar),培养面积25cm2;直径3.5cm培养皿。

1.1.3大鼠血管平滑肌细胞培养动物来源:健康Wistar大鼠,由第三军大学实验动物中心提供,雌雄不拘,体重150~180g。

动脉取材:断颈法处死Wis-tar大鼠,无菌条件下分离全段主动脉,立即置于含青霉素100u/ml,链霉素100mg/ml的无菌生理盐水中。

每次取材2~3只大鼠。

贴壁法原代培养:超净工作台上,清除结缔组织,剥除动脉外膜。

纵向剖开血管,用眼科弯镊钝性刮除内膜面,以去除内皮细胞,剩余血管中膜组织较薄、透明、韧性好。

用含青、链霉素的生理盐水反复冲洗,去除脂滴、血凝块等杂质及可能残留的内皮细胞和外膜成纤维细胞,然后将一次取材的2~3条血管的中膜组织混合在一起,置于无菌培养皿中。

滴加少许培养液使组织保持湿润,用眼科弯剪反复剪切成1mm×1mm大小的组织块。

并剪切好的组织小块均匀摆置于瓶底,组织块间距0.5cm。

盖好瓶盖,轻轻翻转培养瓶,让瓶底朝上并向瓶内注入适量培养液,于37℃孵箱内放置2~4h使组织块干涸并与瓶壁贴附后,将培养瓶慢慢翻转平放,使组织块完全浸入培养液中,继续静置培养3~5d。

待有细胞从组织块周围游出后换液。

1.1.4原代培养动脉VSMC的传代培养当大部分组织块长出细胞晕,并与相邻细胞的细胞晕接触时即可传代。

加入配制好的消化液使其恰好覆盖细胞表面,室温下大约1~2min,倒置显微镜下见细胞质回缩、细胞间隙增大时迅速翻转培养瓶使细胞脱离消化液,吸弃消化液,加入含胎牛血清培养液3~4ml终止消化并反复吹打瓶壁细胞使细胞脱壁,分散为单细胞悬液。

小鼠骨骼肌细胞小鼠骨骼肌细胞产品说明：为使客户能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。

派瑞金提供的小鼠骨骼肌细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。

研发的小鼠骨骼肌细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。

同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。

小鼠骨骼肌细胞注意事项：1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。

4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。

5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。

小鼠骨骼肌细胞产品简介：产品名称：小鼠骨骼肌细胞组织来源：小鼠肌肉组织产品规格：5×105cells / 25cm2培养瓶小鼠骨骼肌细胞简介：小鼠骨骼肌细胞分离自鼠肌肉组织，细胞多呈梭行，具有一定的方向性。

刚开始的细胞呈单个圆形或梭形，处于有丝分裂后期，细胞的活动性强，核成椭圆形，位于细胞中央，胞质内嗜碱性逐渐变为嗜酸性。

本公司生产的小鼠骨骼肌细胞总量约为5×105cells/瓶，细胞纯度75%~85%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5、培养基信息：小鼠骨骼肌细胞培养基类型：DMEM培养基(GIBCO，添加NaHCO3 1.5g/L，Sodium Pyruvate0.11g/L)；添加因子：优质胎牛血清10%，细胞生长因子等。

平滑肌实验报告引言：平滑肌是人体内一种重要的肌肉类型，广泛分布于血管、消化道、呼吸道等器官中。

它具有不同于骨骼肌的特点，能够自发性地收缩和松弛，并参与各种生理过程。

了解平滑肌的结构和功能，对于研究人体生理学、病理学以及药物的作用机制等方面有着重要的意义。

在本次实验中，我们将通过对平滑肌的观察和测量，深入了解其特点和响应机制。

实验一：平滑肌的构造观察首先，我们通过显微镜观察了平滑肌的基本结构。

将取自小鼠食道的组织标本置于载玻片上，加入显微镜溶解液进行处理并覆盖载玻片。

在显微镜下，我们可以清晰地看到平滑肌组织中的细胞形态和纤维排列。

与骨骼肌相比，平滑肌的细胞形状更加细长，并且没有明显的横纹。

接着，我们观察了平滑肌的收缩特点。

将取自小鼠的平滑肌组织分割成较小的片段，并放置在培养皿中，加入生理盐水和适量的钙离子。

随着钙离子的加入，平滑肌组织逐渐收缩，并呈现出波浪状的动态变化。

通过记录收缩的持续时间和幅度，我们可以量化地评估平滑肌的收缩能力。

实验二：通过药物研究平滑肌的响应机制为了进一步研究平滑肌的响应机制，我们选择了常见的药物去甲肾上腺素（noradrenaline）和乙酰胆碱（acetylcholine），它们分别代表交感神经系统和副交感神经系统的作用。

我们首先将分割好的平滑肌组织片段分别置入含有去甲肾上腺素或乙酰胆碱的培养液中，观察其收缩状况。

结果显示，去甲肾上腺素的加入使平滑肌组织呈现出较为强烈的收缩状态，而乙酰胆碱的作用则使其放松松弛。

进一步地，我们测量了平滑肌组织在不同浓度药物下的收缩反应。

通过逐渐增加药物浓度，我们发现平滑肌组织的收缩强度和持续时间均呈现出剂量依赖性的变化。

这表明平滑肌对于不同药物的反应存在一定的敏感性，并且其机制可能与特定的受体和信号传导途径有关。

结论：通过本次实验，我们得出了以下结论：1. 平滑肌具有不同于骨骼肌的结构特点，细胞形状细长且无明显的横纹。

2. 平滑肌能够自发性地收缩和松弛，表现出波浪状的动态变化。

小鼠子宫平滑肌细胞的分离培养及鉴定范晶晶【期刊名称】《潍坊学院学报》【年(卷),期】2012(012)004【摘要】To study a new simple mechanical method for the isolation and culture of Mouse myometrial smooth cells （mMSMCs） in order to provide a experimental model for study the physiology and pathology of MSMCs. A new mechanical method was used to isolate mouse myometrial smooth. And then type Ⅰ collagenase and trypsin were used to isolate mMSMCs. More than 90%of the dissociated cells exhibited initial viability. The surviving cells were observed by phase con- trast microscope and verified by immunofluorescence staining. After 3 days of incubation, primary cultures of cells attached the wall of the incubation dishes, and reached confluence with 2 weeks. The cells grew with spindle--shape and showed typi- cal ＂hill-valley＂ pattern under phase contrast microscope. Immunofluorescence staining for smooth musclea--actin shewed positive reaction in more than 98% attached cells. The mMSMCs cultured in this experiment survive well, with highly puri- ty, and can serve the further studies of physiology and pathology.%为寻找研究子宫平滑肌细胞生理和病理的实验研究模型，试建立一种新的简易机械分离培养小鼠子宫平滑肌细胞的方法。

实验三：小肠平滑肌收缩实验日期：2011年10月25日3.1实验目的3.1.1观察哺乳动物小肠平滑肌的一般生理特性;3.1.2观察某些理化因素对小肠平滑肌的自律性活动和紧张性的影响;3.1.3 学习哺乳动物离体小肠体外实验的方法.3.2实验原理消化道平滑肌具有肌肉组织的共同特点，如兴奋（excitability）、传导性（conductibility）和收缩性（contractibility），还表现出自身的功能特点，如兴奋性较低，收缩缓慢；自动节律性（autorhythmicity）；具有一定的紧张性（tonicity）；具有较大的伸展性（extensibility）；对电刺激、切割、烧灼不敏感，但对于机械牵张、温度变化和化学刺激特别敏感。

消化道平滑肌在离体后，置于适宜的环境中仍能进行节律性收缩（rhythmic contraction），对环境中各种理化因素，如环境的温度、酸碱度、渗透压、一些特殊的无机盐离子、某些生物活性物质以及供氧和牵拉等刺激敏感，这些刺激都可以改变消化道平滑肌的收缩活动，而表现为收缩的节律、强度、速度以及紧张性收缩等方面的改变。

3.3实验材料机械-电换能器、恒温水浴灌流槽、温度计、台氏液、1︰10000肾上腺素、1︰10000乙酰胆碱、1︰10000阿托品、1N NaCl、1N HCl3.4实验方法3.4.1标本制备十二指肠向下取20～30cm的肠段，除去肠系膜及周围脂肪组织之后，用台氏液冲洗干净，保存于盛有室温台氏液的培养皿中备用。

3.4.2固定实验取2～3cm的肠段，用棉线结扎两端肠段的对角（注意应避免封闭肠管，保持肠管管腔能与溶液相通）。

将此肠段一端通过铁勾固定在灌流槽的内槽底部（肠段与铁勾间的间隙应比较小，以免肠管摆动），内槽中的台氏液以刚能淹没肠管为宜。

开启供氧装置供给标本氧气，以保持平滑肌的生理机能。

另一端则通过棉线连接机械-电换能器的悬梁臂上，标本与换能器连线保持垂直，且松紧度适当，不要与灌流槽内壁接触。