平菇液体菌种专用母种制作技术
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秀珍菇液体菌种制备关键技术秀珍菇(Pleurotusgeesteranus),属真菌门、担子菌纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属,是平菇的一种。
这个名称源于台湾,是商业味比较浓厚的一种凤尾菇。
秀珍菇子实体较小,柄长5~6厘米,菌盖直径小于3厘米。
秀珍菇的营养价值相当于牛奶,鲜菇中蛋白质含量丰富,人体必需的8种氨基酸齐全;又因为其外形悦目、鲜嫩清脆、味道鲜美,因而深受广大食客好评。
下面介绍一下秀珍菇液体菌种的制备技术。
一、工艺流程母种→原种(液体摇瓶)→生产种(罐体发酵)→料棒接种二、母种的制备1、母种培养基配方马铃薯(去皮)20%,葡萄糖2%,琼脂2%,水1000毫升,pH值5.5~6。
2、母种的制备及注意事项按配方准确称取原料,加热煮沸最后定容,分装试管,装入量约为试管长度的1/4~1/5,塞好棉塞。
使用高压灭菌锅灭菌,在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌半小时,注意一定要放净高压灭菌锅内的冷空气。
灭菌后,待培养基温度下降至60℃时,将成把的试管摆成斜面。
注意,不要让培养基粘湿棉塞。
要严格按照无菌操作规程进行接种,然后置于恒温箱中25℃左右恒温培养10~15天。
三、原种的制备1、原种培养基配方马铃薯(去皮)20%、麦麸3%、葡萄糖2%、蛋白胨3‰、磷酸二氢钾2‰、硫酸镁1‰。
2、原种的制备及注意事项马铃薯去皮切片后与麦麸一起煮沸20分钟,过滤定容,加入其它原料,全部溶解后装入三角瓶。
三角瓶在使用前除清洗之外,还要进行空灭,灭菌方法与常规灭菌试管培养基相同。
每个瓶中放入5~10粒玻璃球(直径0.5cm),用棉塞塞紧瓶口,再用牛皮纸包裹后扎紧。
使用高压灭菌锅灭菌,在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌45分钟。
冷却后进行无菌接种,然后置于25℃恒温培养箱中静置培养72小时。
摇床培养时,温度25℃,转速140转/分钟,培养时间72~96小时。
四、生产种的制备1、生产种培养基配方马铃薯(去皮)20%、麦麸2%、蛋白胨3‰、葡萄糖2%、磷酸二氢钾1‰、硫酸镁0.5‰、石膏0.5‰、琼脂2~3g、酵母膏0.5‰、消泡剂1‰。
平菇液体菌种制作技术及栽培试验
黄祖荫
【期刊名称】《食用菌》
【年(卷),期】1995(017)001
【摘要】平菇栽培中,采用液体菌种有以下优点:菌丝生长快、长势旺盛,菌龄整齐,省工节能,接种方便,提早出菇,产量较高。
现将我们的研究结果报告如下: 一、液体菌种的制备 (一)材料和方法①供试菌种:平菇P10,由广东省微生物研究所菌种厂提供。
②固体培养基:PDA培养基。
③液体培养基,玉米粉2%,葡萄糖1%,磷酸二氢钾0.2%。
酵母片少量。
pH6.2,1.5kg/cm^2高压灭菌30分钟。
④制备方法:试管母种接种后。
【总页数】2页(P9-10)
【作者】黄祖荫
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】S646.110.3
【相关文献】
1.平菇液体菌种的栽培试验 [J], 王淑华;孙桂芬
2.不同平菇菌株液体菌种栽培试验 [J], 陈相波;杨虎;张宁宁;孙来玉;刘洋
3.平菇液体菌种栽培菌株筛选试验 [J], 张玉林;谭永忠
4.湘北地区平菇液体菌种接种熟料大棚栽培技术 [J], 李友志(文/图);徐小平(文/图);
李盛(文/图);欧迎峰(文/图);郭向荣(文/图);李慕雯(文/图);王迪轩(文/图)
5.平菇液体菌种专用母种制作技术 [J], 王凤林;王涛
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怎样生产和使用平菇液体菌种?我国最早于20世纪60年代(陈幸美等,1963)试用深层培养(液体培养)平菇、香菇、草菇等15种食用菌的菌丝体,并取得成功。
其后,上海师范大学杨庆尧教授等进一步将其完善、定型,并在平菇、香菇等食用菌栽培上推广利用。
下面介绍一种浅层培养平菇液体菌种的工艺。
(1)准备菌种平菇母种若干支。
(2)配制培养基配方一:蛋白陈2.0克,酵母膏2.0克,硫酸镁0.5克,磷酸二氢钾。
.5克,磷酸氢二钾1.0克,葡萄糖20克,加清水至1000毫升。
配方二:蛋白豚2.0克,硫酸镁0.5克,磷酸二氢钾0.5克,硫酸钙0.1克,维生素B,10微克,加清水至1000毫升。
配方三:玉米粉60克,维生素B:10微克。
先将玉米粉加人适量开水中搅成玉米糊,然后加清水至1000毫升,加人维生素Bi。
将配制好的任何一种培养基分装于250毫升三角瓶中,每瓶50~100毫升,加棉塞或硅橡胶塞后置于121℃、0.11兆帕的条件下灭菌20分钟,冷却后接种。
(3)接种培养按无菌操作要求,每支母种接种4~6瓶。
接种后置于恒温摇床上,在25℃、125转/分钟条件下培养4~6天,合格者即为一级种子液。
(4)质量检查摇培过程中或摇培结束后,均应进行质量检杏.若培养液变混浊、有酸臭味,表示已被细菌污染;若培养液有咐味,菌丝球异常,表示已被霉菌污染。
将污染的培养物重新灭菌后倒掉,以免污染环境。
将具有平菇香味,菌丝球颜色白、球形正常的液体菌种镜检后立即应用于下一步生产,或置4℃条件下短期贮存。
液体菌种使用方法液体菌种(一级种子液)的用途有如下三种。
①用来扩大生产二级种子液,用量为5%(体积比),培养基配方及生产方法同上。
②用来扩大生产原种或栽培种(普通棉籽壳培养基或木屑培养基),每瓶(袋)用种量为5~10毫升。
可用刻度吸管(事先灭菌备用)或5毫升进样器作为接种工具,转接液体菌种。
③用作栽培种,每袋用种量为15~30毫升。
没有恒温摇床的单位,每天用人工振荡4~6次,每次30秒左右,也可收到同样的效果。
液体菌种培训教材(节选四)2010年4月10日三、液体菌种的制作过程及方法(一)试管种的生产:液体菌种对试管的纯度要求很高。
所以要自己会做试管种。
试管种的制作其实很简单,在我们要用种的前三个月,到市场上去看哪个菇符合要求,就买回来(也可以用自己保存的试管种均可)。
在接种箱内进行常规气雾(最好是高锰酸钾和甲醛)消毒,30分钟后,开始分离。
分离时先将用具消毒,然后用手把菇体分开,用镊子夹一小块菇肉(不同的菇取种位置不同),放到试管里。
塞上棉塞就行了。
这样的成功率一般在80%以上。
在菌丝生长阶段,要经常观察菌丝的生长情况。
对菌丝生长不整齐的,有污染的,全部淘汰。
只留下没什么问题的,长满试管后,再取特定部位进行转管(见实操)。
菌丝长到**cm时,从菌丝生长的尖端提取一小块,一般地认为,取****大小就可以了,不过从试验上看,提得**效果越好。
平菇一般提二次就可以了,提到五次,基本上与脱毒菌种效果差不多。
别的品种要多些,最多不超过五次,都可以达到提纯的目的。
(二)三角瓶专用母种生产:专用母种分固体和液体两种。
从生产技术上看,液体专用母种要难一些,是用电磁搅拌器或摇瓶机进行生产。
整个过程要4-7天时间,生产的液体种稍经加工就可以直接使用。
液体菌种专用母种的配方就是用PDA加富配方去掉琼脂。
用三角瓶盛装,在高压锅里121℃保持30分钟就行了。
待三角瓶的温度降到30℃以下时,在超净工作台或接种箱内进行接种。
马上就可以进行搅拌或摇瓶了。
固体种生产时间要长些,保存的时间也长,而且方便运输。
固体专用母种一般污染要严重一些,有的人污染率要达到20-30左右。
固体专用母种我们现在一般不用,污染率太高,而且不好发现,最糟糕的是容易堵枪。
配方是把木屑过20-40目的筛,用去掉琼脂的PDA配方拌料,在121℃高压下灭菌2小时,待温度下降到30度以下时,在超净工作台或接种箱内进行常规接种。
一般20多天可以长好。
具有运输和贮存方便等特点。
平菇液体菌种栽培关键技术平菇是侧耳属类的木腐菌,其蛋白质、微量元素含量较高,极具经济价值和食用价值。
目前,平菇的投料量、栽培面积、总产量和从业人数等都位于食用菌品种的前列。
究其主要原因有以下几点:一、价格低廉,口感鲜美,深受广大人民的喜爱。
二、对于从业人员要求低,一般人员都可以进入该行业。
三、平菇的栽培技术相较于其他的食用菌更加简单,投资少,对设备设施要求低。
也正因如此,用液体菌种栽培平菇的应用恐怕较少。
但作为几乎算是新兴的被大多数菌业从业者推崇的液体菌种,其具有“培育时间短”“纯度高”等特点对平菇从业者有很大帮助。
因为传统平菇生产中,固体菌种制作时母种、原种、栽培种一级级扩繁,耗时长,易退化,周年栽培时不同温型品种不易调配等问题比比皆是,甚至还存在一支试管种最多扩繁几次就不行等等的误区。
经过提纯复壮而生产的液体菌种没有级的分别,既可以作为母种接固态原种,也可以作为原种直接接固态栽培种,还可以作为栽培种直接接栽培袋。
所以应用液体菌种栽培平菇既可以直接应用液体菌种种植也可以液体转固体菌种再行种植,实际生产中因平菇种植管理较粗放,一般采用液体菌种接栽培种这种液体转固体的制种方法较为合适,这样既规避了因一罐菌种有问题导致一批菌袋栽培失败的风险,又可方便快捷地小批量制作不同季节不同温型的适量菌种,加之其生产周期短,在如今平菇市场价格瞬息万变的大环境下更显可贵。
实际生产中,利用身边可易取的饮水桶制作液体菌种,采用液转固生产菌种,先作为栽培种制作夏季、早秋熟料栽培袋,在一定时间内只要品种许可可继续选用栽培袋作栽培种继续栽培,较好了解决了种植过程时间长导致的菌种老化等问题,同时大桶菌种因容量小易操作,既容易解决不同品种的调配,还减小了因意外造成的损失,特别适合中小食用菌从业者应用液体菌种进行平菇生产。
平菇栽培一般需要在大棚内以保证平菇生长所需要的合适的温度、湿度和氧气。
大棚建造地方的选择应该在通风良好、取水方便以及四周无感染源的地方。
不同类型平菇菌种制作方法
棉籽壳菌种、麦粒菌种、枝条菌种、液体菌种在发菌、出菇以及接种成本、效率等方面都具有很大的差异,为提高种植户的经济效益,相关专家整理出了不同类型平菇菌种制作的方法,供广大种植朋友们参考。
1.麦粒种制备
配方:麦粒99%,石膏1%,麦粒先用温水加1%石灰浸泡至无白心,然后捞出加石膏拌匀装瓶(350g/瓶),126°C灭菌120min,冷却后无菌接种(每瓶接种量为四分之一平板母种),接种后25°C恒温培养至菌丝满瓶。
2.棉籽壳种制备
配方:棉籽壳85%,麸皮13%,石灰1%,石膏1%,原料预湿后拌料装袋(17cmX35cm聚丙烯袋,每袋装湿料0.9kg),料含水量为62%,料装袋后于126°C灭菌120min,两头接种,每个平板菌种接2袋。
接种后25°C恒温培养至菌丝满袋。
3.枝条种制备
杨木枝条(规格12cmx0.4cmx0.7cm)扎捆后放入桶内,再加1%石灰水浸泡24h以上,捞出沥水撒麸皮,使每根枝条均匀粘上麸皮后装袋。
枝条装袋前后各在袋底部和顶部铺一层棉籽壳种培养基。
装袋后126°C灭菌120min,冷却后一头接种(袋接种量为四分之一平板母种)。
接种后于25°C恒温培养至菌丝满袋。
4.液体种制备
培养基配方:葡萄糖20g、蛋白胨2g、硫酸镁0.5g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾0.5g、B族维生素100ug、蒸馏水100ml。
准确称量原料后煮沸定容,分装三角瓶后每瓶加玻璃珠10粒,121℃灭菌30min,冷却后接种,每瓶接打孔母种块10块,接种后置于转速160r/min、25°C的恒温振荡培养箱中培养7天。
平菇母种的制作一.平菇母种的制作平菇母种配方:土豆200克、白糖20克、琼脂20克、水1000毫升、蛋白胨3克、硫酸镁2克、维生素2克。
按配方精确称取,先将土豆去皮切片放入1000毫升水中,用文火煮沸20分钟左右。
然后过滤,加水再加热,先将琼脂、白糖、硫酸镁、维生素煮至全部溶化,用量杯量一下是否还够1000毫升,如不足,用开水补足。
趁热分装试管中,每管装12毫升,1000毫升可分装80---100支试管。
分装时要用长管漏斗,不要使培养基沾到试管口上,以免沾湿棉塞污染杂菌。
塞棉塞要用普通棉花,塞入试管要松紧合适。
然后,每10支试管用皮套捆成一小捆,每5小捆再捆成一大捆,棉塞用牛皮纸包好,放入高压锅中1.2公斤压力,灭菌30分钟,停火。
等压力表回零才能排气开锅,取出试管倾斜排放在桌面上,斜面试管有两种:原母种试管-----斜面长度应为管长的1/3,生产母种试管的斜面应为管长的1/2,冷却凝固后,取一些试管放入恒温箱中27--30度空白培养5天,经无菌观察,确认无杂菌,才能大量用于分离制种或转接生产母种。
接种要在严格的无菌条件下进行可以使用甲醛加高锰酸钾消毒法,接种后放入25度的恒温箱中培养7---10天,长满试管确认无任何杂菌,就可用于转接二级原种了。
二.平菇原种制作配方1:阔叶木锯沫80斤、玉米面25斤、克霉灵1两、白糖1斤、硫酸镁5两、磷酸二氢钾3两、石膏1斤、碳酸钙1斤。
含水量65%。
配方2:玉米芯80斤、稻糠15斤、夫子10斤、克霉灵1两、白糖1斤、硫酸镁5两、磷酸二氢钾2两、尿素3两、石灰2斤。
含水量65%。
配方3:阔叶木锯沫40斤、玉米芯40斤、豆饼粉10斤、玉米面10斤、白糖1斤、克霉灵1两、硫酸镁5两、菇丰素15克、二氢钾3两、碳酸钙1斤、石灰1斤。
含水量65%.配方4:玉米100斤,磷酸二氢钾0。
5斤,硫酸镁0。
5斤,白糖1斤,碳酸钙2斤,629消毒剂1瓶。
拌料:先将主料和夫子或玉米面、石膏、白灰干拌均匀。
平菇菌种的生产技术一、母种的培养:母种的培育是制种工作中的关键,它的优劣直接影响到原种、栽培种的质量好坏。
母种可以由孢子萌发而成,也可以从子实体组织分离或用平菇斜面的菌丝体移接扩大转管制作。
1、培养基:平菇母种分离和菌种保存宜用普通培养基(PDA)。
平菇菌丝在此培养基上生长速度较慢。
PDA配方和制作方法是:将马铃薯200克去皮切成蚕豆大小的块加1000毫升蒸馏水,用文火煮沸20-30分钟过滤取汁,加葡萄糖20克,琼脂15克,置于铝锅中加热,待琼脂充分溶化后搅匀,定容至1000毫升,趁热分装于试管中,每管装约12毫升,1000毫升可分装80---100支试管。
分装时要用长管漏斗,不要使培养基沾到试管口上,以免沾湿棉塞污染杂菌。
塞棉塞要用普通棉花,塞入试管要松紧合适。
然后,每10支试管用皮套捆成一小捆,每5小捆再捆成一大捆,棉塞用牛皮纸包好灭菌。
取出试管倾斜排放在桌面上,试管斜面长度应为管长的2/3,冷却凝固后,取一些试管放入恒温箱中27--30度空白培养10天,经无菌观察,确认无杂菌,才能大量用于分离制种或转接生产母种。
2、接种:用无菌操作从平菇子实体组织中分离黄豆粒大小的一块,接入PDA培养基的试管斜面上,置恒温箱或培养室(25℃±2℃)培育,3天后菌丝生长洁白、健壮,7天后菌丝长满斜面。
接种要在严格的无菌条件下进行。
如果没有出现杂菌,分离培养就算成功。
但该菌株是否优良,生产价值如何,还需出菇栽培试验。
二、原种的制备:由试管母种初步扩大繁殖到固体种(原种)。
由原种再扩大繁殖应用于生产,叫生产种或栽培种。
母种菌丝数量太少,在实际生产中必须把一级种扩大繁殖成二级种(即原种)才能满足生产种的需要。
好的原种菌丝密集、洁白、长势均匀、粗壮、呈棉毛状,有爬壁现象。
原种长满瓶之后,应立即扩大为栽培种,否则一旦营养耗尽,菌丝就会衰老甚至死亡。
原种的制作过程是:拌料(含水量60%左右)、装瓶、压实、打洞、洗瓶、用塑料膜包扎瓶口、灭菌、冷却、接种、培养。
液体菌种制作方法液体菌种的生产容器多种多样,制作方法法归纳起来主要有以下四种:1.电磁搅拌器法:此法比较简单,投资也比较少,200元左右就可进行生产。
从接种到菌丝长好要3-5天时间。
但也存在生产量小的缺点,一般只用于生产栽培种或生产发酵罐的专用母种。
生产过程:在无菌条件下将试管种接到三角瓶里,搅拌3-5天后得到大量的菌丝体。
2.摇瓶(床)震荡法:此法比较简单,接种简单,管理方便,生产量在几百毫升到几百升不等。
投资在几百至几千元钱之间。
但大型机噪音大,不能在有人居住的地方生产。
生产过程:在无菌条件下将试管种接到瓶内,摇动。
一般4-7天左右会出现大大量的菌球。
3.简易深层发酵(吹氧)法:此法分二种,一种是容器与过滤器一起灭菌的,容易些;另一种是容器与过滤器分开灭菌的,相对来说比较麻烦一些,主要是器材的联接要在无菌状态下进行,如果哪个环节出现问题,不能保证成功率。
投资也要3000多元。
生产过程:在无菌条件下将试管种接到容器内,通气培养4-7天,得到大量的菌球。
4.发酵罐法:是目前要求最高的一种,涉及到好多方面的知识,很难自学成才,而且投资也高,一般要10,000元以上。
如果生产规模大或是菌种场,建议用发酵罐比较好。
如果资金充足,生产小的也可以用发酵罐,因为省略了二级和三级种的制作过程,很快就会把投资收回来,而且可以减轻很多工作量。
生产过程:发酵罐注水、加料后,灭菌40-60分钟,冷却至28℃时,接入经过并瓶的专用母种,一般品种在3-5天内就可以完成培养。
时间的长短一是看罐的大小,二是看品种。
需要说明的是电磁搅拌器生产的液体菌种是菌丝团,而摇瓶机法、简易深层发酵(吹氧)法、发酵罐法生产出来的液体菌种一般是菌球。
平菇菌种的生产技术菌种包括母种、原种、栽培种一母种制作配方①马铃薯(去皮)200克,葡萄糖20克、琼脂20克,水1000毫升。
配方②小麦500克、蛋白胨2克、磷酸二氢钾3克,硫酸镁1.5克,维生素B13片,琼脂20克,水1000毫升。
以上配方均适应平菇菌丝生长,现介绍配方②制作方法:选择质量好的小麦500克,放进锅内,加水1500毫升,水烧开后,煮沸10分钟,然后用千层纱布过滤,取其汁液,若滤汁不足1000毫升,则加水补足,然后将琼脂、蛋白胨、糖等全部加入,加热至全部溶化后,分装试管,装量为试管长度的1/4,分装时,注意勿使试管口沾附培养基,装好后,立即用棉花塞口,用绳子每10支一捆缚好。
然后竖直放入高压锅内消毒,在1.2公斤/米3压力下,维持40分钟,灭菌后的培养基要趁热把试管倾斜,使之凝固成斜面,倾斜度以斜面达到管长1/2长度为宜,冷却后即成试管斜面培养基。
母种转扩必须在无菌条件下操作,以保证继代母种的纯正,一般科研单位出售的均为一级母种,它可以进行再次转管扩接以满足原种生产的要求,每支可扩接20—40支,但转管次数不宜过多,最多不能超过2次,以免削弱菌丝生活力和减低出菇率,无条件转扩的,也可引进一级母种直接转扩原种,则效果更好。
二原种制作⑴棉籽壳培养基棉籽壳100公斤、麸皮5—8公斤、复合肥1公斤、石灰0.5公斤、25%多菌灵,水135公斤由于棉籽壳吸水较慢,拌料后须整理成小堆,待4小时充分吸湿后,再进行瓶装,装好瓶后,在料中央打一个直径2cm、深3cm的洞穴,有利于接入的母种块加快萌发、生长,以棉籽壳为主培养基原种菌龄约为25天左右。
⑵小麦、棉籽壳培养基小麦40公斤、棉籽壳60公斤、石膏粉1公斤、水适量制种用的小麦要干燥、色鲜、无霉变,先将麦粒浸入1—2%的石灰水和0.2%多菌灵混合水溶液中,浸泡时,水面要高出麦粒10—15cm,浸泡时间大约需浸18—20小时,15℃左右时需浸30—36小时,将浸好的麦粒捞出,倒在干净的水泥地面上吹凉,待麦粒表面水分适度干后,可与棉籽壳、石膏粉等混合拌匀,接着装入瓶中。
平菇液体菌种基础知识平菇液体菌种基础知识一、平菇液体菌种标准及生产技术规程1.液体摇瓶菌种标准及生产技术规程。
(1)菌种斜面菌种作为待接菌种(2)摇瓶菌种标准:①外观形态:菌液澄清、棕黄色液体、菌丝呈放射状,“菌球”味感有水果香味、稍酸、菌球量占30%以上。
②镜检形态:美蓝单染色后观察,菌丝着色深、均匀、粗壮、分枝呈树枝状。
侧丝线形、顶端稍弯曲、生长点多见,可见大量椭圆形分生孢子,无杂菌污染,无明显空泡,有锁状联合。
(3)液体摇瓶生产技术规程:①工艺流程:母种一级摇瓶种子二级摇瓶发酵。
②培养基配方:蛋白胨1.5%、酵母膏0.1%、麦芽糖1%、葡萄糖2%、杨树木屑5%、硫酸镁0.075%、磷酸二氢钾0.15%、维生素B10. 01%、pH值6.5(消前)。
③制法:按配方规定量准确称取各药品,加一定量水加热溶解,定容至规定量,杨树木屑加水浸煮,温火下30~40min,用八层纱布过滤取滤汁,充分拌匀后分装于三角瓶中(500ml三角瓶装量至200ml)塞上棉塞(棉塞包扎纱布)上覆牛皮纸,置高压蒸汽灭菌锅灭菌(1kg/㎝2)30min,取出检验无杂菌污染备用。
④接种:在无菌条件下,按斜面与摇瓶之比为1:5(斜面比摇瓶)的比例接种。
一般一只斜面母种可接500 ml三角瓶2~3瓶。
取一支带长把的铁环,环上缠绕纱布后,吸足95%酒精,点燃后套在大三角瓶瓶口上,形成一道“火圈”,阻止杂菌侵入,将斜面母种挖块后,经“火圈”中心接入瓶内,每瓶不少于3块(0.6×0.5㎝/块)。
⑤培养:要求培养温度22℃±2℃,旋转式摇床的转速为170~200转/min,光线以黑暗为佳。
⑥培养终止时间为7d。
2.液体种子罐培养菌种及生产技术规程(1)菌种:使用平菇经摇瓶培养的液体菌种,选用新培养的摇瓶菌种,菌龄不超过7d,菌球不能中空,不能有太多空泡。
(2)种子罐培养菌种标准:①外观形态:基本同摇瓶种子,只是菌球量要占50%以上,pH值为6.5,若菌丝已经中空,表明菌球中部菌丝已老化,部分菌丝自溶。
生产食用菌液体菌种所需的专用母种的制作方法专利名称:生产食用菌液体菌种所需的专用母种的制作方法技术领域:本发明涉及生产食用菌液体菌种所需的专用母种及其生产方法。
背景技术:目前,食用菌的生产已由传统的固体菌种向液体菌种方向转变,而已知的液体菌种生产均采用“一级斜面母种→一级摇瓶种→二级摇瓶种→培养罐培养(液体菌种)”的方法生产,但用这样的方法生产液体菌种周期长、成本高、投资大、易污染、成功率低;而采用“液体专用母种”→培养罐培养(液体菌种)”的方法进行生产,同已知方法比周期短、成本低、技术简单、成功率高。
发明内容本发明的目的就是为了解决现有液体菌种生产存在的问题而提供生产食用菌液体菌种所需的专用母种。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现一、专用母种1、一级摇瓶种培养基按重量百分比①木腐菌培养基土豆20、红糖1.0-1.5、葡萄糖1.0-1.5、麸皮3、蛋白胨0.15-0.3、磷酸二氢钾0.2、硫酸镁0.1、维生素B110毫克/升、余量为水,PH值6.5-7.0②草腐菌培养基土豆20、红糖1.0-1.5、麸皮3.0-5.0、蛋白胨0.1-0.25、酵母膏0.1-0.2、磷酸二氢钾0.2、硫酸镁0.1、维生素B110毫克/升,余量为水,PH 值7.0-7.52、专用母种配方按重量百分比①木腐菌配方硬杂木屑67-77、麸皮20-30、红糖2、石膏1,PH 值自然②草腐菌配方硬杂木屑42-52、谷粒30-40、麸皮15、红糖2、石膏1,PH值6.5-7.5。
二、生产专用母种的方法1、生产一级摇瓶种①分装把配制好的培养基按每瓶200-400毫升的装量装入1000毫升的三角瓶中,盖上棉塞,绑上牛皮纸,②灭菌在121-126℃的条件下灭菌30分钟,③接种待培养基温度降至30℃以下时,即可接入经筛选、提纯、活化处理的一级斜面母种,每瓶接入2-3块0.5-1.0cm2的菌块,④培养将接完种的菌瓶在130-200转/分的回旋式摇床上振荡培养,在23℃-28℃条件下5-10天后制得一级摇瓶种,⑤菌种的筛选、提纯、活化将普通的一级斜面母种接在摇瓶中振荡培养7-10天,挑取悬浮在菌液上层、活力强壮、大小在2-3毫米左右的菌球接在斜面培养基上,待其长到试管的1/3-2/3即可使用,2、生产专用母种①原料处理将颗粒状木屑和麸皮过20目和40目筛,选用两种筛子之间的颗粒为原料,②拌料把原料按配比加水拌匀,含水量在60-63%,③装瓶把上述培养料装入500毫升的三角瓶中,压紧、压平,每瓶装料约450毫升或干料150克,盖上棉塞,绑上牛皮纸,在121-126℃的条件下灭菌90分钟,待温度降至30℃以下时备用,④接种用灭好菌的吸管把培养好的一级摇瓶种接入到盛装在三角瓶内灭好菌的固体培养基中,⑤培养在23-25℃的条件下避光培养,菌丝长满后即可。
平菇液体菌种制备注意事项平菇液体菌种制备是指将平菇菌丝培养在液体基质中,利用菌丝体的快速繁殖和代谢产物的积累,制备出用于平菇栽培的优质菌种。
下面是制备平菇液体菌种时需要注意的事项。
1. 菌种发酵基质的选择:菌种发酵基质选择是影响平菇液体菌种质量的重要因素。
通常选择具有丰富养分和菌丝繁殖的营养基质,如麦芽汁、玉米粉汁等。
基质应保持均匀细腻,酸碱度适宜,以利于菌丝的生长和发酵。
2. 高质量菌种的选择:取得菌株时应选择生长迅速、色泽均匀、菌丝发达的菌株作为菌种。
并在接种前对菌株进行无菌处理,确保菌种无杂菌的污染。
3. 菌种接种量的控制:接种量是控制液体菌种培养的重要参数之一。
通常情况下,接种量应保持在适宜范围内,过多会导致菌丝过密,不利于菌丝生长和产生代谢产物。
而接种量过少则会延长菌种培养周期,降低菌种的发酵效果。
一般情况下,接种量控制在10-20%左右。
4. 温度和湿度的控制:温度和湿度是液体菌种发酵中的两个关键因素。
在菌种发酵过程中,应根据平菇的生长特性,控制培养温度在20-25之间,湿度保持在60-70%左右,以保证菌种生长和酶的合成。
5. 混合发酵条件的掌握:在液体菌种发酵过程中,适当的混合可以提高菌株的吸收养分能力,促进菌丝生长和代谢产物的积累。
应根据菌种特性和培养设备的选择,合理掌握混合发酵的时间和强度。
6. 发酵过程的监控:菌种发酵过程中,应定期对发酵液进行监测,检测pH值、溶氧量、菌丝生长情况等指标,及时调整菌种培养环境,保证菌种培养的稳定和优质。
7. 发酵液的保存和质量检测:发酵结束后,应及时对菌种进行初步处理,如过滤、消毒等,然后储存于低温环境中。
同时,对保存的菌种进行质量检测,包括总菌数、活菌数、无杂菌污染等,确保菌种的优质和稳定。
总之,制备平菇液体菌种需要注意合理选择发酵基质、高质量菌株,控制接种量、温湿度,掌握混合发酵条件,监控发酵过程和保存时的处理和质量检测等。
只有在合理控制这些因素的情况下,才能制备出质量优良的平菇液体菌种,为平菇栽培提供有效保障。
平菇菌种制种的关键技术1、母种的生产平菇是用孢子分离和组织分离法获得菌丝体后扩大转试管制作母种。
1.1培养基:平菇母种分离和菌种保存宜用普通培养基。
平菇菌丝在此培养基上生长速度较慢。
扩大转管适宜用高粱粉培养基,配方和制作方法是:高粱粉30克,加1000毫升蒸馏水,加1%琼脂,置于铝锅中加热,待琼脂充分溶化后搅匀,分装于试管,灭菌接种。
平菇在高粱培养基上生长最快,长势均匀,菌丝旺盛。
高粱培养基适合于生产平菇母种。
菌种培养:分离后的平菇菌丝应放在最适宜的温度(25℃±2℃)培养并经过提纯、转管,一般培养7-10天菌丝可长满试管。
如果没有出现杂菌,分离培养就算成功。
但该菌株是否优良,生产价值如何,还需出菇栽培试验。
1.2母种扩繁:可以用碎玉米粒、稻子碎粒、高粱及其他一些谷物碎粒,在水中浸 12 小时后,捞出沥干水分,装入试管,一般装试管总长的 1/3,在料面上稍压一些,以防止料散开。
然后,擦净试管,塞上棉塞,用报纸包好棉塞,以7支试管为一捆,扎好后放入高压锅中,上汽至0.5Kg/cm2,放汽至 0,加热至1.5Kg/cm2时,保持压力1小时。
取出放凉后按常规方法在接种箱中转接,一般一支 1代母种扩繁 30管母种。
将接种后的母种放入室内,避光,尽量保持恒温 25℃,菌丝发满后 3天,即可使用。
2、原种的生产2.1母种菌丝数量太少,在实际生产中必须把一级种扩大繁殖成二级种(即原种)才能满足生产种的需要。
平菇原种培养基的配制和生产参照《制种技术》中的木腐菌制种的内容。
平菇菌丝在木屑培养基上一般原种20—25天可以满瓶。
在麦粒培养基上15—20天可以长满使用。
好的原种菌丝密集、洁白、长势均匀、粗壮、呈棉毛状,有爬壁现象。
原种长满瓶之后,应立即扩大为栽培种,否则一旦营养耗尽,菌丝就会衰老甚至死亡。
麦粒种更要及时使用。
2.2 原种制作:用玉米、稻子、高粱都可以,先将原料放入水中浸12小时,冬季用温水浸24小时,然后放入锅中加热煮30分钟,至谷物表皮胀开小缝而未开花烂开时捞出,凉干表面水分后,拌入2%, 的石膏或滑石粉或钙镁磷肥都可以。
液体菌种培训教材(六)液体菌种栽培平菇新技术液体菌种培训教材(节选六)2010年4月10日第二章栽培管理技术一、平菇栽培技术液体菌种栽培平菇新技术用固体菌种栽培平菇是一个非常成熟的技术,但在液体菌种栽培平菇上,有不少的人还在应用固体的技术,使液体菌种的先进性得不到发挥。
现将我培训基地液体菌种栽培平菇技术公开如下,不当之处还请各位同行批评指正。
一、液体菌种的制备(一)试管的制备从当地市场上选择外形、片数等形态特征都符合要求的鲜菇,购回。
在接种箱内进行组织分离。
选择生长旺盛、无污染的试管进行转管和提纯。
经过出菇试验后保存。
(二)三角瓶液体专用母种的制备选用PDA加富培养基,去掉琼脂,常规制作灭菌。
在无菌环境下接种后马上放到摇瓶机或搅拌器上,进行三角瓶液体专用母种的制作。
一般4天左右就可以完成三角瓶液体专用母种的生产。
(三)发酵罐液体菌种的制作1.发酵罐的注水与加料由于本公司的发酵罐不需要特殊清洗,只是用水冲一下就行,所以生产者要做的就是将水加到罐的视镜的三分之一处,启动电源,接通灭菌开关,当温度到达85度时,将培养料脱水后加入到罐内。
2.灭菌当培养料加完后,关闭加料口,灭菌。
当温度到125度时保持40分钟至1小时后,关闭灭菌开关。
3.冷却及接种加冷却水冷却罐体。
当温度降到30度以下时,将并瓶后的三角瓶专用母种在火焰圈的保护下进行接种。
4.培养接种后,由于在出厂时,罐的一切培养参数已经设定,所以不需要进行重新设定。
所做的只是注意观察培养期间液体的气味及颜色并及时采样。
一般3天就可以培养完成。
.二、栽培袋的制作常规制作平菇栽培料,用FS-2装袋机进行装袋。
注意,在装袋时,先将栽培袋的一头用绳系住。
装袋时,先定长。
这样装出来的袋是一样长的。
装袋时,当装满料的袋从装袋机内自动脱出时,人工将袋口窝在料孔内,并用塑料棒封口。
如果是发酵料,那灭菌4-5小时就可以了。
如果是纯熟料,那需要8小时灭菌。
灭菌完成后,放到冷却室冷却,当温度降到30度以下时就可以接种了。