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REV20190712仅供研究，不用于临床诊断。
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过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR) 是一类由配体激活的核转录因子,属Ⅱ型核受体超家族成员, 存在3种亚型，即PPARα、PPARδ、PPARγ，这三种亚型在结构上有一定的相似性，均含DNA结合区和配体结合区等。
PPAR与配体结合后被激活，与9-顺视黄酸类受体形成异二聚体，然后与靶基因的启动子上游的过氧化物酶体增殖物反应元件(peroxisome proliferator response element，PPRE)结合而发挥转录调控作用。
PPRE 由含相隔一个或两个核苷酸的重复序列AGGTCA组成。
与配体结合后，PPAR在DNA结合区发生变构，进而影响PPAR刺激靶基因转录的能力。
PPARδ几乎在所有组织中表达，浓度低于PPARα及PPARγ，直至最近以前尚未找到此一核受体的选择性配基。
PPARδ是代谢综合征（肥胖、胰岛素抵抗、高血压是与脂质紊乱有关的共同的病态表现）的一个新靶点。
有不少的研究表明：GW501516可作为PPARδ的特异激动剂用于研究。
参考网址：/cjh/2003/shownews.asp?id=156/conference/preview.php?kind_id=03&cat_name=ADA2001&title_id=59219 Regulation of Muscle Fiber Type and Running Endurance by PPARδplos biology，Volume 2 | Issue 10 | October 2004/plosonline/?request=get-document&doi=10.1371%2Fjournal.pbio.0020294NF-KB通路中的抑制剂好像有1.PDTC(pyrrolidine dithiocarbamate),是一种抗氧化剂，主要作用于IκB降解的上游环节（IκBα的磷酸化或IKK的活性水平），2.Gliotoxin 是一种免疫抑制剂，机制可能从多个环节阻断NF-KB的激活，如IκB的降解，NF-KB的核移位和与DNA的结合。
中性粒细胞蛋白酶抑制剂elafin在毕赤酵母中的表达及活性检测王晓龙;周向东【期刊名称】《中国生物工程杂志》【年(卷),期】2006(26)12【摘要】中性粒细胞蛋白酶抑制剂elafin是中性粒细胞弹性蛋白酶特异性抑制剂。
为建立中性粒细胞蛋白酶抑制剂elafin毕赤酵母表达系统,通过逆转录PCR扩增获取elafincDNA,双酶切后定向克隆至穿梭质粒pPIC9K上。
SalI酶切线性化后,电穿孔法转至毕赤酵母GS115菌株中,PCR筛选出阳性克隆,接种至最小甘油缓冲培养基中,甲醇诱导表达后,取上清阳离子交换层析纯化靶标蛋白。
分别以western-blot、弹力纤维蛋白-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测重组elafin免疫原性、抗蛋白酶活性。
重组elafin在毕赤酵母系统中呈分泌性表达,产量及活性高,分离纯化简便。
此表达系统的建立为其后续研究及临床应用奠定了基础。
【总页数】5页(P29-33)【关键词】中性粒细胞蛋白酶抑制剂;表达;纯化;毕赤酵母【作者】王晓龙;周向东【作者单位】重庆医科大学第二临床学院重症监护室;重庆医科大学第二临床学院呼吸科【正文语种】中文【中图分类】Q819【相关文献】1.黄粉虫纤溶活性基因的克隆及在毕赤酵母中的表达及活性检测 [J], 韩雅莉;林非凡;林泽飞;段雪娟;朱晓琳2.日本囊对虾Kunitz型蛋白酶抑制剂在毕赤酵母中的表达纯化及活性分析 [J], 陈丹丹;何南海;张名昌3.中华鲟半胱氨酸蛋白酶抑制剂在毕赤酵母中的表达和活性分析 [J], 马冬梅;白俊杰;简清;劳海华;叶星;罗建仁4.家蝇抗菌肽Domesticin在毕赤酵母中的表达及抑菌活性检测 [J], 刘进兰;杨雪;李双双;张玉明;柳峰松;唐婷;李红权5.人微小纤溶酶原cDNA在毕赤酵母中的高效表达及活性检测 [J], 王娜; 何成霞; 邹强; 苟兴华; 陈松; 吴昊俣; 蔡心析; 许天恒因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
生物技术进展 2023 年 第 13 卷 第 4 期 596 ~ 603Current Biotechnology ISSN 2095‑2341研究论文Articles重组贻贝粘蛋白的表征及功效评价李敏 ， 魏文培 ， 乔莎 ， 郝东 ， 周浩 ， 赵硕文 ， 张立峰 ， 侯增淼 *西安德诺海思医疗科技有限公司，西安 710000摘要：为了推进重组贻贝粘蛋白在医疗、化妆品领域的应用，对大肠杆菌规模化发酵及纯化生产获得的重组贻贝粘蛋白进行了表征及功效评价。
经Edman 降解法、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱、PITC 法、非还原型SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳法、凝胶法、改良的Arnow 法对重组贻贝粘蛋白进行氨基酸N 端测序、相对分子量分析、氨基酸组成分析、蛋白纯度分析、内毒素含量测定、多巴含量测定；通过细胞迁移、斑马鱼尾鳍修复效果对重组贻贝粘蛋白进行功效评价。
结果显示，获得的重组贻贝粘蛋白与理论的一级结构一致，蛋白纯度达95%以上，内毒素<10 EU ·mg -1,多巴含量大于5%；重组贻贝粘蛋白浓度为60 μg ·mL -1时能够显著促进细胞增殖的活性（P <0.01）；斑马鱼尾鳍面积样品组与模型对照组相比极显著增加（P <0.001）。
研究结果表明，重组贻贝粘蛋白具有显著的促细胞迁移和修复愈合的功效，具备作为生物医学材料的潜质。
关键词：贻贝粘蛋白；基因重组；生物材料；表征；功效评价DOI ：10.19586/j.20952341.2023.0021 中图分类号：S985.3+1 文献标志码：ACharacterization and Efficacy Evaluation of Recombinant Mussel Adhesive ProteinLI Min ， WEI Wenpei ， QIAO Sha ， HAO Dong ， ZHOU Hao ， ZHAO Shuowen ， ZHANG Lifeng ，HOU Zengmiao *Xi'an DeNovo Hith Medical Technology Co.， Ltd ， Xi'an 710000， ChinaAbstract ：In order to promote the application of recombinant mussel adhesive protein in the medical and cosmetics field ， the recombi⁃nant mussel adhesive protein obtained from scale fermentation and purification of Escherichia coli was characterized and its efficacy was evaluated. Amino acid N -terminal sequencing ， relative molecular weight analysis ， amino acid composition analysis ， protein purityanalysis ， endotoxin content ， dihydroxyphenylalanine （DOPA ） content of recombinant mussel adhesive protein were determined by the following methods ： Edman degradation ， matrix -assisted laser desorption ionization time -of -flight mass spectrometry （MALDI -TOF -MS ）， phenyl -isothiocyanate （PITC ）， nonreductive SDS -polyacrylamide gel electrophoresis （SDS -PAGE ）， gel method ， modified Ar⁃now. The efficacy of recombinant mussel adhesive protein was evaluated by cell migration and repairing effect of zebrafish tail fin. Re⁃sults showed that the obtained recombinant mussel adhesive protein was confirmed to be consistent with the theoretical primary structure ， protein purity of more than 95%， endotoxin <10 EU ·mg -1， DOPA content above 5%. When the recombinant mussel adhesive protein concentration was 60 μg ·mL -1， the effect of promoting cell proliferation was the most obvious ， and it had very significant activity （P <0.01）. The caudal fin area of zebrafish in sample group was significantly increased compared with model control group （P <0.001）. The results indicated that recombinant mussel adhesive protein can promote cell migration and repair healing and has the potential to be used as biomedical materials.Key words ：mussel adhesive protein ； gene recombination ； biological materials ； representation ； efficacy evaluation贻贝粘蛋白（mussel adhesive protein ， MAP ）也称作贻贝足丝蛋白（mussel foot protein ，Mfps ），收稿日期：2023⁃02⁃24； 接受日期：2023⁃03⁃31联系方式：李敏 E -mail:*******************;*通信作者 侯增淼 E -mail:***********************.cn李敏，等：重组贻贝粘蛋白的表征及功效评价是海洋贝类——紫贻贝（Mytilus galloprovincalis）、厚壳贻贝（Mytilus coruscus）、翡翠贻贝（Perna viri⁃dis）等分泌的一种特殊的蛋白质，贻贝中含有多种贻贝粘蛋白，包括贻贝粘蛋白（Mfp 1～6）、前胶原蛋白（precollagens）和基质蛋白（matrix proteins）等［1］。
常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步便是蛋白质的提取。
蛋白质的提取过程中，我们要经常加和蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。
另外在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可少的，本文总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF，Leupeptin 亮肽素，Aprotinin抑肽酶，Pepstatin胃蛋白酶抑制剂，EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠，Na3VO4 原矾酸钠，BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠，Na2P2O4 焦磷酸钠等。
对这些蛋白酶抑制剂的溶解配制，贮存液与工作液浓度，保存都做了详细的说明。
蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶（可逆的地面处理）。
溶解性：溶于异丙醇，乙醇，甲醇和丙二醇果>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇，+25℃时稳定至少9个月分子量：174.2使用：贮存浓度：200mM，工作浓度：1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，纤溶酶，和组织蛋白酶B 溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。
4℃一周稳定,分成小份冷冻在-20℃至少6个月分子量：C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6使用：贮存浓度：1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶，激肽释放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如，tris，0.1M，pH8.0）。
pH约7-8的溶液在4℃可保存1周，分装保存在-20℃可至少保存6个月。
避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。
伊利替康结构式-回复伊利替康（Elidel）是一种局部用药治疗湿疹（atopic dermatitis）的药物。
它的主要成分是酯类化合物pimecrolimus。
伊利替康是一种非激素药物，被广泛使用于针对湿疹患者的长期治疗中，有效减轻患者的症状，并且具有较少的副作用。
本文将详细解析伊利替康的结构式，为读者提供更深入的了解。
首先我们来看一下伊利替康的结构式：酯类化合物pimecrolimus的化学名为(1S, 9S, 12S, 13E, 21R, 23R)-9, 21-dihydroxy-12-isopropyl-12-(2-methyl-1-oxobutoxy)-2,5,11,13,1 9-pentamethyl-8,21-dioxo-1H,20H-[1,4]oxazino[3,4]quinolizino[2,1 -a]isoquinoline-13-yl-2-methylpropanoate。
分析伊利替康的结构式，我们可以看到它由几个部分组成。
首先是氧杂吡咯（oxazino）的环结构，它是伊利替康的骨架。
吡咯环上连接着一个氮杂喹啉环（quinolizino）和一个异戊酸酯侧链。
在氮杂喹啉环上有一个吡美沙酮（pimecrolimus）基团。
伊利替康的结构中还有一些关键的官能团。
首先是两个羟基基团（hydroxyl group），它们分别连接在吡美沙酮基团的2号和21号碳原子上。
这些羟基基团在药效中扮演着重要的角色。
接下来是一个异丙基基团（isopropyl group），连接在吡美沙酮基团的12号碳原子上。
最后是一个异丁基基团（2-methyl-1-oxobutoxy），连接在吡美沙酮基团的12号羟基上。
伊利替康属于一类被称为calcineurin抑制剂（calcineurin inhibitors）的药物。
它通过抑制T细胞的活化和炎性细胞因子的释放，从而减轻过敏反应引起的炎症和瘙痒症状。
与传统的皮质类固醇类药物（如氢化可的松）相比，伊利替康作用于皮肤外层而不影响全身免疫系统，因此具有较少的副作用，尤其是在儿童和长期使用患者中。
伊利替康结构式伊利替康，也称为依西美坦，是一种利用于治疗乳腺癌和睾丸癌的化学药物。
它是一种抗肿瘤药物，通过抑制肿瘤细胞的生长和有丝分裂来起到治疗作用。
伊利替康具有独特的结构式和分子特性，下面将详细介绍它的结构式、作用机制、药代动力学和临床应用。
一、伊利替康的结构式伊利替康的化学分子式为C28H22F2N4O4，分子量为502.5克/摩尔。
其结构式如下所示：```H H| |F - C - C=C - C=C - C O| | | || || | | C N| | O // ||H - C=C-C - C=C - C-N H H/ || /C C - C//\\ / \\O O O O```图 1 伊利替康的分子结构式二、伊利替康的作用机制伊利替康的作用机制主要涉及其对肿瘤细胞的生长和分裂的抑制作用。
它是一种激酶抑制剂，通过阻断细胞周期蛋白依赖激酶（CDK）的活化而抑制细胞有丝分裂。
具体来说，伊利替康主要抑制CDK4和CDK6的活性，从而阻止细胞周期的进行，使肿瘤细胞无法继续增殖和扩散。
伊利替康也可以通过抑制转录因子E2F的活性，阻止其介导的基因转录而干扰肿瘤细胞的增殖。
这些作用机制使得伊利替康成为一种有效的抗肿瘤药物。
三、伊利替康的药代动力学1. 吸收：伊利替康口服后在胃肠道吸收迅速，生物利用度高达70%～90%。
饭后服药会延缓吸收而不影响总吸收量。
2. 分布：伊利替康主要分布在体内的肝脏、肾脏、肺和睾丸等组织中，而不会穿透血脑屏障。
3. 代谢：伊利替康主要在肝脏中代谢，由肝脏中的细胞色素P450酶系统催化酶代谢。
4. 排泄：伊利替康主要通过肝脏代谢后，以尿液和粪便的形式排泄。
伊利替康的药代动力学特点表明它在体内的吸收、分布、代谢和排泄都比较稳定，为临床应用提供了保障。
四、伊利替康的临床应用伊利替康主要用于治疗激素受体阳性的、早期和晚期乳腺癌，以及激素受体阳性的、晚期或转移性的睾丸癌。
临床研究表明，伊利替康在这些肿瘤治疗中具有显著的疗效，并且与其他治疗手段联合应用时可以进一步提高治疗效果。
伊利替康结构式伊利替康是一种常用的医疗药物，其结构式为C12H11N3O3，是一种非甾体抗炎药物。
以下是关于伊利替康的详细结构式分析。
一、伊利替康的化学结构伊利替康的化学名称为2-（4-异丙基苯基）-4-乙基-6-甲基吡嗪-3,5-二酮，其分子式为C12H11N3O3，结构式如下所示：```H H\ /H3C - C - C - CH3| | |H2C - N N - COCH3|COCH3```从结构式可以看出，伊利替康的分子包含苯环、吡嗪环和酮基等组成部分，其中苯环上还连接有异丙基和乙基基团。
这些结构特征决定了伊利替康的药理作用和生物活性。
二、伊利替康的药理作用1. 抗炎作用：伊利替康是一种非甾体抗炎药物，具有较强的抗炎作用。
它通过抑制炎症介质的释放和炎症反应的发生，减轻炎症引起的疼痛、肿胀和红肿等症状。
2. 解热作用：伊利替康还具有较强的解热作用，可以降低体温，缓解因感染或其他疾病引起的发热症状。
3. 镇痛作用：伊利替康对疼痛有一定的镇痛作用，可用于缓解轻、中度的头痛、关节痛、肌肉痛等疼痛症状。
三、伊利替康的药代动力学1. 吸收：口服伊利替康后，其在消化道内被高效吸收，快速进入血液循环。
2. 分布：伊利替康在体内分布广泛，能够穿过血脑屏障并在组织中积聚。
3. 代谢：伊利替康在肝脏中发生代谢，主要通过羧酸酯酶代谢生成活性代谢产物。
4. 排泄：伊利替康及其代谢产物主要通过肾脏排泄。
结语伊利替康是一种常用的抗炎镇痛药物，其分子结构和药理作用使其在临床上有着广泛的应用价值。
通过了解伊利替康的结构式和药代动力学，可以更好地理解该药物的药理作用和临床应用。
