平菇液体菌种专用母种制作技术

秀珍菇液体菌种制备关键技术秀珍菇（Pleurotusgeesteranus），属真菌门、担子菌纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属，是平菇的一种。

这个名称源于台湾，是商业味比较浓厚的一种凤尾菇。

秀珍菇子实体较小，柄长5～6厘米，菌盖直径小于3厘米。

秀珍菇的营养价值相当于牛奶，鲜菇中蛋白质含量丰富，人体必需的8种氨基酸齐全；又因为其外形悦目、鲜嫩清脆、味道鲜美，因而深受广大食客好评。

下面介绍一下秀珍菇液体菌种的制备技术。

一、工艺流程母种→原种（液体摇瓶）→生产种（罐体发酵）→料棒接种二、母种的制备1、母种培养基配方马铃薯（去皮）20％，葡萄糖2％，琼脂2％，水1000毫升，pH值5.5～6。

2、母种的制备及注意事项按配方准确称取原料，加热煮沸最后定容，分装试管，装入量约为试管长度的1／4～1／5，塞好棉塞。

使用高压灭菌锅灭菌，在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌半小时，注意一定要放净高压灭菌锅内的冷空气。

灭菌后，待培养基温度下降至60℃时，将成把的试管摆成斜面。

注意，不要让培养基粘湿棉塞。

要严格按照无菌操作规程进行接种，然后置于恒温箱中25℃左右恒温培养10～15天。

三、原种的制备1、原种培养基配方马铃薯（去皮）２０％、麦麸３％、葡萄糖２％、蛋白胨３‰、磷酸二氢钾２‰、硫酸镁１‰。

2、原种的制备及注意事项马铃薯去皮切片后与麦麸一起煮沸20分钟，过滤定容，加入其它原料，全部溶解后装入三角瓶。

三角瓶在使用前除清洗之外，还要进行空灭，灭菌方法与常规灭菌试管培养基相同。

每个瓶中放入5～10粒玻璃球（直径0.5cm），用棉塞塞紧瓶口，再用牛皮纸包裹后扎紧。

使用高压灭菌锅灭菌，在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌45分钟。

冷却后进行无菌接种，然后置于25℃恒温培养箱中静置培养72小时。

摇床培养时，温度25℃，转速140转/分钟，培养时间72～96小时。

四、生产种的制备1、生产种培养基配方马铃薯（去皮）２０％、麦麸２％、蛋白胨３‰、葡萄糖２％、磷酸二氢钾１‰、硫酸镁0.5‰、石膏0.5‰、琼脂２～３ｇ、酵母膏0.5‰、消泡剂１‰。

平菇液体菌种制作技术及栽培试验
黄祖荫
【期刊名称】《食用菌》
【年(卷),期】1995(017)001
【摘要】平菇栽培中,采用液体菌种有以下优点:菌丝生长快、长势旺盛,菌龄整齐,省工节能,接种方便,提早出菇,产量较高。

现将我们的研究结果报告如下: 一、液体菌种的制备 (一)材料和方法①供试菌种:平菇P10,由广东省微生物研究所菌种厂提供。

②固体培养基:PDA培养基。

③液体培养基,玉米粉2%,葡萄糖1％,磷酸二氢钾0.2%。

酵母片少量。

pH6.2,1.5kg/cm^2高压灭菌30分钟。

④制备方法:试管母种接种后。

【总页数】2页(P9-10)
【作者】黄祖荫
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】S646.110.3
【相关文献】
1.平菇液体菌种的栽培试验 [J], 王淑华;孙桂芬
2.不同平菇菌株液体菌种栽培试验 [J], 陈相波;杨虎;张宁宁;孙来玉;刘洋
3.平菇液体菌种栽培菌株筛选试验 [J], 张玉林;谭永忠
4.湘北地区平菇液体菌种接种熟料大棚栽培技术 [J], 李友志(文/图);徐小平(文/图);
李盛(文/图);欧迎峰(文/图);郭向荣(文/图);李慕雯(文/图);王迪轩(文/图)
5.平菇液体菌种专用母种制作技术 [J], 王凤林;王涛
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怎样生产和使用平菇液体菌种？我国最早于20世纪60年代（陈幸美等，1963)试用深层培养（液体培养）平菇、香菇、草菇等15种食用菌的菌丝体，并取得成功。

其后，上海师范大学杨庆尧教授等进一步将其完善、定型，并在平菇、香菇等食用菌栽培上推广利用。

下面介绍一种浅层培养平菇液体菌种的工艺。

(1)准备菌种平菇母种若干支。

（2)配制培养基配方一：蛋白陈2.0克，酵母膏2.0克，硫酸镁0．5克，磷酸二氢钾。

．5克，磷酸氢二钾1.0克，葡萄糖20克，加清水至1000毫升。

配方二：蛋白豚2.0克，硫酸镁0.5克，磷酸二氢钾0.5克，硫酸钙0.1克，维生素B，10微克，加清水至1000毫升。

配方三：玉米粉60克，维生素B：10微克。

先将玉米粉加人适量开水中搅成玉米糊，然后加清水至1000毫升，加人维生素Bi。

将配制好的任何一种培养基分装于250毫升三角瓶中，每瓶50~100毫升，加棉塞或硅橡胶塞后置于121℃、0.11兆帕的条件下灭菌20分钟，冷却后接种。

(3)接种培养按无菌操作要求，每支母种接种4~6瓶。

接种后置于恒温摇床上，在25℃、125转／分钟条件下培养4~6天，合格者即为一级种子液。

(4)质量检查摇培过程中或摇培结束后，均应进行质量检杏．若培养液变混浊、有酸臭味，表示已被细菌污染；若培养液有咐味，菌丝球异常，表示已被霉菌污染。

将污染的培养物重新灭菌后倒掉，以免污染环境。

将具有平菇香味，菌丝球颜色白、球形正常的液体菌种镜检后立即应用于下一步生产，或置4℃条件下短期贮存。

液体菌种使用方法液体菌种（一级种子液）的用途有如下三种。

①用来扩大生产二级种子液，用量为5％（体积比），培养基配方及生产方法同上。

②用来扩大生产原种或栽培种（普通棉籽壳培养基或木屑培养基），每瓶（袋）用种量为5~10毫升。

可用刻度吸管（事先灭菌备用）或5毫升进样器作为接种工具，转接液体菌种。

③用作栽培种，每袋用种量为15~30毫升。

没有恒温摇床的单位，每天用人工振荡4~6次，每次30秒左右，也可收到同样的效果。

液体菌种培训教材(节选四)2010年4月10日三、液体菌种的制作过程及方法（一）试管种的生产：液体菌种对试管的纯度要求很高。

所以要自己会做试管种。

试管种的制作其实很简单，在我们要用种的前三个月，到市场上去看哪个菇符合要求，就买回来（也可以用自己保存的试管种均可）。

在接种箱内进行常规气雾（最好是高锰酸钾和甲醛）消毒，30分钟后，开始分离。

分离时先将用具消毒，然后用手把菇体分开，用镊子夹一小块菇肉（不同的菇取种位置不同），放到试管里。

塞上棉塞就行了。

这样的成功率一般在80%以上。

在菌丝生长阶段，要经常观察菌丝的生长情况。

对菌丝生长不整齐的，有污染的，全部淘汰。

只留下没什么问题的，长满试管后，再取特定部位进行转管（见实操）。

菌丝长到**cm时，从菌丝生长的尖端提取一小块，一般地认为，取****大小就可以了，不过从试验上看，提得**效果越好。

平菇一般提二次就可以了，提到五次，基本上与脱毒菌种效果差不多。

别的品种要多些，最多不超过五次，都可以达到提纯的目的。

（二）三角瓶专用母种生产：专用母种分固体和液体两种。

从生产技术上看，液体专用母种要难一些，是用电磁搅拌器或摇瓶机进行生产。

整个过程要4-7天时间，生产的液体种稍经加工就可以直接使用。

液体菌种专用母种的配方就是用PDA加富配方去掉琼脂。

用三角瓶盛装，在高压锅里121℃保持30分钟就行了。

待三角瓶的温度降到30℃以下时，在超净工作台或接种箱内进行接种。

马上就可以进行搅拌或摇瓶了。

固体种生产时间要长些，保存的时间也长，而且方便运输。

固体专用母种一般污染要严重一些，有的人污染率要达到20-30左右。

固体专用母种我们现在一般不用，污染率太高，而且不好发现，最糟糕的是容易堵枪。

配方是把木屑过20-40目的筛，用去掉琼脂的PDA配方拌料，在121℃高压下灭菌2小时，待温度下降到30度以下时，在超净工作台或接种箱内进行常规接种。

一般20多天可以长好。

具有运输和贮存方便等特点。

平菇液体菌种栽培关键技术平菇是侧耳属类的木腐菌，其蛋白质、微量元素含量较高，极具经济价值和食用价值。

目前，平菇的投料量、栽培面积、总产量和从业人数等都位于食用菌品种的前列。

究其主要原因有以下几点:一、价格低廉，口感鲜美，深受广大人民的喜爱。

二、对于从业人员要求低，一般人员都可以进入该行业。

三、平菇的栽培技术相较于其他的食用菌更加简单，投资少，对设备设施要求低。

也正因如此，用液体菌种栽培平菇的应用恐怕较少。

但作为几乎算是新兴的被大多数菌业从业者推崇的液体菌种，其具有“培育时间短”“纯度高”等特点对平菇从业者有很大帮助。

因为传统平菇生产中，固体菌种制作时母种、原种、栽培种一级级扩繁，耗时长，易退化，周年栽培时不同温型品种不易调配等问题比比皆是，甚至还存在一支试管种最多扩繁几次就不行等等的误区。

经过提纯复壮而生产的液体菌种没有级的分别，既可以作为母种接固态原种，也可以作为原种直接接固态栽培种，还可以作为栽培种直接接栽培袋。

所以应用液体菌种栽培平菇既可以直接应用液体菌种种植也可以液体转固体菌种再行种植，实际生产中因平菇种植管理较粗放，一般采用液体菌种接栽培种这种液体转固体的制种方法较为合适，这样既规避了因一罐菌种有问题导致一批菌袋栽培失败的风险，又可方便快捷地小批量制作不同季节不同温型的适量菌种，加之其生产周期短，在如今平菇市场价格瞬息万变的大环境下更显可贵。

实际生产中，利用身边可易取的饮水桶制作液体菌种，采用液转固生产菌种，先作为栽培种制作夏季、早秋熟料栽培袋，在一定时间内只要品种许可可继续选用栽培袋作栽培种继续栽培，较好了解决了种植过程时间长导致的菌种老化等问题，同时大桶菌种因容量小易操作，既容易解决不同品种的调配，还减小了因意外造成的损失，特别适合中小食用菌从业者应用液体菌种进行平菇生产。

平菇栽培一般需要在大棚内以保证平菇生长所需要的合适的温度、湿度和氧气。

大棚建造地方的选择应该在通风良好、取水方便以及四周无感染源的地方。

不同类型平菇菌种制作方法
棉籽壳菌种、麦粒菌种、枝条菌种、液体菌种在发菌、出菇以及接种成本、效率等方面都具有很大的差异，为提高种植户的经济效益，相关专家整理出了不同类型平菇菌种制作的方法，供广大种植朋友们参考。

1.麦粒种制备
配方：麦粒99%，石膏1%，麦粒先用温水加1%石灰浸泡至无白心，然后捞出加石膏拌匀装瓶(350g/瓶)，126°C灭菌120min，冷却后无菌接种(每瓶接种量为四分之一平板母种)，接种后25°C恒温培养至菌丝满瓶。

2.棉籽壳种制备
配方：棉籽壳85%，麸皮13%，石灰1%，石膏1%，原料预湿后拌料装袋(17cmX35cm聚丙烯袋，每袋装湿料0.9kg)，料含水量为62%，料装袋后于126°C灭菌120min，两头接种，每个平板菌种接2袋。

接种后25°C恒温培养至菌丝满袋。

3.枝条种制备
杨木枝条（规格12cmx0.4cmx0.7cm）扎捆后放入桶内，再加1%石灰水浸泡24h以上，捞出沥水撒麸皮，使每根枝条均匀粘上麸皮后装袋。

枝条装袋前后各在袋底部和顶部铺一层棉籽壳种培养基。

装袋后126°C灭菌120min，冷却后一头接种（袋接种量为四分之一平板母种）。

接种后于25°C恒温培养至菌丝满袋。

4.液体种制备
培养基配方：葡萄糖20g、蛋白胨2g、硫酸镁0.5g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾0.5g、B族维生素100ug、蒸馏水100ml。

准确称量原料后煮沸定容，分装三角瓶后每瓶加玻璃珠10粒，121℃灭菌30min，冷却后接种，每瓶接打孔母种块10块，接种后置于转速160r/min、25°C的恒温振荡培养箱中培养7天。

平菇母种的制作一.平菇母种的制作平菇母种配方：土豆200克、白糖20克、琼脂20克、水1000毫升、蛋白胨3克、硫酸镁2克、维生素2克。

按配方精确称取，先将土豆去皮切片放入1000毫升水中，用文火煮沸20分钟左右。

然后过滤，加水再加热，先将琼脂、白糖、硫酸镁、维生素煮至全部溶化，用量杯量一下是否还够1000毫升，如不足，用开水补足。

趁热分装试管中，每管装12毫升，1000毫升可分装80---100支试管。

分装时要用长管漏斗，不要使培养基沾到试管口上，以免沾湿棉塞污染杂菌。

塞棉塞要用普通棉花，塞入试管要松紧合适。

然后，每10支试管用皮套捆成一小捆，每5小捆再捆成一大捆，棉塞用牛皮纸包好，放入高压锅中1.2公斤压力，灭菌30分钟，停火。

等压力表回零才能排气开锅，取出试管倾斜排放在桌面上，斜面试管有两种：原母种试管-----斜面长度应为管长的1/3，生产母种试管的斜面应为管长的1/2，冷却凝固后，取一些试管放入恒温箱中27--30度空白培养5天，经无菌观察，确认无杂菌，才能大量用于分离制种或转接生产母种。

接种要在严格的无菌条件下进行可以使用甲醛加高锰酸钾消毒法，接种后放入25度的恒温箱中培养7---10天，长满试管确认无任何杂菌，就可用于转接二级原种了。

二.平菇原种制作配方1：阔叶木锯沫80斤、玉米面25斤、克霉灵1两、白糖1斤、硫酸镁5两、磷酸二氢钾3两、石膏1斤、碳酸钙1斤。

含水量65%。

配方2：玉米芯80斤、稻糠15斤、夫子10斤、克霉灵1两、白糖1斤、硫酸镁5两、磷酸二氢钾2两、尿素3两、石灰2斤。

含水量65%。

配方3：阔叶木锯沫40斤、玉米芯40斤、豆饼粉10斤、玉米面10斤、白糖1斤、克霉灵1两、硫酸镁5两、菇丰素15克、二氢钾3两、碳酸钙1斤、石灰1斤。

含水量65%.配方4：玉米100斤，磷酸二氢钾0。

5斤，硫酸镁0。

5斤，白糖1斤，碳酸钙2斤，629消毒剂1瓶。

拌料：先将主料和夫子或玉米面、石膏、白灰干拌均匀。

平菇菌种的生产技术一、母种的培养：母种的培育是制种工作中的关键，它的优劣直接影响到原种、栽培种的质量好坏。

母种可以由孢子萌发而成，也可以从子实体组织分离或用平菇斜面的菌丝体移接扩大转管制作。

1、培养基：平菇母种分离和菌种保存宜用普通培养基（PDA）。

平菇菌丝在此培养基上生长速度较慢。

PDA配方和制作方法是：将马铃薯200克去皮切成蚕豆大小的块加1000毫升蒸馏水，用文火煮沸20-30分钟过滤取汁，加葡萄糖20克，琼脂15克，置于铝锅中加热，待琼脂充分溶化后搅匀，定容至1000毫升，趁热分装于试管中，每管装约12毫升，1000毫升可分装80---100支试管。

分装时要用长管漏斗，不要使培养基沾到试管口上，以免沾湿棉塞污染杂菌。

塞棉塞要用普通棉花，塞入试管要松紧合适。

然后，每10支试管用皮套捆成一小捆，每5小捆再捆成一大捆，棉塞用牛皮纸包好灭菌。

取出试管倾斜排放在桌面上，试管斜面长度应为管长的2/3，冷却凝固后，取一些试管放入恒温箱中27--30度空白培养10天，经无菌观察，确认无杂菌，才能大量用于分离制种或转接生产母种。

2、接种：用无菌操作从平菇子实体组织中分离黄豆粒大小的一块，接入PDA培养基的试管斜面上，置恒温箱或培养室（25℃±2℃）培育，3天后菌丝生长洁白、健壮，7天后菌丝长满斜面。

接种要在严格的无菌条件下进行。

如果没有出现杂菌，分离培养就算成功。

但该菌株是否优良，生产价值如何，还需出菇栽培试验。

二、原种的制备：由试管母种初步扩大繁殖到固体种（原种）。

由原种再扩大繁殖应用于生产，叫生产种或栽培种。

母种菌丝数量太少，在实际生产中必须把一级种扩大繁殖成二级种（即原种）才能满足生产种的需要。

好的原种菌丝密集、洁白、长势均匀、粗壮、呈棉毛状，有爬壁现象。

原种长满瓶之后，应立即扩大为栽培种，否则一旦营养耗尽，菌丝就会衰老甚至死亡。

原种的制作过程是：拌料（含水量60%左右）、装瓶、压实、打洞、洗瓶、用塑料膜包扎瓶口、灭菌、冷却、接种、培养。