高效氯氰菊酯在柑橘中的残留及降解动态研究

氯氰菊酯在甘蓝上的残留动态及室内清洗效果的研究付建涛;黄日林;王世英;李梓豪;张志祥【摘要】研究了3.2％甲维盐·氯氰菊酯微乳剂中氯氰菊酯在甘蓝上的消解动态、残留以及室内清洗的去除效果,为甘蓝的安全食用提供理论依据.检测得到2013年氯氰菊酯在广东、广西、湖北三地甘蓝上的残留动态以及不同时间、不同温度清洗对高效氯氰菊酯残留量的影响.氯氰菊酯在甘蓝中降解速率较快,半衰期为2.14 ～2.56 d,消解动态符合一级动力学方程.残留量与氯氰菊酯施药量、施药次数有关,氯氰菊酯在甘蓝中的残留量随着施药量增多而略有增高,施药次数越多残留量也越高.最终残留量的检测表明在国家规定的安全间隔期内即其在施药后的第3天采收氯氰菊酯的残留量均低于国家规定的最大残留限量(5 mg/kg).另外,在室内清洗过程中水温越高、洗涤浸泡时间越长,供试农药的去除率越高,基本可以保证甘蓝的放心安全使用.实验证明在安全间隔期内采收甘蓝经过室内常规清洗程序处理后食用是相对安全的.【期刊名称】《西南农业学报》【年(卷),期】2016(029)010【总页数】4页(P2388-2391)【关键词】氯氰菊酯;甘蓝;残留;清洗【作者】付建涛;黄日林;王世英;李梓豪;张志祥【作者单位】华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广东广州510642;广州甘蔗糖业研究所广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室,广东广州510316;华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广东广州510642;华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广东广州510642;华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广东广州510642;华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广东广州510642【正文语种】中文【中图分类】X592甘蓝在我国各地普遍栽培，是东北、西北、华北等地区春、夏、秋季的主要蔬菜之一，具有易贮耐运、产量高和品质好等特点[1]。

气相色谱法检测柑橘中的腈菌唑残留Abstracts: A method for the determination of myclobutanil residue in orange was established by gas chromatography with nitrogen phosphorus detector(GC-NPD). Myelobutanil residue was extracted from orange by acetonitrile, and cleaned up by ProElut Carb/NH2 SPE and detected by GC with NPD. The detection limit was 0.008 mg/kg, the average recoveries of myclobutanil in orange peel, pulp and whole orange at the spiked amounts of 0.10,0.50, 1.00 mg/kg were 89.4%~98.0%, 90.0%~108.2% and 94.0%~101.0%, respectively, and the relative standard deviations were 9.65%~14.97%, 1.10%~13.78% and 6.27%~16.15%, respectively. The results showed that this method was suitable for detecting myclobutanil in orange.Key words: gas chromatography; myclobutanil; orange; determination; residue腈菌唑是美国罗姆-哈斯公司1982年开发的一种广谱杀菌剂,又名叶斑清[1],英文名为myclobutanil,化学名称为2-(4-氯苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-甲基)乙腈,分子式:C15H17ClN4｡腈菌唑属三唑类杀菌剂,是甾醇脱甲基化抑制剂,具有内吸､保护和治疗性｡其原药为淡黄色固体,熔点69 ℃,纯品为无色针状结晶,沸点202~208 ℃,25 ℃蒸汽压213 MPa,25 ℃水中溶解度142 mg/L,溶于醇､芳烃､酯､酮(50~100 g/L),不溶于脂族烃,日光下其水溶液易降解[1,2]｡近年来,在我国农业生产中大量使用腈菌唑农药,用于防治水果叶斑病､黑星病等,被认为是一种前景较好的杀菌剂[2,3]｡目前仅有小麦和毛豆中腈菌唑残留量分析技术的报道[1-5],而腈菌唑在柑橘中残留量的分析技术尚未见报道｡本研究建立了柑橘中腈菌唑残留的气相色谱分析方法,以期为我国柑橘中腈菌唑残留量检测提供技术参考｡1材料与方法1.1材料柑橘分别采自于武汉和贵州等地的某柑橘种植基地,采收后,分别取果皮､果肉､全果均质分装,储存于-18 ℃冰箱中待用｡1.2试剂分析纯乙腈､正己烷､甲苯,均购于Mallinckrodt Baker公司;分析纯氯化钠购于国药试剂公司,在140 ℃下烘烤4 h备用｡腈菌唑标准溶液,准确称取腈菌唑标样(来源于农业部环境保护科研监测所)(纯度>95%),以丙酮定容至10 mL,置于-18 ℃冰箱待用,使用前依所需浓度准确吸取适量体积注入容量瓶中并以丙酮定容,配制标准工作溶液｡1.3仪器及条件GC-2010气相色谱仪,带氮磷检测器NPD(岛津,日本),毛细管柱(Rtx-1,30 m×0.25 mm×0.25 μm);AB204/01型分析天平和PL2002/01型电子顶载天平(梅特勒-托利多,瑞士);FJ-200型高速分散均质机(上海标本模型厂,中国)｡1.4方法1.4.1腈菌唑提取分别称取10 g搅碎混匀的柑橘果皮､果肉､全果试样,置于100 mL具塞量筒中,加入20 mL乙腈,匀浆2 min｡再加入3~5 g氯化钠,匀浆1 min,盖上塞子,3 500 r/min离心5 min,使乙腈和水相分层｡1.4.2石墨化炭黑柱/氨基柱组合净化从100 mL具塞量筒中吸取10 mL乙腈相溶液(上层)放入150 mL烧杯中[6],将烧杯放在水浴锅(65 ℃)上加热,将乙腈蒸发近干｡用1 mL乙腈-甲苯(体积比3∶1)溶液溶解烧杯中的试样残渣,全部转入石墨化炭黑柱-氨基柱｡再用1 mL乙腈-甲苯(体积比3∶1)清洗烧杯,并入上述石墨化炭黑柱-氨基柱[7],弃去全部流出液｡用10 mL乙腈-甲苯(体积比3∶2)洗脱石墨化炭黑柱-氨基柱,接收全部洗脱液｡于水浴锅中蒸发近干取出,加入丙酮-正己烷(体积比2∶8)定容至5 mL,供气相色谱分析｡1.4.3气相色谱分析升温程序:100 ℃保持1 min,然后以20 ℃/min升温至180 ℃;再以10 ℃/min升温至300 ℃;保持6 min｡进口温度:260 ℃,进样量:1 μL,载气:氮气(≥99.999%),流速为 1.0 mL/min;氢气:1.5 mL/min;空气:145 mL/min;NPD温度:300 ℃;进样方式:不分流进样,0.75 min后打开分流阀和隔垫吹扫阀｡2结果与分析2.1提取方法的选择乙腈是农残分析中常用的提取溶剂[8-10],能与水互溶,加入氯化钠后可与水分层,可避免糖类､脂肪､蛋白质等杂质干扰,对腈菌唑提取回收率较好｡本研究比较了甲醇､乙腈的提取效果,将样品用甲醇萃取,加入氯化钠水溶液,使用二氯甲烷萃取,净化后再用丙酮定容上机｡通过对不同提取方法的摸索,确定使用乙腈提取法,实验结果表明,采用乙腈提取的基质干扰小,回收率较高｡2.2净化方法的选择比较了不同的净化方法,首先采用乙腈-甲苯(体积比3∶1)直接洗脱,效果不理想｡再考察了直接用乙腈-甲苯(体积比3∶2)洗脱,也存在干扰,通过对不同的净化方法的摸索,确定使用乙腈-甲苯(体积比3∶1)上样､淋洗,弃去淋洗液,再收集用乙腈-甲苯(体积比3∶2)洗脱的溶液,回收效果好｡2.3色谱分析条件的选择经过多次实验,确定采用本方法的程序升温,使用Rtx-1毛细管色谱柱进行分离可得到较好的分离结果,本方法可将腈菌唑和样品中杂质完全分离｡依照上述实验条件,腈菌唑保留时间约为12.4 min,以峰面积作为定量指标,标准色谱图(见图1)及柑橘全果的空白及添加0.1 mg/kg标样色谱图(见图2)如下:2.4线性范围腈菌唑在水果中的限量标准为0.20~1.00 mg/kg[11,12],因此本方法以0.01~1.00 mg/kg作为标准曲线的范围,分别配制了0.01 ､0.05､0.10､0.50､1.00 mg/L标准工作液,取1.00 μL进行测定,外标法定量｡以腈菌唑质量浓度X(mg/L)为横坐标,以相应的峰面积Y为纵坐标绘制工作曲线(图3),回归方程为Y=496 761X-2 982.4,R=0.999 7｡2.5回收率及方法精密度分别在10 g柑橘果肉､全果､果皮样品中加入不同量的标准溶液,按照样品处理步骤进行添加回收实验,每个添加浓度重复5次,结果见表1｡从表1中可以看出,0.10､0.50､1.00 mg/kg 3个添加水平在果皮､果肉､全果中的回收率分别为89.4%~98.0%､90.0%~108.2%､94.0%~101.0%,相对标准偏差(RSD)分别为9.65%~14.97%､1.10%~13.78%､6.27%~16.15%,方法的重现性较好｡2.6方法检出限当称样量为10 g,定容体积为5 mL,进样量为1 μL时,以3倍信噪比计算检出限,结果为0.008 mg/kg｡2.7样品测定利用该方法对在武汉､贵州等地的柑橘部分试验样品的全果进行腈菌唑残留检测,典型色谱图如图4所示｡采用外标法测定目标化合物的含量,其结果见表2｡3结论本研究的柑橘中腈菌唑残留量检测方法表明,供检样品经乙腈提取,石墨化碳柱/氨基柱净化,使用乙腈-甲苯(体积比3∶1)上样､淋洗,弃去淋洗液,再收集用乙腈-甲苯(体积比3∶2)洗脱的溶液,蒸近干,加入丙酮-正己烷(体积比2∶8)定容至 5 mL,采用GC-NPD测定技术方法,具有方法快速､准确､重复性好等特点,同时还具备高灵敏度的特征,对腈菌唑的检出限达到0.008 mg/kg,各项技术指标均符合农药残留量分析要求,可用于柑橘中腈菌唑的残留量的检测分析｡参考文献:[1] 陈丽萍,林志平. 毛豆中腈菌唑残留量的气相色谱法测定[J]. 亚热带植物科学,2006,35(3):48-50.[2] 郭桂文,李皓,史记,等. 12.5%腈菌唑乳油防治香蕉叶斑病试验研究[J]. 农药,2000, 39(9):31.[3] 王璧生,刘景梅,彭埃天,等.腈菌唑防治香蕉黑星病药效试验[J]. 广东农业科学,2004(3):38-39.[4] 夏昕,吴剑英,王立东,等. 腈菌唑在小麦､土壤上残留与降解的动态研究[J]. 农药,1996,35(10):29-31.[5] 施翠娥,陈枥乙,王军,等. 12.5%腈菌唑乳油在梨和土壤中的残留分析方法及残留动态研究[J]. 安徽农业科学,2008,36(16):6850-6852.[6] SN/T 1624-2009进出口食品中嘧霉胺､嘧菌胺､腈菌唑､嘧菌酯残留量的检测方法气相色谱质谱法[S].[7] 刘锦霞,王美玲,黄志强,等. 高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中10种苯甲酰脲类杀虫剂[J]. 分析试验室,2010,29(9):39-43.[8] GB/T 19648-2005水果和蔬菜中446种农药多残留测定方法气相色谱-质谱和液相色谱-串联质谱法[S].[9] 王连珠,杨明智,王瑞龙,等. 气相色谱-质谱法测定生姜中丙炔氟草胺残留量[J]. 食品科学,2006,27(10):461-463.[10] ZHI Y Z, XIAN J L, XIANG Y Y, et al. Pesticide residues in the spring cabbage(Brassica oleracea L. var. capitata) grown in open field [J]. Food Control, 2006(4):1-8.[11] DB31/T 262.2-2001 安全卫生优质水果生产技术操作规范[S].[12] 赵雁冰,庞国芳,范春林,等. 气相色谱-串联质谱法快速测定禽蛋中203种农药及化学污染物残留[J]. 分析试验室,2011,30(5):8-21.。

化学与生物工程２０２０,V o l ．３７N o ．０３㊀w w w．h x y s w gc ．c o㊀C h e m i s t r y &B i o e n g i n e e r i n g基金项目:山西省重点研发计划项目(２０１８０３D ２２１００２Ｇ１)收稿日期:２０１９Ｇ１１Ｇ２８作者简介:王晓慧(１９９３－),女,山西吕梁人,硕士研究生,研究方向:高效氯氟氰菊酯的微生物降解,E Ｇm a i l :１１０３７５２３２８＠q q．c o m ;通讯作者:徐宏英,博士,E Ｇm a i l :４２０９４５３９６＠q q ．c o m ;张智清,硕士研究生,E Ｇm a i l :６０５６７３１２７＠q q．c o m .d o i :１０．３９６９/j．i s s n ．１６７２－５４２５．２０２０．０３．００２王晓慧,商文贤,徐宏英,等．高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展[J ]．化学与生物工程,２０２０,３７(３):７Ｇ１４．WA N G X H ,S HA N G W X ,X U H Y ,e t a l ．R e s e a r c h p r o g r e s s i nm i c r o b i a l d e g r a d a t i o no f l a m b d a c y h a l o t h r i n [J ]．C h e m i s t r y &Bi o Ｇe n g i n e e r i n g,２０２０,３７(３):７Ｇ１４．高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展王晓慧,商文贤,徐宏英∗,张智清∗(太原科技大学环境与安全学院,山西太原０３００２４)摘㊀要:简介了高效氯氟氰菊酯的性质特征,综述了其在土壤和农作物中的残留现状以及降解该农药的微生物㊁降解酶㊁降解基因㊁降解机理和途径等,提出了寻求超强降解的微生物资源㊁提高微生物酶的稳定性和降解效率将是今后微生物降解高效氯氟氰菊酯的重点研究方向.关键词:高效氯氟氰菊酯;微生物降解;降解酶;降解基因;降解机理中图分类号:T Q ４５０．２㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀文章编号:１６７２Ｇ５４２５(２０２０)０３Ｇ０００７Ｇ０８R e s e a r c hP r o g r e s s i n M i c r o b i a lD e g r a d a t i o no f l a m b d a C yh a l o t h r i n W A N GX i a o h u i ,S H A N G W e n x i a n ,X U H o n g y i n g ∗,Z H A N GZ h i q i n g∗(C o l l e g e o f E n v i r o n m e n t a n dS a f e t y ,T a i y u a nU n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y ,T a i yu a n ０３００２４,C h i n a )A b s t r a c t :W eb r i e f l y i n t r o d u c e t h ec h a r a c t e r i s t i c so f l a m b d a c yh a l o t h r i n ,a n dr e v i e wt h ec u r r e n t s t a t u so f r e s i d u e s i n c o n t a m i n a t e d s o i l a n d c r o p s ,a n dm i c r o o r g a n i s m ,e n z y m e ,g e n e ,d e g r a d a t i o nm e c h a n i s ma n d p a t h w a yf o r d eg r a d i n g l a m b d a c yh a l o t h ri n ．F u r t h e r m o r e ,w e f i n a l l yp u t f o r w a r d t h ek e y r e s e a r c hd i r e c t i o n so fm i c r o b i a l d e g r a d a t i o no f l a m b d a c y h a l o t h r i n i n t h e f u t u r e ,w h i c ha r e t o s e e k f o r s u p e r d e gr a d a t i o no fm i c r o b i a l r e s o u r c e s a n d i m p r o v e t h e s t a b i l i t y a n dd e g r a d a t i o ne f f i c i e n c y o fm i c r o b i a l e n z ym e s ．K e y w o r d s :l a m b d a c y h a l o t h r i n ;m i c r o b i a ld e g r a d a t i o n ;d e g r a d a t i o ne n z y m e ;d e g r a d a t i o n g e n e ;d e g r a d a t i o n m e c h a n i s m㊀㊀拟除虫菊酯是天然除虫菊素的衍生化合物,因其较低的毒性㊁良好的稳定性,杀虫谱广,对哺乳动物安全性高,被广泛应用于公共卫生和农业领域.拟除虫菊酯进入环境后会在固相㊁液相㊁气相中循环,过度使用会污染陆地和水生环境,也会对非目标生物造成影响[１Ｇ２].其中,高效氯氟氰菊酯是新一代Ⅱ型广谱高效拟除虫菊酯杀虫剂,毒性更强,药效更快.它具有神经毒性,通过干扰钠通道作用于昆虫的神经系统,并破坏神经元而达到除虫效果[３].高效氯氟氰菊酯过去被认为具有对非靶标生物具有低毒㊁易被人体内氧化酶系统降解㊁不积累㊁低毒等特点.但研究表明,高效氯氟氰菊脂具有脂溶性,含有αＧ氰基Ｇ３Ｇ苯氧基苯甲醇和含有卤素基团羧酸部分,吸入后很容易从呼吸道吸收,口服后也容易在胃肠道吸收[４].频繁过量地使用高效氯氟氰菊酯会增加非靶标生物的环境风险,会对生物的运动系统㊁生殖系统㊁呼吸系统㊁免疫系统等造成损害[５Ｇ７].高效氯氟氰菊酯在自然光照射下具有光稳定性,并且对植物和微粒有很强的吸附亲和力[８],容易在环境中大量残留.微生物降解效率高,成本低,生态恢复良好,环境友好,无二次污染,在农药降解方面有很王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期好的前景和优势[９Ｇ１０],是修复高效氯氟氰菊酯残留的主要方法[１１].作者综述了高效氯氟氰菊酯在土壤和农作物中的残留现状及其微生物降解的研究进展.１㊀高效氯氟氰菊酯的残留现状１．１㊀高效氯氟氰菊酯在土壤中的残留动态高效氯氟氰菊酯在土壤中的高疏水性和持久性,使其在土壤中迁移和大量残留,会对土壤的生态功能㊁菌群结构㊁生态平衡造成影响.郑钊等[１２]研究了功夫菊酯在海南沙土和壤土的残留动态:好氧条件下,在沙土中的半衰期(T１/２)为１１５．５２d,壤土中的T１/２为９９．０２d;厌氧条件下,沙土中的T１/２为４９．５１d,壤土中的T１/２为３０．１３d,表明高效氯氟氰菊酯在壤土中的降解较好,且厌氧条件下降解速度比好氧条件下快.杜红霞等[１３]以济南㊁太原及杭州三地为试验点,测定了高效氯氟氰菊酯在梨园土壤中的T１/２㊁安全施用剂量:在土壤中的T１/２为２．６~２３．１d,太原点和杭州点低于济南点,且２．５％的高效氯氟氰菊酯的安全施用剂量为１２．５g a．i． h m－２.李宏宇等[１４]研究了杭州㊁乌鲁木齐安宁渠的高效氯氟氰菊酯在大白菜土壤中的残留动态:T１/２为９．０~１１．９d,乌鲁木齐安宁渠的土壤残留量稍低于杭州.乌鲁木齐安宁渠土壤偏碱性,试验时间在夏季;杭州的土壤偏酸性,试验时间在冬季;表明高效氯氟氰菊酯更易在碱性㊁温度比较高的环境下降解.研究人员[１５Ｇ１７]同时测定了白菜㊁玉米和小麦土壤中高效氯氟氰菊酯的残留,在玉米土壤中的T１/２为１９．６~２８．１d,在小麦土壤中的T１/２为１６．５~１９．３d,而在小白菜土壤中降解迅速,T１/２为８．３~１３．４d,发现高效氯氟氰菊酯在玉米土壤中降解较慢.可见,土壤的类型㊁酸碱度㊁通气量㊁温度㊁时间㊁农作物种类等均会影响高效氯氟氰菊酯在土壤中的降解.１．２㊀高效氯氟氰菊酯在蔬菜㊁水果及农作物中的残留动态㊀㊀高效氯氟氰菊酯可有效防治蔬菜㊁水果及农作物上多种害虫,但大量或不规范的施用,会造成农药在果蔬和农作物中的残留,最终通过食物链在人体内累积,威胁人类健康.山西韭菜农残检测显示,农药总检出率为８０％,其中高效氯氟氰菊酯检出率为１６．７％[１８];广西荔枝主产区农残现状的调查表明,高效氯氟氰菊酯的检出率为２０．４％,超标率为０．０２％[１９];北京市蔬菜农残状况调查显示,高效氯氟氰菊酯超标率为０．２％,韭菜根部农药残留明显[２０];杭州市蔬菜农残现状表明,拟除虫菊酯类农药的总检出率为１２．６％,总超标率为２．１％,高效氯氟氰菊酯的检出率最高[２１];李琰等[２２]对上海市闵行区市场果蔬农残情况作了分析,高效氯氟氰菊酯检出率最高,其残留量最高的蔬菜㊁水果分别为鸡毛菜和苹果;王冬群等[２３]对蔬菜中拟除虫菊酯的残留情况进行了调查,其中豌豆中高效氯氟氰菊酯的超标率为２５％;徐晶等[２４]抽检了哈尔滨市的１７家超市蔬菜样品,发现菊酯类农药总检出率为１２．６７％,超标率为２．９８％,高效氯氟氰菊酯检出率为１２．５％,叶类蔬菜问题最多.郝宁等[２５]调查了２０１０~２０１３年邯郸市蔬菜中的拟除虫菊酯残留,８种拟除虫菊酯的总检出率为１８．６２％,高效氯氟氰菊酯的检出率最高,农药主要集中在鳞茎类㊁叶茎类㊁豆类蔬菜中.综上,我国高效氯氟氰菊酯的残留和超标现象较为普遍,由于其对光和热的稳定性,在环境中有很长的半衰期,它引起的一些生物慢性毒性㊁致癌致突变性严重威胁人类健康[２６Ｇ２８].２㊀高效氯氟氰菊酯降解菌我国是一个生物资源大国,微生物物种㊁代谢和生态类型丰富多样,自然环境中存在着大量的细菌㊁放线菌㊁真菌及藻类等微生物,为菌株的筛选提供了充足的资源.从长期高浓度农药污染土壤中筛选高效降解菌株,再与土著微生物群落共同作用降解农药残留,是修复污染土壤的有效途径[２９],微生物功能的生物修复是国际土壤修复科学中的热点内容[３０].目前,研究人员已经分离到大量的拟除虫菊酯类农药降解菌株,见表１[３１Ｇ３９].有关高效氯氟氰菊酯降解菌的研究也不少,见表２.王彦辉等[４０]筛选到一株高效降解真菌,经鉴定为青霉菌(P e n i c i l l i u m s p．),菌株在p H＝７．０㊁３０ħ㊁底物浓度为５０m g L－１时降解效果最好,在此条件下培养７d,功夫菊酯降解率可达到８３．９０％.刘珍[４１]分离筛选到两株真菌,为棘孢曲霉(A s p e r g i l l u s a c u l e a t u s)和草酸青霉(P e n i c i l l i u mo x a l i c u m),在２８ħ㊁接种量为５％的条件下培养５d后,两株真菌对１００m g L－１功夫菊酯的降解率分别为６９．８９％和８４．８３％.张建等[４２]分离到一株对功夫菊酯有高效降解作用的细菌,鉴定为芽孢杆菌属(B a c i l l u s s p．),它的最适生长温度㊁p H值分别为３０ħ㊁７,底物浓度为１００m g L－１时,３d对功夫菊酯的降解率为８５％.徐莲等[４３]分离到一株三氟氯氰菊酯高效降解细菌,为芽孢杆菌属(B a c i l l u s s p．),该菌株最适生长温度㊁p H值分别为３０ħ㊁８~９,具有耐盐性,底物浓度为１００m g L－１时,１d降解率可达到９８．４％,且对三氟氯氰菊酯的耐受性极强,可以达到６００m g L－１.翟逸[４４]分离到一株人苍白杆菌(O c h r o b a c t r u ma n t h r o p i),菌株在３０ħ㊁王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期表１㊀降解拟除虫菊酯的微生物类群T a b．１㊀T h em i c r o b e g r o u p f o r d e g r a d i n gp y r e t h r i o d s属名分离来源可降解农药参考文献寡养单胞菌属(S t e n o t r o p h o m o n a s)农药厂污染淤泥中毒死蜱和联苯菊酯[３１]芽孢杆菌属(B a c i l l u s C o h n)茶园土壤氯氰菊酯[３２]苍白杆菌属(O c h r o b a c t r u m)拟除虫菊酯污染土壤顺式和反式氯氰菊酯[３３]沙雷氏菌属(S e r r a t i a B i z i o)溴氰菊酯污染土壤溴氰菊酯㊁高效氯氰菊酯㊁氯氰菊酯[３４Ｇ３５]不动杆菌属(A c i n e t o b a c t e r s p．)农药厂附近的地表土壤三氟氯氰菊酯㊁联苯菊酯㊁溴氰菊酯㊁氯氰菊酯[３６]产碱菌属(A l c a l i g e n e s)三氟氯氰菊酯㊁甲氰菊酯㊁溴氰菊酯㊁氯氰菊酯㊁氯菊酯[３７]曲霉属(A s p e r g i l l u s)污水处理厂排污口高效氯氰菊酯[３８]链轮丝菌属(S t r e p t o v e r t i c i l l i u m)使用氯氰菊酯的蔬菜大棚氯氰菊酯[３９]链霉菌属(S t r e p t o m y c e s)使用氯氰菊酯的蔬菜大棚氯氰菊酯[３９]诺卡氏菌属(N o c a r d i a)使用氯氰菊酯的蔬菜大棚氯氰菊酯[３９]表２㊀降解高效氯氟氰菊酯的微生物类群T a b．２㊀T h em i c r o b e g r o u p f o r d e g r a d i n g l a m b d aＧc y h a l o t h r i n属名分离来源菌株名称参考文献青霉属(P e n i c i l l i u m)农药厂污水处理口青霉菌(P e n i c i l l i u m s p．)[４０]青霉属(P e n i c i l l i u m)农药厂生化处理池草酸青霉(P e n i c i l l i u mo x a l i c u m)[４１]曲霉属(A s p e r g i l l u s)农药厂生化处理池棘孢曲霉(A s p e r g i l l u s a c u l e a t u s)[４１]芽孢杆菌属(B a c i l l u s s p．)农药厂废水处理池G FＧ１菌株[４２]芽孢杆菌属(B a c i l l u s s p．)农药厂废水排放口G FＧ３菌株[４３]苍白杆菌属(O c h r o b a c t r u m)拟除虫菊酯生产厂废水处理系统人苍白杆菌(O c h r o b a c t r u ma n t h r o p i)[４４]鞘氨醇杆菌属(S p h i n g o m o n a s s p．)农药厂排污口的污泥鞘氨醇杆菌(S p h i n g o b a c t e r i u m s p．)[４５]不动杆菌属(A c i n e t o b a c t e r s p．)农药厂排污口不动杆菌(A c i n e t o b a c t e r s p．)[４６]产碱菌属(A l c a l i g e n e s)农药厂废水排污口Y F１１菌株(未知种)[４７]肠杆菌属(E n t e r o b a c t e r)农药长期污染土样阴沟肠杆菌(E n t e r o b a c t e r c l o a c a e)[４８]p H＝７．０㊁２．０％接种量㊁高效氯氟氰菊酯浓度５０m g L－１时,降解率为８４％,耐受能力强,对高效氯氟氰菊酯耐受浓度可达到４００m g L－１,且该菌株对其中间代谢产物３Ｇ苯氧基苯甲酸能有效降解,使残留被彻底清除.王琨[４９]筛选到３株高效氯氟氰菊酯降解菌,菌株B EＧ１降解率最高,在３０ħ㊁p H值７．０㊁初始浓度为１００m g L－１时,降解率为４９．６％.吴浩豪等[４５]筛选到一株鞘氨醇杆菌属(S p h i n g o b a c t e r i u m s p．),对氯氟氰菊酯有降解作用,该菌株的最适温度㊁p H值分别为３０ħ㊁７．０,菌株有很宽的p H值适用范围,在p H 值５~９的条件下,对氯氟氰菊酯的降解率都可以达到５０％以上,底物浓度为２００m g L－１时,７d降解率可以达到７７．２％.肖红利[４６]分离得到一株不动杆菌(A c i n e t o b a c t e r s p．),最适温度㊁p H值分别为２８ħ㊁７．０,具有广谱性,能以拟除虫菊酯㊁有机磷等多种农药为碳源,且对农药的耐受浓度高达５００m g L－１,菌株在２８ħ㊁１８０r m i n－１培养１０８h,对２００m g L－１三氟氯氰菊酯降解率为７７．８％.虞云龙等[４７]分离到一株产碱菌属(A l c a l i g e n e s)的一个未知种,该菌株最适温度㊁p H值分别为３０ħ㊁７．０~７．５,该菌株具有广谱性,对三氟氯氰菊酯有降解作用,５０m g L－１的三氟氯氰菊酯降解速率为３．０４μm o l L－１ h－１.目前筛选到的能降解高效氯氟氰菊酯菌株降解能力强,有广谱性,大多是细菌,少量为真菌,很少筛到放线菌.细菌对环境适应能力强,在高浓度农药的作用下,易发生突变,在农药的微生物降解中起主导作用[５０].３㊀高效氯氟氰菊酯的降解酶和降解基因农药降解酶主要来自于微生物.微生物的降解实质是酶促反应,是微生物通过物理或化学方法,产生水解酶和各类氧化酶将农药分解转化的过程.酯酶在拟除虫菊酯的降解中具有重要的调节作用[５１].降解酶王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期通常比降解菌更能忍耐极端环境,不受温度㊁p H值㊁土著微生物吞噬㊁农药浓度等外部环境的影响,环保安全,降解谱广,降解效率高.当前拟除虫菊酯降解酶的研究主要集中在提取㊁纯化粗酶液以及酶学性质方面.林淦[４８,５２]从阴沟肠杆菌WＧ１中提取的粗酶液,可以水解氯氟氰菊酯,反应速率最大为６３．９３n m o l m L－１ m i n－１,氯氟氰菊酯在浓度为２０m g L－１㊁３５ħ㊁p H值７．５时,粗酶液在１h的降解率可以达到８３％,且该粗酶液的胞内酶表现出降解底物的活性.解开治等[５３]从恶臭假单胞菌X P１２中提取粗酶液,在p H值６．５~８．０㊁２５~４０ħ时对高效氯氟氰菊酯㊁高效氯氰菊酯和溴氰菊酯的降解率均在７０％左右,将粗酶液用于叶类蔬菜上,其对高效氯氟氰菊酯降解率可达到８３．５％,起催化降解作用的是胞内酶.虞云龙等[５４]从广谱性产碱菌中提取了粗酶液,该粗酶液在p H值５．０~１０．５范围内均有较好的降解活性,有广谱性,能降解部分拟除虫菊酯,降解三氟氯氰菊酯的最适p H值为７．５,米氏常数为８．６７m m o l L－１,最适温度为３２．５ħ,胞内酶对拟除虫菊酯农药起降解作用.拟除虫菊酯农药酶促降解的研究表明,降解酶具有更高的降解率,且对温度和p H值有更宽的适应性,在实际应用中有很好的前景,对农药降解起主要作用的是胞内酶.也有研究人员发现,胞外酶对降解拟除虫菊酯农药起作用,徐莲等[４３]从能高效降解三氟氯氰菊酯的芽孢杆菌中提取能降解三氟氯氰菊酯的粗酶液,酶的定域试验和底物诱导试验表明,该降解酶为组成型胞外酶,粗酶液反应温度为３０~６０ħ,在温度和p H值分别为４０ħ㊁９．０时有最高降解活性,６０ħ时酶的活性保持在５０％左右;且发现其降解基因在染色体的D N A上,不在质粒上.郭鹏[５５]对一株能高效降解甲氰菊酯的范氏鞘酯菌J ZＧ２进行深入研究,并且通过硫酸铵沉淀㊁凝胶层切和切胶回收电洗脱等纯化粗酶液,获得了一个新的菊酯水解酶P y t H,该酶属组成型胞内酶,在温度为２５~５０ħ㊁p H值为６．０~８．５时,均对酶的活性没有影响,该酶的最大降解速率和米氏常数分别为７．５３６n m o l m i n－１㊁０．０５n m o l m L－１,纯化的水解酶有广谱性,对其它拟除虫菊酯也有水解作用.从筛选到的高效降解菌株中分离到的酶含量低,且酶的分离纯化费时㊁费力㊁成本高.通过克隆酶的降解基因并进行异源表达可以提高酶的产量.关于拟除虫菊酯克隆基因的报道还很少,仅克隆到几个降解基因,即e s t P水解酶基因(克雷伯氏菌Z D１１２)㊁p y t H水解酶基因(鞘酯菌J ZＧ１)㊁p y e３水解酶基因[５６Ｇ５８].肖红利[４６]从不动杆菌属菌中克隆了氯氰菊酯降解酶片段(约５k b),并在大肠杆菌E．c o l i B L２１中进行了表达,应用分子生物学技术构建了４ＧD菌株基因组文库,从中得到的重组质粒对高效氯氰菊酯和三氟氯氰菊酯有良好降解性,重组质粒中可能有拟除虫菊酯降解基因,有待进一步的研究.翟逸[４４]构建了人苍白杆菌Y ZＧ１的基因组文库,从中克隆了一个新型的酯酶基因p y t Z,它与已知的几个拟除虫菊酯水解基因序列相似性极低,p y t Z有一个６０６b p的开放阅读框,用来编码拟除虫菊酯水解羧酸酯酶;转入大肠杆菌系统中诱导纯化获得的P y t Z蛋白,在温度２０~４５ħ和p H值６．０~８．０范围内均可以降解高效氯氟氰菊酯,P y t Z底物特异性广泛㊁酶活性高㊁稳定性好,为微生物降解拟除虫菊酯提供了有利资源.通过基因改良技术将降解酶基因转入易于繁殖的宿主中获得高表达,可增大酶产量,提高降解效率,也避免了直接使用微生物菌株存在的问题.通过基因组文库的成功构建,为高效氯氟氰菊酯降解基因的提取提供了有利条件.４㊀高效氯氟氰菊酯的降解机理和途径拟除虫菊酯类农药种类繁多,代谢途径也较为复杂,这类农药的化学式中都有酯键,其微生物降解失去神经毒素的关键就是酯键的断裂[５９].由菌株对高效氯氰菊酯㊁溴氰菊酯㊁联苯菊酯降解途径(图１~３)发现,其降解的第一步就是酯键的断裂.目前对高效氯氟氰菊酯的微生物降解机理研究较少.林淦等[４８]研究了阴沟肠杆菌对高效氯氟氰菊酯的降解途径,在粗酶液作用下,水解生成αＧ氰基Ｇ３Ｇ苯氧基苄醇和２,２Ｇ二甲基Ｇ３Ｇ(２Ｇ氯Ｇ３,３,３Ｇ三氟Ｇ１Ｇ丙烯基)环丙烷羧酸(图４).C h e n等[６０]分析了苏云金芽孢杆菌对氯氟氰菊酯的降解途径,该菌株通过酯键和芳基键的断裂,产生了６种代谢产物:αＧ羟基Ｇ３Ｇ苯氧基苯甲酰基乙腈㊁３Ｇ苯氧基苯基乙腈㊁NＧ(２Ｇ异丙氧基苯基)Ｇ４Ｇ苯氧基苯甲酰胺㊁３Ｇ苯氧基苯甲醛㊁３Ｇ苯氧基苯甲酸酯和苯酚.B iＧr o l l i等[６１]分析了海洋真菌对(ʃ)Ｇ氯氟氰菊酯的降解途径,首先被羧酸酯酶水解,酯键断裂,产生２Ｇ羟基Ｇ２Ｇ(３Ｇ苯氧基苯基)乙腈和２,２Ｇ二甲基Ｇ３Ｇ(２Ｇ氯Ｇ３,３,３Ｇ三氟Ｇ１Ｇ丙烯基)环丙烷羟酸,２Ｇ羟基Ｇ２Ｇ(３Ｇ苯氧苯基)乙腈可以通过一种氧化腈酶(将氰醇转化为醛的酶)生成３Ｇ苯氧基苯甲醛,氰醛通过氧化生成３Ｇ苯氧基苯甲酸,最后生成３Ｇ(羟基苯氧基)苯甲酸(图５).作为拟除虫菊酯的主要中间代谢产物３Ｇ苯氧基苯甲酸(３ＧP B A)比母体农药更具流动性和持久性,毒性更强,它对环境及人体有潜在危害[６２].微生物对农药的降解过程中存在污染物的不完全降解,会带来二次污染,造成被修复王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期土壤的毒性作用增强,所以研究菌株对高效氯氟氰菊酯的降解途径是很有必要的.图１㊀枯草芽孢杆菌对氯氰菊酯的降解途径F i g ．１㊀D e g r a d a t i o n p a t h w a y o f b e t a Ｇc y p e r m e t h r i nb y Ba c i l l u s s ub t i l is 图２㊀无色杆菌对溴氰菊酯的降解途径F i g ．２㊀D e g r a d a t i o n p a t h w a y o f d e l t a m e t h r i nb yC h r o m a t i c b a c t e r ia图３㊀醋酸钙不动杆菌对联苯菊酯的降解途径F i g ．３㊀D e g r a d a t i o n p a t h w a y of b i f e n t h r i n b y Ac i n e t o b a c t e r a c e t a te 图４㊀阴沟肠杆菌对高效氯氟氰菊酯的降解途径F i g ．４㊀D e g r a d a t i o n p a t h w a y o f l a m b d a Ｇc y h a l o t h r i nb yE n t e r o b a c t e r c l o a c ae图５㊀海洋真菌对(ʃ)氯氟氰菊酯的降解途径F i g ．５㊀D e g r a d a t i o n p a t h w a y o f (ʃ)l a m b d a Ｇc yh a l o t h r i n b y m a r i n e d e r i v e d f u n gi王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期５㊀结语目前对高效氯氟氰菊酯降解菌的筛选工作,仅限于实验室条件下单一菌株的培养和降解,而从实验室到自然环境中,受到各因素的制约,实际效果不太理想,同时菌株的安全性评价有待进一步考察.筛选高效广谱㊁适应性强及环境友好的高效氯氟氰菊酯降解菌株,用分子生物学和基因工程等技术对降解酶基因资源进行克隆,构建高效工程降解菌,制备多菌株复合系,是解决上述问题的根本方法.很多情况下微生物并不能将农药完全降解矿化,某些中间代谢产物的毒性大于母体化合物毒性,通过质谱等手段分析高效氯氟氰菊酯降解的中间代谢产物以推断降解途径,并深入研究菌株的降解途径对提高微生物的修复有重要作用.关于高效氯氟氰菊酯降解酶的分离纯化和固定化研究相对较少.天然的分离菌株其产酶量较低,且酶在土壤中的活动性较差,而纯化的降解酶更能忍受异常环境,因此对降解酶进行纯化和固定化可以提高酶的稳定性和适应力,应该大力加强这方面的研究.参考文献:[１]㊀T A N G W,WA N G D,WA N GJ,e ta l．P y r e t h r o i d p e s t i c i d er e s iＧd ue s i n t h e g l o b a l e n v i r o n m e n t:a no v e r v i e w[J]．C h e m o s p h e r e,２０１７,１９１:９９０ １００７．[２]㊀C Y C O N M,P I O T R OW S K AＧS E G E TZ．P y r e t h r o i dＧd e g r a d i n g m iＧc r o o r g a n i s m s a n dt h e i r p o t e n t i a l f o rt h eb i o r e m ed i a t i o no fc o nＧt a m i n a t e d s o i l s:ar e v i e w[J]．F r o n t i e r s i n M i c r o b i o l o g y,２０１６,７:１４６３．[３]㊀J A Y A K R I S HN A NS,D I K S H I T A K,S I N G HJP,e t a l．D i s s i p aＧt i o no f l a m b d aＧc y h a l o t h r i no nt o m a t o(L y c o p e r s i c o ne s c u l e n t u mM i l l．)a n d r e m o v a l o f i t s r e s i d u e s b y d i f f e r e n tw a s h i n gp r o c e s s e sa n ds t e a m i n g[J]．B u l l e t i no fE n v i r o n m e n t a lC o n t a m i n a t i o na n dT o x i c o l o g y,２００５,７５(２):３２４Ｇ３２８．[４]㊀K A V L O C K R,C H E R N O F FN,B A R O N R,e t a l．T o x i c i t y s t u d i e s w i t hd e c a m e t h r i n,a s y n t h e t i c p y r e t h r o i d i n s e c t i c i d e[J]．J o u r n a l o fE n v i r o n m e n t a l P a t h o l o g y a n dT o x i c o l o g y,１９７９,２(３):７５１Ｇ７６５．[５]㊀B OWN I KA,K OWA L C Z Y K M M,B A N C Z E R OW S K I J．L a m b d aＧc y h a l o t h r i na f f e c t s s w i m m i n g a c t i v i t y a nd p h y s i o l o g i c a l re s p o n s e so f d a p h n i am a g n a[J]．C h e m o s p h e r e,２０１８,２１６:８０５Ｇ８１１．[６]㊀H A R A T Y MＧM A JA．H e m a t o l o g i c a l a l t e r n a t i o n sa f t e r p y r e t h r o i d s p o i s o n i n g i nm i c e[J]．A n n a l so fA g r i c u l t u r a l a n dE n v i r o n m e n t a lM e d i c i n e,２００２,９(２):１９９Ｇ２０６．[７]㊀L IH T,F A N GY H,N I CB,e t a l．L a m b d aＧc y h a l o t h r i n d e l a y s p uＧb e r t a l l e y d i gc e l lde v e l o p m e n t i nr a t s[J]．E n v i r o n m e n t a lP o l l uＧt i o n,２０１８,２４２:７０９Ｇ７１７．[８]㊀MA U DS J,HAM E RJ,WA R I T O NJ S,e t a l．A q u a t i c e c o t o x i c o lＧo g y o ft h e p y r e t h r o i di n s e c t i c i d el a m b d aＧc y h a l o t h r i n:c o n s i d e r aＧt i o n f o r h i g h e r t i e r a q u a t i c r i s ka s s e s s m e n t[J]．P e s tM a n a g e m e n t S c i e n c e,１９９８,５４(４):４０８Ｇ４１７．[９]㊀Z HA N G X,G A O Y,Z A N G P,e ta l．S t u d y o nt h es i m u l t a n e o u sd e g r a d a t i o no ff i v e p e s t i c i d e sb y P a e n i b a c i l l u s p o l y m y x a f r o mP a n a x g i n s e n g a n dt h ec h a r a c t e r i s t i c so f t h e i r p r o d u c t s[J]．E c oＧt o x i c o l o g y a n dE n v i r o n m e n t a l S a f e t y,２０１８,１６８:４１５ ４２２．[１０]㊀T O P PE,Z HU H,N O U RS M,e t a l．C h a r a c t e r i z a t i o no f a na tＧr a z i n eＧd e g r a d i n g P s e u d a m i n o b a c t e r s p．i s o l a t e df r o m C a n a d i a na n dF r e n c ha g r i c u l t u r a l s o i l s[J]．A p p l i e d a n dE n v i r o n m e n t a lM iＧc r o b i o l o g y,２０００,６６(７):２７７３Ｇ２７８２．[１１]㊀C H E NSH,Y A N G L,HU M Y,e t a l．B i o d e g r a d a t i o no f a n d３Ｇp h e n o x y b e n z o i c a c i db y an o v e l S t e n o t r o p h o m o n a s s p．s t r a i nZ SＧSＧ０１a n d i t s u s e i nb i o r e m e d i a t i o no f c o n t a m i n a t e ds o i l s[J]．A pＧp l i e d M i c r o b i o l o g y a n dB i o t e c h n o l o g y,２０１１,９０(２０):７５５Ｇ７６７．[１２]㊀郑钊,许佳彬,王威,等．３种拟除虫菊酯农药在海南土壤中的降解特性[J]．热带生物学报,２０１９,１０(３):２４３Ｇ２４８．Z H E N GZ,X UJB,WA N G W,e t a l．D e g r a d a t i o nc h a r a c t e r i s t i c s o f t h r e e d i f f e r e n t p y r e t h r o i d p e s t i c i d e s i n s o i l i nH a i n a n[J]．J o u rＧn a l o fT r o p i c a l B l o l o g y,２０１９,１０(３):２４３Ｇ２４８．[１３]㊀杜红霞,李慧冬,官帅,等．氯氟氰菊酯在梨和土壤中的残留和降解行为研究[J]．山东农业科学,２０１８,５０(１２):１１９Ｇ１２２．D U H X,L IH D,G U A NS,e t a l．R e s i d u e s a n dd e g r a d a t i o nb eＧh a v i o r o f c y f l u t h r i n i n t h e p e a r a n d s o i l[J]．S h a n d o n g A g r i c u l t u rＧa l S c i e n c e,２０１８,５０(１２):１１９Ｇ１２２．[１４]㊀李宏宇,蔺彩霞,韩青,等．高效氯氟氰菊酯在大白菜和土壤上的消解动态[J]．农村科技,２０１３(６):４５Ｇ４６．L IH Y,L I NCX,H A N Q,e t a l．D i g e s t i o nd y n a m i c s o f l a m b d aＧc y h a l o t h r i n i n c a b b a g e a nd s o i l[J]．R u r a l S c ie n c e a n dT e c h n o l oＧg y,２０１３(６):４５Ｇ４６．[１５]㊀马婧玮,张军锋,吴绪金,等．高效氯氟氰菊酯在小白菜及土壤中的残留动态[J]．农药,２００９,４８(４):２７８Ｇ２８１．MAJW,Z H A N GJ F,WUXJ,e t a l．R e s i d u e d y n a m i c s o f l a m bＧd aＧc y h a l o t h r i n i n p a k c h o i a n ds o i l[J]．A g r o c he m i c a l s,２００９,４８(４):２７８Ｇ２８１．[１６]㊀李慧冬,张海松,陈子雷,等．高效氯氟氰菊酯在玉米和土壤中的残留及消解动态[J]．生态环境学报,２０１０,１９(５):１１０３Ｇ１１０７．L IH D,Z HA N G H S,C H E N ZL,e t a l．R e s i d u e s a n dd e g r a d aＧt i o no f l a m b d aＧc y h a l o t h r i n i n Z e am a y s L．a n ds o i l[J]．E c o l o g ya n dE n v i r o n m e n t a l S c i e n c e s,２０１０,１９(５):１１０３Ｇ１１０７．[１７]㊀陈国峰,李雪茹,刘峰,等．高效氯氟氰菊酯㊁噻虫嗪及其代谢物噻虫胺在小麦中的残留及消解动态分析[J]．麦类作物学报,２０１８,３８(１):１１９Ｇ１２５．C H E N GF,L IX R,L I U F,e t a l．R e s i d u ea n dd e g r a d a t i o nd yＧn a m i co f l a m b d aＧc y h a l o t h r i n,t h i a m e t h o x a m a n dc l o t h i a n i d i ni nw h e a t[J]．J o u r n a l o fT r i t i c e a eC r o p s,２０１８,３８(１):１１９Ｇ１２５．[１８]㊀郭丽丽,花锦．Q u E c h E R S法动态监测及评价山西省韭菜中１２种农残[J]．中国蔬菜,２０１８(４):６４Ｇ７０．G U O LL,HU AJ．D y n a m i cm o n i t o r i n g a n d e v a l u a t i o n o f１２p e sＧt i c i d er e s i d u e si nl e e k f r o m S h a n x i P r o v i n c e b y Q u E C h E R Sm e t h o d[J]．C h i n aV e g e t a b l e s,２０１８(４):６４Ｇ７０．[１９]㊀王运儒,邓有展,陈永森,等．广西荔枝农残现状及膳食风险评估[J]．南方农业学报,２０１８,４９(９):１８０４Ｇ１８１０．王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期WA N G Y R,D E N G YZ,C H E N YS,e t a l．S t a t e a n dd i e t a r y i nＧt a k e r i s ka s s e s s m e n t o f p e s t i c i d e r e s i d u e i n l i t c h i i nG u a n g x i[J]．J o u r n a l o f S o u t h e r nA g r i c u l t u r e,２０１８,４９(９):１８０４Ｇ１８１０．[２０]㊀李安,王北洪,潘立刚．北京市蔬菜中农残现状及慢性膳食暴露评估[J]．食品安全质量检测学报,２０１６,７(３):１１６４Ｇ１１６９．L IA,WA N GBH,P A NLG．P r e s e n t s i t u a t i o n a n d c h r o n i c d i e tＧa r y e x p o s u r ea s s e s s m e n to f p e s t i c i d er e s i d u e si nv e g e t ab l e si nB e i j i n g[J]．J o u r n a l o f F o o dS a f e t y a n dQ u a l i t y,２０１６,７(３):１１６４Ｇ１１６９．[２１]㊀张力群,王姝婷,金铨．杭州市市售蔬菜拟除虫菊酯类农药残留现状调查分析[J]．中国卫生检验杂志,２０１３,２３(１７):３４２３Ｇ３４２４．WA N GLQ,WA N GST,J I N Q．I n v e s t i g a t i o no n t h e p y r e t h r i n p e s t i c i d e r e s i d u e s i nv e g e t a b l e si n H a n g z h o u C i t y[J]．C h i n e s e J o u r n a l o fH e a l t hL a b o r a t o r y T e c h n o l o g y,２０１３,２３(１７):３４２３Ｇ３４２４．[２２]㊀李琰,蔡跃,杨胜琴,等．上海市闵行区蔬菜和水果中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留调查[J]．环境与健康杂志,２０１１,２８(１):７４Ｇ７６．[２３]㊀王冬群,沈群超．蔬菜中拟除虫菊酯类农药残留情况调查[J]．浙江农业科学,２００４(６):５１Ｇ５３．WA N G D Q,S H E N Q C．I n v e s t i g a t i o no fr e s i d u a l q u a n t i t y o f p y r e t h r o i d i n s e c t i c i d e s i nv e g e t a b l e s[J]．J o u r n a l o fZ h e j i a n g A gＧr i c u l t u r a l S c i e n c e s,２００４(６):５１Ｇ５３．[２４]㊀徐晶,杨静,张海霞,等．蔬菜中拟除虫菊酯类农药残留调查[J]．北方园艺,２０１２(１５):１４２Ｇ１４４．X UJ,Y A N GJ,Z H A N G H X,e t a l．I n v e s t i g a t i o no n s i t u a t i o no f p y r e t h r o i d s p e s t i c i d e s r e s i d u e s o f v e g e t a b l e s[J]．N o r t h e r nH o r t iＧc u l t u r e,２０１２(１５):１４２Ｇ１４４．[２５]㊀郝宁,李伟昊．２０１０~２０１３年邯郸市蔬菜中拟除虫菊酯类农药残留调查[J]．职业与健康,２０１４,３０(１９):２７３６Ｇ２７３７．H A O N,L I W H．I n v e s t i g a t i o no f p y r e t h r o i d p e s t i c i d er e s i d u e si nv e g e t a b l e s i n H a n d a nC i t y f r o m２０１０－２０１３[J]．O c c u p a t i o na n dH e a l t h,２０１４,３０(１９):２７３６Ｇ２７３７．[２６]㊀T HA T H E Y U S A J,S E L V AM A DJ．S y n t h e t i c p y r e t h r o i d s: t o x i c i t y a n db i o d e g r a d a t i o n[J]．A p p l i e d E c o l o g y a n d E n v i r o nＧm e n t a l S c i e n c e s,２０１３,１(３):３３Ｇ３６．[２７]㊀T S U J I R,Y AMA D AT,K AWAMU R AS．M a m m a l t o x i c o l o g y o f s y n t h e t i c p y r e t h r o i d s[J]．T o p i c s i n C u r r e n tC h e m i s t r y,２０１２,３１４:８３Ｇ１１１．[２８]㊀A LＧAM O U D IW M．T o x i c e f f e c t so f l a m b d aＧc y h a l o t h r i n,o n t h e r a tt h y r o i d:i n v o l v e m e n t o f o x i d a t i v e s t r e s s a n d a m e l i o r a t i v ee f f e c t o f g i n g e re x t r a c t[J]．T o x i c o l o g y R e p o r t s,２０１８,５:７２８Ｇ７３６．[２９]㊀L I A O M,Z HA N G HJ,MA A L,e t a l．S t u d y o nd e g r a d i n gp e rＧf o r m a n c e o f t w oe f f i c i e n tm i x e ds t r a i n s f o rs y n t h e t i c p y r e t h r o i di n s e c t i c i d e sd e g r a d a t i o n[J]．C h i n e s eJ o u r n a lo fP e s t i c i d eS c iＧe n c e,２００９,１１(４):４７２Ｇ４７９．[３０]㊀骆永明,腾应,过园．土壤修复 新兴的土壤科学分支学科[J]．土壤,２００５,３７(３):２３０Ｇ２３５．L U O Y M,T E N G Y,G U O Y．S o i l r e m e d i a t i o n:an e w b r a n c hd i s c i p l i ne of s o i l s c i e n c e[J]．S o i l s,２００５,３７(３):２３０Ｇ２３５．[３１]㊀张群,马晨,张月,等．一株可同时降解毒死蜱和联苯菊酯降解菌的筛选鉴定及其降解特性初探[J]．农药,２０１７,５６(１０):７３３Ｇ７３８．Z H A N G Q,MAC,Z H A N G Y,e t a l．I s o l a t i o n,i d e n t i f i c a t i o na n dd e g r a d a t i o n c h a r a c t e r i s t i c s o f S t e n o t r o p h o m o n a s s p．s t r a i n a b l e t os i m u l t a n e o u s d e g r a d e c h l o r p y r i f o s a n d b i f e n t h r i n[J]．A g r o c h e m iＧc a l s,２０１７,５６(１０):７３３Ｇ７３８．[３２]㊀张梦梅,胡露,赖文,等．地衣芽孢杆菌分批培养降解氯氰菊酯动力学研究[J]．食品科学,２０１６,３７(１７):１３９Ｇ１４４．Z H A N G M M,HUL,L A IW,e t a l．K i n e t i cm o d e l s f o r b a t c h f e rＧm e n t a t i o n o f B a c i l l u sl i c h e n i f o r m i s a n d c o n s e q u e n t c y p e rＧm e t h r i nd e g r a d a t i o n[J]．F o o dS c i e n c e,２０１６,３７(１７):１３９Ｇ１４４．[３３]㊀WA N GBZ,MA Y,Z H O U W Y,e ta l．B i o d e g r a d a t i o no f s y nＧt h e t i c p y r e t h r o i d s b y O c h r o b a c t r u m t r i t i c i s t r a i n p y dＧ１[J]．W o r l dJ o u r n a lo f M i c r o b i o l o g y B i o t e c h n o l o g y,２０１１,２７(１０):２３１５Ｇ２３２４．[３４]㊀C Y C O N M,Z M I J OW S K A A,P I O T R OW S K AＧS E G E T Z．E nＧh a n c e m e n t o f d e l t a m e t h r i nd e g r a d a t i o nb y s o i l b i o a u g m e n t a t i o nw i t h t w o d i f f e r e n t s t r a i n s o f S e r r a t i am a r c e s c e n s[J]．I n t e r n a t i o nＧa l J o u r n a lo fE n v i r o n m e n t a lS c i e n c ea n d T e c h n o l o g y,２０１４,１１(５):１３０５Ｇ１３１６．[３５]㊀P R A S H A RP．I s o l a t i o n a n d i d e n t i f i c a t i o n o f c y p e r m e t h r i n d e g r a d i n g S e r r a t i a n e m a t o d i p h i l a f r o mc a u l i f l o w e rr h i z o s p h e r e[J]．I n t e rＧn a t i o n a l J o u r n a l o f P h a r m t e c hR e s e a r c h,２０１５,１２(３):２１７Ｇ２３０．[３６]㊀刘婷婷,董昆明,缪莉,等．联苯菊酯降解菌的筛选㊁鉴定及降解特性研究[J]．农业环境科学学报,２０１２,３１(６):１１４７Ｇ１１５２．L I U T T,D O N G K M,M I A O L,e ta l．I s o l a t i o n,i d e n t i f i c a t i o na n db i o d e g r a d a t i o nc h a r a c t e r i s t i c s o f a b a c t e r i a l s t r a i n a b l e t od eＧg r a d e b i f e n t h r i n[J]．J o u r n a l o fA g r oＧE n v i r o n m e n t S c i e n c e,２０１２,３１(６):１１４７Ｇ１１５２．[３７]㊀A K B A RS,S U L T A NS,K E R T E S Z M．D e t e r m i n a t i o no f c y p e rＧm e t h r i nd e g r a d a t i o n p o t e n t i a lo fs o i lb a c t e r i aa l o n g w i t h p l a n tg r o w t hＧp r o m o t i n g c h a r a c t e r i s t i c s[J]．C u r r e n t M i c r o b i o l o g y,２０１５,７０(１):７５Ｇ８４．[３８]㊀L I A N G W Q,WA N GZ Y,L IH,e t a l．P u r i f i c a t i o na n dc h a r a cＧt e r i z a t i o no f a n o v e l p y r e t h r o i d h y d r o l a s e f r o m A s p e r g i l l u s n i g e rZ D１１[J]．J o u r n a l o fA g r i c u l t u r a l a n dF o o dC h e m i s t r y,２００５,５３(１９):７４１５Ｇ７４２０．[３９]㊀张玲玲,崔德杰,洪永聪,等．氯氰菊酯降解放线菌的分离与筛选[J]．青岛农业大学学报(自然科学版),２００８,２５(４):２８０Ｇ２８４．Z H A N GLL,C U I DJ,H O N GYC,e t a l．I s o l a t i o n a n d s c r e e n i n g o fc y p e r m e t h r i n d e g r a d i n gＧa c t i n o m y c e ss t r a i n s[J]．J o u r n a lo f Q i n g d a o A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y(N a t u r a l S c i e n c e E d i t i o n),２００８,２５(４):２８０Ｇ２８４．[４０]㊀王彦辉,杜良伟,李红红,等．功夫菊酯高效降解菌的筛选㊁鉴定及降解特性研究[J]．西南农业学报,２０１６,２９(８):１８７９Ｇ１８８３．WA N G Y H,D U L W,L IH H,e ta l．S c r e e n i n g,i d e n t i f i c a t i o na n d c h a r a c t e r i s t i c so f l a mb d aＧc y h a l o t h r i nde g r a d i n gf u ng u s[J]．S o u t h w e s tC h i n a J o u r n a l o fA g r i c u l t u r a l S c i e n c e s,２０１６,２９(８):１８７９Ｇ１８８３．[４１]㊀刘珍．拟除虫菊酯类农药的降解研究[D]．南宁:广西大学,２０１７．L I UZ．S t u d y o nt h ed e g r a d a t i o no f p y r e t h r o i d p e s t i c i d e s[D]．N a n n i n g:G u a n g x iU n i v e r s i t y,２０１７．[４２]㊀张建,张振华,黄星,等．功夫菊酯降解菌G FＧ１的分离鉴定及其王晓慧,等:高效氯氟氰菊酯的微生物降解研究进展/２０２０年第３期降解特性研究[J]．土壤,２００９,４１(３):４５４Ｇ４５８．Z HA N GJ,Z HA N GZH,HU A N GX,e t a l．I s o l a t i o n a n d c h a r a cＧt e r i s t i c so fl a m b d aＧc y h a l o t h r i nＧd e g r a d i n g b a c t e r i u m G FＧ１[J]．S o i l s,２００９,４１(３):４５４Ｇ４５８．[４３]㊀徐莲,张丽萍,刘怡辰,等．功夫菊酯降解菌G FＧ３的筛选鉴定及其降解特性研究[J]．农业环境科学学报,２００９,２８(７):２１５Ｇ２２１．X U L,Z H A N GLP,L I U Y C,e t a l．I s o l a t i o n,i d e n t i f i c a t i o na n dc h a r a c t e r i s t i c so fac y h a l o t h r i nＧde g r a d i n g b a c t e r i u m G FＧ３[J]．J o u r n a l o fA g r oＧE n v i r o n m e n t S c i e n c e,２００９,２８(７):２１５Ｇ２２１．[４４]㊀翟逸．拟除虫菊酯降解酶基因的克隆及酶学性质研究[D]．北京:中国农业科学院,２０１２．Z HA IY．C l o n i n g a n de n z y m a t i c c h a r a c t e r i a t i o no f an o v e l p y r eＧt h r o i dd e g r a d i n gg e n e[D]．B e i j i n g:C h i n e s eA c a d e m y o fA g r i c u lＧt u r a l S c i e n c e s,２０１２．[４５]㊀吴浩豪,呼世斌,陈小翠,等．氯氟氰菊酯降解菌的分离和培养条件研究[J]．中国土壤与肥料,２００９(３):７１Ｇ７４．WU H H,HUSB,C H E NXC,e t a l．S t u d y o n i s o l a t i o n a n d c u lＧt u r e c o n d i t i o n s o f c y b a l o t h r i nd e g r a d i n g b a c t e r i u m[J]．S o i l s a n dF e r t i l i z e r s S c i e n c e s i nC h i n a,２００９(３):７１Ｇ７４．[４６]㊀肖红利．拟除虫菊酯降解菌株分离及生化分子基础研究[D]．北京:中国农业科学院,２００５．X I A O HL．I s o l a t i o n a n d t h e b a s i c r e l a t i v e s t u d y o n b i o c h e m i c a l, m o l e c u l a r b i o l o g y o f p r e t h r o i dＧd e g r e d i n g s t r a i n[D]．B e i j i n g:C h iＧn e s eA c a d e m y o fA g r i c u l t u r a l S c i e n c e s,２００５．[４７]㊀虞云龙,宋凤鸣,郑重,等．一株广谱性农药降解菌(A l c a l i g e n e s s p．)的分离与鉴定[J]．浙江农业大学学报,１９９７,２３(２):１１１Ｇ１１５．Y U YL,S O N G F M,Z H E N G Z,e ta l．I s o l a t i o na n d i d e n t i f i c aＧt i o no fab r o a dＧs p e c t r u m b a c t e r i a ls t r a i n(A l c a l i g e n e s s p．)d eＧg r a d i n gp e s t i c i d e s[J]．J o u r n a l o f Z h e j i a n g A g r i c u l t u r a lU n i v e r s iＧt y,１９９７,２３(２):１１１Ｇ１１５．[４８]㊀林淦,姚威．阴沟肠杆菌wＧ１粗酶液对氯氟氰菊酯的降解效果及其作用机理[J]．江苏农业科学,２００６(３):１９１Ｇ１９２．L I N G,Y A O W．D e g r a d a t i o ne f f e c ta n df u n c t i o n a r y m e c h a n i s mo f c r u d ee n z y m ee x t r a c t e d f r o m E n t e r o b a c t e r c l o a c a e s t r a i nwＧ１o n c y h a l o t h r i n[J]．J i a n g s u A g r i c u l t u r a lS c i e n c e s,２００６(３):１９１Ｇ１９２．[４９]㊀王琨．高效氯氟氰菊酯降解菌的分离及其降解特性[D]．南京:南京理工大学,２００８．WA N G K．T h e i s o l a t i o no f l a m b d aＧc y h a l o t h r i nd e g r e d i n g b a c t eＧr i a a n d t h e r e s e a r c ho f i t sd e g r a d a t i o nc h a r a c t e r i s t i c s[D]．N a nＧj i n g:N a n j i n g U n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y,２００８．[５０]㊀L A LR．I n s e c t i c i d eM i c r o b i o l o g y[M]．S p r i n g e rＧV e r l a g,１９８４．[５１]㊀B HA T TP,B H A T T K,HU A N G Y,e t a l．E s t e r a s e i s a p o w e r f u l t o o l f o r t h e b i o d e g r a d a t i o no f p y r e t h r o i d i n s e c t i c i d e s[J]．C h e m oＧs p h e r e,２０１９,２４４．[５２]㊀林淦．阴沟肠杆菌w１０j１５中拟除虫菊酯类杀虫剂降解酶的酶学性质研究[D]．福州:福建农林大学,２００４．L I N G．S t u d i e so nt h ec h a r a c t e r i s t i c so f p y r e t h r o i d sd e g r a d i n ge n z y m ef r o m E n t e r o b a c t e rc l o a c a e w１０j１５[D]．F u z h o u:F u j i a nA g r i c u l t u r e a n dF o r e s t r y U n i v e r s i t y,２００４．[５３]㊀解开治,徐培智,陈建生,等．恶臭假单胞菌X P１２对拟除虫菊酯类农药的酶促降解特性及其应用研究[J]．广东农业科学,２００９(１２):１５６Ｇ１６０．X I EKZ,X UPZ,C H E NJ S,e t a l．P s e u d o m o n a s p u t i d a X P１２＇se n z y m a t i c d e g r a d a t i o n i n p y r e t h r o i d p e s t i c i d e s a n d i t s a p p l i c a t i o ns t u d y[J]．G u a n g d o n g A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s,２００９(１２):１５６Ｇ１６０．[５４]㊀虞云龙,陈鹤鑫,樊德方,等．拟除虫菊酯类杀虫剂的酶促降解[J]．环境科学,１９９８(３):６８Ｇ７１．Y U YL,C H E N H X,F A N DF,e t a l．E n z y m a t i cd e g r a d a t i o no f s y n t h e t i c p y r e t h r o i d i n s e c t i c i d e s[J]．E n v i r o n m e n t a l S c i e n c e,１９９８(３):６８Ｇ７１．[５５]㊀郭鹏．拟除虫菊酯降解菌J ZＧ２的分离鉴定㊁降解特性及菊酯水解酶的纯化和特性研究[D]．南京:南京农业大学,２００９．G U O P．I s o l a t i o n a n d c h a r a c t e r i z a t i o n o f p y r e t h r o i d d e g r a d i n gs t r a i n,p u r i f i c a t i o na n dc h a r a c t e r i s t i c so fa p y r e t h r o i dh y d r o l a s e[D]．N a n j i n g:N a n j i n g A g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y,２００９．[５６]㊀WUPC,L I U Y H,W A N G ZY,e t a l．M o l e c u l a r c l o n i n g,p u r i f i f i c aＧt i o n,a n db i o c h e m i c a lc h a r a c t e r i z a t i o no fan o v e l p y r e t h r o i dＧh yＧd r o l y z i n ge s t e r a s ef r o m K l e b s i e l l a s p．s t r a i nZ D１１２[J]．J o u r n a lo fA g r i c u l t u r a l a n dF o o dC h e m i s t r y,２００６,５４:８３６Ｇ８４２．[５７]㊀WA N GBZ,G U OP,H A N GBJ,e t a l．C l o n i n g o f an o v e l p y r eＧt h r o i dＧh y d r o l y z i n g c a r b o x y l e s t e r a s e g e n e f r o m S p h i n g o b i u m s p．J ZＧ１a n dc h a r a c t e r i z a t i o no f t h e g e n e p r o d u c t[J]．A p p l i e da n dE n v i r o n m e n t a lM i c r o b i o l o g y,２００９,７５(１７):５４９６Ｇ５５００．[５８]㊀L IG,WA N G K,L I U Y H,M o l e c u l a r c l o n i n g a n dc h a r a c t e r i z aＧt i o no f an o v e l p y r e t h r o i dＧh y d r o l y z i n g e s t e r a s eo r i g i n a t i n g f r o mt h em e t a g e n o m e[J]．M i c r o b i a l C e l l F a c t o r i e s,２００８,７:３８．[５９]㊀王保战．拟除虫菊酯水解酶的基因克隆㊁表达和酶学特性研究[D]．南京:南京农业大学,２０１０．WA N G BZ．M o l e c u l a r c l o n i n g,e x p r e s s i o n,a n dc h a r a c t e r i z a t i o n o f an o v e l p y r e t h r o i dh y d r o l y z i n g e n z y m e[D]．N a n j i n g:N a n j i n gA g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y,２０１０．[６０]㊀C H E NSH,D E N GYY,C H A N GCQ．e t a l．P a t h w a y a n d k i n e tＧi c s o fc y h a l o t h r i nb i o d e g r a d a t i o nb y４４８B a c i l l u s t h u r i n g i e n s i ss t r a i nZ SＧ１９[J]．S c i e n t i f i cR e p o r t s,２０１５,５:８７８４．[６１]㊀B I R O L L IW G,V A C O N D I OB,A L V A R E N G A N．e t a l．E n a nＧt i o s e l e c t i v e b i o d e g r a d a t i o no f t h e p y r e t h r o i d(ʃ)Ｇl a m b d aＧc y h a l oＧt h r i nb y m a r i n eＧd e r i v e d f u n g i[J]．C h e m o s p h e r e,２０１８,１９７:６５１Ｇ６６０．[６２]㊀X I E W J,Z H O UJ M,WA N G H Y,e t a l．E f f e c to f n i t r o g e no n t h ed e g r a d a t i o no fc y p e r m e t h r i na n di t s m e t a b o l i t e３Ｇp h e n o x yＧb e n z o ic a c id i n s o i l[J]．Pe d o s p h e r e,２００８,１８(５):６３８Ｇ６４４．。

柑橘及土壤中高效氯氟氰菊酯残留分析方法研究杨玉霞;莫仁甫;王天顺;周其峰【期刊名称】《南方农业学报》【年(卷),期】2012(043)001【摘要】[目的]建立快速、实用的测定柑橘及土壤中高效氯氟氰菊酯残留的方法.[方法]样品经甲醇提取、弗罗里硅土柱净化、浓缩、定容后,用带μ-ECD检测器的气相色谱仪进行测定.[结果]高效氯氟氰菊酯在0.005～1.000 μg/mL范围内线性良好,线性相关系数r=0.9996.该方法对高效氯氟氰菊酯标样的最小检出限为1.0×10-12 g,对橘皮、橘肉和土壤的最低检出浓度均为0.001 mg/kg,样品平均回收率为90.96％～104.21％,相对标准偏差为2.73％～10.45％.[结论]建立的GC-μECD检测方法具有分离效果好、回收率高、经济快速、准确度和灵敏度高的特点,适用于柑橘及土壤中高效氯氟氰菊酯的残留检测.【总页数】4页(P38-41)【作者】杨玉霞;莫仁甫;王天顺;周其峰【作者单位】广西农业科学院植物保护研究所,南宁530007;广西农业科学院植物保护研究所,南宁530007;中国农业科学院甘蔗研究中心/广西农业科学院甘蔗研究所,南宁530007;广西农业科学院植物保护研究所,南宁530007【正文语种】中文【中图分类】S481.8【相关文献】1.柑橘和土壤中吡草醚残留分析方法研究 [J], 胡秀卿;吴珉;赵华;朱亚红;徐浩;平立凤;李振2.杀扑磷在柑橘和土壤中的残留分析方法研究 [J], 金铨;吴慧明;朱国念3.柑橘及土壤中高效氯氟氰菊酯残留分析方法研究 [J], 杨玉霞;莫仁甫;王天顺;周其峰4.苯醚甲环唑在柑橘和土壤中的残留分析方法研究 [J], 郑海香5.联苯肼酯在柑橘及其土壤中的残留分析方法 [J], 戴魏;李晓刚;陈力华;聂思桥;任竞;梁骥;付启明;张贵群;刘义珂;刘金胜;刘力因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

柑橘黄龙病防治研究现状概述作者：张文辉刘洁余冠学陈绪杨韦杰来源：《广西农学报》2022年第02期摘要：黄龙病被称为柑橘“癌症”，严重损害果农效益，阻碍柑橘产业的高质量发展。

概述柑橘黄龙病在农业综合防治、化学药物防治、生物防治、物理防治、生态防治五个方面的研究现状，从中看出，国内外研究都从不同的角度进行黄龙病防控策略的研究，最多研究的是化学药物的防治策略，是主要的研究方向;其次是物理防治和生物防治，也有较多研究;最少研究的是生态防治。

这些防治策略也存在缺陷，建议从财政保障、管理执行、技术应用三方面开展柑橘黄龙病防控，加强技术应用研究，关注生态防治的研究探索，促进生态防治技术的进步。

关键词：柑橘;黄龙病;研究;防控中图分类号：S436.66 文献标识号：A 文章编号：1003-4374（2022）02-0079-05Overview of Research Status on Control of Citrus Huanglong DiseaseZhang Wen-hui， Liu Jie， Yu Guan-xue， Chen Xu-yang， Wei Jie *（college of Agriculture， Guangxi University， Nanning， Guangxi 530003， China）Abstract： Huanglong disease is known as citrus' cancer'， which seriously damages the benefit of fruit growers and prevents the high-quality development of citrus industry. The research status of citrus Huanglong disease from five aspecs in agricultural integrated control， chemical pesticide control， biological control， physical control and ecological control were summarized， it shows that the research botn at home and abroad has carried out the research on the prevention and control strategies of Huanglong disease from different perspectives， and the most research is the prevention and control strategy of chemical pesticide， which is the main research direction. Second is physical control and biological control， which also has many stuchies， the least research is ecological control， which also existing defects. It is suggested to carry out the prevention and control of citrus Huanglong disease from three aspects of financial support， management implementation and technical application， strengthen technical application research， pay attention to the research and exploration of ecological control， and promote the progress of ecological control technology.Key words： citrus， Huanglong disease， research， prevention and control黃龙病被称为柑橘“癌症”，是世界上为害柑橘生产最具有严重的破坏性的病害之一，近几十年来对我国乃至世界范围内都造成了不可估量的重大损失，根据全国农业技术服务中心的预测，我国柑橘黄龙病发生面积达14.7万公顷，主要发生在华南、江南南部等地区，部分地区可能存在较为严重的暴发，并且染上黄龙病的病株，幼苗期存在矮小化、抽梢困难、叶片斑驳黄化明显的现象，成熟期果实果肉苦涩、红鼻子果、果皮绿化，严重破坏柑橘的价值，使得果农的多年辛苦经营功亏一篑。

·829·亚洲柑橘木虱响应高效氯氰菊酯胁迫的转录组分析宋晓兵，崔一平，凌金锋，黄峰，陈霞，彭埃天*（广东省农业科学院植物保护研究所/农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室/广东省植物保护新技术重点实验室，广东广州510640）摘要：【目的】筛选高效氯氰菊酯胁迫下的柑橘木虱抗药性相关基因及其网络，探讨柑橘木虱应对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性机制，为柑橘木虱的抗药性治理提供科学依据。

【方法】采用Illumina NovaSeq 6000测序系统对高效氯氰菊酯和空白对照处理的柑橘木虱成虫进行转录组测序，采用生物信息学软件Hisat2、DESeq2和clusterProfiler 等对差异表达基因（Differentially expressed genes ，DEGs ）进行功能注释、分类以及参与的信号通路分析。

【结果】从所检测的柑橘木虱转录组数据中筛选到显著DEGs 4596个，其中显著上调表达基因2900个、显著下调表达基因1696个。

DEGs 中有624个富集到KEGG 的103条代谢通路，富集的通路主要涉及Hippo 信号通路、核糖体、吞噬体、药物代谢、嘌呤代谢、硫胺素代谢和细胞凋亡等与昆虫抗药性紧密相关的7条代谢通路。

与昆虫抗药性相关的DEGs 38个，涉及细胞色素P450、谷胱甘肽转移酶、钠离子通道、三磷酸腺苷合酶、细胞色素b 、酸性磷酸酯酶、钙粘蛋白、糖基转移酶、脱羧酶和ABC 转运蛋白等多个代谢抗性和靶标抗性基因。

【结论】挖掘获得大量的柑橘木虱响应拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性相关基因，显著富集的通路主要涉及Hippo 信号通路、核糖体、吞噬体和硫胺素代谢等与昆虫抗药性紧密相关的代谢通路，为研究柑橘木虱的抗药机制以及进行抗药性治理提供了丰富的数据基础。

关键词：柑橘木虱；高效氯氰菊酯；抗药性；转录组中图分类号：S436.661.2文献标志码：A文章编号：2095-1191（2023）03-0829-10收稿日期：2022-05-11基金项目：“十四五”广东省农业科技创新十大主攻方向“揭榜挂帅”项目（2022SDZG06）；广东省现代农业产业技术体系建设专项（2022KJ108）通讯作者：彭埃天（1962-），https:///0000-0002-8568-7459，研究员，主要从事南方果树病虫害综合防控研究工作，E-mail ：***************第一作者：宋晓兵（1980-），https:///0000-0003-0526-2272，博士，副研究员，主要从事柑橘病虫害防控研究工作，E-mail ：**************Transcriptome analysis of Diaphorina citri Kuwayamain response to beta-cypermethrin stressSONG Xiao-bing ，CUI Yi-ping ，LING Jin-feng ，HUANG Feng ，CHEN Xia ，PENG Ai-tian*（Institute of Plant Protection ，Guangdong Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Green Prevention andControl on Fruits and Vegetables in South China ，Ministry of Agriculture and Rural Affairs/Guangdong Provincial KeyLaboratory of High Technology for Plant Protection ，Guangzhou ，Guangdong 510640，China ）Abstract ：【Objective 】To screen Diaphorina citri Kuwayama resistance genes and their network regulation under thestress of beta-cypermethrin ，and explore the resistance mechanism of D.citri to pyrethroid insecticides.【Method 】The Illu-mina NovaSeq 6000sequencing system was used to sequence the transcriptome of the adult citrus psyllids treated with beta-cypermethrin and blank control.The differentially expressed genes （DEGs ）were functionally annotated and classi-fied using bioinformatics softwares such as HISAT2，DESeq2and clusterProfiler ，as well as the signal pathways analysis involved.【Result 】A total of 4596significant DEGs genes were screened in the citrus psyllid transcriptome data ，in which 2900were significantly up-regulated and 1696were significantly down-regulated.Among the DEGs ，624were enriched in 103different metabolic pathways in KEGG.Seven enriched pathways of insect resistance mainly involved Hippo sig-54卷南方农业学报·830·0引言【研究意义】亚洲柑橘木虱（Diaphorina citri Kuwayama）属半翅目（Hemiptera）扁木虱科（Liviidae），是毁灭性病害柑橘黄龙病（Huanglongbing）的重要传播虫媒，目前已扩散到美洲和非洲（江宏燕等，2018），其引发的柑橘黄龙病暴发成灾造成严重的经济损失。

高效氯氰菊酯降解菌的分离、鉴定及特性研究的开题报告
一、研究背景
氯氰菊酯是广泛使用的一种杀虫剂，其具有高效、快速、持久的优点，但也存在着对非靶生物的毒性和对环境的污染等问题。

因此，寻找高效的降解菌对氯氰菊酯进行降解成为一种有效的处理方式。

通过研究氯氰菊酯降解菌的分离、鉴定及特性，能够为环境治理提供科学依据。

二、研究内容
1.收集土壤样本并筛选出潜在的氯氰菊酯降解菌；
2.通过形态学和生理特征初步鉴定降解菌的种属；
3.应用16S rRNA序列分析技术对菌株进行精确鉴定；
4.研究菌株的生长特性和降解能力；
5.对菌株的代谢产物进行分析。

三、研究意义
1.为寻找高效的氯氰菊酯降解菌提供参考；
2.为深入研究氯氰菊酯的降解机理提供先导；
3.作为一种生物降解技术，具有环保意义。

四、研究方法
1.采集土壤样本；
2.分离培养降解菌；
3.通过形态学和生理特征初步鉴定菌株；
4.利用16S rRNA序列分析技术对菌株精确鉴定；
5.研究菌株的生长特性和降解能力；
6.对菌株的代谢产物进行分析。

五、研究预期成果
1.得到一种或多种具有高效降解氯氰菊酯的菌株；
2.通过对菌株的研究，了解其生长特性和代谢能力；
3.对降解氯氰菊酯的机理进行探讨；
4.为生物降解技术在环境治理中的应用提供基础研究数据。

蔬菜中高效氯氰菊酯等农药残留分析方法殷春杭;钱允辉;王志强【摘要】采用乙腈同时提取蔬菜中的高效氯氰菊酯和氰戊菊酯,用安捷伦的弗罗里硅土柱(500mg;6mL)进行净化,气相色谱法(μECD检测器)进行测定,高效氯氰菊酯的回收率在70.1%～110%,变异系数在1.35%～5.42%,最低检出限为0.001mg/kg.氰戊菊酯的回收率在84.99%～103.68%,变异系数在5.13%～7.15%,最低检出限为0.001mg/kg.【期刊名称】《中国测试》【年(卷),期】2007(033)004【总页数】3页(P118-120)【关键词】蔬菜;高效氯氰菊酯;农药残留【作者】殷春杭;钱允辉;王志强【作者单位】江苏省南通市农产品质量检验测试中心,江苏,南通,226006;江苏省南通市农产品质量检验测试中心,江苏,南通,226006;江苏省南通市农产品质量检验测试中心,江苏,南通,226006【正文语种】中文【中图分类】工业技术第 33 卷第 4 期中国测试技术 2007 年 7 月 CfflNAMEASUREMENT TECHNOLOGY V01.33No.4July.2007蔬菜中高效氯氰菊酯等农药残留分析方法殷春杭，钱允辉，王志强 (江苏省南通市农产品质量检验测试中心，江苏南通 226006)摘要：采用乙腈同时提取蔬菜中的高效氯氰菊酯和氰戊菊酯，用安捷伦的弗罗里硅土柱(500mg;6mL) 进行净化，气相色谱法（ vECD 检测器）进行测定，高效氯氰菊醑的回收率在 70.1% —110% ．变异系数在 1.35% —5.42% ，最低检出限为 O.OOlmg／ kg 。

氰戊菊酯的回收率在 84.99%-103.68% ，变异系数在 5.13% —7.15% ，最低检出限为 O.OOlmg/kg 。

关键词：蔬菜；高效氯氰菊酯；农药残留中圈分类号： TQ450.2+63文献标识码：A文章编号：1672-4984(2007)04-0118-03 Determinationofhigheffectcypermethrinandfenvalerateinvegetables YINChun-hang,QIANYun-hui,WANGZhi-qiang (Nantong SupervisionandTestinSCenterforAgriculturalProductQuality,Nantong226006,China) Abstract: High effect cypennethrinandfenvalerateinvegetableswereextractedwithacetonitrile simultaneously.Extractwa8purifiedwithAgilentflorisilcolumn(500mg;6ml),andanaISrzedbyga schromatography(yECDdetector).Theseresults showedthat recoveriesof higheffect cypermethrinandfenvaleratewere70.1% 一110%and84.99%~103.68%,coefficienLsofvariationwerel.35%~5.42%and5.1 3%~7.15%,andthelowestdetectionlimiLswereO.OOlny;lkgandO.OOlmg/kgrespectively. Keywords:Vegetables;Beta-cypermerthrin; Pesticides residues l 引言高效氯氰菊酯是目前应用最为广泛的菊酯类杀虫剂，与传统的有机磷类农药相比，其有着对环境安全，效果更好，亩投入成本低的优势。

高效氯氰菊酯在柑橘中的残留及降解动态研究高效氯氰菊酯，英文通用名：beta cypermethrin，化学名称：2,2-二甲基-3-（2 ,2-二氯乙烯基）环丙烷羧酸-α-氰基-（3-苯氧基）-苄酯，其结构式见图1。

高效氯氰菊酯是一种广谱杀虫剂，对许多虫害，如蚜虫、甜菜夜蛾、棉铃虫、潜叶蛾、菜青虫、蚜虫等具有良好的防治效果 [1-6]。

关于高效氯氰菊酯在蔬菜、水果等作物[7-12]上的残留研究国内外已有诸多报道，多采用GC、GC-MS、HPLC、HPLC-MS/MS等方法，本研究在 * 的基础上进行方法优化，结合GC-ECD，测定了高效氯氰菊酯在柑橘和土壤中的残留量，并对其降解规律进行了研究，为高效氯氰菊酯在柑橘上的膳食风险评估及残留监测提供了科学依据。

1.1 试剂与仪器1.1.1 药剂及试剂99%高效氯氰菊酯标准品（Dr.Ehrenstorfer GmbH）；2%高效氯氰菊酯乳油（EC），本实验室研制。

二氯甲烷、正己烷、乙腈、丙酮（美国天地公司）、无水硫酸钠、氯化钠（上海国药集团）。

1.1.2 仪器设备xx气相色谱仪（ECD，岛津公司），IKAT-25高速组织分散器（德国IKA公司），高速冷冻离心机H2050R-1（长沙湘仪有限公司），AB204-E型电子天平（瑞士梅特勒公司）。

1.2 田间试验设计田间试验于xx和2018年在桂林市、长沙市和厦门市进行。

按农药残留试验准则要求，设5个处理小区，重复3次，每小区2棵树，另设对照小区。

2%高效氯氰菊酯EC防治柑橘虫害。

降解动态试验：柑橘一半大小时施药，剂量为20 mg/kg，施药后2 h、1 d、2d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d、30 d、35 d采样，处理重复3次，处理间设保护隔离区，另设空白对照。

土壤样品：施药和采样方法参照植株样品。

所有样品均装入样品袋中，贴好标签，保存于-20 ℃冰箱中待测。

最终残留试验：按照20 mg/kg浓度药液施药2次、20 mg/kg浓度药液施药3 次、13.3 mg/kg浓度药液施药2 次、13.3 mg/kg浓度药液施药3次、空白对照五个处理顺序施药。