动物实验基本操作技术

第三章动物实验基本操作技能第一节实验动物的种类实验动物（experimental animal）指通过科学方法培育、繁殖和饲养而成并供医学、生物学实验使用的动物。

通过遗传学与微生物学的控制，培育出来的个体具有较好的遗传均一性以及对外来刺激的敏感性和实验重复性，这些动物属于高质量的实验动物。

常用实验动物的种类及其特点如下：一、青蛙与蟾蜍两者均属于两栖纲，无尾目。

是教学实验中常用的小动物。

青蛙和蟾蜍的心脏具有明显的自律性，即使在离体情况下仍能保持较长时间的、有节奏地搏动，可用于机能学的实验；其坐骨神经-腓肠肌标本常用于观察各种刺激或药物对外周神经、横纹肌或神经-肌接头的作用；蛙舌与肠系膜能作为观察炎症反应和微循环变化的标本；蛙的腹直肌可用于鉴定胆碱能神经药物的作用。

此外，还能用于水肿和肾功能不全实验。

二、小白鼠属于哺乳纲，啮齿目，鼠科。

是医学、生物学实验中用途最广泛和最常用的动物。

因其生长快，饲养消耗少，繁殖周期短，产仔多，温顺易捉，能复制出多种人类疾病的模型，适用于需大量动物的实验。

如半数致死量或半数有效量的测定、药物的筛选、药物效价比较等。

也适用于避孕药、抗肿瘤药、中枢神经系统、缺氧等方面的研究。

三、大白鼠同属于哺乳纲，啮齿目，鼠科。

牙齿锋利，性情较凶，当受惊、被挑逗或较强的刺激时容易发怒咬人。

雄性大白鼠之间常发生殴斗和咬伤。

大白鼠也具有小白鼠的其他优点。

因为可复制出多种的病理过程和疾病模型，对创伤的耐受性较强以及个体较小白鼠大，所以用途广泛。

一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠进行研究，如水肿、炎症、休克、胃酸分泌、胃排空、高血压、心功能不全、脏器的缺血-再灌注损伤、黄疸、肾功能不全等。

大白鼠的踝关节还用于观察药物抗炎作用等实验。

四、豚鼠又名天竺鼠、荷兰猪。

哺乳纲，啮齿目，豚鼠科。

性情温顺。

对组胺敏感并易于致敏，故常选用于复制变态反应性疾病的动物模型和研究抗过敏药如平喘药和抗组胺药的实验。

第二章动物实验的基本操作与技术动物实验方法是多种多样的，在医学的各个领域内都有其不同的应用，其中一些基本方法都是共同性的，如动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等，不管是从事何种课题的医学研究都要用这套基本方法，因此，动物实验基本方法，已成为医学科技工作者必须掌握的一项基本功。

第一节实验动物的抓取固定方法一、小鼠抓取固定方法小鼠温顺，一般不会咬人，抓取时先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤（见图2-1之一），将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可（图2-1之二）。

有经验者可直接用左手小指钩起鼠尾，迅速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。

这种在手中固定方式，能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。

如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时，则需将小鼠作一定形式的固定，解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧位（必要时先行麻醉），再用大头针将鼠前后肢依次固定在腊板上。

尾静脉注射时，可用小鼠尾静脉注射架固定（图2-2），先根据动物大小选择好合适的固定架，并打开鼠筒盖，手提鼠尾巴，让动物头对准鼠筒口并送入筒内，调节鼠筒长短合适后，露出尾巴，固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。

图2-1 小鼠的抓取固定方法图2-2 小鼠尾静脉注射方法二、大鼠的抓取固定方法大鼠的抓取方法基本同小鼠，只不过大鼠比小鼠牙尖性猛，不易用袭击方式抓取，否则会被咬伤手指。

抓取时为避免咬伤，可带上帆布手套。

如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃时，同样可采用左手固定法，只是用拇指和食指捏住鼠耳，余下三指紧捏鼠背皮肤，置于左掌心中，这样右手即可进行各种实验操作。

也可伸开左手之虎口，敏捷地从后一把抓住。

若做手术或解剖等，则需事先麻醉或处死，然后用细棉线绳活结缚腿，背卧位绑在大鼠固定板上；尾静脉注射时的固定同小鼠（只需将固定架改为大鼠固定盒）。

三、动物实验的基本技术(一)实验动物的捉持方法1．青蛙和蟾蜍通常用左手握持，以食指和中指夹住左前肢，大拇指压住右前肢，右手将下肢拉直并固定于无名指和小指之间。

毁脑和脊髓时，左手食指和中指夹持青蛀或蟾蜍的头部，右手将探针经枕骨大孔向前刺入颅腔，左右摆动探针捣毁脑组织。

如需破坏脊髓，毁脑后退回探针刺入椎管即可。

2．小鼠右手提起鼠尾，放在鼠笼(或其它粗糙面)上，向后轻拉其尾，小鼠即固定于鼠笼上，迅速用左手拇指和食指捏住小鼠头颈部皮肤，并以左手小指、无名指压其尾部于手掌尺侧。

另一方法是只用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后用手掌尺侧和小指夹住尾根部，然后用左手拇指和食指捏住头颈部皮肤。

3．大鼠捉持方法与小鼠相似。

因大鼠容易被激怒咬人，捉持时左手应戴防护手套。

右手抓住鼠尾，再用左手拇指和食指握住头部，其余手指与手掌握住脊部和腹部。

注意不要捏其颈部，以防用力过大、过久，造成窒息死亡。

4．豚鼠以左手直接从背侧握持前部躯干，右手托住臀部或抓住两后肢。

体重小者，可用单手捉持。

5．家兔一只手抓住兔颈背部皮肤，将兔轻轻提起，另一只手托住臀部，使兔呈蹲坐姿势。

切不可用手握持双耳提起兔子。

(二)实验动物的性别辨认、标记和去毛方法1．性别辨认鼠类：雄性小鼠和大鼠性器官与肛门距离较远，其间有被毛，阴囊明显可见。

雌性小鼠和大鼠性器官与肛门距离较近，其间无被毛，腹部乳头明显可见。

豚鼠性别辨认方法与小鼠和大鼠相同；家兔：雄兔泄殖孔附近，可见阴囊，用拇指和食指挤压泄殖孔部位，可露出阴茎。

雌兔腹部5对乳头明显可见。

2．标记小鼠、大鼠和兔多采用染色法，一般用1％的苦味酸溶液(黄色)或5％中性红溶液(红色)涂于动物体表不同部位的皮毛处，代表不同号码。

编号原则是先左后右，自前到后。

例如1号涂左前肢；2号涂左侧腹部；本号涂后肢；4号涂右前肢；5号涂右侧腹部；6号涂右后肢；7号涂头部；8号涂背部；9号涂尾部；10号不涂色。

如10只以上动物作标记时，可用两种不同颜色溶液，一种颜色作为个位数，另一种颜色作为十位数，涂在不同部位。

动物实验基本操作一、实验动物的抓取与固定。

（一）小鼠。

1. 抓取。

- 用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将其提起，放在鼠笼盖或其他粗糙表面上。

当小鼠向前挣扎时，用左手的拇指和食指迅速捏住小鼠两耳后颈背部皮肤，无名指和小指夹住小鼠尾巴根部，将小鼠固定成头部略向上的姿势。

- 原因：捏住尾巴提起小鼠可以避免小鼠咬伤操作人员，将其放在粗糙表面上是利用小鼠的本能反应（向前挣扎），便于后续准确抓取其颈背部皮肤。

而固定成头部略向上的姿势有利于进行诸如灌胃、注射等操作，并且能防止小鼠咬伤操作人员脸部等部位。

2. 固定。

- 如需进一步固定，可将小鼠放在特制的小鼠固定器内，将其身体和四肢固定好。

也可以将小鼠固定在泡沫板上，用大头针固定其四肢（这种方法常用于解剖实验）。

- 原因：使用固定器可以确保小鼠在实验过程中保持稳定，减少因挣扎而影响实验操作的准确性，同时也能保障操作人员的安全。

对于解剖实验，在泡沫板上用大头针固定四肢可以充分暴露小鼠的身体结构，便于进行精细的解剖操作。

（二）大鼠。

1. 抓取。

- 先用右手抓住大鼠尾巴中部，将大鼠提起，放在粗糙平面上。

然后用左手戴防护手套（大鼠体型较大且可能会激烈挣扎，容易咬伤操作人员），从大鼠背部绕到其胸前，拇指和食指捏住大鼠两耳后颈背部皮肤，其余手指握住大鼠身体，将其提起固定。

- 原因：与小鼠抓取类似，先抓住尾巴提起是为了初步控制大鼠，放在粗糙平面上利用其向前挣扎的本能便于后续抓取。

戴防护手套是因为大鼠的咬合力较强，为了防止操作人员受伤。

2. 固定。

- 可将大鼠放入大鼠固定器中固定。

对于需要进行手术等操作的大鼠，也可将其麻醉后固定在手术台上，用绑带固定其四肢。

- 原因：固定器和手术台固定都能保证大鼠在实验过程中保持稳定，使实验操作能够顺利进行，尤其是在进行需要精细操作的手术时，稳定的固定是确保手术成功的关键因素之一。

二、实验动物的给药操作。

（一）口服给药。

1. 灌胃法（以小鼠为例）- 准备好灌胃针（一般为特制的金属针具）和相应的药物溶液。

第三章动物实验基本操作技术3.1 常用手术器械及使用方法生理学实验常用手术器械与医学外科手术器械大致相同，但也有一些专用器械，下面所列的是几种常规的手术器械（图3.1-1）。

图3.1-1 常用的生理实验手术器械（1）手术刀：用于切开皮肤和脏器。

由刀片和刀柄组成，刀片有圆刃、尖刃和弯刃3种，可根据需要自由拆装和更换（图3.1-2）。

常用的执刀方法有4种（见图3.1-3），其中执弓式是一种常用的执刀方法，动作范围大而灵活，用于腹部、颈部、股部的皮肤切口。

图3.1-2 安装、取下刀片法图3.1-3 执刀方法1．执弓式；2．握持式；3．执笔式；4．反挑式（2）手术剪：手术剪分钝头剪和尖头剪，其尖端有直、弯两型。

用于剪切皮肤、肌肉、血管等软组织。

钝头手术剪的钝头端可插入组织间隙，分离、剪切无大血管的肌肉和结缔组织。

还有一种小型的眼科剪刀，常用于剪神经、血管、包膜等。

正确的执剪姿势是用拇指和环指持剪，示指置于手术剪的上方（图3.1-4）图3.1-4 手术剪的握持方法禁用手术剪刀剪骨头等坚硬组织。

在蛙类实验中，常用粗剪刀（即普通剪刀）剪切蛙的脊柱、骨和皮肤等粗硬组织。

（3）镊子：分有齿和无齿两类，大小长短不一，主要用于夹捏或提起组织。

圆头镊子用于较大或较厚的组织及牵拉皮肤切口，眼科镊子或钟表镊子用于夹捏细软组织。

执镊方法为用拇指对食指和中指（图3.1-5）。

图3.1-5 镊子的握持方法（4）止血钳：有大、小、有齿、无齿、直形、弯形之分。

根据不同操作部位选用不同类型的止血钳。

小号止血钳也叫“蚊式钳”。

持止血钳的方法与手术剪相同。

主要用于夹血管或止血点，以达止血目的，也用于分离组织、牵引缝线等。

正确持钳和持剪方法相同（图3.1-6）。

开放血管钳的方法是利用右手已套入止血钳的拇指与环指相对挤压，继而两指向相反的放向旋开，放开止血钳（图3.1-6）。

图3.1-6 持钳法和松钳法（5）骨钳：先用颅骨钻钻孔，然后用骨钳咬切骨质，扩大骨孔。

动物实验基本操作技术1. 什么是动物实验？动物实验，顾名思义，就是用动物来做实验。

这可是个很有争议的话题，有人觉得这是科学进步的必要步骤，有人则认为这样对小动物太不公平。

其实，动物实验在医学、心理学、毒理学等领域都扮演着重要角色，就像是科学界的小伙伴，帮助我们找到很多问题的答案。

它让我们在研发新药、测试产品之前，先看看这些东西对生命的影响。

嘿，谁会愿意拿自己去试验呢，对吧？2. 动物实验的基本操作2.1 准备工作开始实验前，咱们得做好充分的准备工作。

想象一下，你准备去野外露营，得先把帐篷、食物、睡袋全都备齐，动物实验也是一样。

首先，你得了解实验的目的，确保你知道自己要干嘛。

接着，选好实验动物，常见的有小鼠、大鼠、兔子等。

它们可是咱们的实验小明星哦！要确保动物的健康状况良好，毕竟，咱们可不能让小动物们在实验中受苦。

2.2 操作过程好了，准备工作都做好了，咱们就可以开始操作了。

在实验过程中，保持冷静和专注是关键。

比如说，给小动物打针的时候，手一定要稳，不然就像大厨切菜时不小心切到手一样，得不偿失。

此外，注意观察动物的反应，如果它们表现得很不舒服，那可得立即停止实验。

记住，咱们不是要折磨它们，而是要让它们帮助我们获取知识。

3. 实验后的处理3.1 数据记录实验结束后，别急着松一口气，咱们还有一项重要工作——记录数据。

好比你考试后要整理笔记，数据记录能帮助咱们分析实验结果。

确保每一个细节都被记录下来，包括动物的状态、实验条件等等，这些都是今后研究的重要参考。

没有记录，实验就像是没吃过的榴莲，香味全无，完全没办法享受。

3.2 动物的安置最后，咱们得考虑动物的安置问题。

根据实验的性质，有些动物可能需要被安乐死，而有些则可以继续观察一段时间。

无论怎样，处理动物的时候一定要尊重它们。

动物也有生命，它们的价值不仅仅在于实验数据，更在于它们是这个地球上的一部分。

我们得对它们负责，尽量给它们一个体面的归宿。

4. 总结动物实验虽然重要，但这并不意味着我们可以随意对待小动物。

实验三实验动物基本操作技术实验动物基本操作技术是指针对实验动物进行各项操作的技术，包括动物的饲养、标记、采血、给药等各种操作。

掌握这些基本操作技术对于进行科学实验具有重要的意义，可以提高研究者的实验效率和准确性，同时也对动物的福利和健康起到保护作用。

首先是实验动物的饲养技术。

为了确保实验的可靠性和准确性，需要提供良好的饲养环境。

饲养环境应包括适当的温度、湿度、光照条件以及合理的动物密度等。

同时，对饲料和饮水的供给也需要精细控制，以确保实验动物的健康状态。

其次是实验动物的标记技术。

在一些研究中，需要对实验动物进行标记，以便对不同个体进行追踪和区分。

常见的标记方法有耳标、尾标、颈圈等。

标记时需要注意对动物的身体造成的影响要尽量减小，并确保标记牢固不易脱落。

第三是实验动物的采血技术。

从实验动物体内获取血液样本是许多实验研究的重要环节。

常见的采血方法有尾静脉采血、静脉窦采血等。

在采血前需要对动物进行适当的镇静和固定，以减少动物的痛苦和不适。

最后是实验动物的给药技术。

在一些研究中，需要给实验动物注射药物或其他物质。

给药的方法有多种多样，如皮下注射、静脉注射、腹腔注射等。

在给药之前需要准确计量药物剂量，并根据动物的体重和个体差异进行相应的调整。

除了上述基本操作技术外，还需要掌握一些相关的安全操作技巧。

在进行实验动物操作时，需要佩戴适当的个人防护装备，如手套、口罩等，以防止对自身造成伤害或感染风险。

同时，也需要遵守相关的实验动物伦理规范和法律法规，确保实验动物的福利和权益。

总之，掌握实验动物基本操作技术是进行科学实验的基础，能够提高实验研究的效果和准确性。

在实验动物操作过程中，需要注重动物福利和健康，遵循伦理规范和法律法规，以保护动物的权益和福利。

只有持续学习和不断实践，才能熟练掌握这些技术，使其发挥最佳效果。

动物实验的基本技术操作方法动物实验是一种科学研究的重要手段，也是科学发展和医学进步的必要步骤之一、在进行动物实验时，研究人员需要掌握一系列基本的技术操作方法。

下面将介绍几种常见的动物实验技术操作方法。

1.动物麻醉操作：动物麻醉是进行动物实验的前提条件，可以减少动物的痛苦和压力，保证实验结果的可靠性。

常用的麻醉方法包括静脉麻醉、吸入麻醉和局部麻醉。

研究人员需要掌握药物的剂量、给药途径和监测动物麻醉深度的方法。

2.动物手术技术：在进行一些复杂的实验时，需要进行动物手术操作。

手术技术操作包括皮肤消毒、手术切口、血管或器官的外露和缝合等。

研究人员需要掌握无菌操作的技巧和手术操作的规范，以确保手术的成功和动物的生存率。

3.器械使用和数据记录：在动物实验中，研究人员需要掌握各种生物学实验仪器的使用方法，如离心机、显微镜、血液分析仪等。

同时，需要准确记录实验过程中的数据，包括动物身体指标、实验参数和操作步骤等。

4.体内注射技术：动物实验中常用的一项技术是体内注射，包括静脉注射、皮下注射和腹腔注射等。

研究人员需要掌握注射针头的选择、皮肤局部麻醉的方法和注射位置的确定等。

5.血液采集技术：在一些实验中需要进行动物的血液采集，以获取血液样本进行化验或分析。

血液采集技术包括尾脉、静脉和心脏穿刺等。

研究人员需要掌握相应的采血器具的使用方法，以及合理的采血量和采血速度。

6.器官取材和组织处理技术：在一些器官相关的实验中，需要对动物进行器官取材和组织处理。

器官取材技术包括猝死动物器官取材和活体器官取材。

组织处理技术包括固定处理、包埋和切片等。

研究人员需要掌握无菌操作技术和组织处理的标准流程，以获得有效的实验结果。

7.动物分组和饲养技术：在进行动物实验前，需要对动物进行分组和饲养。

分组技术包括随机分组和对照组的设计等。

饲养技术包括提供适宜的饲料和水源、维持良好的生活环境等。

研究人员需要了解动物的生理特点和各种实验动物的饲养要求，以保证动物的健康状态和实验的可靠性。

动物实验是一项敏感和复杂的工作，必须在合乎伦理的前提下进行，且需要遵循相关法规和指南。

以下是一个基本的动物实验操作技术手册大纲，但请注意，实施动物实验前，确保已经获得了合适的伦理批准和遵循当地法规。

1. 实验前准备：-获取伦理委员会的批准。

-确保实验室和设备符合标准。

-训练实验人员，确保其了解实验目的和操作流程。

2. 动物选择和养护：-选择适当的实验动物种类。

-确保动物的健康状况和遗传背景。

-提供适当的饲料、水和住房条件。

3. 实验设计：-制定明确的实验计划和协议。

-随机分组和安排实验。

-控制实验变量，确保结果的可靠性。

4. 麻醉和手术技术：-使用适当的麻醉剂和疼痛缓解措施。

-实施外科手术时，保持严格的无菌操作。

-确保手术室环境符合标准。

5. 实验操作和数据收集：-严格遵循实验方案的步骤。

-使用精确的测量工具。

-记录和存储实验数据。

6. 动物监测：-定期监测实验动物的生理指标。

-观察动物行为和外观。

-确保动物福祉和及时干预。

7. 实验结束和处理：-完成实验后，安全地结束动物的参与。

-对实验动物进行适当的处置或重返饲养环境。

-清理和消毒实验设备和环境。

8. 数据分析和报告：-使用统计工具对数据进行分析。

-撰写实验报告，详细描述实验设计、方法和结果。

-提交实验结果给相关的科研机构或期刊。

9. 废弃物处理：-安全处理动物实验产生的废弃物。

-符合相关环境法规，确保废弃物不对环境造成污染。

10. 纪录保存和档案管理：-确保实验记录和数据的安全存储。

-遵循机构和法规的档案保存要求。

11. 反馈和改进：-定期进行实验室审核和评估。

-根据实验结果和经验，改进实验设计和操作流程。

请注意，这只是一个基本的手册大纲，具体的操作流程和技术要求可能根据实验的具体内容和动物种类而有所不同。

在进行任何动物实验之前，请确保阅读并遵循相关法规和伦理指南，以确保实验的合法性和伦理性。