植物有效成分(胡萝卜素)的提取
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β-胡萝卜素和番茄红素的提取、分离与测定[摘要]β—胡萝卜素是一种抗氧化剂,具有解毒作用,是维护人体健康不可缺少的营养素。
番茄红素(Lycopene)是类胡萝卜素的一种,对防治癌症、提高免疫力、延缓衰老有特效,有植物黄金之称,被誉为“21世纪保健品的新宠”。
因此,提取、分离、鉴定这些活性成分成为研究和开发这些天然生物资源的重要环节。
本实验用常规天然有机化合物的提取方法获得β-胡萝卜素和番茄红素样品,再用柱色谱法将其分离,用薄层色谱检测分离效果,最后用分光光度法分别对其鉴定。
[关键词]β-胡萝卜素、番茄红素、提取、分离、测定实验基本原理β-胡萝卜素和番茄红素分子中的碳骨架是由8个异戊二烯单位连接而成的,它们是四萜类化合物。
它们的分子中都有一个较长的π-π共轭体系,能吸收不同波长的可见光,因而,它们都呈现一定的绿色,β-胡萝卜素是黄色物质,番茄红素是红色物质,所以,又把它们叫做多烯色素。
β-胡萝卜素和番茄红素的结构式分别如下:(番茄红素)(β-胡萝卜素)胡萝卜素是最早发现的一种多烯色素。
后来,又发现了许多在结构上与胡萝卜素类似的色素,于是就把这类物质叫做胡萝卜素类化合物,或者叫做类胡萝卜素。
这类化合物大都难溶于水,易溶于弱极性或非极性的有机溶剂,因此又把这类化合物叫做脂溶性色素。
胡萝卜素广泛存在于植物的叶、花、果实中,尤以胡萝卜中含量最高。
胡萝卜素有α、β、γ三种异构体,在生物体中以β-异构体含量最多,生理活性最强。
在动物体中,胡萝卜素在酶的作用下可转化为维生素A,因此,胡萝卜素又被叫做维生素A原。
胡萝卜素在人和高等动物体内就有重要的生理功能,是人和高等动物生存不可缺少的营养物质。
番茄红素是胡萝卜素的开链异构体。
番茄红素在成熟的红色植物果实如番茄、西瓜、胡萝卜、草莓、柑橘等中含量丰富,其中含量最高的是番茄。
由于番茄红素不具有维生素A原活性,因此长期以来不被人们所重视。
但近年来研究表明,番茄红素是一种优越的天然色素和生物抗氧化剂,具有极强的清除自由基的能力,它可以预防前列腺癌、乳腺癌和消化道(结肠、直肠与胃)癌的发生,在预防心血管疾病、动脉硬化等各种与衰老有关的疾病及增强机体免疫力方面具有重要作用。
第3讲 植物有效成分的提取考点| 植物芳香油和胡萝卜素的提取1.提取玫瑰精油试验 (1)方法:水蒸气蒸馏法。
(2)试验流程鲜玫瑰花――→加清水水蒸气蒸馏―→油水混合物 ↓加入NaCl F 玫瑰油←――过滤 除水←―――――――加入无水Na 2SO 4分别油层2.提取橘皮精油的试验 (1)方法:一般接受压榨法。
(2)试验流程石灰水浸泡―→漂洗―→压榨―→过滤 ↓ 橘皮油←再次过滤←静置 3.胡萝卜素的提取(1)胡萝卜素性质:不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。
(2)提取方法及流程①方法:萃取法,石油醚最适宜作萃取剂。
②试验流程:胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素。
(3)鉴定方法:纸层析法。
1.植物芳香油提取方法的比较 提取方法 水蒸气蒸馏法 压榨法 有机溶剂萃取法 试验原理利用水蒸气将挥发性较强通过机械加压,压榨使芳香油溶解在有机溶剂的芳香油携带出来 出果皮中的芳香油 中,蒸发溶剂后就可获得芳香油方法步骤①水蒸气蒸馏 ②分别油层 ③除水过滤①石灰水浸泡、漂洗 ②压榨、过滤、静置 ③再次过滤①粉碎、干燥 ②萃取、过滤 ③浓缩适用范围 适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取 适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶液中优点 简洁易行,便于分别生产成本低,易保持原料原有的结构和功能出油率高,易分别 局限性水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题分别较为困难,出油率相对较低使用的有机溶剂处理不当会影响芳香油的质量(1)影响萃取的因素①主要因素:萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。
②次要因素:萃取效率受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。
(2)对胡萝卜素粗品的鉴定 ①方法:将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析鉴定。
纸层析是层析法的一种。
层析法又称色谱法,是一种基于被分别物质的物理、化学及生物学特性的不同,利用它们在某种基质中移动速度不同而进行分别和分析的方法。
胡萝卜素提取原理
胡萝卜素是存在于植物中的一类天然色素,主要存在于胡萝卜等橙黄色蔬菜中。
胡萝卜素在食品、医药和化妆品工业中具有重要的应用价值,因此人们需要从植物中提取胡萝卜素。
胡萝卜素的提取原理主要包括以下几个步骤。
1. 选材:选择新鲜、成熟、品种纯正的胡萝卜作为提取材料,以保证胡萝卜素含量较高。
2. 破碎:将胡萝卜切碎、研磨或压碎,增大胡萝卜表面积,有利于后续的物质转移。
3. 溶剂浸提:将破碎的胡萝卜与适量的溶剂(如正己烷、乙醚等)混合,进行浸提。
溶剂可以溶解胡萝卜素,并将其从胡萝卜细胞中释放出来。
4. 滤液分离:将经过浸提的混合物进行过滤分离,将溶剂滤掉,得到含有胡萝卜素的滤液。
5. 重结晶:将滤液进行蒸馏或加热浓缩,使胡萝卜素逐渐结晶,在结晶过程中去除杂质。
6. 精制:对得到的胡萝卜素晶体进行精制处理,通过再结晶、析出等方法,去除胡萝卜素中的杂质,提高纯度。
7. 干燥:将精制后的胡萝卜素晶体进行干燥处理,去除残留的
溶剂和水分,使其达到稳定的干燥状态。
通过以上步骤,就能够从胡萝卜中提取出较纯的胡萝卜素。
提取后的胡萝卜素可以应用于食品工业中的色素添加剂、保健品、药物等领域,满足人们对胡萝卜素的需求。
课题2 胡萝卜素的提取课后篇巩固提升基础巩固1.下列关于胡萝卜素的叙述,错误的是( )A.胡萝卜素可用于治疗幼儿生长发育不良、干皮症等D.提取胡萝卜素时,可采用石油醚、苯、酒精、丙酮等作溶剂;酒精与水互溶,苯、丙酮沸点低。
2.下图是提取胡萝卜素的实验流程示意图,下列相关说法正确的是( )A.图中干燥处理时的温度越高、时间越长越利于胡萝卜素提取B.图中甲过程表示萃取,此过程用到的有机溶剂具有较低的沸点C.图中乙过程表示浓缩,浓缩之前进行过滤的目的是除去萃取液中的不溶物,提取时应干燥,但要控制干燥的温度和时间,若温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。
图中甲是萃取,所用萃取剂应具有较高的沸点,并能充分溶解胡萝卜素。
工业生产上,β-胡萝卜素的提取方法主要有三种:一是从植物中提取;二是从岩藻中获得;三是利用微生物发酵生产。
3.萃取的效率主要取决于( )A.原料颗粒的大小,其次还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量,萃取的温度和时间等条件的影响。
4.从胡萝卜中提取胡萝卜素时,首先要将原料干燥、粉碎,其目的主要是( )A.胡萝卜太大,不能放入烧瓶中C.脱水,使原料与有机溶剂充分接触,提高萃取效率D.减少萃取的时间,从而提高效率,此外,原料颗粒的大小及含水量也能影响萃取效率。
因此,将胡萝卜干燥脱水,并粉碎,使之与萃取剂充分接触,充分溶解,效果会更好。
另外,萃取时间一般要长一些,效果也会更好。
5.萃取法提取出的胡萝卜素粗品,可以通过纸层析法进行鉴定,原理是( )C.层析液对各种色素的溶解度不同,造成不同色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同D.层析液中丙酮使色素溶解,而且彼此分离的扩散速度不同,当层析液在滤纸上扩散时,溶解度高的色素随层析液在滤纸上扩散得快,反之则慢。
因而各种色素可以在滤纸上分离,然后通过比较萃取样品与标准样品的层析带来鉴定胡萝卜素。
6.根据从胡萝卜中提取胡萝卜素的相关知识及胡萝卜素的性质,回答下列问题。
从胡萝卜中提取色素分析胡萝卜是一种富含胡萝卜素的植物,其色素是由胡萝卜素所负责的。
胡萝卜素是一类有机化合物,是植物的黄、橙色素,其中最重要的成分是β-胡萝卜素。
胡萝卜中的色素不仅为其赋予了漂亮的外观,还具有丰富的营养价值和多种保健功效。
因此,从胡萝卜中提取色素并进行分析,对于了解其成分、性质及应用具有重要意义。
胡萝卜素的提取方法有很多种,常见的有溶剂提取和超声波辅助提取等方法。
其中,溶剂提取是一种简便易行的方法。
下面将介绍溶剂提取胡萝卜素的步骤:1.胡萝卜的选择:选择新鲜、质地坚实、没有腐烂或受伤的胡萝卜作为提取原料,以保证营养成分和色素的完整性。
2.制备胡萝卜样品:将胡萝卜切成小块,并使用食品加工器将其细碎,以增加提取效果。
3.溶剂的选择:选择合适的溶剂进行提取。
对于胡萝卜素的提取,最常用的溶剂是乙醇、乙醚或混合溶剂。
选择溶剂时应注意其溶解性和提取效果。
4.提取操作:将胡萝卜样品与溶剂混合,通过搅拌或加热等方式进行提取。
提取时间和温度根据实验需要进行调整。
5.过滤和浓缩:提取液通过滤纸或滤器进行过滤,去除胡萝卜渣。
然后使用旋转蒸发仪或其他浓缩方法将提取液浓缩至一定体积,从而得到胡萝卜素的溶液。
提取得到的胡萝卜素溶液可以用于进一步的分析。
1. 紫外-可见光谱法(UV-Vis):可以通过测定溶液的吸收光谱,确定胡萝卜素的吸光度和最大吸收波长,进而计算其浓度。
2.高效液相色谱法(HPLC):可以通过在色谱柱中进行分离和检测,得到胡萝卜素的分离峰和峰面积,从而计算其相对含量和纯度。
3.薄层色谱法(TLC):可以通过将提取液在薄层色谱板上进行分离,通过比色、荧光或显色等方法检测胡萝卜素的带点,从而进行定性分析和定量测定。
4.质谱分析(MS):可以通过质谱仪对提取液进行分析,得到每个胡萝卜素的分子质量、相对丰度以及结构信息等。
通过色素分析,我们可以了解胡萝卜中胡萝卜素的组成和含量,进一步研究其功能和应用。
课题2胡萝卜素的提取胡萝卜素的基础知识1.种类(1)划分依据:双键的数目。
(2)类型:分为α、β、γ三类,最主要的组成成分是β—胡萝卜素。
2.用途(1)治疗因缺乏维生素A 而引起的各种疾病.(2)广泛地用作添加剂。
(3)使癌变细胞恢复成正常细胞。
3.性质1.胡萝卜素不溶于水,易溶于石油醚等有机溶剂,可用萃取法提取。
2.胡萝卜素有α、β、γ三类,其中β—胡萝卜素是最主要的组成成分。
3.提取胡萝卜素的流程:胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素。
4.萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量,原料颗粒的大小、含水量、萃取的温度和时间等条件对萃取的效率也有影响。
5.萃取过程避免明火加热,应采用水浴加热。
6.对提取的胡萝卜素可通过纸层析进行鉴定.胡萝卜素是橘黄色结晶,化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂.4.提取途径(1)一是从植物中提取;(2)二是从大面积养殖的岩藻中获得;(3)三是利用微生物的发酵生产.胡萝卜素有防治癌症的作用,能否快速大量生产胡萝卜素?采用什么技术?提示:能。
发酵技术。
[跟随名师·解疑难]1.胡萝卜素的分布胡萝卜素广泛存在于植物的叶、茎和果实中,最早是在胡萝卜中分离得到的。
除胡萝卜外,绿色蔬菜和黄玉米、小米等粮食中也含有一定量的胡萝卜素。
2.胡萝卜素的理化性质胡萝卜素为橘黄色结晶,不溶于水,易溶于石油醚等有机溶剂,在橄榄油和苯中的溶解度为0。
1 g/100 mL,在氯仿中的溶解度为4。
3 g/100 mL。
胡萝卜素在弱碱条件下比较稳定,在酸中不稳定,在光照和含氧条件下也不稳定。
胡萝卜素低浓度时为黄色,高浓度时为橙红色。
重金属离子,特别是铁离子,可促使胡萝卜素退色.胡萝卜中的胡萝卜素85%为β—胡萝卜素,其结构式为:胡萝卜素提取的实验设计[自读教材·夯基础]1.提取方法与流程(1)提取方法:根据胡萝卜素易溶于有机溶剂的特点,可以采用有机溶剂萃取的方法来提取。
胡萝卜素的提取总结本文总结了从几种不同植物中提取胡萝卜素,分别为:在南瓜中用无机钙盐沉淀的方法,提取β-胡萝卜素,采用超声波辅助提取甘薯中的β-胡萝卜素,用石油醚-丙酮(1∶1,v/v)混合溶剂从油菜籽中提取胡萝卜素。
本文概述了这几种方法提取胡萝卜的原料、试剂以及简单的操作过程。
标签:胡萝卜素;南瓜;甘薯;油菜籽;提取胡萝卜素对人体有很大帮助,尤其是对眼睛和皮肤的健康,它可以改进夜盲症、皮肤不光滑的情况,还对自由基对人体的伤害有改善作用,此外,胡萝卜素是食品添加剂的一种,而且在保健和医疗方面得到了更多的使用,尤其是天然β-胡萝卜素。
因为其有如此多的好处,在全球的应用越来越多,所以如何更有效的提取胡萝卜素成为许多科学家研究的热门问题。
为了人们更好的了解胡萝卜素的来源以及提取方法,希望可以根据前人的研究发展出更多,更好的发法,供人们更好的利用胡萝卜素。
一、从新鲜南瓜中提取胡萝卜素方法:用无机盐将胡萝卜素沉淀的方法原料:新鲜南瓜试剂:氯仿氢氧化钙石油醚氯化钙操作簡单步骤:取一些干净并且去掉外皮的新鲜南瓜,将南瓜切成块状后,将南瓜块打碎成浆糊状物,之后,用水对南瓜进行加压抽滤,一段时间后得到一定量的橙黄色的南瓜汁液。
将所得到的南瓜汁液按照一定的比例进行称量。
再加入一定量的氯化钙,为了将南瓜汁液调节到一定的pH值,向其中加入一定量的氢氧化钙,将温度控制在40摄氏度左右,时间大概为5min,进行完以上操作后将其取出放在常温下静置一段时间后,进行过滤就可以得到橙红色沉淀。
在所得到的橙红色沉淀中,加入一些溶剂石油醚,搅拌使其混合均匀后,进行一段时间的恒温回流,恒温回流时要将温度控制在40摄氏度左右,回流的时间大概为30min,放在室温下冷却一段时间后进行萃取蒸馏。
进行完上述操作后即可得到纯净的β-胡萝卜素。
二、从新鲜甘薯中提取胡萝卜素方法:用超声波高频震动辅助提高萃取效率的提取法(这是一种新的提取方法,被广泛运用在植物活性成分提取方面。
【高中生物】高中生物知识点:植物色素的提取植物色素的提取:1、胡萝卜素、叶绿素、叶黄素、番茄红素和辣椒红素都是脂溶性植物色素,一般不溶于水,易溶于酒精、乙醚和氯仿等有机溶剂。
故常用有机溶剂萃取胡萝卜素。
2、胡萝卜素的提取:(1)胡萝卜素的性质:胡萝卜素是橘黄色结晶,化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。
(2)胡萝卜素的提取来源提取天然胡萝卜素的方法主要有:一是从植物中提取;二是从大面积养殖的岩藻中荻得;三是利用微生物的发酵生产。
(3)萃取剂:最适宜作胡萝卜素萃取剂的是石油醚。
(4)实验流程胡萝卜→粉碎→干燥→萃取(石油醚)→过滤_→浓缩→胡萝卜素→鉴定(纸层析法)。
知识点拨:1、注意事项:(1)萃取前往往要将胡萝卜烘干、粉碎,并且原料颗粒越小越好,这样做的目的:让原料与萃取剂充分接触,提高萃取效率。
(2)萃取过程中采用水浴加热的原因:有机溶剂用明火直接加热易爆炸。
(3)在提取的胡萝卜素粗品鉴定中,点样斑点用吹风机吹干时,温度不宜过高,否则斑点会变成黄色。
2、萃取剂常用石油醚。
石油醚经常被用作提取植物有效成分的萃取剂的原因是具有较高的沸点、萃取效率高、毒性很小。
3、胡萝卜素的特性:(1)一分子的β-胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官内被氧化分解成维生素A,用于治疗夜盲症、干皮症等。
(2)胡萝卜素可以划分为α、β、γ三类,其划分的主要依据是:根据分子式中碳碳双键的数目。
胡萝卜素是脂溶性的。
用油炒胡萝卜时,应多加些油,便于人体吸收。
(3)胡萝卜素的颜色和主要吸收的光谱分别是:橙黄色和蓝紫光。
(4)胡萝卜素的作用:胡萝卜素可以用来治疗缺乏维生素A而引起的各种疾病;胡萝卜素可用作食品色素;天然胡萝卜素还具有使癌变细胞恢复成正常细胞的作用。
4、乙醇和丙酮为水溶性溶剂。
相关高中生物知识点:实验:绿叶中色素的提取和分离绿叶中色素的提取和分离:1.原理(1)各种色素能溶解在有机溶剂(无水乙醇等)中形成溶液,使色素从生物组织中脱离出来。
植物有效成分(胡萝卜素)的提取胡萝卜素是Wakenroer于1931年在胡萝卜中发现的一种色素。
许多天然食物中,如绿色蔬菜、甘薯、胡萝卜、菠菜、木瓜、芒果等,皆含有丰富的β-胡萝卜素,其中含量最高的是胡萝卜。
胡萝卜素有α、β、γ等异构体,其中以β-胡萝卜素的活性最高。
世界卫生组织经过论证认为:β-胡萝卜素为最有希望的抗氧化剂之一。
它可以防止和消除体内生理代谢过程中产生的自由基,是氧自由基最强的“克星”。
β-胡萝卜素的保护视力、防癌、抗癌、防衰老、防治白内障、抗辐射线对人体损伤和提高机体免疫力的功效已得到认可,是联合国粮农组织和世界卫生组织食品添加剂联合委员会认可的无毒、安全、有营养的食品添加剂。
β-胡萝卜素的分子式为C40H56,相对分子质量为536.88,β-胡萝卜素的结构中存在着多个共轭双键,为天然存在的共轭多烯烃化合物。
β-胡萝卜素为紫红色或红色结晶性粉末,有轻微异臭或异味受光、热、空气影响后,产品外观色泽变淡。
溶于二硫化碳、石油醚、苯、氯仿;几乎不溶于乙醇、水、酸、碱。
β-胡萝卜素的天然品制备方法主要包括有机溶剂萃取法、超临界流体CO2萃取法、盐藻提取法、微生物发酵法等。
有机溶剂萃取法:β-胡萝卜素可用有机溶剂从天然植物胡萝卜、棕榈、沙棘等富含β-胡萝卜素的植物中提取。
常用的有机溶剂为无水乙醚、石油醚等。
但大量有机溶剂的使用会造成不同程度的环境污染,且不易回收。
超临界流体CO2萃取法:近年来大量资料表明,采用超临界流体CO2萃取法提取β-胡萝卜素可以大大提高β-胡萝卜素提取率,具有萃取效率高、速度快、无污染、工艺简单、萃取物色味纯正等优点。
盐藻提取法:通过大面积培养盐生杜氏藻提取β-胡萝卜素。
目前我国相继形成了内蒙古吉兰泰盐场生物工程公司、天津兰太生物工程公司等少数几家养殖盐藻生产天然胡萝卜素的企业。
盐藻提取法受外界环境影响特别大,要有盐湖场,需要长时期的高温和强烈光照,作为培养的海水要求具有10%以上的高盐浓度。
课题2胡萝卜素的提取理一理判一判1.胡萝卜素化学性质稳定,易溶于有机溶剂,适宜采用萃取法提取。
(√)2.胡萝卜粉碎后可直接进行萃取。
(×)3.水溶性和水不溶性有机溶剂都可以用于提取胡萝卜素。
(×) 4.石油醚沸点高,适宜进行胡萝卜素的萃取。
(√)5.萃取的效率仅取决于萃取剂的性质和用量。
(×)6.胡萝卜素的鉴定可采用纸层析法。
(√)7.干燥处理可减少原料的含水量,进而促进原料中的胡萝卜素溶解于萃取剂中。
(√)8.萃取过程可用明火加热,还要安装冷凝管以防胡萝卜素损失。
(×)悟一悟1.萃取前,要将胡萝卜进行粉碎和干燥。
粉碎的胡萝卜颗粒越小越好。
2.新鲜的胡萝卜含有大量的水分,在干燥时要注意控制温度,温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。
3.胡萝卜干燥的速度和效果与破碎程度、干燥方式有关。
可以用烘箱烘干,也可以用热风吹干。
4.萃取的最佳温度和时间可以通过设置对照实验来摸索。
5.层析时应选择干净的滤纸,为了防止操作时对滤纸的污染,应尽量避免用手直接接触滤纸,可以戴手套进行操作。
6.点样应快速细致,样点不能太大(直径为2 mm左右),并保持滤纸干燥。
点样后如果用吹风机吹干,温度不宜过高,否则样点会变黄。
7.点样完成后,将滤纸卷成筒状,卷纸时注意滤纸两边不能相互接触,以免因毛细现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快,溶剂前沿不齐,影响结果。
8.石油醚易挥发,层析容器要密封。
9.层析时间不宜过长,因为胡萝卜素随石油醚扩散速度很快。
感悟体会:练一练1.[全国高考题]回答与胡萝卜有关的问题:(1)胡萝卜含有的胡萝卜素中,最主要的是________(填“α胡萝卜素”或“β胡萝卜素”或“γ胡萝卜素”),该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子________,后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症,该疾病称为________,胡萝卜素是________(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。
β-胡萝卜素的提取分离研究β-胡萝卜素的提取摘要:β-胡萝卜素是安全的、无毒的天然色素,在生物食品等领域均有展应用。
β-胡萝卜素的提取工艺众多,工艺各有特点。
简要介绍了溶剂提取法提取胡萝卜素,柱色谱分离β-胡萝卜素,薄层色谱法检验分离效果的方法。
学习柱色谱法、薄层色谱法的原理及其方法。
掌握从胡萝卜中分离提纯β-胡萝卜素的原理和方法。
学会用色谱法从胡萝卜中提取胡萝卜素并鉴定之。
关键词:β-胡萝卜素提取分离引言:胡萝卜是传统蔬菜和食用天然胡萝卜素的重要来源。
β-胡萝卜素是500多种类胡萝卜素的一种。
是橘黄色脂溶性化合物,它是一种重要的食用天然色素和营养强化剂,易溶于许多有机溶剂,如:乙酸乙酯、氯仿。
几乎不溶于丙二醇、甘油、酸和碱‘不溶于水。
β-胡萝卜素是一种非常安全的、无任何毒副作用的营养元素,具有解毒作用。
是维护人体健康不可缺少的营养素。
在抗癌、预防心血管疾病、白内障及抗氧化方面有显著的功能,可预防因老化引起的多种退化性疾病。
另外,β-胡萝卜素在食品工业中的应用也日益广泛。
胡萝卜中含有丰富的胡萝卜素,是β-胡萝卜素含量最高的蔬菜之一。
本文以胡萝卜为原料,采用色谱分离的方法研究了胡萝卜素的提取。
正文1.1胡萝卜中的成分每100克胡萝卜中,约含蛋白质0.6克,脂肪0.3克,糖7.6~8.3克,铁0.6毫克,维生素A(胡萝卜素)1.35~17.25毫克,维生素B1 0.02~0.04毫克,维生素B2 0.04~0.05毫克,维生素C12毫克,热量150.7千焦,另含果胶、淀粉、无机盐和多种氨基酸。
各类品种中尤以深橘红色胡萝卜素含量最高,各种胡萝卜所含能量在79.5千焦~1339.8千焦之间。
胡萝卜是一种质脆味美、营养丰富的家常蔬菜,素有“小人参”之称。
胡萝卜富含糖类、脂肪、挥发油、胡萝卜素、维生素A、维生素B1、维生素B2、花青素、钙、铁等人体所需的营养成分。
1.2 β-胡萝卜素的性质分子式,其分子式为 C40H56,紫红或暗红色的结晶性粉末。
课题2 胡萝卜素的提取《学案》【课题目标】本课题通过从胡萝卜中提取胡萝卜素,了解有关胡萝卜素的基础知识和提取胡萝卜素的基本原理,初步学会胡萝卜素的提取技术和纸层析的操作方法,并初步了解有机溶剂的相关知识。
【课题重点与难点】课题重点:胡萝卜素的提取,纸层析的操作。
课题难点:胡萝卜素的提取。
【知识要点】1.胡萝卜素的性状;2.胡萝卜素的提取方法【导学诱思】1. 胡萝卜素是,化学性质比较,不溶于水,微溶于,易溶于等有机溶剂。
根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类。
是其中最主要的组成成分。
与β-胡萝卜素化学结构类似的胡萝卜素约有100多种,它们大多存在于蔬菜中。
等蔬菜是提取天然β-胡萝卜素的原料。
工业生产上,提取天然β-胡萝卜素的方法主要有三种,一是从中提取,二是从中获得,三是利用生产。
本课题所提供的方法只能提取胡萝卜素的,若要获得β-胡萝卜素,还需要进一步的。
2.提取胡萝卜素的实验流程有、、、、、。
思考:影响萃取的因素有哪些?【疑难点拨】1、萃取剂的选择根据胡萝卜素易溶于有机溶剂的特点,可以考虑有机溶剂萃取的方法。
有机溶剂分为水溶性和水不溶性两种。
乙醇和丙酮能够与水混溶,是水溶性有机溶剂;石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳等不能与水混溶,称为水不溶性有机溶剂。
萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有很高的溶点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水溶。
最佳萃取剂为石油醚。
思考:(1)乙醇和丙酮能够用于胡萝卜素的萃取吗?为什么?解答:胡萝卜素可溶于乙醇和丙酮,但它们是水溶性有机溶剂,因萃取中能与水混溶而影响萃取效果,所以不用它们作萃取剂。
(2)在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳这几种溶剂中,哪种最适宜用来提取胡萝卜素?解答:在这五种溶剂中,石油醚的沸点最高,在加热萃取时不易挥发,所以石油醚最适宜用作萃取剂。
2、纸层析的操作(1)层析时注意选择干净的滤纸,为了防止操作时对滤纸的污染,应尽量避免用手直接接触滤纸,可以带手套进行操作。
植物有效成分(胡萝卜素)的提取胡萝卜素是Wakenroer于1931年在胡萝卜中发现的一种色素。
许多天然食物中,如绿色蔬菜、甘薯、胡萝卜、菠菜、木瓜、芒果等,皆含有丰富的β-胡萝卜素,其中含量最高的是胡萝卜。
胡萝卜素有α、β、γ等异构体,其中以β-胡萝卜素的活性最高。
世界卫生组织经过论证认为:β-胡萝卜素为最有希望的抗氧化剂之一。
它可以防止和消除体内生理代谢过程中产生的自由基,是氧自由基最强的“克星”。
β-胡萝卜素的保护视力、防癌、抗癌、防衰老、防治白内障、抗辐射线对人体损伤和提高机体免疫力的功效已得到认可,是联合国粮农组织和世界卫生组织食品添加剂联合委员会认可的无毒、安全、有营养的食品添加剂。
β-胡萝卜素的分子式为C40H56,相对分子质量为536.88,β-胡萝卜素的结构中存在着多个共轭双键,为天然存在的共轭多烯烃化合物。
β-胡萝卜素为紫红色或红色结晶性粉末,有轻微异臭或异味受光、热、空气影响后,产品外观色泽变淡。
溶于二硫化碳、石油醚、苯、氯仿;几乎不溶于乙醇、水、酸、碱。
β-胡萝卜素的天然品制备方法主要包括有机溶剂萃取法、超临界流体CO2萃取法、盐藻提取法、微生物发酵法等。
有机溶剂萃取法:β-胡萝卜素可用有机溶剂从天然植物胡萝卜、棕榈、沙棘等富含β-胡萝卜素的植物中提取。
常用的有机溶剂为无水乙醚、石油醚等。
但大量有机溶剂的使用会造成不同程度的环境污染,且不易回收。
超临界流体CO2萃取法:近年来大量资料表明,采用超临界流体CO2萃取法提取β-胡萝卜素可以大大提高β-胡萝卜素提取率,具有萃取效率高、速度快、无污染、工艺简单、萃取物色味纯正等优点。
盐藻提取法:通过大面积培养盐生杜氏藻提取β-胡萝卜素。
目前我国相继形成了内蒙古吉兰泰盐场生物工程公司、天津兰太生物工程公司等少数几家养殖盐藻生产天然胡萝卜素的企业。
盐藻提取法受外界环境影响特别大,要有盐湖场,需要长时期的高温和强烈光照,作为培养的海水要求具有10%以上的高盐浓度。
微生物发酵法:微生物发酵法是指利用微生物培养技术,通过微生物的培养,在其体内合成β-胡萝卜素,然后自微生物体内分离得到β-胡萝卜素的一种方法。
本次培训主要是采用有机溶剂从天然植物胡萝卜中提取胡萝卜素。
提取到的是类胡萝卜素的混合物,可以采用纸层析法对提取物进行粗分离,可以看到叶黄素和胡萝卜素。
本实验设计具有方法简便、设备简单、易于操作等特点。
一、课题目标本课题通过从胡萝卜中提取胡萝卜素,了解有关胡萝卜素的基础知识和提取胡萝卜素的基本原理,初步学会胡萝卜素的提取技术和纸层析的操作方法,并初步了解有机溶剂的相关知识。
二、课题重点与难点课题重点:胡萝卜素的提取,纸层析的操作。
课题难点:胡萝卜素的提取。
三、实验案例(一)实验原理萃取是指用溶剂从液体混合物中提取其中某种组分的操作。
它是利用溶液中各组分在所选用的溶剂中溶解度的差异,使溶质进行液液传质,以达到分离均相液体混合物的操作。
通过使用有机溶剂可以将天然植物(胡萝卜)中的色素提取出来。
纸层析是分离色素常用的方法。
它是利用混合物各组分在流动相和固定相两种不同溶剂中的分配系数差异,将它们分离开。
在纸层析中的流动相是指层析液,在毛细拉力作用下,层析液能不断由下向上流动。
固定相是指被吸附在滤纸纤维之间的水分。
由于纤维素上的亲水羟基使这部分水束缚在纤维素周围,不易扩散而成为固定相。
在层析过程中,当层析液在毛细拉力作用下,上升流经色素滤液细线时,滤液细线上的色素就相继融入层析液,随着层析液上升,并发生分配,即有一部分色素从层析液分配溶解到固定相中,直到平衡。
由于分配系数的不同,与分子大小有关,那些分配系数大的色素分子,随层析液向上移动得快,形成的色素带集中在滤纸的上部;而分配系数小的色素分子,随层析向上移动得慢,形成的色素带集中在滤纸的下面。
纸层析使素色粗提液进行分离,可以将叶黄素和胡萝卜素两大类色素分离开来。
(二)原料,主要试剂、耗材和仪器1. 原料新鲜胡萝卜。
2. 试剂苯、石油醚(沸程60-90℃)、四氯化碳、无水硫酸钠等。
3. 耗材层析滤纸、中速或快速定量滤纸(φ11cm)、玻璃漏斗、毛细滴灌、15ml 大试管(或25ml比色管)。
4. 仪器电热鼓风干燥箱、水浴锅、匀浆器或榨汁机。
(三)实验步骤1. 色素的提取和浓缩(1)胡萝卜的粉碎和干燥选取500 g(可供10组试验用)新鲜红心的胡萝卜,用清水洗净,沥干、用匀浆机(或榨汁机)切碎,然后在45 ℃的烘箱中烘干,时间约需4.0h,将干燥后的胡萝卜进一步粉碎过筛。
注意胡萝卜的粉碎一定要彻底。
(2)萃取取粉末样品1g,放入15ml大试管(或25ml比色管)中,加入10mL溶剂(苯、石油醚、四氯化碳)塞上胶塞(或比色管盖),混匀,放于45℃水浴中萃取15、30、45min,然后加入无水硫酸钠少许,过滤萃取液,除去固体物质及少量的水分,注意要避光。
(3)对萃取的样品进行浓缩取下胶塞(或比色管盖),将水浴锅置于通风橱中进行蒸馏、浓缩2-2.5h,浓缩液至1-2ml即可。
注意要避光。
2. 色素提取液的纸层析分离(1)点样将层析滤纸剪成15cm×1.5cm,在距一端2cm中央处用毛细滴管点样。
点样量要少,样点直径控制在0.5cm以内,自然风干或电吹风冷风吹干后再点样,反复数次至风干样点为橙红色。
注意要避光。
(2)层析向15ml大试管(或25ml比色管)中加入2.5ml的四氯化碳,将处理好的滤纸条有样点的一端朝下放入试管,浸没在四氯化碳中,加盖,层析约20min。
注意要避光。
3. 结果观察(1)确定提取胡萝卜素的最佳方案比较采用不同的有机溶剂和时间萃取的实验结果,确定提取胡萝卜素的最佳方案。
(2)是否出现对应的层析带如果萃取样品中出现了和标准样品一样的层析带,说明提取胡萝卜素的实验成功(如果具有胡萝卜素标准样品)。
由于提取物中含有杂质,萃取样品的颜色可能比标准样品的颜色浅,我们也可以通过颜色的比较,初步确定提取的胡萝卜素的量。
说明:胡萝卜素比叶黄素的分散速度快,因此胡萝卜素位于色素带的上面,呈现橙黄色,下面为黄色色素带为叶黄素。
附1 问题参考答案(一)资料[资料一]萃取剂的选择讨论题1. 乙醇和丙酮能够用于胡萝卜素的萃取吗?为什么?答:胡萝卜素可溶于乙醇和丙酮,但它们是水溶性有机溶剂,因萃取中能与水混溶而影响萃取效果,所以不单独用它们作萃取剂。
2. 在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳这几种有机溶剂中,哪种适宜用来提取胡萝卜素?答:在这五种有机溶剂中,石油醚的沸点最高,在加热萃取时不易挥发,所以石油醚较适宜用作萃取剂。
(二)练习1. 答:提取方法实验原理方法步骤适用范围水蒸气蒸馏利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来 1.水蒸气蒸馏 2.分离油层3.除水过滤适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油压榨法通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油1.石灰水浸泡、漂洗2.压榨、过滤、静置3.再次过滤适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取有机溶剂萃取使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发溶剂后就可获得芳香油1.粉碎、干燥2.萃取、过滤3.浓缩适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶液中附2 常用有机溶剂的性质及回收精制1.甲醇(CH3OH)分子量32.04,沸点64.70℃,比重0.7924能与水、乙醇,乙醚,氯仿以任何比例混溶,因不与水共沸,故用分馏法可以获得99.8%的浓度。
绝对无水的甲醇,可用镁和碘的方法制得(同乙醇项下),甲醇易燃,有毒,对视神经有损伤,在操作中应加以注意。
精制方法:工业规格的甲醇中,主要含丙酮和甲醛杂质,可用下述方法除去:(1)先用高锰酸钾法大致测定醛酮的含量后,加入过量盐酸羟,回流四小时,然后重蒸馏。
(2)将硫酸汞酸性溶液与甲醇一起加热,使丙酮生成终合物析出,或将碘的碱性溶液与甲醇共热使醛或酮氧化成碘仿,然后再分馏精制。
[注意]:甲醇不能用生石灰脱水,因CaO能吸附20%甲醇。
且CaO、CH3OH、H2O三乾与相互间形成的复合物处于平衡状态,完成脱去水是不可能的。
2.乙醇(C2H5OH)分子量46.07,沸点78.32℃比重0.7893,与水能任意混溶,蒸馏时与水共沸,共沸点78.1℃,共沸混合液含水4.43%,即为95%乙醇。
再生方法,先在用过的乙醇中加入生石灰(氧化钙)用量为每立升25—50克,加热回流脱水后,分级蒸馏,收集76℃—81℃的馏分,含醇30—90%,再置圆烧瓶中,加计算量多一倍的生石灰再蒸馏收集76℃—78℃的馏分,浓度可达90.5—99.5%。
如需绝对无水者,则可用以下二法:(1)99.5%乙醇1000ml,加27.5克苯二甲酸二乙酯和7克金属钠,放置后蒸馏,得无水醇。
C6H4(COOC2H5)2+2C2H5ONa+2H2O C6H4(COONa)2+4C2H3OH(2)93%以上的乙醇60ml,置于2立升容积的圆底烧瓶中加入5克金属镁,0.5克碘,使发生反应促进镁溶解成醇镁,再加900ml乙醇,回流加热五小时,蒸馏可得100%乙醇。
(C2H5O)2Mg+2H2O 2C2H5OH+Mg(OH)2如用于紫外光谱分析:要求较高,普通发酵乙醇常混有少量醛。
又无水乙醇用苯,沸蒸馏所得者常含有苯、甲苯、均不宜于光谱分析用,其精制法如下:95%普通乙醇100ml,加入25ml 12N H2SO4,在水浴上回流加热数小时以除去苯及甲苯等杂质,蒸馏。
将初馏分50ml及残馏分100ml弃去,主馏分中加入硝酸银8克,并加热使溶解,溶解后再加入粒状氢氧化钾15克,回流加热一小时。
此时溶液从具粘土色的AgOH悬浊液变为黑色的还原银粒凝集沉淀出来。
此反应约需20—30分钟,如果黑色沉淀很早生成,即表示能被氧化的物质存在较多。
将蒸馏后所得溶液再加入少量硝酸银和氢氧化钾(1:2W/W)重复上述操作直至没有黑色沉淀物生成为止,再继续加热三十分钟,蒸馏,再将粗馏分约50ml及残馏分约100ml弃去,收集得出主馏分,但主馏分中有带入微量碱和银离子的可能,将会促进乙酸氧化,故应重蒸馏一次,由此法制得的乙醇含水3—6%,在206nm处透明,200nm处有尾端吸收。
3.乙醚(C2H5OC2H5)分子量74.12,沸点34.6℃,比重0.714,在水中的溶解度为8.11%,用过的乙醚常含有水及醇,如用水洗涤损失很大,可用饱和氯化钙水液洗涤。
乙醇也可同时除去,再以无水氯化钙脱水干燥,重蒸馏即得。
乙醚久置于空气中,尤其是暴露在日光下,会逐渐氧化醛酸、及过氧化物,当过氧化物到达万分之几时,蒸馏时有发生爆炸的危险,过氧化物是否存在,可以用碘化钾溶液与少量乙醚共振摇生成游离碘而检出。
其除去法可用稀碱、浓高锰酸钾液,亚硫酸钠液顺次洗涤,再用水洗,干燥,熏蒸馏而得。