下载文档原格式
急性胰腺炎大鼠胰腺组织cPKGα的变化李丽娟;刘敏;张学晶;杨艳;唐薇薇;徐海燕;张冬【期刊名称】《遵义医学院学报》【年(卷),期】2010(033)005【摘要】目的观察急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺组织传统型蛋白激酶Cα(cPKCα)的水平,探时其在AP发病中的可能作用.方法取26只SD大鼠随机分为2组:假手术(SO)组和AP组,采用牛磺脱氧胆酸钠复制AP模型,模型制成后1h、5h,采用免疫组织化学方法检测大鼠胰腺组织cPKC α的水平.结果与SO组相比较,AP组大鼠胰腺组织cPKCα阳性表达明显增高,增多的cPKCα主要聚集于细胞膜侧.结论 AP 大鼠胰腺组织cPKC α的表达水平明显增高,活性增强,后者在AP的发病中可能发挥重要作用.【总页数】3页(P418-420)【作者】李丽娟;刘敏;张学晶;杨艳;唐薇薇;徐海燕;张冬【作者单位】遵义医学院,病理生理教研室,贵州,遵义,563003;遵义医学院附属口腔医院,贵州,遵义,563003;遵义医学院附属口腔医院,贵州,遵义,563003;遵义医学院,病理生理教研室,贵州,遵义,563003;遵义医学院,病理生理教研室,贵州,遵义,563003;遵义医学院,病理生理教研室,贵州,遵义,563003;遵义医学院,病理生理教研室,贵州,遵义,563003【正文语种】中文【中图分类】R576【相关文献】1.中性粒细胞趋化因子在轻、重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达变化 [J], 徐萍;徐岷;周国雄;黄介飞;张弘;魏群;江枫;肖明兵2.急性胰腺炎大鼠胰腺组织中组织因子表达的动态变化 [J], 马克强;高军林3.大鼠重症急性胰腺炎胰腺组织中NO生成及iNOS表达的变化 [J], 赵伟;任泽强4.胰腺组织中F-actin、RegⅢ在大鼠急性胰腺炎中的水平变化 [J], 牛孝蓉;田桦;杜井峰;张雪梅;程开;赵金祷;朱艳丽;武荣国;卓越5.重症急性胰腺炎大鼠模型胰腺组织信号转导与转录激活因子-1的变化 [J], 张昌威;王卫星;余佳;殷涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
急性胰腺炎不同时期炎症因子的基因表达及意义戴璟瑜;郑通标;许燕平;闫玉矿;彭海峰【期刊名称】《海南医学院学报》【年(卷),期】2012(018)009【摘要】目的:通过建立大鼠不同程度AP模型,观察AP病程中炎症因子的变化,为进一阐明AP发病机制提供实验依据.方法:选取健康雄性大鼠110只,随机分为假手术对照组(N)、急性水肿型胰腺炎组(AEP)和急性坏死型胰腺炎组(ANP),Realtime RT-PCR检测胰腺组织中IL-6、IL-10、TNF-α表达水平,ELISA法检测血清中IL-6、IL-10、TNF-α以及AMY含量检测.结果:模型组标本中IL-6和TNF-α均出现表达上调,其中TNF-α上调先于IL-6；1L-10呈先下调后又显著上调的趋势,血清中IL-6和TNF-α同样出现表达上调,IL-10呈先下调后又显著上调的趋势,ANP组血清中3种因子的水平变化幅度大于AEP组,24 h后TNF-α表达水平显著高于12h水平,AEP及ANP组血清中AMY水平均呈逐渐升高,其中ANP纽升高更为显著.血清中IL-6和TNF-α水平与AMY水平呈显著正相关.结论:炎症因子在AP进展中发挥了重要的作用,TNF-α是其中重要的环节,胰腺以外来源的炎症因子在AP激发的全身炎症反应中占重要地位.【总页数】4页(P1177-1180)【作者】戴璟瑜;郑通标;许燕平;闫玉矿;彭海峰【作者单位】深圳市龙岗中心医院普外科,深圳518000;深圳市龙岗中心医院普外科,深圳518000;深圳市龙岗中心医院普外科,深圳518000;深圳市龙岗中心医院普外科,深圳518000;深圳市龙岗中心医院普外科,深圳518000【正文语种】中文【中图分类】R56【相关文献】1.重症急性胰腺炎肺损伤大鼠肺内血管生成素样蛋白4、细胞间黏附分子-1基因表达及意义 [J], 李晶;曹丽叶;张爱民;张彩菊;靖立良;张全2.Survivin基因在急性胰腺炎中的表达及其意义 [J], 李震东;马清涌;罗羽宏3.p53基因在人皮肤血管瘤不同时期的表达及意义 [J], 杨虹;张端莲;余瑛;刘昱4.EIF5A2基因在不同发育时期人胎盘绒毛膜中的定位表达及意义 [J], 杜宝玲;潘继红;邹文霞;徐丽萍;熊喜峰;马宁芳5.不同程度颅脑损伤后炎症因子的表达及其临床意义 [J], 王佳;张红玉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
急性胰腺炎大鼠胰腺组织中组织因子表达的动态变化马克强;高军林【期刊名称】《青海医学院学报》【年(卷),期】2013(034)002【摘要】目的观察急性胰腺炎大鼠胰腺组织中组织因子(tissue factor,TF)的表达变化,探讨其在急性胰腺炎及水肿性胰腺炎向重症胰腺炎发展中的可能作用.方法 90只Wistar大鼠随机分为轻症胰腺炎组(M组)、重症胰腺炎组(S组)及对照组(C组),采用胰胆管注射1%或5%牛磺胆酸方法制备轻症或重症胰腺炎动物模型.在建模后不同时间点(1、6、12h)处死动物,以光镜观察胰腺病变,采用免疫组织化学和反转录聚合酶链式反应法检测胰腺组织中TF及mRNA的表达.结果 [HTK〗利用不同浓度的牛磺胆酸可以建立不同类型的急性胰腺炎大鼠模型;血淀粉酶在急性胰腺炎时明显升高,但与严重程度无关;TF在急性胰腺炎大鼠胰腺组织中表达明显增加,在重症急性胰腺炎表达更明显.大鼠在注射药物1 h后TF蛋白开始表达;TF mRNA在建模1 h后开始表达,在6 h时达到高峰.结论 TF的表达水平与胰腺炎的严重程度呈正相关,提示TF可能通过激活胰腺微循环的凝血机制而在胰腺炎的发生发展中发挥重要作用.【总页数】5页(P120-124)【作者】马克强;高军林【作者单位】青海省红十字医院;青海省红十字医院【正文语种】中文【中图分类】R393【相关文献】1.HMGB1、TLR4在重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达及乌司他丁的干预效应 [J], 王静;王烜;邓明明;孟娅2.p38MAPK信号途径抑制剂SB203580对大鼠重症急性胰腺炎胰腺组织中TNF-α表达的调控作用 [J], 江涛;方茂勇3.大鼠早期急性胰腺炎外周血及胰腺组织中PTEN表达水平及其意义的研究 [J], Zhang Gaofeng;Tang lijun4.金黄益胆颗粒对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中ICAM-1、TGF-β1表达的影响[J], 张秀平;曹立瀛;刘四清;付庆江;郭振武5.Toll样受体4在重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达和作用 [J], 王彬;吴晓尉;许小兵;金鑫鑫;李敏利;郭美霞;张晓华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
《乌司他丁对重症急性胰腺炎大鼠血清MIF水平及中性粒细胞凋亡的干预作用研究》一、引言重症急性胰腺炎（SAP）是一种常见的消化系统疾病，具有较高的发病率和死亡率。
血清MIF（巨噬细胞移动抑制因子）水平在SAP的发生和发展过程中起着重要作用，而中性粒细胞凋亡的异常也与SAP的严重程度密切相关。
近年来，乌司他丁作为一种广谱的蛋白酶抑制剂，在多种炎症性疾病的治疗中显示出良好的效果。
因此，本研究旨在探讨乌司他丁对SAP大鼠血清MIF水平及中性粒细胞凋亡的干预作用，以期为临床治疗提供新的思路。
二、材料与方法1. 实验材料本实验所需材料包括：乌司他丁、SD大鼠、试剂盒等。
所有试剂均符合实验要求，并经过严格的质量控制。
2. 实验方法（1）动物分组与造模：将SD大鼠随机分为对照组、SAP组和乌司他丁治疗组。
采用胰胆管逆行注射法建立SAP模型。
（2）血清MIF水平检测：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠血清MIF水平。
（3）中性粒细胞凋亡检测：采用流式细胞术检测各组大鼠中性粒细胞的凋亡情况。
（4）乌司他丁干预：乌司他丁治疗组在造模后给予乌司他丁治疗，观察其对血清MIF水平和中性粒细胞凋亡的影响。
三、实验结果1. 血清MIF水平比较与对照组相比，SAP组大鼠血清MIF水平显著升高（P<0.05）；乌司他丁治疗组大鼠血清MIF水平较SAP组降低（P<0.05）。
2. 中性粒细胞凋亡比较SAP组大鼠中性粒细胞凋亡率较对照组升高（P<0.05）；乌司他丁治疗组大鼠中性粒细胞凋亡率较SAP组降低（P<0.05）。
3. 乌司他丁的干预作用乌司他丁治疗能显著降低SAP大鼠血清MIF水平，并促进中性粒细胞的正常凋亡，从而减轻胰腺组织的炎症反应和损伤。
四、讨论本研究结果表明，乌司他丁对SAP大鼠血清MIF水平及中性粒细胞凋亡具有显著的干预作用。
血清MIF水平的升高与SAP的严重程度密切相关，而中性粒细胞凋亡的异常也参与了SAP的发生和发展过程。
急性胰腺炎大鼠核因子-κB、TN F-α及胰腺病理损伤的动态变化薛东波;王海洋;张伟辉【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2005(15)10【摘要】目的观察了AP发病过程中核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及胰腺病理损伤的动态变化.方法96只Wister大鼠分为3组:对照组(n=32)、AP 组(n=32)、LPS干预组(n=32).AP组由蛙皮素诱导制成AP动物模型.LPS干预组在AP组基础上,给予腹腔内注射LPS.于第12、24、36、72h分批处死小鼠并收取标本.对胰腺组织HE染色进行病理评分;应用流式细胞术(FCM)检测NF-κB蛋白表达的改变;RT-PCR检测TNF-αmRNA表达变化.结果在AP病程进展的不同时段,NF-κB、TNF-αmRNA表达水平及病理损伤等各项指标在AP组都明显高于对照组,在LPS干预组都明显高于AP组,且具有显著性统计学意义;而且三项指标随病程发展呈现出相似的动态变化趋势.结论结果提示NF-κB可能通过调节TNF-α的表达而影响AP病变的严重程度.【总页数】3页(P1512-1514)【作者】薛东波;王海洋;张伟辉【作者单位】哈尔滨医科大学第一临床医学院,普外科三病房,黑龙江,哈尔滨,150001;哈尔滨医科大学第一临床医学院,普外科三病房,黑龙江,哈尔滨,150001;哈尔滨医科大学第一临床医学院,普外科三病房,黑龙江,哈尔滨,150001【正文语种】中文【中图分类】R657.51【相关文献】1.急性胰腺炎大鼠胰腺组织核因子-κB动态变化 [J], 马良龙;刘瑞林;刘牧林2.核因子-κB在重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达 [J], 李清华;徐萍;陈令全;谢勇;陈江;刘丕;吕农华3.抗氧化剂对重症急性胰腺炎大鼠胰腺核因子-kB活化的影响 [J], 章忠渭;张启瑜4.脂质体介导核因子-κB诱捕物寡聚脱氧核苷酸对重症急性胰腺炎大鼠胰腺炎症因子mRNA表达和胰腺损伤的影响 [J], 钟荣德;周杰;廖柳清;符方勇;李湘竑;林艺雄5.粉防己碱对急性胰腺炎大鼠胰腺核因子κB活化的影响 [J], 朱玲;张红;李永渝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
胰腺组织中F-actin、RegⅢ在大鼠急性胰腺炎中的水平变化牛孝蓉;田桦;杜井峰;张雪梅;程开;赵金祷;朱艳丽;武荣国;卓越【期刊名称】《黑龙江医药科学》【年(卷),期】2018(41)3【摘要】目的:研究急性胰腺炎摸型中胰腺组织中F-actin、RegⅢ的水平变化情况.方法:把SD大鼠分成3组,每组15只,分别是摸型组、假手术组及空白组,急性胰腺炎的摸型组是利用3％牛磺胆酸钠溶液,逆行注射到胰胆管内,把摸型组及假手术组分成四个时间点,即3h、6h、12h、24h,观察各点的胰腺组织病理变化情况,通过western-blotting检测各组F-actin、RegⅢ的含量.结果:F-actin蛋白表达量在急性胰腺炎摸型组中,呈降低趋势,和假手术组、空白组比较,差异具有统计学的意义(P<0.05).Re gⅢ蛋白表达量则明显升高在摸型组中,与假手术组及空白组相比较,差异具有统计学意义的(P<0.05).结论:大鼠急性胰腺炎的摸型创建成功,用3％牛磺胆酸钠溶液,在胆胰管内逆行注入;F-actin蛋白表达量在急性胰腺炎摸型组中,和空白组、假手术组比较,呈现减低的趋势;而RegⅢ表达量在摸型组中,呈显著增高,和假手术组及空白组比较,在胰腺组织修复、再生方面RegIII起一定的作用.【总页数】2页(P11-12)【作者】牛孝蓉;田桦;杜井峰;张雪梅;程开;赵金祷;朱艳丽;武荣国;卓越【作者单位】佳木斯大学,黑龙江佳木斯154007;佳木斯大学,黑龙江佳木斯154007;佳木斯大学,黑龙江佳木斯154007;佳木斯大学,黑龙江佳木斯154007;佳木斯大学,黑龙江佳木斯154007;佳木斯大学,黑龙江佳木斯154007;佳木斯大学,黑龙江佳木斯154007;佳木斯大学,黑龙江佳木斯154007;佳木斯大学,黑龙江佳木斯154007【正文语种】中文【中图分类】R576【相关文献】1.HMGB1、TLR4在重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达及乌司他丁的干预效应 [J], 王静;王烜;邓明明;孟娅2.p38MAPK信号途径抑制剂SB203580对大鼠重症急性胰腺炎胰腺组织中TNF-α表达的调控作用 [J], 江涛;方茂勇3.急性胰腺炎大鼠胰腺组织中组织因子表达的动态变化 [J], 马克强;高军林4.大鼠早期急性胰腺炎外周血及胰腺组织中PTEN表达水平及其意义的研究 [J], Zhang Gaofeng;Tang lijun5.Toll样受体4在重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达和作用 [J], 王彬;吴晓尉;许小兵;金鑫鑫;李敏利;郭美霞;张晓华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
实验性急性胰腺炎对心肌影响的动态观察和成华;马琪;孙扬【摘要】目的:探讨大鼠急性胰腺炎(AP)早期血清淀粉酶、心功能以及心肌酶指标的变化,为临床工作提供相关依据.方法:将SD大鼠(35只)随机分为对照组(7只)和实验组(28只),实验组采用十二指肠结扎法复制大鼠急性胰腺炎模型,并依据术后实际情况将大鼠分为术后3 h、6 h、9 h、12 h实验组共4组,每组7只.对照组行假手术.观察2组大鼠术后血清淀粉酶(AMY)、心率(R)、平均动脉压(MAP)、心室率(VR)、平均左室内压(LMVP)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳酸脱氢酶同工酶-1(LD-1)、a-羟丁酸脱氢酶(HBDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)的动态变化.结果:AP术后12 h实验组AMY 明显升高,与其余各组相比差异有统计学意义(P＜0.05);术后9 h实验组与12 h实验组R、MAP、VR、LMVP均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);AP术后12 h实验组AST、AKP、LDH均明显升高,与其余各组相比差异有统计学意义(P＜0.05);AP术后3 h实验组CK、CKMB均明显升高,与其余各组相比差异有统计学意义(P＜0.05);AP术后12 h实验组LD-1、HBDH升高,与对照组及9 h实验组相比差异有统计学意义(P＜0.05).对照组心肌组织无炎细胞浸润,间质无水肿;3 h 实验组心肌间质仅有轻度水肿;6 h、9 h实验组心肌间质有少量炎细胞浸润,部分心肌细胞溶解、坏死;12 h实验组心肌间质出现较多炎细胞浸润,部分心肌间质有出血.结论:十二指肠结扎法所致大鼠急性胰腺炎模型过程中,血清淀粉酶、心肌酶指标和心功能指标基本呈现先增高后降低的趋势,这可能是急性胰腺炎引起心功能不全的原因之一,对其心功能指标和心肌酶指标的测定可早期发现急性胰腺炎所致心功能的损害.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2007(030)010【总页数】3页(P1108-1110)【关键词】急性胰腺炎;心肌;影响;观察【作者】和成华;马琪;孙扬【作者单位】乌鲁木齐市友谊医院外科;新疆医科大学基础医学院机能中心实验室,新疆,乌鲁木齐,830054;新疆医科大学基础医学院机能中心实验室,新疆,乌鲁木齐,830054【正文语种】中文【中图分类】R-332;R657.51;R331.31近年来,众多学者对急性胰腺炎(AP)的发病机制进行了深入的临床及实验研究，取得了一些成果。
《乌司他丁对重症急性胰腺炎大鼠血清MIF水平及中性粒细胞凋亡的干预作用研究》一、引言重症急性胰腺炎（SAP）是一种常见的急腹症，其发病机制复杂，常伴随严重的炎症反应和细胞凋亡。
血清迁移抑制因子（MIF）作为炎症反应的关键介质，在SAP的病理生理过程中扮演着重要角色。
乌司他丁作为一种广谱的蛋白酶抑制剂，被广泛用于治疗多种炎症性疾病。
本研究旨在探讨乌司他丁对SAP大鼠血清MIF水平及中性粒细胞凋亡的干预作用。
二、材料与方法1. 实验动物与分组本实验选用健康成年SD大鼠，随机分为四组：正常对照组、SAP模型组、乌司他丁治疗组及假手术组。
2. 实验方法（1）SAP模型制备：采用Lichtenheld法建立SAP模型。
（2）乌司他丁治疗：乌司他丁治疗组在SAP模型制备后立即给予乌司他丁注射。
（3）样本收集与处理：分别在造模前、造模后不同时间点采集大鼠血液样本，分离血清，进行相关指标检测。
（4）检测指标：包括血清MIF水平、中性粒细胞凋亡等。
三、实验结果1. 血清MIF水平变化与正常对照组相比，SAP模型组大鼠血清MIF水平显著升高，而乌司他丁治疗组大鼠血清MIF水平较SAP模型组有所降低。
2. 中性粒细胞凋亡情况SAP模型组大鼠中性粒细胞凋亡程度较正常对照组显著增加，而乌司他丁治疗组大鼠中性粒细胞凋亡程度较SAP模型组有所降低。
3. 乌司他丁对SAP大鼠生存率的影响乌司他丁治疗组大鼠的生存率较SAP模型组有所提高。
四、讨论本研究发现，乌司他丁能够降低SAP大鼠血清MIF水平及中性粒细胞凋亡程度，从而提高大鼠的生存率。
这表明乌司他丁可能通过抑制炎症反应和减少细胞凋亡来改善SAP的病情。
MIF作为一种重要的炎症介质，在SAP的发病机制中发挥着重要作用。
乌司他丁作为一种广谱的蛋白酶抑制剂，能够抑制多种酶的活性，从而抑制炎症反应。
此外，乌司他丁还能够促进细胞的凋亡，减少中性粒细胞的释放和浸润，从而减轻组织损伤。
五、结论本研究表明，乌司他丁对SAP大鼠具有显著的干预作用，能够降低血清MIF水平及中性粒细胞凋亡程度，提高大鼠的生存率。
P物质在大鼠重症急性胰腺炎相关性肺损伤中的作用的开
题报告
背景与目的：
重症急性胰腺炎（SAP）是一种严重的胰腺炎，与高死亡率相关。
肺损伤是SAP常见
的并发症之一，但其病理机制尚不清楚。
先前的研究表明，炎性因子、氧化应激和胰
腺液渗出是SAP相关的肺损伤的关键因素。
P物质是一种神经肽，已被证明在疼痛和
炎症过程中起到重要作用。
尽管先前的研究表明P物质可能与SAP相关的肺损伤有关，但它在该疾病中的确切作用尚不清楚。
因此，本研究旨在探讨P物质在SAP相关肺损
伤中的作用。
方法：
我们将使用大鼠模型，将它们分为三组。
第一组将接受SAP诱导剂，第二组将接受SAP诱导剂和P物质拮抗剂处理，第三组作为对照组只接受生理盐水。
我们将评估肺
组织中的炎性细胞浸润、氧化应激指标、细胞因子水平和组织损伤。
我们还将测定血
清P物质水平，并评估其与SAP相关的肺损伤的相关性。
预期结果：
我们预计P物质拮抗剂将降低SAP诱导的肺损伤，包括减少炎性细胞浸润、降低氧化
应激和细胞因子水平，减轻组织损伤。
我们也预计血清P物质水平与肺损伤的严重程
度呈正相关。
结论：
通过研究P物质在SAP相关肺损伤中的作用，我们期望深入了解该疾病的病理机制，
并为开发治疗SAP相关的肺损伤的新方法提供基础。
[文章编号] 16712587Ⅹ(2008)0120032203[收稿日期] 2007211205[基金项目] 国家高技术研究发展计划项目资助课题(2004AA205020)[作者简介] 蒋春晓(1962-),男,吉林省长春市人,工程师,在读医学博士,主要从事多器官衰竭的组织工程学研究。
[通讯作者] 颜炜群(Tel :0431285619386,E 2mail :weiqunyan @jlu 1edu 1cn )rhK D/APP 对大鼠急性胰腺炎血清炎性因子和胰腺组织超微结构的影响蒋春晓1,张馨木1,张赢予1,2,顾国贞1,颜炜群1(1.吉林大学再生医学科学研究所生物化学研究室,吉林长春130021;21江苏省镇江市第一人民医院心脏病研究所,江苏镇江210002)[摘 要] 目的:观察rh KD/A PP 对实验性大鼠急性坏死性胰腺炎(AN P )血清炎性因子和胰腺组织超微结构的影响。
方法:采用315%的牛磺胆酸钠011mL ・100g -1逆行注入大鼠胰胆管内诱导AN P 模型。
60只大鼠随机分为假手术组(Sham 组),模型组(Model 组),rh KD/A PP 低、中、高剂量组(4×104kU ・kg -1、8×104kU ・kg -1、16×104kU ・kg -1组),阳性药抑肽酶组(Aproitin 组),观察AN P 大鼠血清肿瘤坏死因子2α(TN F 2α)、一氧化氮(NO )变化和胰腺组织超微结构变化。
结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清TN F 2α和NO 水平明显升高(P <01001);与模型组比较,rh KD/A PP 中、高剂量组大鼠血清TN F 2α和NO 均降低(P <0105或P <0101),与阳性药抑肽酶组比较差异无显著性。
胰腺组织超微结构显示细胞表面可见较多微绒毛,核仁明显,分泌颗粒增多。
结论:rh KD/A PP 早期给药可显著减轻胰腺炎症反应,对大鼠急性胰腺炎具有治疗作用。
[关键词] rh KD/A PP ;急性胰腺炎;大鼠,Wistar ;细胞因子[中图分类号] R657151;R 2332 [文献标识码] AE ffects of rhK D/APP on inflamm atory cytokines in serum andultrastructrue of tissue in acute pancreatitis ratsJ IAN G Chun 2xiao 1,ZHAN G Xin 2mu 1,ZHAN G Y ing 2yu 1,2,GU Guo 2zhen 1,YAN Wei 2qun 1(11Department of Biochemistry ,Institute of Frontier Medical Sciences ,Jilin University ,Changchun 130021,China ;21Institute of Heart Disease ,First People ’s Hospital of Zhenjiang ,Zhenjiang 210002,China )Abstract :Objective To observe the effect of rh KD/A PP on inflammatory cytokines and ultrastructrue in experimental acute necrosis pancreatitis (AN P )in rats.Methods AN P model was induced by injections of 315%sodium taurocholate into the main pancreaticduct of rats.Sixty rats were randomly divided into 6groups (n =10):sham group ;model group ;low ,mediate ,high dose rh KD/A PP group s (4×104,8×104and 16×104kU ・kg -1);aproitin group.TN F 2αand NO activity were assayed and ultrastructrue changes were observed after treatment with rh KD/A PP.Results Compared with sham group ,the levels of TNF 2αand NO in serum in model group rapdily raised (P <0101).Compared with model group ,the levels of serum TN F 2αand NO in mediate and high dose rh KD/A PP group s were decreased (P <0105or P <0101);but there was no significant difference compared with aproitin group.The ultrastructure results of pancreas tissue showed that there were a lot of microvilli on cell surface ,the nucleoli were significant ,and secretory granules inreased.Conclusion rh KD/A PP can reduce the inflammatory response of pancreas ,and has therapeutic effect on rats with AN P.K ey w ords :rh KD/A PP ;acute pancreatitis ;rats ,Wistar ;cytokines23第34卷 第1期2008年1月吉 林 大 学 学 报 (医 学 版)Journal of Jilin University (Medicine Edition )Vol.34No.1 J an.2008 急性胰腺炎(acute pancretitis,A P)是一种炎症性疾病,基本病理改变为胰腺腺泡的急性损害和胰腺的急性炎症,炎症不仅涉及胰腺局部,而且会发生全身性炎症反应,早期容易并发多脏器功能衰竭。
基因工程制备rh KD/A PP是β淀粉样蛋白(AbP)的一个片段(289～345bp),由57个氨基酸残基组成多肽[1],具有Kunitz型丝氨酸蛋白水解酶抑制(KPI)活性,能够有效地抑制胰蛋白酶、弹性蛋白酶、纤溶酶、胰血管舒缓素等蛋白水解酶的活性。
因此,rh KD/A PP能够有效地抑制A P早期各种细胞炎症因子的释放发挥治疗胰腺炎的作用。
本研究旨在通过建立胰腺炎模型观察rh KD/A PP对大鼠A P的治疗作用。
1 材料与方法111 动物、试剂及仪器 Wistar大鼠,雌雄兼用,由长春高新医学动物研究中心提供,合格证号:医动字第20063145号。
牛磺胆酸钠购自Sigma公司,rh KD/A PP由吉林大学再生医学科学研究所生化室制备;COL E PA RM ERP酶标仪(新加坡)。
112 A P动物模型的制作 大鼠禁食,自由饮水12h后,3%戊巴比妥麻醉下,经上腹部正中切口进入腹腔,提起胃、十二指肠,显露出胰腺,确认胆胰管,在其近端和远端均以动脉夹或一号丝线暂时结扎,将带有四号针头的1mL注射器沿十二指肠壁浆肌层穿刺距离胆胰管开口013～014cm处的胆管,注入315%的牛磺胆酸钠011mL・100g-1,以012mL・min-1的速度注射后,停留4min,去除结扎线,指压穿刺点,查无漏胆,逐层关腹。
对照组仅牵引胰腺和十二指肠后关腹。
113 实验分组与用药 60只大鼠随机分为6组,每组10只。
假手术组(Sham组),模型组(Model组),rh KD/A PP低、中、高剂量组(4×104kU・kg-1、8×104kU・kg-1和16×104kU・kg-1组),阳性药抑肽酶组(Aproitin组)。
rh KD/A PP低、中、高剂量组于模型建立后经股静脉注射rh KD/A PP,抑肽酶组注入(2×104kU・kg-1Aproitin),假手术组和模型组注入等量生理盐水。
每8h给药1次。
于术后48h腹主动采血,3500r・min-1离心10min,取血清,用COL E PA RM ER P酶标仪测定血清肿瘤坏死因子(TN F2α)和一氧化氮(NO)。
114 胰腺组织电镜观察 切取同一部位胰腺,迅速放入3%戊二醛溶液(4℃)固定,J EM21200EX 型电镜下观察摄片。
115 统计分析方法 实验数据以x±s,采用SPSS1010统计软件,各组TN F2α和NO均数比较采用单因素方差分析。
2 结 果211 大鼠血清TN F2α和NO的变化 与假手术组比较,模型组大鼠血清TN F2α和NO水平明显升高(P<0101);与模型组比较,rh KD/A PP中、高剂量组大鼠血清TN F2α和NO均降低(P< 0105或P<0101),与阳性药抑肽酶组比较差异无显著性。
见表1。
表1 大鼠血清TNF2α和NO的变化Tab11 Effects of rh KD/A PP on TN F2αand NO levels of serum in acute pancreatitis rats(n=10,x±s)GroupDose(kU・kg-1)TN F2α(ρB/ng・L-1)NO(c B/mmol・L-1)Sham048.0±3.632.8±2.5Model0161.0±24.03386.5±3.833rh KD/APP20000130.0±25.0△70.1±18.0△40000129.0±26.0△61.2±19.6△△80000127.0±20.0△△59.3±21.9△△Aproitin40000128.0±22.0△△58.7±15.4△△ 3P<0101compared wit h sham group;△P<0105,△△P<0101 compared wit h model group213 急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺组织超微结构的变化 假手术组:可见腺泡细胞,核仁正常,核边缘消失;泡心细胞正常;可见细胞连接,分泌颗粒多而大;腺泡细胞胞质内可见线粒体、粗面内质网、高尔基体及胞质下部分泌颗粒,细胞连接清晰可见(图1A)。
