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动物组织基因组DNA提取试剂盒（心、肝、肌肉）（磁珠法）使用说明货号：DM1702规格：50T保存：磁珠可以在室温下（15-25℃）运输，但请在4℃冰箱中保存，禁止冻存。
其余试剂可以室温保存，更长时间的保存可置于2-8℃。
复检期1年。
试剂盒内容：试剂盒组成DM1702-50T裂解液S1-233ml裂解液S2 2.2ml漂洗液1（空瓶）洗脱液 5.5ml磁珠 1.4ml×2说明书1份产品说明：动物组织基因组DNA提取试剂盒（心、肝、肌肉）（磁珠法）采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统，可从样品中分离纯化高质量基因组DNA。
特殊包被的磁珠在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的DNA，能够达到快速分离纯化DNA的目的。
整个过程安全、便捷，提取的DNA纯度高。
使用本试剂盒纯化的基因组DNA的OD260/OD280均在 1.7-1.9之间，可以应用于各类下游分子生物学实验。
使用前请先在漂洗液中配置70%乙醇。
若裂解液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min溶解沉淀，摇匀后使用。
操作步骤：1.裂解取适量的动物组织样本（肌肉组织≤50mg；心脏≤30mg；肝脏≤20mg；）用液氮研磨成粉末，并迅速转移到已加入600μl裂解液S1-2、40μl裂解液S2的EP管中，吹打或震荡混合均匀。
将EP管置于65℃水浴25～30min。
待冷却到室温，加入400ul氯仿，剧烈震荡15s，静置3min，12000rpm4℃离心5-10min。
2.结合尽量取净上清于新的1.5mL EP管中，加入等体积的异丙醇以及振荡混匀的50μL磁珠，颠倒混匀1min，静置3min。
将EP管置于磁铁上进行磁分离，吸弃废液（吸净管盖及管底残液）。
3.洗涤加入600μL漂洗液（使用前请预先配置70%乙醇），轻柔混匀1-2min，将EP管置于磁力架上进行磁分离，吸净管盖及管底的残液；重复本步骤一次。
动物基因组DNA的提取[实验原理]在EDTA和SDS等去污剂存在下，用蛋白酶K消化细胞，随后用酚抽提，可以得到哺乳动构基因组DNA，用此方法得到的DNA长度为100-150 kb，适用于L嘴菌体构建基因组文库和Southern分析。
通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤，以及相对分子质量较大的DNA 的琼脂糖凝胶电泳技术。
[仪器、材料与试剂](一)仪器1.台式离心机2.玻璃匀浆器3．高压灭菌锅4．恒温水浴(二)材料1．1.5mL微量离心管2．微量取样器和吸头3．无菌过滤器(一次性)4．10 mL注射器5．鼠肝6．三羟甲基氨基甲烷(Tris)7.十二烷基硫酸钠(SDS)8．乙二胺四乙酸(EDTA)9．蛋白酶K10．RNA酶11．DNA相对分子质量标准物，DNA／EcoRI+HindⅢ相对分子质量标准物(三)试剂1、1.5 mol／L NaCl2、0.5 mol／L Tris·HCI pH8.03．0.5 mol／L EDTA pH8.04．3 mol／L NaAc pH5.2以上均高压灭菌。
5．蛋白酶K 10mg／mL配好后用一次性过滤器过滤，-20 保存(教师配制)6.组织匀浆液100mmol／LNaCI，10mmol／LTris·HCl(pH 8.0)，0.25mmol／LEDTA(pH8.0)7．酶解液200mmol／LNaCI，20mmol／L Tris·HCI(pH 8．O)，50mmol／LEDTA(PH 8.0)，200~g／mL蛋白酶K，1％SDS8．无DNA酵的RNA酶：将胰RNA酶溶解于10mmol／L Tris.HCI(pH7.5)、15 mmol ／L NaCl溶液中，浓度l0mg／mL，于100℃水浴处理15min，以降解DNA酶，缓慢冷却到室温，-20℃保存9．TE缓冲液：10mmol／LTris·HCl(pH8.0)，25 mmol／LEDTA(pH8.0)10．平衡酚(pH8.0)：氧仿：异戊醇=25：24：1<体积比)11．氧仿：异戊醇=24：l(体积比)12．5xTBE 5．4gTris，2．75g硼酸2mL 0.5mol／L EDTA(pH8.0)，加水到100mL；13．6x上样缓冲液o．25％溴酚蓝，40％(W／V)蔗糖水溶液14．λDNA／EcoRI+／HindⅢ相对分于质量标准物片段(bP)21 227，5148，4 973，4 268，3 530，2 027，1 904，1 584，1 315，947，831，564，125[实验步骤]本实验在无液氮的条件下，铡备鼠肝DNA，与有液氮条件下相比，产量和质量都有所下降。
磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒MagBeads Tissues Gen DNA Extraction Kit【目录号】TGDE-5005、TGDE-5030【运输条件】2~25℃；【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃，其它组分室温保存；【试剂盒组成】【注意事项】1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心，使用前请充分混匀；2. 使用前请检查裂解液1和裂解液2是否出现结晶，如有结晶请置于65℃水浴重新溶解；3. 在使用本试剂盒前，请用户自配80%乙醇；4. 如需去除RNA请自备RNase A溶液（100mg/mL, 分散液10mM Tris-HCl,1mM EDTA, pH值8.0）；5. 本操作指南经本公司反复验证，使用前请仔细阅读，并且按照操作指南的建议操作。
磁珠法·自动化：为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案【产品简介】本产品适用于从各种动物组织以或者细胞样本中提取基因组DNA。
试剂盒采用具有独特分离作用的纳米磁珠和独特的缓冲液系统。
特殊技术包埋的纳米磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力，而当条件改变时可以释放所吸附的核酸，从而达到快速分离纯化核酸的目的。
本试剂盒提取所得基因组DNA产物得量高、纯度好，适用于各种下游分子生物学实验，如：酶切、PCR、QPCR、文库构建、Southern 杂交、芯片检测和高通量测序等。
本试剂盒可配合核自动化酸提取仪或工作站使用，实现高通量操作。
【试剂盒说明】【自备仪器、耗材及试剂】仪器自动版研钵（或组织研磨机、匀浆机）、英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、80%乙醇、异丙醇、液氮。
手动版研钵（或组织研磨机、匀浆机）、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、真空干燥箱、80%乙醇、异丙醇、2.0mL离心管、离心管配套用磁力架、液氮。
【仪器自动版操作步骤】本操作以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例，同步可完成32个样本的提取。
基因组DNA小量抽提试剂盒(离心柱式)产品编号产品名称包装D0063 基因组DNA小量抽提试剂盒(离心柱式) 50次产品简介：碧云天的基因组DNA小量抽提试剂盒(离心柱式) (Genomic DNA Mini Preparation Kit with Spin Column)是目前世界上最先进的基因组DNA抽提试剂盒之一。
可以抽提动物组织、鼠尾、培养细胞、细菌、酵母、动物血液、昆虫以及固定组织的包括基因组DNA在内的总DNA。
一个试剂盒通过说明书中提供的不同操作方法，可以抽提除植物样品外的几乎所有样品中的总DNA。
样品首先被蛋白酶K消化，随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液，然后加入到纯化柱内。
通过高速离心，使DNA 在穿过纯化柱的瞬间，结合到纯化柱上，随后通过两次洗涤去除各种杂质，最后通过洗脱液把DNA洗脱下来。
整个过程无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，样品裂解后仅需约15分钟即可完成。
通过本试剂盒纯化得到的基因组DNA的长度最长可达50kb左右，平均为30kb左右，最短为100bp的DNA也可以被纯化。
如需获得更长的基因组DNA，对于哺乳动物样品，包括组织或细胞等，可以使用碧云天生产的(D0061)哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒。
通过本试剂盒获得的总DNA，OD260/OD280的范围通常在1.7至1.9之间。
本试剂盒可以抽提少至数百个细胞，多至25mg组织、0.5-1cm鼠尾、500万个培养细胞、20亿个细菌或5000万个酵母。
样品用量过多，反而会影响抽提效果。
如果待抽提样品的DNA含量小于5ng，建议加入适当量的carrier DNA，例如poly-dT 或其它对后续实验没有干扰的DNA，也可以加入适当量的carrier RNA，例如yeast RNA等，以改善抽提效果。
本试剂盒的标准操作步骤抽提得到的总DNA会含有少量RNA，但如果按照可选步骤加入RNase A，就可以获得不含RNA 的高纯度总DNA。
AxyPrep 动植物基因组DNA小量试剂盒本试剂盒采用独特的裂解和相分离技术，结合DNA制备膜选择性地吸附DNA的方法达到纯化基因组DNA的目的。
每次制备可获得多至20 μg的基因组DNA。
用于PCR、Southern印迹分析、RAPD、RFLD 等分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性说明书，耗材：DNA制备管、小量滤器、2 ml 离心管、1.5 ml 离心管。
RNase A：50 mg/ml，室温保存。
Buffer G-A：裂解液，室温密闭贮存。
Buffer G-B：蛋白去除液，室温密闭贮存。
Buffer DV-A：Buffer DV的制备液，请参照实验准备Buffer DV的配制方法配制，室温密闭贮存。
Buffer DV：相分离液，室温密闭贮存。
Buffer BV：DNA结合液，室温密闭贮存。
Buffer W1：洗涤液，室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate：去盐液。
使用前，按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇，混合均匀，室温密闭贮存。
可用100%乙醇或95%乙醇。
Eluent：2.5 mM Tris-HCl，pH 8.5，室温密闭贮存。
二、注意事项Buffer G-A、Buffer G-B、Buffer BV和Buffer W1含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。
若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
三、实验准备1. 第一次使用时，在Buffer W2 concentrate中按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇并混合均匀。
2. 制备Buffer DV：取2 ml Buffer DV-A，125 ml异丙醇，75 ml异丁醇，加入提供的250 ml试剂瓶中，混合均匀。
3. 4℃预冷Buffer DV。
4. 准备65℃水浴。
5. 使用前检查Buffer G-A和Buffer G-B是否有沉淀析出，若出现沉淀，请于65℃水浴加热至沉淀完全溶解后再使用。
哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒产品简介：碧云天生产的哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒(Mammalian genomic DNA extraction kit)，采用了经典的蛋白酶K处理法，可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA。
用本试剂盒抽提到的基因组DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增及基因组DNA文库的构建等。
通常使用本试剂盒，从20毫克组织可以抽提到约40微克基因组DNA，从106-107Hela细胞可以抽提到约5-50微克基因组DNA。
本试剂盒足够抽提50个常规量的样品。
保存条件：-20℃保存，一年有效。
10M 醋酸铵和Nuclease Free Water也可以室温保存。
注意事项：需自备Tris平衡苯酚、氯仿和无水乙醇。
如果打算抽提到大片断的基因组DNA，则要尽量避免基因组DNA的物理性剪切。
例如避免剧烈振荡含有基因组DNA的样品，可以用剪掉枪头尖的枪头吸取含有基因组DNA的样品。
不可过分干燥基因组DNA沉淀，否则会极难溶解。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1. 样品收集a)对于组织样品：切下组织，并剪切成小块，置液氮中冻结，研碎或捣碎。
b) 对于贴壁细胞：胰酶消化后，PBS或生理盐水洗一次，1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。
c)对于悬浮细胞：1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。
2. 基因组DNA抽提a) 样品处理完毕后，每1毫升样品裂解液中加入5微升蛋白酶K，混匀。
b) 对于上述处理好的样品，每20毫克组织或106-107个细胞中加入500微升添加了蛋白酶K的样品裂解液，颠倒混匀数次，充分裂解组织或细胞。
c) 50℃水浴消化过夜。
d) 加入500微升Tris平衡苯酚抽提样品。
e) 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体)，剩余的水相用等体积Tris平衡酚再抽提一次。
f) 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体)，剩余的水相用等体积氯仿再抽提一次。
◆海洋动物组织基因组DNA快速提取试剂盒◆目录号1437◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外海洋动物组织基因组DNA快速提取试剂盒目录号：1437适用于快速提取各种海洋动物组织基因组DNA 试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次（143701）100次（143702）200次（143703）裂解液SL室温11 ml 20 ml 40 ml 结合液CB 室温11 ml 20 ml 40 ml 抑制物去除液IR 室温25 ml 50 ml 100 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液E B 室温15 ml 15 ml 15ml×2蛋白酶K粉（可选）20mg/ml-20℃20mg 2×20mg 4×20mg吸附柱AC 室温50个100个200个收集管（2ml）室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果储存事项：1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.为避免降低活性、方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入1ml灭菌水溶解，因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存，－20℃保存。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
注意事项：洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。
也可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。
小量血液基因组DNA直接提取试剂盒（离心柱型）GK4001-50 50 PrepsGK4001-100 100 PrepsGK4001-200 200 Preps一. 试剂盒组成Components GK4001-5050 PrepsGK104001-100100 PrepsGK4001-200200 PrepsGenClean Column 2.0-ml Collection TubeProteinase K(a)Boiled RNase ALysis SolutionAW1 Solution(b)AW2 Solution(c)AE Buffer(d)TE-50(f)Protocol50501.2 ml250 μl15 ml15.5ml12ml10 ml15ml11001002X1.2 ml500 μl30ml31 ml12ml20 ml15ml12002004X1.2ml2X500μl60ml62 ml24ml40 ml25m1(a)收到Proteinase K，分装-20℃保存。
(b)首次使用前，必须在AW1溶液瓶中按表示量加入无水乙醇，充分混匀后使用。
每次使用后将瓶盖盖紧，以保持中的AW1乙醇含量。
如果您发现AW1由于运输或保管不当造成容量严重不准，请用量筒定容后再加入0.6倍体积的无水乙醇。
(c) 首次使用前，必须在AW2瓶中加入4倍体积的无水乙醇，充分混匀后使用。
每次使用后将瓶盖盖紧，以保持AW2中的乙醇含量。
如果您发现AW2由于运输或保管不当造成容量严重不准，请用量筒定容后再加入4倍体积的无水乙醇。
(d) AE Buffer为10 mM Tris-HCl, 0.5 mM EDTA pH 8.5。
TE(pH 8.0)或者水（pH>7.0）均可以使用，但是DNA的洗脱效率通常要低20%左右。
(f) 本试剂盒中的TE-50是10 mM Tris-HCl， 50 mM EDTA pH 8.0。
动物组织基因组DNA小量提取试剂盒
一、产品简介
本试剂盒采用独特的组织和细胞裂解液，配合蛋白酶K裂解细胞释放基因组DNA，释放的基因组DNA被选择性吸附到硅胶膜上。
适合从≤25mg动物组织中提取多至20 μg基因组DNA。
纯化的基因组DNA长度可达20-30 kb，适合用于酶切、PCR、Southern杂交、RAPD、RFLD 等分子生物学实验。
二、试剂盒组成和储存
组成内容DK611-01 (50次) DK611-02 (200次) Proteinase K＊ 1 ml 4×1 ml
Buffer TG-A 15 ml 60 ml
Buffer TG-B 15 ml 60 ml
Buffer WA19 ml 75 ml
Buffer WB§16 ml 65 ml
DNA吸附柱-C 50套200套
1.5 ml离心管50个200个
TE※15 ml 30 ml
说明书1份1份＊Proteinase K: 20 mg/ml, -20℃长期保存；频繁使用可置于4℃保存。
§Buffer WA和Buffer WB，使用前按试剂瓶所示体积加入无水乙醇或者95%乙醇，混合均匀。
※TE：10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, pH 8.0(25°C)。
除Proteinase K外，其他组成成分于室温储存。
三、注意事项
1.Buffer TG-A、Buffer TG-B和Buffer WA含刺激性化合物，避免沾染皮肤、眼睛和衣服、谨防吸入口鼻。
若沾
染皮肤、眼睛，立即使用大量水或生理盐水冲洗沾染处，必要时寻求医疗咨询。
2. 使用后应及时盖紧试剂瓶盖子，以免影响下次使用效果。
3. 操作步骤1，切碎组织块可减少水浴消化时间，并且提高DNA产量。
组织切碎后应立即进行下一个操作步骤，
以免基因组DNA被内源DNA酶降解。
4. 操作步骤4，转移离心上清时勿将沉淀转移到干净的离心管，否则会堵塞DNA吸附柱-C中的吸附膜，大大降
低DNA结合和洗脱效率，并且影响DNA纯度。
5. 操作步骤6，室温放置1-2 min，有助于提高DNA吸附效率，从而提高产量。
6. 操作步骤11，室温放置1-2 min，有助于提高DNA洗脱效率，从而提高产量。
四、操作步骤
组织消化
实验准备：56℃和70℃水浴，2个干净的1.5ml离心管，无水乙醇或者95%乙醇，将Proteinase K恢复至室温。
1. 将动物组织尽可能切碎，称取≤25mg切碎的动物组织放入干净的1.5 ml离心管中。
▲切碎动物组织可以减少操作步骤2的水浴时间。
肌肉和内脏等组织可以切为肉泥状，鼠尾可以剪切为薄片。
2. 加入20 μl Proteinase K，加入250 μl Buffer TG-A，Vortex 10秒或者剧烈摇晃20次混合均匀，置于56℃水
浴，间断混合，直至组织块完全被消化（毛发和骨组织等不能被完全消化，不影响后续实验）。
▲加入Buffer TG-A混合均匀后溶液为混浊状，每4-5 min剧烈震荡或者摇晃有助于分散组织块，加快消化组织的速度；
一般水浴10-20 min后溶液为透亮状，每20-30 min剧烈震荡或者摇晃一次即可。
▲水浴时间因动物组织类型和组织块大小而异，一般的动物组织（比如小鼠尾）1-3小时即可消化完全。
也可以过夜消化，不影响实验效果；如果选择过夜消化组织，无需在水浴期间间断混合。
▲RNA残留可能会影响酶切但不影响PCR。
如需去除RNA，可在水浴结束后加入8 μl RNase A1（50 mg/ml）溶液（客户自备），混合均匀，室温放置2 min。
3. 加入250 μl Buffer TG-B，Vortex震荡10秒或者剧烈摇晃20次混合均匀，置于70℃水浴10 min。
4. 室温12,000×g离心2 min，将离心上清倒入或者用移液器转入另一个干净的1.5 ml离心管。
▲离心沉淀为毛发和骨组织等不能被消化的组织。
勿将沉淀转移到干净的离心管，否则会堵塞DNA吸附柱-C中的吸附膜，大大降低DNA结合和洗脱效率，并且影响DNA纯度。
5. 加入250 μl无水乙醇或者95%乙醇(此时可能会出现絮状凝集物，不影响实验效果)，温和翻转离心管10次混
合均匀，避免产生大量泡沫，简短离心(离心速度达到3,000×g后立即停止)去除离心管盖上的液体。
▲切勿长时间高速离心，防止絮状凝集物沉淀到离心管底。
DNA结合
6. 将溶液和絮状凝集物一起倒入或者用移液器转入DNA吸附柱-C中，室温放置2 min。
7. 室温12,000×g离心2 min，弃废液，将DNA吸附柱-C放回2 ml离心管中。
洗涤
实验准备：第一次使用前，按试剂瓶所示体积在Buffer WA和Buffer WB中加入无水乙醇或者95%乙醇。
8. 在DNA吸附柱-C中加入500 μl Buffer WA，室温12,000×g离心1 min，弃废液，将DNA吸附柱-C放回2 ml
离心管中。
9. 在DNA吸附柱-C中加入500 μl Buffer WB，室温12,000×g离心1 min，弃废液，将DNA吸附柱-C放回2 ml
离心管中。
重复此步骤。
10. 室温12,000×g离心2 min。
洗脱
实验准备（可选）：65℃预热TE或者去离子水。
11. 将DNA吸附柱-C转入试剂盒携带的1.5 ml离心管中，向DNA吸附膜的中央加50-200 μl TE或者去离子水，
室温放置1-2min，室温12,000×g离心1 min。
▲65℃预热TE或者去离子水，可以提高洗脱效率。
▲离心结束后将1.5 ml离心管中的洗脱液加到吸附膜的中央，重复此步骤，可以提高洗脱效率。
附录1. 从乙醇或者福尔马林等固定液浸泡的组织中提取基因组DNA
一般从乙醇或者福尔马林等固定液浸泡的组织中提取的基因组DNA为降解的小片段(<650 bp)，长度因固定液质量和保存时间而异。
实验准备：56℃和70℃水浴，PBS，2个干净的1.5ml离心管，无水乙醇或者95%乙醇，
将Proteinase K恢复至室温。
1. 将组织从固定液中取出，用PBS洗涤2次。
2. 去除PBS，继续四、操作步骤1。
附录2. 从石蜡包埋的组织中提取基因组DNA
一般从石蜡包埋的组织中提取的基因组DNA为降解的小片段(<650 bp)，长度因石蜡的质量和保存时间而异。
实验准备：56℃和70℃水浴，二甲苯，2个干净的1.5ml离心管，无水乙醇或者95%乙醇，
将Proteinase K恢复至室温。
1. 称取≤25mg石蜡包埋的组织切片。
2. 加入1.2 ml二甲苯，Vortex震荡10秒或者剧烈摇晃20次混合均匀；室温12,000×g离心5 min；用Tips仔
细吸除离心上清(勿吸除沉淀)。
3. 加入1.2 ml 无水乙醇或者95%乙醇，Vortex震荡10秒或者剧烈摇晃20次混合均匀；室温12,000×g离心5
min；用Tips仔细吸除离心上清(勿吸除沉淀)。
4. 重复步骤3。
5. 打开离心管盖，室温放置20-30 min或者37°C放置10–15 min，彻底挥发乙醇。
6. 继续四、操作步骤2。
