生物化学实验基本操作

生物化学的基本操作与血清尿素测定实验报告
一、实验原理：
二乙酰在强酸条件下与尿素缩合成红色的二甲基氧咪唑化合物，颜色深浅与尿素含量成正比。

因二乙酰不稳定，故由试剂中二乙酰与强酸作用产生二乙酰。

二、实验试剂：
1、酸性试剂：在三角烧瓶中加去离子水约100ml，然后加入浓硫酸
44ml、85%磷酸66ml。

冷至室温，加入氨基硫脲50mg及硫酸镉2g，溶解后用去离子水稀释至IL。

置棕色瓶中，4℃可保存半年。

三、基本操作及注意事项：
1、试剂中加入氨基硫脲和镉离子，可增进显色强度和色泽稳定性，但仍有轻度褪色现象，（每小时小于5%）。

煮沸显色经冷却后，应及时比色。

2、尿液中尿素也可用此法测定，但因浓度高，需先用去离子水作50倍以上稀释。

四、评价：
1、本法试剂单一，方法简便，但试剂毒性和腐蚀性。

在标本数量多时加热开始难以达到100℃，各管间受热温度也可能不一致，因而本法重复性不佳。

生物化学实验基本操作在生物化学研究中，实验操作是非常关键和基础的环节。

正确的实验操作能够确保实验结果的准确性和可重复性。

本文将介绍生物化学实验的基本操作步骤，以及注意事项和常见错误，旨在帮助读者进行高质量的实验。

1. 实验室准备实验前需要充分准备实验室和实验设备。

确保实验室环境整洁，无杂物和污染物。

检查实验设备的完整性和正常运行状态，如酶标仪、离心机、超低温冰箱等。

检查试剂的标签和耐期，确保试剂无污染、完整密封。

准备所需的试剂和溶液，按照实验要求正确称量和稀释。

2. 安全措施生物化学实验涉及到一些有害物质和有毒试剂，因此必须采取相应的安全措施。

佩戴实验手套、眼镜和口罩，避免直接接触化学物质。

对于具有刺激性和致敏性的试剂，应采取适当的通风和排放措施。

在实验操作过程中，注意实验室的安全出口和紧急出口，以应对突发情况。

3. 实验记录实验过程中的记录是非常重要的部分，确保实验结果的可靠性和重复性。

在实验前，准备好实验记录表格，包括实验步骤、试剂使用量、反应时间和实验结果等。

实验过程中，实验人员应及时、准确地记录各项数据和观察结果，不漏一步、一项。

同时，注意记录实验中的异常情况和发现的问题。

4. 实验步骤生物化学实验的步骤根据具体实验目的和方法而定，但一般包括样品处理、试剂制备、反应或分离、结果检测等。

在进行每一步操作之前，确保实验器材和试剂已经准备好，操作空间整洁无杂质。

按照实验步骤的要求依次进行操作，注意操作的顺序和时间控制。

严格按照实验方法和条件要求操作，避免人为因素对实验结果的影响。

5. 清洁和废弃物处理实验完成后，要及时清洁实验器材和实验台面，避免试剂残留和交叉污染。

使用正规的清洗剂和方法进行清洗，定期对实验室进行无菌处理和消毒。

对于废液和废弃物的处理，要按照实验室的规定和环保要求进行集中收集、处理和处置。

总之，生物化学实验的基本操作包括实验室准备、安全措施、实验记录、实验步骤和清洁处理等环节。

生化实验的基本操作（一）搅拌和振荡1.配制溶液时，必须随时搅拌或振荡混合。

配制完了时，必须充分搅拌或振荡混合。

2.搅拌使用的玻璃搅棒，必须两头都烧圆滑。

3.搅棒的粗细长短，必须与容器的大小和所配制的溶液的多少呈适当比例关系。

不能用长而粗的搅棒去搅拌小离心管中的少量溶液。

4.搅拌时，尽量使搅棒沿着器壁运动，不搅入空气，不使溶液飞溅。

5.倾入液体时，必须沿器壁慢慢倾人以免有大量空气混入。

倾倒表面张力低的液体(如蛋白质溶液）时，更需缓慢仔细。

6.振荡溶液时，应沿着圆圈转动容器，不应上下振荡。

7.振荡混合小离心管中液体时，可将离心管握在手中，以手腕、肘或肩作轴来旋转离心管; 也可由一手持离心管上端用另一手弹动离心管；也可用一手大拇指和食指持管的上端，用其余三个手指弹动离心管。

手指持管的松紧要随着振动的幅度变化。

还可以把双手掌心相对合拢，住离心管，来回挫动。

8.在容量瓶中，混合液体时，应倒持容量瓶摇动，用食指或手心顶住瓶塞，并不时翻转容量瓶。

9.在分液漏斗中振荡液体时，应用一手在适当斜度下倒持漏斗，用食指或手心顶住瓶塞，并用另一手控制漏斗的活塞。

一边振荡，一边开动活塞，使气体可以随时由漏斗泄出。

10.研磨配制肢体溶液时，要使杵棒沿着研钵的单方向进行，不要来回研磨。

（二）沉淀的过滤和洗涤1.过滤沉淀一般使用滤纸。

2.应根据沉淀的性质选择不同的滤纸.胶状沉淀,应使用质松孔大的滤纸.一般大小颗粒的结晶形成沉淀,应使用致密孔小的滤纸。

而极细的沉淀，则应使用致密孔最小的滤纸。

滤纸越致密，过滤就越慢。

3.滤纸的大小要由沉淀量来决定，并不是由溶液的体积来决定。

沉淀量应装到滤纸高度的1／3左右。

最多不应超过1／2，通常使用直径为7-9厘米的圆形滤纸。

4.折叠滤纸应先整齐的对折，错开一点再对折，打开后形成一边一层，一边三层的圆锥体。

折叠尖端时不可过于用力，以免容易出洞。

放入漏斗中时，滤纸边缘应完全吻合。

撕去三层一边的外面两层部分的尖端，使滤纸上缘能更好的贴在漏斗的壁上，不留缝隙。

生化实验室基本操作1 玻璃仪器的清洗实验中所用的玻璃仪器清洁与否，直接影响实验的结果，往往由於仪器的不清洁或被污染而造成较大的实验误差，有时甚至会导致实验的失败。

做生物化学实验对玻璃仪器清洁程度的要求，比一般化学实验的要求更高。

这是因为：①生物化学实验中蛋白质、酶、核酸等往往都是以“毫克”和“微克”计的，稍有杂质，影响就很大。

②生物化学实验对许多常见的污染杂质十分敏感，如金属离子（钙、镁离子等）、去污剂和有机物残基等，因此玻璃仪器（包括离心管等塑料器皿）是否彻底清洗净就是非常重要的。

⑴初用玻璃仪器的清洗新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质，可先用0.5％的去污剂洗刷，再用自来水洗净，然后浸泡在1％～2％盐酸溶液中过夜（不可少于四小时），再用自来水冲洗，最后用无离子水冲洗两次，在100℃～120℃烘箱内烘干备用。

⑵使用过的玻璃仪器的清洗先用自来水洗刷至无污物，再用合适的毛刷沾去污剂（粉）洗刷，或浸泡在0.5％的清洗剂中超声清洗（比色皿决不可超声），然后用自来水彻底洗净去污剂，用无离子水洗两次，烘干备用（计量仪器不可烘干）。

清洗后器皿内外不可挂有水珠，否则重洗，若重洗后仍挂有水珠，则需用洗液浸泡数小时后（或用去污粉擦洗），重新清洗。

⑶石英和玻璃比色皿的清洗决不可用强碱清洗，因为强碱会浸蚀抛光的比色皿。

只能用洗液或1％～2％的去污剂浸泡，然后用自来水冲洗，这时使用一支绸布包裹的小棒或棉花球棒刷洗，效果会更好，清洗干净的比色皿也应内外壁不挂水珠。

2 塑料器皿的清洗聚乙烯、聚丙烯等制成的塑料器皿，在生物化学实验中已用的越来越多。

第一次使用塑料器皿时，可先用8mol/L尿素（用浓盐酸调pH = 1）清洗，接着依次用无离子水、1 mol/L KOH和无离子水清洗，然后用10—3 mol/L EDTA 除去金属离子的污染，最后用无离子水彻底清洗，以后每次使用时，可只用0.5％的去污剂清洗，然后用自来水和无离子水洗净即可。

一、玻璃仪器的使用及清洁（一）玻璃仪器的洗涤及干燥1、一般仪器：烧杯、试管、离心管等普通玻璃仪器，可直接用毛刷蘸餐洗净刷洗，然后用自来水冲洗，直至容器内不挂水珠即可。

最后用少量蒸馏水冲洗内壁2－3次，倒置晾干即可。

2、容量分析仪器：容量瓶、滴定管及吸管等容量仪器，用后用自来水多次冲洗，如能清洁（壁不挂水珠），再用蒸馏水少量冲洗2~3次晾干即可备用。

若仍不干净附有油污等，则须于干后放入铬酸洗液内浸泡数小时，然后倒净（或捞出）洗液，用自来水充分冲洗至水不显黄色后再冲几次，最后用少量蒸馏水冲洗2~3次晾干备用。

在做酶学实验时，对仪器的清洁要求更高，因如有极微量的污物（如重金属离子）即可导致整个实验失败。

因此，必要时仪器经上述方法洗涤后，还需用稀盐酸或稀硝酸洗涤，以除去铬及其它金属离子，然后再用自来水、蒸馏水冲洗。

生化实验室常用的洗液有以下几种：（1）铬酸洗液：为最常用的洗液，由重铬酸钾、粗硫酸及水配制而成，去污力强，清洗效果好。

其配制方法有多种，可根据需要进行选择，常用的配方如下表。

重铬酸钾（ｇ）100 60 100水（ｍｌ）750 300 200粗硫酸（ｍｌ）250 460 800清洁性能较弱较强（常用）最强配制方法为：先将重铬酸钾溶于水，再慢慢加入浓硫酸。

因配制过程产生大量热，容器需放入冷水中，边加硫酸边搅动混合。

由于产热量很大，使用玻璃容器有破裂的危险，所以最好用耐高温的陶瓷或耐酸的搪瓷容器。

洗液可多次反复使用，如效力变弱，可加入少量重铬酸钾及浓硫酸继续使用，但如果变为绿色，则不宜再用。

（2）10%尿素液：为蛋白质良好溶剂，帮适用于洗涤盛血的容器。

（3）草酸盐液：用于清洗过锰酸钾的痕迹。

（4）硝酸液：用1：1的硝酸水溶液，用于清洗CO2测定器及微量滴定管。

（5）乙二胺四乙酸二钠（EDTA－Nａ2）液：5~10%的EDTA－Nａ2液可用于洗涤器皿内无机盐类。

玻璃仪器的干燥方法可根据不同仪器的种类而定。

生物化学实验操作标准流程实验目的：本实验旨在通过一系列生物化学实验，掌握生物化学实验的基本操作技能，培养实验操作能力，进一步巩固和增强生物化学知识。

实验原理：生物化学实验是利用生物体内某些特定化学反应的原理和方法，在实验室中进行的活动，旨在研究生物体内的生化过程、生化成分及其相互作用。

需要通过实验仪器的使用、试剂的配制、实验步骤的操作等一系列过程来确保实验顺利进行。

实验材料：试管、坩埚、实验动物、试剂、生物化学仪器等。

实验步骤：1. 实验前准备：清洗实验仪器，准备所需试剂，并检查实验动物的状态。

2. 实验操作：a. 锁定实验目标和方法；b. 配制试剂：根据实验要求，精确称量所需试剂，配制标准溶液；c. 进行实验：按照实验操作流程，逐步进行各项实验操作；d. 记录数据：准确记录实验数据，包括实验结果、出现异常情况等；e. 处理实验废物：将实验废物妥善处理，避免对环境造成污染。

实验注意事项：1. 实验操作时要戴好实验手套、口罩等防护用具，确保人员安全；2. 注意实验仪器的使用方法，避免损坏实验设备；3. 严格按照实验流程操作，不得擅自修改实验步骤；4. 学会分析实验结果，及时发现问题并采取措施解决；5. 实验结束后，保持实验室的整洁，及时清理实验废物。

实验总结：通过本次生物化学实验，我掌握了生物化学实验的操作标准流程，充分锻炼了实验技能，增强了对生物化学知识的理解和掌握。

生物化学实验是培养科学素养和实践能力的重要途径，希望通过不断实验实践，提高实验技能，为将来的科研工作做好准备。

以上便是生物化学实验操作标准流程，通过认真学习和实践，相信你会逐渐掌握生物化学实验的操作技能，取得更好的实验成果。

祝愿你在科学领域不断前行，成为优秀的生物化学研究者！。