3第六章-免疫比浊分析
- 格式:ppt
- 大小:1.43 MB
- 文档页数:46
免疫比浊法和免疫投射比浊法1.定义:(1)免疫比浊法:在一定量的抗体中分别加入递增量的抗原,经一定时间后形成抗原抗体复合物,用浊度计测量反应液体的浊度,并由此推算样品中的抗原含量。
(2)免疫投射比浊法:当光线通过一个浑浊介质溶液时,由于溶液中存在混浊颗粒,光线被吸收一部分,吸收的多少与混浊颗粒的量成正比,这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。
一般采用抗体对抗原定量的透射比浊法,称为免疫透射比浊法。
2.原理(1)免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。
其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊度。
当抗体浓度固定时,形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加,反应液的浊度也随之增加。
通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照,即可计算出检样中抗原的含量。
(2)免疫透射比浊法是抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。
当光线通过溶液时,可被免疫复合物吸收。
免疫复合物量越多,光线吸收越多。
光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。
利用比浊计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密度值也与抗原含量成正比。
本法较单向琼脂扩散试验和火箭电泳等一般免疫化学定量方法敏感、快速简便,但要求免疫复合物的数量和分子量达到一定高度,否则就难以测出。
3.关系4.免疫比浊法适用的仪器紫外可见分光光度计全自动生化仪全自动生化仪常见的检测方法终点法连续检测法比浊法均相酶免疫分析。
免疫比浊法原理
免疫比浊法是一种常用于生物化学和免疫学领域的实验方法,它通过测定抗原
与抗体结合后形成的免疫复合物的光学密度来定量分析抗原或抗体的含量。
这种方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点,因此在医学诊断、生物学研究等领域得到了广泛应用。
免疫比浊法的原理主要是利用抗原与抗体结合后形成的免疫复合物对光的散射
或吸收产生影响,从而实现对抗原或抗体含量的测定。
具体来说,当抗原与抗体结合形成免疫复合物后,会使溶液中的颗粒浓度增加,导致溶液的浊度增加,从而使溶液对光的散射或吸收增强。
通过测定溶液的光学密度,就可以间接地反映出抗原或抗体的含量。
在进行免疫比浊法实验时,首先需要将待测样品与相应的抗体进行反应,形成
免疫复合物。
然后利用光度计或比色皿等设备,测定样品溶液的光学密度。
通过比较待测样品与标准曲线的关系,就可以计算出样品中抗原或抗体的含量。
免疫比浊法在实际应用中具有广泛的适用性。
例如,在医学诊断中,可以利用
免疫比浊法来检测血清中特定蛋白质的含量,从而辅助诊断各种疾病。
在生物学研究中,可以利用免疫比浊法来分析细胞表面分子的表达情况,研究免疫应答过程等。
此外,免疫比浊法还可以用于药物的药效学研究、环境监测等领域。
总之,免疫比浊法作为一种常用的免疫学实验方法,具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点,适用于各种领域的抗原或抗体含量的定量分析。
通过对免疫复合物对光的散射或吸收进行测定,可以实现对抗原或抗体含量的准确测定,为医学诊断、生物学研究等领域提供了重要的实验手段。