左旋多巴验证方法

左旋多巴片微生物限度检查法验证
王火权;谭昕;金萍
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2012(024)005
【摘要】目的建立左旋多巴片微生物限度检查方法并对其进行验证.方法按照<中国药典>2010年版二部附录微生物限度检查法试验,采用阳性试验菌,用3种方法测定回收率.结果左旋多巴片具有抑菌作用,确定了左旋多巴片微生物限度检查的最佳操作方法.结论细菌总数测定用离心法和薄膜过滤法联用,霉菌和酵母菌总数测定采用常规法,控制菌检查用经验证的常规法.
【总页数】3页(P57-59)
【作者】王火权;谭昕;金萍
【作者单位】浙江杭州市萧山区第一人民医院,杭州,311200;浙江杭州市萧山区第一人民医院,杭州,311200;浙江杭州市萧山区第一人民医院,杭州,311200
【正文语种】中文
【中图分类】R969.4
【相关文献】
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左旋多巴验证方法左旋多巴是一种常用的药物，用于治疗帕金森病等运动障碍性疾病。

左旋多巴能够通过补充多巴胺来缓解症状，因此对于这类疾病的患者来说非常重要。

然而，左旋多巴也存在一定的副作用和限制使用的条件。

因此，对于左旋多巴的验证方法是非常重要的。

首先，验证左旋多巴的方法主要包括几个方面：动物实验、体外实验、人体实验和临床观察。

下面将详细介绍这些方法。

首先是动物实验。

动物实验是验证左旋多巴的一种常见方法，主要通过给动物注射左旋多巴来观察其对运动障碍的影响。

通常实验会选择小鼠或大鼠作为实验对象，注射剂量和频率也会有所调整，以模拟人类使用该药物的情况。

实验结果可以通过观察动物的运动行为、神经活动以及脑组织中多巴胺的含量来评估左旋多巴的疗效。

其次是体外实验。

体外实验通过将左旋多巴与相关的酶或细胞进行反应，来研究其在生物体内的作用机制。

例如，可以将左旋多巴与多巴胺转移酶进行反应，观察其酶活性的变化；或者将左旋多巴与多巴胺受体结合蛋白进行反应，以研究其对多巴胺受体的影响。

这些实验可以揭示左旋多巴的药理作用和分子机制。

第三是人体实验。

人体实验是验证左旋多巴的必要环节，通过在健康志愿者或患者身上进行实验，观察左旋多巴的药代动力学和药效学。

实验通常会进行相当长的时间，以评估药物的持续时间、剂量与效果之间的关系，同时还可以观察左旋多巴的不良反应和耐受性。

人体实验的结果对于确定剂量、频率以及用药方式提供了重要的依据。

最后是临床观察。

临床观察是验证左旋多巴疗效的重要手段，通过对相对较大的患者人群进行观察，来评估其在实际临床应用中的效果。

观察可以根据疗效评价量表和生活质量等指标进行，例如对运动功能的改善、症状减轻和生活质量的提高等。

同时还需注意不同患者对左旋多巴的反应差异，对于一些患者可能需要调整剂量或采用其他药物治疗。

综上所述，左旋多巴的验证方法主要包括动物实验、体外实验、人体实验和临床观察。

通过这些方法，能够全面评估左旋多巴的药效、剂量、频率以及不良反应，并为临床治疗提供依据。

国家标准《植物源产品中左旋多巴的测定高效液相色谱法》编制说明《植物源产品中左旋多巴的测定高效液相色谱法》标准起草组2020年5月15日目录（一）工作简况 (3)1、任务来源 (3)2、目的和意义 (3)3、协作单位 (4)4、标准编制过程和主要工作过程 (4)5、国家标准主要起草人及其所做的工作 (5)（二）国家标准编制原则和确定国家标准主要内容的论据 (5)1、标准编制原则 (5)2、确定国家标准主要内容的论据 (5)2.1、前处理条件的研究 (5)2.2、色谱条件的优化 (10)2.3、最大吸收波长的确定 (15)（三）主要试验（或验证）的分析、综述报告，技术经济论证，预期的经济效果 (15)1、实验材料及仪器 (15)1.1、试剂 (15)1.2、溶液 (15)1.3、仪器 (16)2、实验方法 (16)2.1、样品的前处理 (16)2.2、仪器参考条件 (16)2.3、测定 (16)2.4、结果分析 (17)3、方法的实验室内验证 (17)3.1、方法的线性范围、检出限和定量限 (17)3.2、方法准确度的验证 (18)3.3、方法精密度的验证 (20)3.4、方法稳定性的验证 (22)3.5、方法耐用性考察 (24)4.方法实验室间验证 (24)5、经济与社会效益 (24)（四）采用国际标准和国外先进标准的程度，以及与国际、国外同类标准水平的对比情况，或与测试的国外样品、样机的有关数据对比情况 (24)（五）与有关的现行法律、法规和强制性国家标准的关系 (25)（六）重大分歧意见的处理经过和依据 (25)（七）国家标准作为强制性国家标准或推荐性国家标准的建议 (25)（八）贯彻国家标准的要求和措施建议（包括组织措施、技术措施、过渡办法等内容） (25)（九）废止现行有关标准的建议 (25)（十）其他应予说明的事项 (25)（一）工作简况1、任务来源本标准根据国标委公布的2018 年第四批国家标准计划项目（国标委发函[2018] 83 号），本项目计划编号为20184466-T-469，名称为植物源产品中左旋多巴的测定高效液相色谱法。

高效液相色谱法测定左旋多巴片的有关物质目的：采用高效液相色谱法测定左旋多巴片的有关物质。

方法：采用依利特Spherisorb C18柱（5 μm，150×4.6 mm），以0.01 mol/L磷酸二氢钾缓冲液（含0.003 mol/L辛烷磺酸钠，pH3.0）-甲醇（84∶16）为流动相，检测波长280 nm，流速1.0 ml/min，柱温30℃。

结果：降解产物在该色谱条件下与左旋多巴分离良好。

结论：本方法用于测定左旋多巴片有关物质，方法简便，快速，结果准确。

[Abstract] Objective: To use an RP-HPLC method for determination of related substances in levodopa. Methods: The method was performed on Spherisorb column （5 μm，150×4.6 mm）, the mobile phase A was 0.01 mol/L KDP buffer (contain 0.003 mol/L Octane-1-sulfonic acid sodium salt, pH3.0), the mobile phase B was MeOH, the detection wavelength was 280 nm. The flow rate was 1.0 ml/min. Results: The related substances in levodopa were separated successfull. Conclusion: The Method is simple, accurate and good reproducibility.[Key words] Levodopa tablet; HPLC; Related substances左旋多巴是目前临床上治疗帕金森疾病最常用和最有效的药物之一，也是目前治疗大龄儿童弱视的主要药物[1]。

左旋多巴验证方法2方法2.1色谱条件分析柱：YMC PACK MB-ODS柱，2.1mm*150mm，3μm；柱温50℃；流动相：甲醇-0.5%甲酸溶液（30:70）；流速：0.15ml·min-1；进样量：5μL。

2.2质谱条件扫描方式MRM，雾化气10L·min-1，气帘气10L·min-1，碰撞气4 L·min-1，离子源电压5000V，离子源温度500℃。

检测通道1（L-dopa）198.3/152 m/z；检测通道2（IS）258.2/85.2m/z。

2.3血样处理取100μL人血浆，标准曲线样品或质控样品，加入30μL内标工作液（苄丝肼为10μg·ml-1的0.1%甲酸溶液，卡比多巴为1μg·ml-1的0.1%甲酸溶液），涡旋混匀10s，加入0.5%甲酸甲醇溶液300μL，4℃高速离心10min（14000r·min-1），吸取上清液100μL，涡旋混匀后，取5μL进样分析。

2.4标准曲线处理左旋多巴和IS的0.1%甲酸溶液浓度均为1.0mg·ml-1，稀释成不同浓度的工作液后，用空表血浆稀释配制成左旋多巴浓度为50、100、200、300、500、800、1000 ng·ml-1的标准人血浆样品供测定左旋多巴的标准曲线用。

样品分装于聚丙烯试管后，置-20℃避光保存，备用。

按“2.3”项下处理血浆样品，进样，记录色谱，以左旋多巴浓度为横坐标，左旋多巴与IS的峰面积比值为纵坐标，进行线性回归，求得回归方程。

2.5方法属性考察了6个不同来源的血浆样本和志愿者空白血浆对左旋多巴的和IS的峰面积的干扰和定量测定的影响。

2.6精密度和回收率测定在4批次验证试验中取标准质控样品（120、360和720 ng·ml-1），按“2.3”项处理，于1日内各测定5份，以后同法连续测定5 d，分别计算其日内、日间精密度和方法回收率。

左旋多巴兴奋试验原理
左旋多巴（Levodopa）是一种用于治疗帕金森病的药物。

它通过增加脑内多巴胺的水平来缓解帕金森病患者的症状。

左旋多巴兴奋试验原理是通过评估患者在服用左旋多巴后的症状改善程度来确认帕金森病的诊断。

兴奋试验通常分为两个阶段：单次剂量试验和长期用药试验。

在单次剂量试验中，患者会被要求在空腹状态下口服一定剂量的左旋多巴，并在一定时间间隔内进行评估。

医生会观察患者是否有明显的症状改善，例如肌肉僵硬、震颤和运动协调等方面的改善。

长期用药试验是指患者在一段时间内连续服用左旋多巴，以观察他们的症状是否持续改善。

这个过程可能需要几周或几个月的时间，医生会根据患者的症状反应和剂量调整来确定最佳的治疗方案。

左旋多巴兴奋试验的原理是基于左旋多巴对帕金森病患者症状的改善作用。

通过评估患者在不同剂量和时间点下的症状反应，可以确定左旋多巴对其是否有效，从而帮助医生做出准确的诊断和制定个体化的治疗方案。

双抗体夹心ELISA法定量检测左旋多巴沈鸿;肖红;李瑞【期刊名称】《实用药物与临床》【年(卷),期】2010(013)001【摘要】目的建立左旋多巴的酶联免疫定量分析方法 .方法以左旋多巴与栽体蛋白钥孔戚血蓝素偶联,制备免疫抗原Levodopa-KLH.采用杂交瘤技术制备的特异性抗左旋多巴单克隆抗体作为包被抗体,待测左旋多巴为夹心抗原,免疫抗原Levodopa-KLH免疲新西兰兔得到的多克隆抗体为检测抗体,建立了一种定量测定左旋多巴的双抗体夹心ELISA方法 .结果左旋多巴浓度在40～2 000 ng/mL范围内呈良好线性关系,Y=0.8367 X+0.3423,相关系数r2=0.993 3,检测限为20ng/mL.经方法学考核,批内、批闸变异系数分别为9.53%和12.77%,平均回收率为87.86%,与卡比多巴、多巴胺、异丙肾上腺索、去甲肾上腺素、肾上腺素、维生素C、5-羟色胺、金刚烷胺基本无交叉反应,健全性分析表明,人血清稀释倍数对该方法无影响,8 d连续检测标准曲线表明稳定性良好.结论这种定量检测左旋多巴的双抗体夹心ELISA方法 ,灵敏度高,重复性好.为左旋多巴研究提供了定量检测的方法 ,并为药代动力学、临床血药浓度监测提供备选方法 .【总页数】4页(P32-35)【作者】沈鸿;肖红;李瑞【作者单位】南京医科大学附属南京脑科医院研究所,南京,210029;南京医科大学附属南京脑科医院研究所,南京,210029;南京医科大学药学院,南京,210029【正文语种】中文【相关文献】1.MLCK定量检测的双抗体夹心ELISA方法建立 [J], 邸亚男;王晋星一;王猛;李兴;杨国珍;潘卫2.双抗体夹心ELISA定量检测IFNβ-HSA融合蛋白方法的建立 [J], 张立操;张莲芬;雷楗勇;陈其亮;陈蕴;许泓瑜;许正宏;张雁云;金坚3.转基因棉花中新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)双抗体夹心ELISA定量检测方法的建立[J], 王新桐;孙佳芝;高丽丽;杨正友;柴同杰4.大熊猫IgG双抗体夹心ELISA定量检测方法的建立 [J], 张焕容;海泉;王海瑞;侯蓉5.双抗体夹心ELISA定量检测IL-2-HSA融合蛋白 [J], 张红梅;李波;段作营;雷楗勇;金坚;李华钟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。