生化实验二优秀课件

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《生化实验》课件

实验流程
1
实验准备
清洗仪器、准备试剂和标本，确保实验顺利进行。
2
实验操作
按照操作步骤进行样本处理、反应和测量。
3
数据记录
准确记录实验数据，便于后续分析和结果展示。
实验方案的制定
目标设定
定义实验目标和预期结果，指导实验方案的制定。
调整量
确保实验中只有一个变量改变，其他条件保持恒定。
《生化实验》PPT课件
探索生化实验的奥秘，了解其应用领域和实验室安全知识。学习实验流程、制定实验方案和数据分析，解答常见问题。
生化实验简介
1 关键性实验技术
学习DNA测序、蛋白质表达、酶活性等生化实验技术。
2 学术研究工具
了解生化实验在药物研发、基因工程和医学诊断等方面的应用。
生化实验的应用
实验改进
提出改进实验方案的建议，优化实验设计和操作。
数据分析和结果展示
统计分析
使用统计方法对实验数据进行分析，发现规律和趋势。
图表展示
使用图表和图形呈现实验结果，直观清晰地展示研究发现。
实验报告
撰写详细的实验报告，包括实验目的、方法、结果和结论。
常见问题解答
实验失败
分析失败原因，如实验条件、操作技巧和实验材料等。
结果解释
解释实验结果，讨论研究意义和可能的应用。
医药研究
开发新药物、研究药物代谢和毒性，为治疗疾病提供科学依据。
基因工程
编辑基因序列、合成重组蛋白，促进生命科学研究的进展。
食品安全
检测食品中的有害物质，确保食品安全和卫生。
实验室安全
1 个人防护措施
佩戴实验室服装、手套和护目镜，避免与实验物质接触。

生化实验课件-动物肝脏中DNA的提取和测定

实验2 DNA的定量测定（二苯胺法）
一. 实ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ目的掌握二苯胺法测定DNA含量的原理和方法二. 实验器材坐标纸试管吸管 722型分光光度计恒温水浴锅
实验2 DNA的定量测定（二苯胺法）
三.实验耗材 1. DNA标准溶液（取DNA钠盐用5mmol/L的NaOH 配成200ug/L的溶液） 2. 二苯胺溶剂（纯二苯胺1g溶于100ml冰醋酸（A.R.）再加入10ml过氯酸（A.R.浓度>60%）混匀待用。临用前加入1ml 1.6%乙醇溶液） 3. DNA样液（将实验1提取的DNA粗品用蒸馏水溶解，定容至25ml，控制其DNA含量在100ug/ml 左右）
实验2 DNA的定量测定（二苯胺法）
四. 实验操作 1.标准曲线的绘制按表1加入各种试剂，混匀，于60°C恒温水浴45min，冷却后，在595nm波长下于分光光度计比色测定，以吸光度对DNA浓度作图，制作标准曲线。 2.样品的测定取DNA样液1.0ml，加入蒸馏水1.0ml，混匀。然后准确加入二苯胺试剂4.0ml，混匀，于60°C恒温水浴45min，冷却后，595nm 波长下于分光光度计比色测定，根据所测的吸光度对照标准曲线求得DNA的质量（ug）。
实验1 动物肝脏中DNA的提取
2. 在沉淀中加入20ml柠檬酸钠缓冲液、10.5ml氯仿-异戊醇混合液、2ml SDS使其最终浓度为0.41%，振荡 30min，然后缓慢加入固体NaCl（约1.8g），使其最终浓度为1mol/L。将其在3500r/min离心20min，取上清水相。 3. 在上述水相溶液中加入等体积冷乙醇，边加边用玻棒慢慢搅动，将缠绕在玻棒上的凝胶状物用滤纸吸去多余的乙醇，即得DNA 粗品。用蒸馏水溶解并定容至25ml。

实验室检查生化PPT课件

结合胆红素由胆道排入肠腔，被细菌还原成尿胆原。一部分尿胆原被肠粘膜吸收进入体内被肝细胞摄取，其中一部分进入血循环从肾脏排出。残留肠腔的尿胆原氧化后，以粪胆素排出因此，当胆红素生成过多或肝细胞的摄取、结合、转运、排泄等过程发生障碍，可导致血中胆红素升高。
1.血清胆红素测定
包括总胆红素（STB），结合胆红素（CB）和非结合胆红素（UCB）。
参考值：总胆红素（STB） 1.7-17.1umol/L 结合胆红素（CB） 0-6.8umol/L 非结合胆红素（UCB）1.7-10.2umol/L
临床意义：
(1)根据总胆红素判断有无黄疸及黄疸的程度
STB 17.1—34.2 mol/L 隐性黄疸
34.2—171 mol/L 轻度黄疸
171—342mol/L 中度黄疸
实验室检查之
生化检验
第一节肝功能检查
一.反映蛋白质代谢功能
1.总蛋白(TP) 60-80 g/L,是血清中所含各种蛋白
的总称，包括白蛋白和球蛋白,。
2.白蛋白(ALB) 40-50 g/L,为血液中的主要蛋白
质由肝脏合成，白蛋白主要维持血浆渗透压，代谢物质转运，供能作用。
3.球蛋白(GLO) 20-30 g/L,为血清中总蛋白减去
(4) 结合胆红素还有助于早期发现处于隐性黄疸肝胆疾病。
2.尿胆红素和尿胆原测定
非结合胆红素为脂溶性非极性物质，不能透过肾小球滤过膜，溶血性黄疸尿胆红素为阴性；
结合胆红素是水溶性极性物质，可以通过肾小球滤过膜从尿中排出，肝细胞性和梗阻性黄疸尿胆红素为阳性。
尿胆原在溶血性黄疸和肝细胞性黄疸时浓度升高。
白蛋白以外的蛋白质(TP-A=G)，主要为免疫球蛋白和补体，与机体的免疫状态有关。

生化2蛋白质化学.ppt

质子化(-NH3+)形式存在，羧基是以离解状态(-COO-)存在。
+ H3N-CH-COOH
R
- H+ pK1
+ H+
- H+
H3N+-CH-COO-
R
pK2
+ H+
H2N-CH-COO-
R
“ +”
正离子
PH<PI
“0”
两性离子
PH=PI
“-”
负离子
PH>PI
2. 氨基酸的等电点
在一定的pH值时，氨基酸分子中氨基的离解度等于羧基的离解度时，所含的-NH3+和-COO-数目正好相等，净电荷为0。在电场中既不向正极移动，也不向负极移动，这一pH值即为氨基酸的等电点，简称pI。
在等电点时，氨基酸既不向正极也不向负极移动，即氨基酸处于两性离子状态。
3. 氨基酸的等电点的计算
+ H3N-CH-COOH
R
- H+ pK1
+ H+
- H+
H3N+-CH-COO-
R
pK2
+ H+
H2N-CH-COO-
R
K1=
H3N+-CH-COO- * H+
R
+ H3N-CH-COOH
R
K2=
H2N-CH-COO-
R
H3N+-CH-COO-
*
H+
R
K1* K2=
H3N+-CH-COO- * H+
R + H3N-CH-COOH
*

生化实验课件-尿液淀粉酶活力测定 (2)

4.保溫30分鐘後，取出各管。迅速浸入冰水浴中冷卻。然後向各管中加稀碘液2滴搖勻。觀察各管的顏色。各試管中出現黃到蘭的色序。黃色表明無澱粉存在，淺紅色到紫色表明有澱粉的水解中間產物。蘭色表明有澱粉或其初期水解產物存在。
計算：選擇黃色管中尿液稀釋倍數最大的一管來計算。假設第5管為黃色（從第6管起仍有紅色或蘭色）。已知第5管內含尿液為1/32m1。即1/32m1尿液能在37℃，30分鐘水解0.1%澱粉1 m1。所以，1 m1尿液在同樣條件下可水解0.1%澱粉32 m1。即每1 m1尿液中所含澱粉酶的活性為32個活力單位。
100m1水中，使用前稀釋10倍）； 4.移液管； 5.試管； 6.恒溫水溶鍋。
操Hale Waihona Puke ：1. 取 10 支試管，按次序記上號碼，各加 0.9% NaCl 1 m1。
2.用1m1移液管加尿液1m1於第一管，使其與 0.9%；NaC1混合（若尿液中含澱粉酶過多，應預先將尿液適當稀釋）。用移液管吸取，然後任其流出。反復三次，使全管混勻。
從第一管吸出1m1到第二管中，混勻。吸出1m1 到第三管……依次類推。到第九管吸出1m1棄之。這樣即可獲得分別含有尿液 1/2 、 1/4 、 1/8……1/512 m1的不同濃度的尿稀釋液，第10 管不加尿液作為對照管。
3.將10支試管置冰水溶中，然後從第10管起依次迅速準確加入0.1%澱粉液1m1。迅速搖勻。立即從冰水浴中取出，置37℃，並記錄時間。注意保持水浴的溫度。
實驗十五
尿液澱粉酶活力測定（Winslow）氏法
原理：
臨床上通常用Winslow氏法測定尿或血清中澱粉酶活性。該法對澱粉酶活性單位的規定是：在37℃，30分鐘，恰好能將0.1% 澱粉溶液1m1水解（指加入碘液後不再呈蘭色或紅色）的酶量定為一個活力單位。

实验诊断生化2讲课文档

第十五页，共130页。
16
第三节胆红素代谢检查
胆红素代谢功能的常规检查主要包括： 1. 血清总胆红素（STB）：正常情况下为非结合胆红素（UCB）和结合胆红素（CB）的总和； 2. 血清结合胆红素（CB）； 3. 血清非结合胆红素（UCB）； 4. 血清CB/UCB比值等。【参考范围】成人STB（TBil）：3.4～17.1μmol/L； CB（DBil）：0～6.8μmol/L； UCB ： 1.7～10.2μmol/L；
6
白蛋白测定的临床意义
较少见：严重腹泻、呕吐引起的脱水，广泛性烧伤，急性大出血
1.蛋白质摄入不足：慢性胃肠道疾病，营养不良，妊娠后期，哺乳期
2.白蛋白合成功能不全：肝硬化，肝功严重损伤，慢性感染，恶性贫血
3.蛋白质消耗太多：甲亢，糖尿病，慢性消耗性疾病，恶性肿瘤
4.蛋白质丢失增多:肾病综合征,严重烧伤
第二十一页，共130页。
22
【临床意义】 1. 判断有无黄疸及黄疸的程度： (1）隐性黄疸（亚临床黄疸）：17.1<STB≦34.2μmol/L。 (2）显性黄疸：>34.2μmol/L
①轻度黄疸：34.2～171μmol/L； ②中度黄疸：171～342μmol/L； ③重度黄疸：>342μmol/L。
轻度↑或正常 ↑↑
（-）（+）变浅或灰白色 ↓或消失
肝细胞性黄疸 ↑↑
↑
↑
（+）或（-）（+）变浅或正常 ↓或正常
第二十九页，共130页。
30
第四节肝脏疾病常用的血清酶检测
一、丙氨酸氨基转移酶—ALT
ALT俗称谷丙转氨酶（GPT），其主要存在肝实质细胞
内，其肝内活性较血清高100倍。【参考范围】 5～40U/L 【临床意义】

血液生化检查详解优秀课件

ALP主要分布在肝脏、骨骼、肾脏、小肠及胎盘中，血清中的ALP以游离形式存在，大部分来自肝脏和骨骼，常可作为肝脏疾病的检查指标之一。
幼年动物的ALP主要来源于骨骼，成年动物ALP主要来自肝脏。
2.碱性磷酸酶（ALP）正常参考值：30-115IU/L 临床意义：
常见于肝癌、肝硬化、阻塞性黄疸、急慢性黄疸型肝炎、胆管阻塞、骨细胞瘤、骨转移癌、骨折恢复期。
又称谷丙转氨酶，是机体的氨基转移酶之一，在氨基酸代谢中起着重要的作用。ALT广泛分布在动物的肝、肾、心的器官中，尤以肝细胞中含量最高，约为血清中的100倍，故只要有1％肝细胞坏死，即可使血清中ALT增加一倍，因此它是犬猫最敏感的肝功能检测指标之一。当肝细胞受损害时，细胞膜通透性增加或细胞破裂，肝细胞内ALT大量逸入血液导致血液中ALT含量增加，故血清ALT增加是反映肝细胞损害的最敏感指标之一，具有很高的灵敏性和较高的特异性。
5.肌酐（CRE）
正常参考值：36.00-132umol/L
临床意义：
升高：常见于严重肾功能不全、各种肾障碍、肢端肥大症等。
降低：常见于肌肉量减少（如营养不良、高龄者）、多。
6.尿素氮（BUN）
尿素是体内氨基酸代谢的最终产物之一。氨基酸经脱氨基作用先生成氨。氨对机体有毒性，在肝脏经鸟氨酸循环生成尿素，尿素通过血液循环输送至肾脏，经肾小球滤过，肾小管重吸收一部分，大部分经尿排泄，当肾小球滤过功能降低时血中尿素增高，所以血尿素能反映肾小球滤过功能。
能检测，进行保肝治疗和营养治疗，在肝功得到恢复时方可实施限期或择期手术，肝功严重损害时除急症抢救外不应实施手术。
肾病患肾病的动物麻醉风险大，手术耐
受力差，中轻度肾功损害动物内科治疗同时密切检测肾功水平，必须手术而又重度肾功损害的动物可以考虑进行腹膜透析后再实施手术。

《生化实验基本操作》课件

2 实验操作步骤注意事项
掌握实验操作过程中需要注意的细节，确保实验结果准确可靠。
3 实验安全注意事项
学习实验过程中的安全操作规范和紧急事故应急预案，保障实验人员安全。
实验结果分析
展示实验结果的图像，分析并解释数据，介绍数据统计和分析方法。
1
实验结果的图像展示和解析
使用图像和图表向观众展示实验结果，并进行详细解析。
PCR扩增
使用聚合酶链反应（PCR）扩增DNA片段的基本操作步骤。
Western blotting
了解Western blotting技术在蛋白质检测中的应用和操作流程。
实验注意事项
掌握实验前准备工作、实验操作步骤注意事项以及实验安全注意事项，确保操作顺利进行。
1 实验前准备工作
了解实验前的材料准备、设备检查和实验环境准备等重要步骤。
《生化实验基本操作》 PPT课件
生化实验基本操作PPT课件
实验原理介绍
了解生物分子的基本组成、化学性质和特点，以及生化实验的实验原理。
生物分子的基本组成
探索DNA、Rቤተ መጻሕፍቲ ባይዱA、蛋白质等生物分子的基本组成和结构。
生物分子的化学性质和特点
研究生物分子的化学特性，如酶的催化作用和蛋白质的折叠。
生化实验的实验原理
生化实验的应用前景
介绍生化实验在医学、农业和环境保护等领域的广泛应用前景。
参考文献
推荐一些生化实验相关的书籍，以及在线可获取的生化实验资源。 • 生化实验教程 - 张三，ISBN 978-1234567890 • 实验技术手册 - 李四，ISBN 978-0987654321 • 生化实验资源网站
2
数据统计和分析方法
介绍常见的生化实验数据统计和分析方法，如t检验和方差分析。

生化实验课件-酵母核糖核酸的分离及组分鉴定 (2)

核苷酸的消化和核酸一樣。此外嘌呤類核苷
酸可用1.5mol/L的HCL，100℃ 水解1小時脫磷；
嘧啶類核苷酸可用10mol/L H 2 SO4消化1—2個小
時脫磷。
二，試劑
1.標準磷試劑（含磷5μg/ml）:準確稱取恒重
（105℃ ）的 KH 2 PO4 0.4389g,用水定容到100ml，此液
3. 催化劑：硫酸銅（ CuSO4 •5H 2O）：硫酸鉀
（ K 2 SO4）=1：4（W/W）,研成細末。
4. 30%過氧化氫，濃硫酸
三，操作方法
1.製作磷標準曲線：
取標準磷酸溶液（ 5μg/ml ）0，0.5，1.0，1.5，2.0，
2.5，3.0ml，用水補足到3ml，含磷量分別為0，2.5，5，
3.磷酸：取一支試管，加入水解液1ml和定磷試劑 1ml。在水浴中加熱，觀察溶液是否變成藍色，說明磷酸是否存在。
離心機使用及注意事項
使用方法:
1 ．接通電源 2 ．平衡離心樣品 3. 加入樣品, 關蓋 4 ．設置時間 5．調節轉速 6. 關機, 開蓋, 取出樣品
注意事項:
（1）離心前必須仔細檢查轉頭各孔內有無異物。（2）離心管必須仔細平衡。（3）機內若不清潔，離心管要封口。（4）必須慢啟動，然後加速。（5）離心時不准開蓋。（6）不准用手刹車。
1000ml 500ml 1000ml 500ml 200ml 50ml 50ml 80ml 10ml
11. 定磷試劑
50ml
（1）17%硫酸：將17毫升濃硫酸（比重1.84）緩緩加入到83毫升水中。
（2）2.5%鉬酸銨溶液： 2.5g鉬酸氨溶於100ml水中。
（3）10%抗壞血酸溶液：10g抗壞血酸溶於100ml水中，貯存棕色瓶保存。溶液呈淡黃色時可用，如呈深黃色或棕色則失效，需要純化抗壞血酸。

检验科讲课—生化课件

生化检验结果对于诊断、治疗和监测疾病具有重要意义，应正确应用于临床实践。
06
生化检验的新技术发展
自动化生化分析仪
自动化生化分析仪是生化检验领域的重要技术之一，它能够快速、准确地完成大量生化样本的检测和分析。
自动化生化分析仪采用先进的机械臂和液体处理系统，实现了样本的自动加样、混合、分离和检测等功能，大大提高了检测效率。
操作误差等。
03
误差纠正与预防
根据误差分析结果，采取相应的纠正措施，如维修仪器、更换试剂、培
训操作人员等。同时，还需要制定预防措施，防止类似误差再次发生。
05
生化检验的注意事项
患者准备
患者应提前了解生化检验的要求，如饮食控制、禁食时间等，以便做好充分准备。
患者应避免剧烈运动、过度劳累和情绪波动，以免影响检验结果。
肾功能指标
评估肾脏功能，反映肾脏健康状况。
尿素氮（BUN）：蛋白质代谢产物，通过肾脏排泄
。
尿酸（UA）：嘌呤代谢产物，反映肾功能和痛风。
肌酐（CREA）：肌肉代谢
尿蛋白（PRO）：检测肾
•·
产物，通过肾脏排泄。
脏病变和评估肾功能。
血糖血脂指标
在此添加您的文本17字
监测血糖和血脂水平，预防糖尿病和心血管疾病。
选择合适的质控品，将其与样本一同检测，并根据质控品的结果评估实验的准确性。
校准与校准验证
在开始实验前，必须对仪器进行校准，确保仪器处于正常工作状态。同时，还需要定期对校准结果进行验证，以确保结果的准确性。
室间质量评价
参加评价计划
通过参加权威机构组织的室间质量评价计划，与其他实验室进行比对，了解自身实验室的检测水平。

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10ml1%NaCl，研磨成匀浆，0-4 ℃下放置20min。离心（2000rpm， 10min），测定上清酶液的总体积。 2）种子酶的提取：取干燥种子10粒作对照，操作方法同上。 4、二硝基水杨酸法测定酶活力量取待测酶液1ml，ph6.9的0.02mol/L磷酸缓冲液稀释10倍，作为酶活力测定物。按下表加各物质。
本实验以淀粉酶催化淀粉生成麦芽糖的速度来测定酶的活力。麦芽糖是还原糖，能使3，5-二硝基水杨酸还原成棕色的3-氨基-5-硝基水杨酸，后者在 500nm处有最大吸光度，而进行定量测定。三、主要仪器设备及实验耗材
小麦种子，可见分光光度计，离心机，恒温水浴，研钵等标准麦芽糖，淀粉， 3，5-二硝基水杨酸溶液，氯化钠，磷酸缓冲液，石英砂四、实验内容和步骤
2
试剂
试管编号
1（种子酶稀释液）
2（幼苗酶稀释液）
3（空白管）
V（0.2%淀粉溶液）/ml 1
1
1
V(标准麦芽糖溶液）/ml -
-
-
V(蒸馏水）/ml
-
-
0.5
V(酶液）/ml
0.5
0.5
-
混匀各管，45 ℃恒温水浴，水解3min，加入1% 3，5-二硝基水杨酸溶液2ml 入沸水浴，准确加热5min，迅速冷却至室温，加水稀释至20ml，混匀
3
ห้องสมุดไป่ตู้
测定各管的A500nm值。 5、计算酶活力单位
总酶活力单位=C酶×n ×V酶式中：C酶为种子酶或幼苗酶分解淀粉产生的麦芽糖的浓度（mg/ml)
n为酶溶液稀释的倍数 V酶为提取酶液的总体积（ml）设在45 ℃，ph6.9的条件下，3min内水解淀粉释放1mg麦芽糖所需要的酶量为1个活力单位（U）。
4
1、制作标准曲线
1
以不同浓度梯度的标准麦芽糖液与3，5-二硝基水杨酸反应，测定A500nm，以麦芽
糖含量为横坐标， A500nm值为纵坐标，绘制标准曲线。 2、萌发小麦种子
浸泡小麦种子24h，入25℃恒温箱或在室温下发芽。 3、提取小麦萌发前后的酶液 1）幼苗酶的提取：取萌发的幼苗10株，剪去根部，入研钵加石英砂，
实验二小麦萌发前后淀粉酶活性的比较
一、实验目的及要求 1、学习分光光度法测定淀粉酶活力的原理与方法 2、了解小麦萌发前后的淀粉酶活力的变化二、实验基本原理
淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。实验证明，在某些植物如小麦、大麦的休眠种子中只含有β-淀粉酶，α-淀粉酶是在发芽过程中形成的，所以在禾谷类萌发的种子和幼苗中，这两类淀粉酶都存在。其活性随萌发时间的延迟而增高。