实验动物实用手册

概论一：实验动物的定义：指经人工饲育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确或者来源清楚的用于科学研究、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。

动物的遗传学分类：近交系、封闭群和杂交群3大类群。

动物按基因特点分类：基因突变动物、转基因动物动物按清洁程度分级：所谓清洁程度是指实验动物携带病菌和寄生虫的情况。

普通级动物是指不携带人兽共患病和动物烈性传染病病原的动物；清洁级动物是指除普通级动物应排除的病原外，还应不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的微生物和寄生虫；无特定病原体动物（SPF）指除普通级、清洁级动物应排除的微生物和寄生虫外，还应不携带主要潜在感染或条件性致病和对科学实验感染大的微生物和寄生虫；无菌动物（GF）是指利用现有的检测方法和检查手段，不能在动物体内检出任何细菌、病毒、寄生虫等病原体。

二：常用实验动物的特点小鼠体型小，便于操作和饲养管理，饲料消耗量少，需要的饲养空间也较小，性情温顺，胆小怕惊，容易捕捉，体小娇嫩，对外界环境适应能力较差，不耐饥饿、冷、热。

对温、湿度很敏感，一般以温度18~22℃，相对湿度50%~60%最佳，喜欢光线较暗的安静环境，习惯于昼伏夜动。

三：实验动物的选择原则动物实验中实验动物是主要研究对象。

实验动物的选择是动物实验中首要考虑的问题。

不同实验研究的目的和要求不同，不同种类实验动物也具有各自的生物学特点和解剖生理特征，随意选择动物用于某项实验，可能会得出不可靠的试验结果，甚至导致整个实验徒劳无功，直接关系到科学研究的成败和质量。

为保证动物实验研究中使用最适宜的实验动物，选择实验动物应遵循以下原则：相似性原则：是指利用动物与人类某些功能、代谢、结构及疾病特点的相似性选择实验动物。

适用性原则：不同种系实验动物具有某些特殊的解剖生理特点，用解剖生理特点符合实验目的和要求的实验动物做实验，是保证实验成功的关键问题。

例如：犬的甲状旁腺位于甲状腺的表面，位置固定，多在2个甲状腺相对应的两端上，故选用其做甲状旁腺摘除实验很合适。

大动物实验手册
大动物实验手册涉及的实验可能有很多，这取决于你感兴趣的具体领域和实验目标。

但是，这里是一个可能的实验示例：条件性回避反应测试。

一、实验目的：
本实验旨在通过条件性回避反应测试，研究动物在特定环境下的行为反应和心理状态，以评估动物的学习和记忆能力。

二、实验材料：
1. 实验动物：大鼠或猴子等大动物
2. 实验设备：测试箱、电击设备、摄像机等
3. 实验试剂：无
三、实验步骤：
1. 实验前准备：准备好实验动物、设备和试剂，确保实验环境的安全和舒适。

2. 实验开始：将动物放入测试箱中，适应环境5分钟。

3. 电击处理：对动物进行一定数量的循环电击，每个循环包括无信号不可逃避的双室足底电击期和间歇期，电击时间和间歇时间分别为3-10秒。

电刺激频率为5-15Hz，刺激电流强度根据动物种类调整。

4. 条件性回避反应测试：在电击处理结束后第二天，将动物放入测试箱中，适应环境5分钟。

然后进行15-30个运行周期的实验，记录动物在电击期和间歇期的行为表现。

5. 数据处理和分析：对实验数据进行处理和分析，评估动物的条件性回避反应程度和心理状态。

6. 实验结束：将动物妥善处理，整理实验数据和报告。

四、注意事项：
1. 在进行实验时，要遵守动物福利和伦理原则，确保动物的健康和安全。

2. 实验人员需要具备一定的动物实验技能和经验，熟悉实验动物的生理和心理特点。

3. 在实验过程中，要保持实验环境的清洁和卫生，避免交叉感染和污染。

实验动物饲养管理和使用手册实验动物饲养管理和使用手册1、引言1.1 目的本手册的目的是提供实验动物饲养管理和使用的详细指南，确保实验动物的福利和符合法律法规的要求。

1.2 适用范围本手册适用于所有实验室、研究机构和相关机构，对于饲养、管理和使用实验动物的人员参考。

2、饲养设施2.1 动物房间2.1.1 房间布局2.1.2 温度和湿度控制2.1.3 照明2.1.4 通风2.1.5 噪音控制2.1.6 环境清洁和消毒2.2 笼具和笼舍2.2.1 笼具选择2.2.2 笼具清洁和消毒2.2.3 笼具标识2.3 饲料和水的供给2.3.1 饲料选择2.3.2 饲料存放和保质期2.3.3 饮水设备和水的质量控制3、动物管理3.1 动物购买和检疫3.1.1 供应商选择3.1.2 动物购买和运输3.1.3 动物检疫程序3.2 健康监测3.2.1 常规健康检查3.2.2 疾病筛查和畸形检测3.2.3 动物隔离和治疗3.3 实验动物的饲养3.3.1 饲养群体大小和组合3.3.2 饲养环境的标准化3.3.3 饲料供给和特殊饮食要求4、动物使用和实验操作4.1 使用动物前的准备4.1.1 动物编号和记录4.1.2 麻醉和术前操作4.1.3 实验操作的技术培训4.2 实验操作的注意事项4.2.1 采集样本和标本处理4.2.2 注射和给药方法4.2.3 手术操作和实验操作步骤4.3 死亡、安乐死和人道处置4.3.1 动物死亡的记录和报告4.3.2 安乐死的程序和规定4.3.3 人道处置准则和流程附件：1、实验动物饲养记录表格2、动物购买和供应商信息表格3、健康监测结果记录表格4、实验操作记录表格法律名词及注释：1、动物福利法：指保护和提高动物福利的法律法规。

2、动物实验伦理委员会（IACUC）：负责审核和监督实验动物使用的委员会。

3、3R原则：Replace（替代）、Reduce（减少）、Refine（改进），指在实验动物使用中，替代动物、减少使用动物、改进使用方法的原则。

实验1 实验动物的捉持法和给药法一、常用实验动物的捉持法1．蛙和蟾蜍通常以左手握持，用食指和中指夹住左前肢，拇指压住右前肢，右手将下肢拉直，左手用无名指及小指夹住（图1）。

图1 蟾蜍捉持法2．小鼠（1）双手法：右手提鼠尾，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，向后方轻拉鼠尾，使小鼠前肢固定在粗糙面上。

迅速用左手拇指和食指捏其双耳间颈背部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤和尾部，便可将小鼠牢固捉持（图2）。

图2 小鼠双手捉持法（2）单手法：小鼠置于笼盖上，先用左手食指和拇指抓住鼠尾，后手掌尺侧和小指夹住鼠尾，然后左手拇指与食指捏住颈部皮肤（图3）。

图3 小鼠单手捉持法3. 大鼠大鼠容易激怒咬人，捉持时应戴防护手套。

先用右手抓住鼠尾，再用左手拇指和食指握住头部，其余手指与掌部握住背部和腹部。

注意不要捏其颈部，以防用力过大、过久，窒息死亡。

4．家兔一只手抓住兔颈背部皮肤，将兔轻轻提起，另一只手托住臀部，使兔呈蹲坐姿势（图4）。

切不可用手握持双耳提起兔子。

图4 家兔捉持法5．豚鼠豚鼠性情温和，不咬人，用手轻轻握住身体即可抓起。

6. 猫应戴好防护手套。

轻声呼唤，慢慢将手伸入猫笼，轻抚猫头、颈和背部，一只手抓住颈背部皮肤，另一只手抓住腰背部。

性情凶暴的猫可用布袋或网套捉持，操作中应防其利爪和牙齿伤人。

7. 狗驯服的狗可戴上特制嘴套，用绳带固定于耳后颈部；凶暴的狗可用长柄捕狗夹钳住狗的颈部，然后套上嘴套。

狗嘴也可用绳带固定，操作时先将绳带绕过狗嘴的下颌打结，再绕到颈后部打结，以防绳带滑落。

狗麻醉后四肢固定于手术台上，取下嘴套或绳带，将一金属棒经两侧嘴角，穿过口腔压于舌上，再用绳带绕过金属棒绑缚狗嘴，并固定于手术台上。

应将狗舌拉出口腔，以防窒息。

二、常用实验动物给药法1. 经口给药法此法有口服与灌胃两种方法。

适用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬等动物。

口服法可将药物放入饲料或溶于饮水中令动物自由摄取。

若为保证剂量准确，可应用灌胃法。

动物实验技术第六章动物实验基本操作技术第一节、实验动物的抓取与固定一、小鼠的抓取与固定•抓取方法：用右手拇指和食指捏住尾部中段提起，如果只想移动小鼠，就用两手把它捧起来。

•手固定法：将右手捏起的小鼠放在笼盖上，用右手捏其尾部中段，在小鼠向前爬的一瞬间，用左手的拇指和食指捏住颈背部皮肤，再翻转左手，将小鼠置于左手掌心中，右手拉住小鼠尾部，再用左手小指和无名指压住小鼠尾根部使小鼠整个呈一条直线。

固定时注意，过分用力会使小鼠颈椎脱臼，若用力过轻头部能反转过来咬伤实验者的手。

这种固定方法是灌胃给药和腹腔注射给药常用的方法。

•手术固定法：用乙醚等麻醉药品麻醉后，用长20~30cm的线绳分别系在四肢上，再把四肢的线绳分别系在固定板四角的钉子上，并且在头部上颚切齿的地方牵一根线绳达到完全固定。

•在静脉给药时，先根据小鼠的大小选择合适的固定器，打开鼠筒盖，把小鼠放在里面，只露出尾巴；或者用倒放的烧杯将鼠扣住，只露出尾巴并压住。

二、大鼠的抓取与固定•抓取方法：4~5周龄以内的大鼠同小鼠；周龄较大的大鼠其尾部皮肤容易被剥脱，所以用左手从背部中央到胸部捏起来抓住。

抓取时最好带防护手套，但手套不宜过厚。

•手固定法：同小鼠。

•手术固定法：同小鼠。

•静脉给药或采血时同小鼠。

三、豚鼠的抓取与固定•抓取方法：抓取幼小豚鼠时，用手捧起来；成熟的大豚鼠，用手大把抓起胸肋部即可。

注意不能粗野，更不能抓取腰腹部，这样容易造成肝破裂而死亡。

•手固定法：⑴将左手的食指和中指放在豚鼠颈背部两侧，拇指和无名指放在肋部，分别用手指夹住左右前肢抓起来。

⑵反转左手，用右手的拇指和食指夹住右后肢，用中指和无名指夹住左后肢是豚鼠整体伸直成一条直线。

⑶一个人固定操作时，坐在椅子上，用右手拿着豚鼠的后肢夹在两腿之间，用大腿代替右手夹住。

•手术固定法：同大、小鼠。

四、家兔的抓取与固定•抓取方法：用一只手大把抓住颈背部皮肤提起来，另一只手托住其臀部，让其重心落在托其臀部的手上，运送时，还要抓住颈肩部皮肤抱着兔子运送。

实验动物实用手册常用实验动物名词一、实验动物(LaboratoryAnimal)基本概念及分类方法(一)实验动物的定义：遗传背景明确、来源清楚、对其携带的微生物、寄生虫实行控制，经科学方法人工培育用于科学实验的动物。

(二)实验动物的分类方法1、按遗传学控制分类*近交系(1nbredStrain)(1)定义：杂种动物经过相当于20代全同胞兄弟单纯连续繁殖，各条染色体上的基因趋于纯合，品系内个体差异趋于零。

(2)近交动物的特征a、纯合性和一致性纯合性指的所有动物的基因位点都应是纯合的。

一致性指的是任何可遗传的体征都完全一致。

例如：血型和组织型，体重、毛色。

b、遗传稳定性c、特异性就整个近交系小鼠而言，每个晶系在遗传上都是独特的，几乎每个近交系都建立了各自的遗传概况。

有些品系可能自发某些疾病，成为研究人类疾病的动物模型。

d、分布于各地，引一对即可繁殖。

e、背景资料和数据较完整。

*封闭群(Closedcolony)(1)定义：以非近亲配种方式进行繁殖生产的一个种群，在不从外部引入新血缘条件下，至少连续繁殖四代以上称封闭群。

(2)封闭群的特点：a、由于非近交，具有杂合性，从而避免近交衰退的出现。

b、由于没有引进新的血缘，种群间遗传特性能保持相对稳定。

c、群内个体间，因其具有杂合性，所以个体间的反应性具有差异，重复性和一致性不如近交系。

1、按微生物学分类*普通级动物Convention（CV）alAnimal不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。

*清洁动物Clean（CL）Animal除普通级动物应排除的病原体外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体。

饲养在屏障系统中。

空气要经过滤净化，饲养室要保持正压，进入室内的—切物品要经过消毒灭菌，工作人员进入要洗澡和穿灭菌工：作服，动物饮水要经灭菌。

*无特定病原体动物SpecificPathogen-free（SPF）Animal除清洁动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病菌和对科研干扰大的病原。

实验动物血液生理生化参考手册一、介绍实验动物血液生理生化是研究实验动物体内血液成分和功能的一门学科。

血液是人和动物体内非常重要的液体之一，它不仅运输氧气、营养物质和代谢废物，还参与免疫反应和维持体内酸碱平衡。

本参考手册将深入探讨实验动物血液的生理功能和生化指标，以便研究者更好地了解和利用实验动物进行科学研究。

二、实验动物常用的血液指标2.1 血红蛋白血红蛋白是血液中的一种蛋白质，它携带氧气向全身组织供应能量。

测定血红蛋白水平可以了解实验动物的氧气运输能力和贫血情况。

2.2 红细胞计数红细胞计数是测量实验动物血液中红细胞数量的指标，可以反映出实验动物的造血能力和贫血程度。

2.3 血小板计数血小板计数可以反映出实验动物的止血功能和血小板生成能力，对于评估凝血功能和判断出血风险非常重要。

2.4 白细胞计数白细胞计数是测量实验动物血液中白细胞数量的指标，可以反映出实验动物的免疫功能、感染状况和炎症反应。

三、实验动物血液生化指标3.1 血糖血糖是血液中的一种重要生化指标，它可以反映出实验动物的糖代谢状态和胰岛素分泌情况。

血糖水平的异常波动可能与糖尿病等疾病相关。

3.2 血脂血脂包括胆固醇、甘油三酯等指标，它们可以反映出实验动物的脂代谢状态和心血管健康情况。

高血脂与心脑血管疾病的发生风险密切相关。

3.3 肝功能指标肝功能指标包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶等，它们可以反映出实验动物肝脏的功能状态和肝细胞损伤程度。

3.4 肾功能指标肾功能指标包括尿素氮、肌酐等，可以反映出实验动物肾脏的滤过功能和排泄能力。

肾功能异常可能与肾病等情况有关。

四、实验动物血液采集方法4.1 静脉采血静脉采血是常用的实验动物血液采集方法，可以通过尾静脉、颈静脉等位置进行。

在采血前应充分消毒，避免感染和出血。

4.2 尾刺采血尾刺采血是小鼠等小型动物常用的血液采集方法，可以通过尾部的微小针刺进行。

注意刺激要轻柔，避免造成动物不适和伤害。

4.3 口腔黏膜采血口腔黏膜采血是领口鼠等动物血液采集的方法之一，可以通过舌下脉搏或颊黏膜进行。