脂溶性维生素的测定

脂溶性维生素的定量检测维生素的化学多样性使得其难以同时被萃取和分析。

食物中的维生素含量介于纳克到毫克之间，婴儿配方奶粉等基质中的维生素含量进行标记时，水溶性和脂溶性维生素的分析通常分开进行，这就会延长分析时间。

维生素的不同，其分子结构的多样性会因为最大吸光度而不同。

脂溶性维生素包括维生素A、D、E和K，它们都含有环结构和长的、脂肪族烃链，这四种维生素都是高度疏水的，每一种都至少有一个极性基团。

脂溶性维生素由长的碳氢链或稠环组成的聚戊二烯化合物。

在研究中，我们采用了一种高灵敏度、可靠的方法，通过紫外检测技术，同时测定9种脂溶性维生素。

使用此方法能够对食品样品进行营养成分标记快速分析，可获得极高的色谱分离度。

峰面积和保留时间重现性的相对标准偏差值较低，这证实了所开发的方法的可靠性和灵敏度。

为了证明该方法能够有效用于营养成分的标记，我们对婴儿配方奶粉和复合维生素片中的维生素D进行定量分析，然后将所得结果与标示值进行比较。

采用回收率校正方法，计算得到的婴儿配方奶粉和复合维生素片中维生素D的含量数值与标示值非常接近。

结果表明该方法非常适用于定量食品样品中的维生素。

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HPLC法测定脂溶性维生素注射液中维生素D2及维生素E的含量目的建立测定脂溶性维生素注射液中维生素D2、维生素E的高效液相色谱（HPIC）分析方法。

方法应用高效液相色谱法。

维生素D2采用Kromasil 100-5sil（250mm×4.6mm）色谱柱：以正已烷：异丙醇（97.5：2.5）为流动相：流速为1ml/min）：检测波长为265nm：柱温室温：紫外测器。

维生素E采用Kromasil 100-5sil（250mm×4.6mm）色谱柱：以正已烷-异丙醇（99.5∶0.5）为流动相：流速为1mL/min：检测波长为298nm：柱温室温：紫外检测器。

结果维生素D2和维生素E分别在0.26～2.08?g/mL和0.64～3.20mg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

维生素D2和维生素E的平均回收率分别为98.90%、100.2%、RSD分别为1.2%、1.1%。

结论本方法准确、快速、重现性好。

标签：维生素D2；维生素E；高效液相色谱法；含量测定[Abstract ] Objective To develop the HPLC method for determination of vitamin D2，vitamin E content in the Fat-soluble vitamin injection. Methods High performance liquid chromatography（HPLC）was used.Kromasil 100-5sil （250mm×4.6mm）chromatographic column was used to determine vitamin D2，n-hexane：isopropanol（97.5：2.5）was as mobile phase，the flow rate was 1ml/min，wavelength was 265nm，under the condition of room temperature，and UV-detector were used.Kromasil 100-5sil（250mm×4.6mm）chromatographic column was used to determine vitamin E：n-hexane：isopropanol（99.5∶0.5）was as mobile phase，the flow rate was 1ml/min，the wavelength was 298nm，under the condition of room temperature，and UV-detector were used. Results There was a good linear relationship between the 0.26-2.08?g/mL range and peak area for vitamin D2，while the 0.64-320?g/mL range for vitamin E.The average recovery rate of vitamin D2 and vitamin E were 98.90% and 100.2%.RSD of vitamin D2 and vitamin E were 1.2% and 1.1%. Conclusion The method is accurate，rapid and reproducible.[Key words] Vitamin D2；Vitamin E；Chromatography（HPLC）；Determination脂溶性維生素注射液为含有维生素A、维生素D2、维生素E、维生素K1和注射用大豆油，卵磷脂等的灭菌乳剂，属维生素类药。

维生素D的测定——脂溶性维生素的测定为一组存在于动植物组织中的类固醇的衍生物，因其有抗佝偻病作用，也称之为抗佝偻病维生素。

目前己知的维生素D起码有10种，但最重要的是维生素D2和维生素D3。

维生素D2又名麦角钙化醇，分子式为C28H44O，相对分子质量为396.66；维生素D3又名胆钙化醇，分子式为C27H44O，相对分子质量为384.65。

食品中维生素D的含量很少，且主要存在于动物性食品中。

维生素D的含量普通用国际单位（IU）表示，1国际单位的维生素D相当于0.025μg的维生素D。

几种富含维生素D的食品中维生素D的含量（IU/100g）如下：奶油50，蛋黄150一400，鱼40一150，肝10一70，鱼肝油800一30000。

维生素D的测定办法有、紫外分光光度法、气相色谱法、液相色谱法及薄层层析法等。

其中比色法敏捷度较高，但操作非常复杂、费时。

虽然操作容易，精密度也高，但敏捷度低，不能用于含微量维生素D的样品。

液相色谱法的敏捷度比比色法高20倍以上，且操作简便，精度高，分析速度快，是目前分析维生素D的最好办法。

这里主要介绍三氯化锑比色法。

在三氯甲烷溶液中，维生素D与三氯化锑结合生成一种橙黄色化合物，呈色强度与维生素D的含量成正比。

皂化与提取同维生素A的测定。

假如样品中有维生素A共存，可用以下办法举行分别纯化。

(1)分别柱的制备：取一支具有活塞和砂蕊板的玻璃层析柱。

第一层：加入无水硫酸钠，铺平整。

其次层：将celite540置于碘值瓶中，加入石油醚，振摇，再加入聚乙二醇600，强烈振摇，使其黏合匀称，然后倒入层析柱内。

第三层：加中性氧化铝。

第四层：加入无水硫酸钠。

轻轻地转动层析柱，使其次层的高度保持在12cm左右。

(2）纯化：先用石油醚淋洗分别柱，然后将样品提取液倒入柱内，再用石油醚继续淋洗。

弃去最初收集的滤液，再用容量瓶收集淋洗液至刻度。

将淋洗液移入分液漏斗中，加水洗涤3次（去除残留的聚乙二醇，以免与三氯化锑作用形成混浊物，影响比色）。

维生素e的测定方法
维生素E是一种重要的脂溶性维生素，具有抗氧化、抗衰老等作用。

对于维生素E的测定，目前主要有以下方法：
1.高效液相色谱法：该方法通过色谱分离、检测维生素E的吸收峰来确定维生素E的含量。

该方法操作简便、准确度高、灵敏度较好，适用于各种样品的测定。

2.比色法：该方法将维生素E与少量2,2'-二联苯酚在酸性条件下反应，生成具有紫色的吸收峰，根据吸光度测定维生素E的含量。

该方法操作简单、易于推广，但是因为受到其他物质的干扰较大，准确度较低。

3.氧化法：该方法将样品与氧气或过氧化氢反应，将维生素E氧化为各自二烯酸，再通过比色法或荧光法测定各自二烯酸的含量来确定维生素E的含量。

该方法准确度高、灵敏度好，但是操作相对复杂，需要一定的实验技巧。

总之，不同的测定方法适用于不同的样品和实验要求，应根据具体情况选择合适的方法进行测定。

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微乳液相色谱法同时测定4种脂溶性维生素杨建锐;黄丽娜;黄光亮;李宁【摘要】建立了种新的微乳体系,并成功地应用于微乳液相色谱法( MELC)快速分析脂溶性维生素VA、VD2、VD3和VE.通过对影响分离选择性的主要因素进行考察,得到最佳微乳体系组成为98％ (v/v)(50 g/L十二烷基硫酸钠(SDS)-10％(质量分数)正丁醇-1.0％(质量分数)正辛烷-84％水(质量分数))-2％ (v/v)乙腈.该微乳体系中,表面活性剂类型和浓度、油相正辛烷的含量、有机添加剂乙腈对脂溶性维生素的分离起到了重要的作用.以Venusil ASB C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm)为分离柱,流速为0.7 mL/min,检测波长为265 nm,柱温为40℃,VA、VD2VD3和VE在20 min内达到基线分离.4种脂溶性维生素的保留时间和峰面积的相对标准偏差(RSD)(n=5)分别小于2.3％和3.0％；VA、VD2 、VD3和VE的线性范围分别为22.0 ～ 88.0 mg/L、20.2～81.0 mg/L、24.3 ～97.2mg/L和125.0～500.0mg/L,相应的线性相关系数r2分别为0.999 6、0.999 4、0.999 8、0.999 8；检出限(S/N=3)分别为0.37、0.34、0.41和2.12 mg/L.本方法已成功应用于多维元素片(21)中VA与VE的测定,结果令人满意.%A novel system was developed for the rapid determination of fat-soluble vitamins A, D2, D3 and E with microemulsion liquid chromatography (MELC). The effects of operating parameters on the separation selectivity were investigated. The optimized microemulsion system consisted of 98% (v/v) of 50 g/L sodium dodecyl sulfate (SDS)-10% (w/w) n-butanol-1. 0% (w/w) w-octane-84% water (w/w) and 2% (v/v) acetonitrile. The type and content of surfactant, the contentof oil phase and the organic additive (acetonitrile) were found to play important roles in the separation of four fat-soluble vitamins. The fouranalytes were baseline separated within 20 min on a Venusil ASB C18, column (150 mm x4. 6 mm, 5 μm) with a flow rate of 0. 7 mL/min and the detection wavelength of 265 nm at 40 ℃. The relative standard derivations (RSDs, n = 5) of retention times and peak areas of the analytes were less than 2.3% and 3.0%, respectively. The linear ranges of vitamins A, D2, D3 and E were 22. 0 - 88. 0 mg/L, 20.2 -81.0 mg/L, 24. 3-97.2 mg/L and 125.0 -500.0 mg/L, with their correlation coefficients (r2) of 0. 999 6, 0. 999 4, 0. 999 8 and 0. 999 8, respectively. The detection limits (S/N = 3 ) were 0. 37, 0. 34, 0. 41 and 2.12 mg/L, respectively. This method was successfully applied to the determination of commercial Vitamins with Minerals Tablets (21 ) , and the results were satisfactory.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2011(029)010【总页数】5页(P995-999)【关键词】微乳液相色谱;微乳流动相;脂溶性维生素【作者】杨建锐;黄丽娜;黄光亮;李宁【作者单位】广东药学院,广东广州510006;广东药学院,广东广州510006;广东药学院,广东广州510006;广东药学院,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】O658维生素也称维他命，是动物体及人类正常物质代谢和某些特殊生理功能不可缺少的低分子有机化合物，主要参与各种酶的组成［1，2］。

维生素d常用的含量测定方法概述及说明1. 引言1.1 概述在我们的日常生活中，维生素D是一种非常重要的营养物质。

它对我们身体的健康具有至关重要的影响，包括促进骨骼生长和维持免疫系统功能等。

而为了确保我们获得足够的维生素D，我们需要了解食物和补充剂中维生素D的含量。

因此，测定维生素D的含量成为一个重要且必要的任务。

1.2 文章结构本文将对维生素D常用的含量测定方法进行概述和说明。

首先，我们将介绍维生素D在人体中的重要性和其主要功能、来源以及缺乏症状。

接下来，我们将详细介绍几种常见的测定方法，包括生化分析法、液相色谱法以及免疫学方法，并对每种方法进行说明。

最后，我们将总结文章内容并给出结论。

1.3 目的本文旨在提供对于测定维生素D含量方法的解释与说明，使读者能够更好地理解使用各种测定方法来确定食物或补充剂中维生素D的含量。

通过这样的了解，人们可以更好地制定膳食计划、购买合适的补充剂，并确保维生素D的充足摄入，维护身体健康。

2. 维生素D的重要性2.1 维生素D的功能维生素D是一种脂溶性维生素，对于人体健康至关重要。

最主要的功能是促进人体对钙和磷的吸收和利用。

它在骨骼发育和维持正常骨骼结构中起着关键作用。

此外，维生素D也参与免疫调节、神经系统发育、心血管健康以及肌肉功能等许多其他重要生理过程。

2.2 维生素D的来源维生素D可以通过两种方式得到：一是皮肤暴露于紫外线下，能够自主合成产生活性维生素D3；二是通过食物摄入。

食物中富含维生素D的主要来源包括脂类鱼类（例如鲑鱼、金枪鱼）、蛋黄、奶制品以及强化的食品（如强化谷物、橙汁等）。

2.3 维生素D的缺乏症状缺乏维生素D会导致骨骼健康问题。

儿童期间，严重缺乏可能引起佝偻病，表现为软弱的骨骼和变形。

在成人身上，维生素D缺乏可能会导致骨质疏松、易骨折等问题。

此外，维生素D缺乏还与免疫系统功能受到影响、肌无力、心血管疾病风险增加以及情绪障碍等多种其他健康问题相关联。

饲料添加剂中四种脂溶性维生素的检测1.摘要应用HALO柱，建立一种用反相高效液相色谱测定饲料添加剂中4种脂溶性维生素的分析方法。

方法采用HALO C18色谱柱（4.6×50mm，2.7 μm），以乙腈－水为流动相进行梯度洗脱，流速2 mL/min，检测波长采用波长时间程序，分别在251nm和280nm下检测，4种水溶性维生素7 min内完成分离检测。

维生素A乙酸酯、维生素K3线性范围0.8-80.0µ/mL，维生素D3、维生素E线性范围2.0-200.0µ/mL，测得维生素的检测限介于4×10-9g/mL~4×10-8g/mL之间(S/N>2)。

样品回收率为89%-100%这一方法操作简便快速、准确可靠，适用于饲料中脂溶性维生素的测定。

2.关键词反相高效液相色谱；脂溶性维生素；HALO柱。

3.范围本方法适用于饲料中脂溶性维生素的检测。

本方法适用于高效液相色谱法分析脂溶性维生素。

本方法可测定4种维生素，包括：维生素A乙酸酯、维生素D3、维生素E、维生素K3。

本方法测定各维生素最低检测限不高于4×10-8g /mL。

4.规范性引用文件GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。

5.定义5.1维生素维生素又名维他命，通俗来讲，即维持生命的物质，是维持生物体生命活动必须的一类有机物质，也是保持生物体健康的重要活性物质。

维生素在体内的含量很少，但不可或缺。

各种维生素的化学结构以及性质不同。

维生素是个庞大的家族，目前所知的维生素就有几十种，大致可分为脂溶性和水溶性两大类。

6.原理样品经提取后，用反相高效液相色谱进行色谱分析，采用外标法定量。

7.试剂与材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

7.1 乙腈：色谱纯7.2 超纯水：蒸馏水以0.22 um水系滤膜过滤即得。

7.3 标准品：维生素A乙酸酯、维生素D3、维生素E、维生素K3，纯度均大于等于97%。