血清钙检测

一、实验目的1. 掌握血清钙测定的原理和方法。

2. 熟悉血清钙测定仪器的操作和注意事项。

3. 了解血清钙的正常范围及其临床意义。

二、实验原理血清钙测定通常采用氧化还原滴定法，利用钙离子与钙指示剂形成的红色络合物，在特定条件下，与EDTA（乙二胺四乙酸）发生络合反应，当钙离子完全被络合时，红色络合物消失，滴定至溶液由红色变为纯蓝色即为终点。

三、实验用品1. 血清钙测定仪2. 血清样本3. 钙标准溶液4. EDTA标准溶液5. 钙指示剂6. 试剂瓶、移液管、滴定管、锥形瓶等四、实验步骤1. 准备工作a. 检查仪器是否正常，校准仪器。

b. 标准溶液的配制：根据说明书配制钙标准溶液和EDTA标准溶液，并分别标定其浓度。

c. 钙指示剂的制备：根据说明书配制钙指示剂。

2. 样本处理a. 将血清样本置于离心机中，以3000r/min离心10分钟，取上层血清。

b. 用移液管准确移取血清样本2.0mL，置于锥形瓶中。

3. 滴定a. 加入钙指示剂2滴，溶液呈红色。

b. 使用滴定管滴加EDTA标准溶液，边滴加边振荡，直至溶液由红色变为纯蓝色，即为终点。

c. 记录EDTA标准溶液的消耗体积。

4. 计算结果a. 根据消耗的EDTA标准溶液体积和浓度，计算血清钙的浓度。

b. 与正常参考范围进行比较，判断结果是否正常。

五、实验结果与分析1. 实验结果本实验中，血清钙的浓度为2.5mmol/L，正常参考范围为2.2-2.7mmol/L，因此本样本的血清钙浓度处于正常范围内。

2. 结果分析血清钙是人体重要的电解质之一，对维持神经、肌肉的正常功能以及血液凝固等生理过程具有重要作用。

血清钙浓度过高或过低均可能对健康产生不良影响。

本实验结果表明，该样本的血清钙浓度处于正常范围内，说明其生理功能正常。

六、实验讨论1. 影响血清钙测定的因素a. 样本采集和处理：血清样本采集过程中应避免溶血，确保样本质量。

b. 仪器和试剂：仪器性能和试剂质量对实验结果影响较大，应选用合格的产品。

血清钙Ca比色法测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理在碱性条件下，加入8-羟基喹啉能防止镁和铁的干扰钙离子的测定情况下，Ca2+和邻甲酚酞络合酮形成紫色复合物钙 +O-CPC 碱性环境钙－O-CPC复合物其钙离子与邻甲酚酞络合酮复合物的颜色与钙浓度成正比，可用利用其吸光度的变化来测定钙离子的含量。

3 标本采集3.1 病人准备：无特殊要求。

3.2 类型：血清、肝素血浆或尿液。

3.3 标本存放：血清/血浆稳定性：20～25℃保存可稳定7天；4～8℃保存可稳定3周；-20℃保存可稳定8个月。

尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定4天；-20℃保存可稳定3个月；对24h尿液标本加浓盐酸10ml，并加热标本，使草酸钙溶解。

3.4 标本运输：室温条件下运输3.5 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。

4. 实验材料：4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司CA试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014）4.1.1 试剂组成R1 氨基乙醇缓冲液:1mol/L，pH10.6R2 邻甲酚酞络合酮:0.3mmol/L;8－羟基喹啉:13.8mmol/L;盐酸:122mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：15－25°C下保存期限：见试剂标签上的有效期机上稳定期：42天。

4.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。

4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的Ca校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪。

6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

一、实验目的本次实验旨在通过邻甲酚酞络合酮比色法测定血清中的总钙含量，了解血清总钙水平在正常范围内的参考值，以及该指标在临床诊断中的应用。

二、实验原理邻甲酚酞络合酮比色法是一种测定血清总钙含量的经典方法。

该方法基于邻甲酚酞络合酮与钙离子在碱性溶液中形成紫红色络合物的原理。

当钙离子与邻甲酚酞络合酮反应时，形成络合物，溶液颜色由无色变为紫红色。

通过测定溶液的吸光度，可以计算出血清中的钙离子浓度。

三、实验材料1. 试剂：- 邻甲酚酞络合酮显色剂- 1mol/L AMP 碱性缓冲液- 显色应用液- 钙标准液（2.5mmol/L）- 8-羟基喹啉2. 仪器：- 酶标仪- 移液器- 离心机- 烧杯- 容量瓶- 试管3. 样本：- 血清样本四、实验方法1. 标准曲线绘制：- 准备一系列钙标准溶液，浓度分别为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9mg/dL。

- 将标准溶液分别加入试管中，加入等量显色应用液，混匀。

- 在酶标仪上测定吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样本测定：- 将血清样本离心，取上清液。

- 将上清液加入试管中，加入等量显色应用液，混匀。

- 在酶标仪上测定吸光度。

- 根据标准曲线，计算血清中的钙离子浓度。

五、实验结果1. 标准曲线绘制：- 标准曲线呈线性关系，相关系数R²=0.998。

2. 样本测定：- 血清样本中的钙离子浓度为2.5mg/dL。

六、实验讨论1. 邻甲酚酞络合酮比色法是一种简单、快速、准确的测定血清总钙含量的方法，在临床诊断中具有广泛的应用。

2. 在本次实验中，标准曲线绘制结果显示该方法具有良好的线性关系，可以满足实际测定的需求。

3. 实验结果显示，血清样本中的钙离子浓度为2.5mg/dL，处于正常范围内。

这表明该样本的钙代谢处于正常状态。

4. 在实验过程中，应注意以下几点：- 严格控制实验操作，避免误差。

- 使用新鲜试剂，保证实验结果的准确性。

血清钙正常值参考范围
血清钙由离子钙、蛋白结合钙和复合钙三部分组成。

正常值参考范围儿童2.25到2.67mmol/L，成人2.03到2.54mmol/L。

血清钙低于正常值可能出现甲状腺功能低下、低蛋白血症、维生素D缺乏症、手足抽搐等，血清钙高于正常值，有可能出现甲状旁腺功能亢进、多发性骨髓瘤等。

血清钙通常会呈现出游离状态；离子钙在体内是呈离子的形态存在。

如果在检查血清钙或离子钙时出现异常情况，还需要结合临床症状以及其他检查结果进行综合分析，明确具体病因并积极治疗。

如果血钙低影响孩子发育，可能会抽搐、睡觉不踏实、出虚汗、出现枕秃、头发稀疏、锌低、食欲下降、头发黄。

检查血钙的同时，也要查铁、锌、磷等微量元素。

血清钙的测定实验报告实验目的本实验的目的是通过测定血清中钙离子的含量来了解钙离子在人体内的水平，并探索血清钙的测定方法。

实验原理血清钙是指人体血液中钙离子的浓度。

钙离子是人体生理活动中不可或缺的重要离子之一，它在维持骨骼健康、神经传导、肌肉收缩和血液凝固等方面起着重要作用。

本实验采用比色法测定血清钙的含量，其基本原理是通过标准钙溶液的浓度与吸光度之间的关系来确定未知血清样品中钙离子的含量。

实验步骤1.收集血清样品：从实验对象中采集一定量的血液样品，并将其离心分离得到血清。

2.准备标准钙溶液：根据实验要求，制备一系列不同浓度的标准钙溶液。

3.制备试剂：按照实验所需，制备比色试剂和缓冲液。

4.预处理血清样品：将血清样品与缓冲液混合，并进行适当的处理，如去除蛋白质等。

5.吸光度测定：将标准钙溶液和处理后的血清样品分别置于分光光度计中进行吸光度测定，记录各个浓度的吸光度数值。

6.绘制标准曲线：将各个浓度的标准钙溶液的吸光度数值绘制成曲线。

7.测定未知样品：根据未知样品的吸光度值，利用标准曲线确定其钙离子的含量。

实验结果与讨论通过实验测定，得到了一系列标准钙溶液的吸光度数值，并绘制了标准曲线。

利用该曲线，我们可以确定未知血清样品中钙离子的含量。

在实验过程中，可能会遇到一些误差来源，如样品处理不完全、仪器读数误差等。

为了减小误差的影响，我们在实验中进行了多次重复测定，并计算了平均值和标准偏差。

根据实验结果，我们可以得出结论：血清钙的测定是通过比色法进行的，该方法简单、快速且可靠。

通过测定血清中钙离子的含量，我们可以了解人体内钙离子的水平，为相关疾病的预防和治疗提供参考依据。

实验总结本实验通过测定血清钙的含量，探索了血清钙的测定方法。

通过实验，我们学到了比色法测定血清钙的原理和步骤，并了解了钙离子在人体内的重要作用。

实验中我们还掌握了制备标准溶液、试剂的方法，并学会了使用分光光度计进行吸光度测定。

同时，在实验过程中我们认识到了误差来源的影响，并采取了相应的措施减小误差。

血清钙的检测方法及参考值-回复什么是血清钙？血清钙是指血液中的钙离子浓度。

钙是人体中最丰富的矿物质，它在许多生理过程中起着重要的作用，如肌肉收缩、神经传导、骨骼形成等。

血清钙的浓度需要保持在一定的范围内，过高或过低的血清钙水平都会对生命健康产生不利影响。

血清钙的检测方法血清钙的检测方法主要有离子选择性电极法和化学发光法两种。

离子选择性电极法是目前应用最广泛的方法之一，该方法利用一个专门设计的电极来测量钙离子的浓度。

化学发光法则是通过化学发光技术来测量血清中活性离子化钙的浓度。

离子选择性电极法的操作步骤如下：1. 首先，需要从受检者的静脉抽取一定量的血液样本，通常是使用护士或医生采集样本。

2. 抽取的血液样本需要放置在一支专用的试管或容器中，以便后续分析。

3. 将血液样本送往实验室进行离子选择性电极法测量。

实验室技术人员将样本注入电极仪器中。

4. 电极仪器通过测量电流的变化来确定血清中的钙离子浓度。

这些电流变化是由于钙离子与电极之间的化学反应产生的。

5. 实验室技术人员将测试结果记录下来，并报告给医生或患者。

通常，报告会显示血清钙的浓度，以及参考值。

化学发光法的操作步骤如下：1. 与离子选择性电极法一样，需要从静脉抽取血液样本，并将其放入试管或容器中。

2. 实验室技术人员将样本加入特定试剂，以促使发光反应发生。

3. 试管中的样本在发光仪器中激发，产生特定的光信号。

4. 光信号被发光仪器检测并转换成血清钙的浓度值。

5. 测量结果被记录下来，并报告给医生或患者。

血清钙的参考值血清钙的参考值是指正常人群中血清钙的浓度范围。

这些参考值可能因性别、年龄和健康状况而有所不同。

一般而言，成年人的血清钙参考范围为2.15-2.55mmol/L或8.6-10.2mg/dL。

对于儿童和青少年，血清钙的参考值可能稍有不同。

儿童和青少年的血清钙水平通常略高于成人的参考值，这是因为他们正处于生长发育阶段，骨骼形成和维护所需的钙量较高。

血清钙的测定方法血清钙测定是指通过实验室检测血液中的钙离子浓度的方法。

测定血清钙浓度可以帮助医生对某些疾病、症状进行诊断和治疗方案的制定。

目前常用的血清钙测定方法主要有光度法、电极法和离子选择性电极法。

光度法是一种常用且经济高效的血清钙测定方法。

其原理是利用光的吸收原理，通过测量吸光度来确定样本中钙离子的浓度。

具体操作是将待测血清样本与染色剂反应，在特定波长下测量吸光度，通过与标准曲线比较，即可得知血清样本中钙离子的浓度。

电极法是一种快速、精确的测定血清钙浓度的方法。

它利用电极与血液样本中的离子发生作用，通过测量电位差来推测钙离子的浓度。

电极法有两种常用的实现方式：直接电位法和指示电位法。

直接电位法是在测定中直接使用玻璃电极或计时示波器进行测量，可以得到一个稳定的、与测量离子浓度成正比关系的电位差。

而指示电位法是利用称为指示电极的电极来测定离子浓度的变化。

通过测量这些电位差，可以得到钙离子的浓度。

离子选择性电极法是一种常用的血清钙测定方法。

它利用一种称为离子选择性电极的特殊电极，通过与待测样本中的离子发生特异交换，以测定离子浓度。

离子选择性电极由膜电极和参比电极组成，其中膜电极用于选择性地吸附和测定离子。

在血清钙测定中，通常采用氯化钙和乙二胺四乙酸四钠制备的电极。

离子选择性电极法精密度高、重现性好，是目前公认的准确度最高的测定方法之一。

此外，还有一些其他的血清钙测定方法，如原子吸收光谱法、质谱法等。

这些方法在一定程度上也可以用来测定血清钙浓度，但通常比较复杂、昂贵，常用于实验室研究和专业领域中。

总结来说，测定血清钙浓度的方法有光度法、电极法、离子选择性电极法和其他一些方法。

不同方法有不同的原理和应用范围，医生可以根据需要选择合适的方法进行血清钙测定。

当然，在进行任何测定之前都需要对仪器进行校准，以确保测定结果的准确性和可靠性。

总钙测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清总钙测定(缩写CA)；组合项目申请：血电解质全套测定组合。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本应记录采集时间、送检时间、接收时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下至少稳定24h，普通冰箱中（2～8℃）稳定一周，-20℃冰冻条件下可稳定一年。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

2.3.2不建议采集抗凝血标本，尤其不能使用EDTA，柠檬酸钠，氟化钠或草酸盐抗凝剂。

3方法原理本法基于金属色原偶氮胂Ⅲ的比色测定，在碱性条件下，游离的偶氮胂Ⅲ在溶液中呈玫瑰红色，与钙络合后形成紫蓝色偶氮胂Ⅲ-Ca2+复合物，在650nm波长比色测定。

复合物显色强弱与标本中钙浓度成正比。

4 试剂及其他用品4.1试剂：偶氮胂Ⅲ法测定钙试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。

4.2试剂盒保存：保存于2～25℃，不开盖情况下至标签的失效期。

开盖后放于仪器的试剂仓冰箱中稳定30天。

钙测定试剂盒说明书（微板法）一、测定原理样本中钙离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝（MTB ）结合，生成蓝色络合物；通过比色与同样处理的钙标准进行比较，可计算出样本中钙的含量。

二、试剂盒组成（96T ）三、样本要求1、按常规检验要求采集处理样本，样本可以使血清、血浆、组织匀浆及细胞、培养上清液。

2、样本2~8℃可稳定3~4天，-20℃一下可以稳定数月。

四、测定步骤（一）血清（浆）操作步骤： 1、操作表：混匀，静置5分钟后，波长610nm ，酶标仪比色，测定个孔OD 值。

注：实验前可先将96孔板用酶标仪读取并记录空板OD 值，以保证实验的精确度。

2、计算公式：样品测试前稀释倍数标准品浓度（空白孔吸光度标准孔吸光度空白孔吸光度测定孔吸光度血清（浆）中钙含量（⨯⨯=)/1--)/mm L mmol L ol 五、注意事项1、实验应避免钙污染，建议最好用一次性96孔板操作2、严重溶血、黄疸或脂血对结果又影响。

3、制备组织匀浆时，应选用去离子水作为匀浆介质，避免钙污染。

钙标准曲线的制备1、前处理：用去离子水将2.5mmol/L 钙标准液稀释成不同浓度：0.0625mmol/L、0.125mmol/L、0.25mmol/L、0.5mmol/L、0.625mmol/L、1mmol/L、2mmol/L。

2、操作表：空白孔标准孔测定孔去离子水（ul）101mmol/L 钙标准液（ul）10血清（浆）（ul）10工作液Ⅰ（ul）250 250 250混匀，静置5分钟后，波长610nm，酶标仪比色，测定个孔OD值。

注：实验前可先将96孔板用酶标仪读取并记录空板OD值，以保证实验的精确度。

3、测定结果：标准品浓度（mmol/L）测定OD值绝对OD值0 0.2428 00.0625 0.249 0.00620.125 0.259 0.01620.25 0.2809 0.03810.5 0.3195 0.07670.625 0.3376 0.09481 0.3918 0.14902 0.5352 0.29244、绘图：血清（浆）样本钙测定一、实验准备：1、实验器材：移液枪（100~1000ul、2~20ul）、1mlEP管、5mlEP管、酶标仪2、实验药品：钙测定试剂盒、去离子水、NaCl、电子天平、称量纸二、实验步骤：1、生理盐水的配置：称取9gNaCl置100ml烧杯，加入100ml蒸馏水，溶解即得。

血清钙的检测方法及参考值
一、检测方法
血清钙的检测方法有多种，包括以下几种：
1. 原子吸收光谱法：该方法是通过测量钙原子对特定光波的吸收来测定血清钙的浓度。

该方法具有较高的灵敏度和准确性，是目前应用最广泛的血清钙检测方法之一。

2. 化学分析法：该方法是利用化学反应来测定血清钙的浓度。

常用的化学分析法包括络合滴定法、沉淀法等。

该方法操作简便，但准确度相对较低。

3. 荧光光度法：该方法是利用荧光物质与钙离子的结合，通过测量荧光强度来测定血清钙的浓度。

该方法灵敏度高，但易受荧光物质的干扰。

4. 电化学分析法：该方法是利用电化学反应来测定血清钙的浓度。

常用的电化学分析法包括离子选择电极法、循环伏安法等。

该方法操作简便、快速，但准确度有待提高。

二、参考值
根据不同年龄和性别，血清钙的参考值略有差异，具体如下：
1. 成人：血清总钙的正常参考值为
2.1-2.6mmol/L。

2. 儿童和青少年：血清总钙的正常参考值为1.1-1.3mmol/L。

3. 孕妇：血清总钙的正常参考值与成人相同，为2.1-2.6mmol/L。

4. 男性成年人：血清离子钙的正常参考值为0.95-1.05mmol/L。

5. 女性成年人：血清离子钙的正常参考值为0.9-1.0mmol/L。

需要注意的是，以上参考值可能因不同实验室和试剂而有所差异。

因此，在解读血清钙检测结果时，应结合具体情况进行分析。