网织红细胞检查的临床意义课件
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网织红细胞计数及临床意义一、概述1、网织红细胞(reticulocyte,Ret,RET)是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡细胞略大于成熟红细胞(直径8.0~9.5μm),其胞质中残存的嗜碱性物质RNA经碱性染料(如煌焦油蓝、新亚甲蓝等)活体染色后,形成蓝色或紫色的点粒状或丝网状沉淀物。
2、网织红细胞自骨髓释放到外周血液后仍具有合成血红蛋白的能力,约1~2天后,过渡为成熟红细胞ICSH将网织红细胞分为4型(网织红细胞分型及特征)。
二、检测方法与原理1、普通显微镜法:网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞,其胞质内尚有嗜碱性的RNA物质,经新亚甲蓝或煌焦油蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色网状结构。
2、血液分析仪法:特殊染料与网织红细胞中RNA结合后进行RNA定量,可精确计数网织红细胞占红细胞的百分数(Ret%),并可根据RNA含量将网织红细胞分类及计算网织红细胞其他参数。
(一)普通显微镜法1、染色液①新亚甲蓝枸橼酸氯化钠染色液:新亚甲蓝0.1g溶于100ml枸橼酸氯化钠溶液内(1体积30g/L枸橼酸钠溶液与4 体积9.0g/L氯化钠溶液混合),充分混匀,待染料溶解后过滤。
②煌焦油蓝生理盐水染色液:煌焦油蓝1.0g、枸橼酸钠0.4g、氯化钠0.85g,溶于双蒸馏水100ml中,过滤后备用。
2、操作①在小试管中加入染色液2滴;再加人静脉血(或末梢血)2滴,混后放置37℃恒温水箱中。
②10分钟后取1滴混悬液制成涂片③在油镜下直接观察1000个红细胞中Ret数。
或以Miller 窥盘计数法计数:Miler窥盘为一个厚为1mm、直径为19mm 的圆形玻片,玻片上用微细刻线画出两个正方形格子,大方格B面积为小方格A的9倍。
置于目镜内,计数小方格内红细胞数(将小方格内数得红细胞数乘以9,折算成一个大方格内的红细胞数)和大方格内的Ret数。
(窥盘结构)3、结果计算①直接观察法:网织红细胞比例=计数1000个红细胞中的网织红细胞数/1000②窥盘计数法:网织红细胞比例=大方格内网织红细胞数/(小方格内红细胞数×9)③网织红细胞绝对数(个/L)=网织红细胞百分数x红细胞数/L④网织红细胞生成指数(RPI):RPI=(网织红细胞百分数/2)×(患者血细胞比容/0.45)三、参考区间1、网织红细胞比例:成年人:0.005~0.015新生儿:0.03~0.06;儿童:0.005~0.0152、网织红细胞绝对数成年人:(24~84)×10%/L四、注意事项1、标本应在4小时内进行处理。