网织红细胞计数ppt
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10-网织红细胞计数B D I S R et i c-C O U N T(Thi azol e O r ange)Catalog No. 349204简介早期红细胞细胞核丢失后,胞浆内仍残留有细胞器(如核糖体、线粒体),这样的早期红细胞就是网织红细胞,它有别于不含细胞器的成熟红细胞。
这些细胞器富含核酸物质(RNA和DNA),而在成熟红细胞中不含有此种物质。
正常人(非贫血者)中,网织红细胞在骨髓中三天成熟,第四天出现在外周循环血中。
网织红细胞计数可以评估红细胞造血系统活性,但是如果网织红细胞的骨髓成熟时间缩短而循环血成熟时间延长,这种评估方法就会有误差。
这时,外周血相中一至三天的网织红细胞(“漂移”网织红细胞)也会被当做第四天网织红细胞而计算在内。
如遇此种情况,应当对“漂移”网织红细胞做修正(修正公式见流式细胞仪分析一节)。
BD公司生产的Retic-COUNT试剂主要成分为噻唑橙(TO),与丫啶橙(AO)的作用类似。
TO 与DNA碱基对以1:2的比例结合,分解常数、正电荷数和膜通透性与AO相近。
Retic-COUNT试剂既可与DNA结合,也可与RAN结合,形成的荧光-核酸复合物,吸收光谱为475nm,荧光发射光谱为530nm,因此,适合在安装了488nm激光的流式细胞仪上使用,如FACSCalibur,FACSort,FACScan等。
网织红细胞计数的传统方法是使用新亚甲基蓝染料,染色涂片后,光镜下计数。
但此方法费时,且由于只计数1000个细胞,因而存在固有的取样误差。
使用Retic-COUNT流式细胞术方法进行网织红细胞计数,与传统的新亚甲基蓝方法相比,存在很多优势。
使用流式细胞术,可以检测上万个细胞,具有很好的取样精确性。
由于使用的是细胞悬液,可以消除涂片时的分布误差。
同时,它还具有省时、操作简便等优点。
另外,由于可以使用配套的Retic-COUNT自动软件,不需要做阴性对照,还可以减少操作的变异性。