EDTA溶液(0.25molL,pH8.0)
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edta的酸效应系数与溶液的ph有关
酸效应系数(edta)与ph 值的关系是: pH>7时,1.6-2.0; pH<7时,5.3-8.4; pH=7时,3.9-5.5; pH=10时,为1.2-2.4.
其中,当溶液的PH 值在4.5-6.5之间时,1.0-1.5;而在7.0-11.0之间时,则可达到最大。
这主要是由于酸碱缓冲体系能够吸收水分子,使得它们对于缓冲作用所起的贡献减小了,从而导致ph 值上升。
但是如果把缓冲溶液长期保存在一个较高的ph 值下,缓冲溶液就会逐渐失去活性。
因此在实际应用中,我们需要注意缓冲溶液ph 值的变化范围。
酸效应系数的测定原理是根据EDTA 与蛋白质结合后,形成一种新的螯合物,此螯合物不稳定,很快被水解,故EDTA 的浓度越高,水解速率越快,则EDTA 的酸效应系数越大。
当EDTA 的浓度增加时,水解反应加快,其酸效应系数也随之提高。
因此,通过测定EDTA 的酸效应系数来判断EDTA 的水解程度和反应的完全程度,以及判断EDTA 在生产中是否被完全水解等方面具有重要意义。
EDTA 的酸效应系数越大,表明EDTA 水解程度越低、越易水解,即水解程度越轻,反之亦然。
但并非EDTA 的酸效应系数越大越好,因为水解程度太低的EDTA 将无法满足生产工艺的要求,甚至出现严重问题。
因此必须控制适宜的酸效应系数。
常见实验用溶液的配制方法[日期:2005-1-9] 来源:作者:[字体:大中小]一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。
1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
北京雷根生物技术有限公司
EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)
简介:
EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)是用EDTA.2Na 配制,调pH 至8.0,只有其pH 接近8.0,才能完全溶解。
Leagene EDTA 溶液经高压灭菌处理,用于螯合金属离子等,是常用分子生物学试剂。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、按实验具体要求操作。
注意事项:
1、 实验要求无菌时,应注意无菌操作。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
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编号 名称 DH0006 苏木素伊红(HE)染色液 PE0080 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) PE0103 Acr-Bis(30%,29:1) PS0013 RIPA 裂解液(强) R00195 Tris-EDTA 缓冲液(10×TE,pH8.0) R00300
X-gal(20mg/ml) TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 单试剂比色法)。
edta标准溶液的浓度EDTA标准溶液的浓度。
EDTA(乙二胺四乙酸)是一种常用的螯合剂,可以与金属离子形成稳定的络合物。
在实验室中,常常需要使用EDTA标准溶液来进行金属离子的测定和分析。
因此,掌握EDTA标准溶液的制备方法和浓度计算是实验室工作中必不可少的一部分。
一、EDTA标准溶液的制备方法。
1. 首先,准备所需的试剂和仪器。
包括EDTA固体、蒸馏水、酸式指示剂、PH计、容量瓶等。
2. 将一定质量的EDTA固体称取到容量瓶中,加入适量的蒸馏水,用磁力搅拌器搅拌溶解。
3. 加入适量的酸式指示剂,调节溶液的PH值至指定范围。
4. 用蒸馏水定容至刻度线,摇匀即可得到EDTA标准溶液。
二、EDTA标准溶液的浓度计算。
EDTA标准溶液的浓度计算是根据所用的EDTA质量、溶液的体积和EDTA的摩尔质量来进行的。
其浓度计算公式为:C(mol/L)= m(g)/ M(g/mol) / V(L)。
其中,C为EDTA标准溶液的浓度,单位为mol/L;m为EDTA的质量,单位为g;M为EDTA的摩尔质量,单位为g/mol;V为溶液的体积,单位为L。
在进行浓度计算时,需要注意使用准确的EDTA质量、摩尔质量和溶液的体积,避免因数据误差而导致浓度计算结果不准确。
三、EDTA标准溶液的应用。
1. 金属离子的测定,EDTA可与许多金属离子形成稳定的络合物,因此可以用来测定水样中金属离子的含量,如钙、镁、锌等。
2. 分析化学实验,在分析化学实验中,常常需要使用EDTA标准溶液来进行滴定分析,测定样品中金属离子的含量。
3. 环境监测,在环境监测中,可以利用EDTA标准溶液对水样中金属离子的含量进行测定,从而了解水质的污染情况。
四、EDTA标准溶液的保存。
制备好的EDTA标准溶液应密封保存,避免受到空气和光线的影响。
同时,要定期检查溶液的浓度,确保其稳定性和准确性。
总结:EDTA标准溶液的浓度计算和制备方法是实验室工作中必不可少的一部分。
edta标准溶液的常用浓度EDTA标准溶液是一种化学试剂,一般用于分析实验中的金属离子试剂滴定分析测定中。
EDTA标准溶液的浓度选择与分析实验所需的测定范围密切相关。
本文将围绕EDTA标准溶液的常用浓度展开阐述。
一、EDTA标准溶液常用浓度EDTA标准溶液有多种不同的浓度可供选择,其中最为常用的一般有0.05mol/L、0.1mol/L、0.2mol/L、0.5mol/L等。
不同的实验需要不同浓度的EDTA标准溶液。
二、EDTA标准溶液的制备以0.2mol/L的EDTA标准溶液为例,制备步骤如下:1. 称取精确的EDTA二钠盐量,记录药品当量、药品过量及溶剂体积,按公式计算所需理论药品质量。
例如,制备0.2mol/L的EDTA 标准溶液,所需EDTA药品质量为2×294.12=588.24mg。
2. 将EDTA二钠盐精确称取至反应瓶中,加适量去离子水或高纯水溶解,摇匀。
3. 用量筒加入适量的稀盐酸或氢氧化钠调节pH,至pH值在5.0~6.0之间,再用高纯水或去离子水定容至1L。
三、EDTA标准溶液的质量检验标准溶液的质量检验是保证实验数据准确而可靠的基础。
检验EDTA标准溶液质量的主要指标为其浓度是否稳定、药品是否纯净、pH 是否合适。
1. 浓度稳定性检验:使用滴定法或其他方法,对EDTA标准溶液的浓度进行检测,检测结果应在理论浓度±0.5%范围内。
2. 药品纯净度检验:使用药品分析法或其他方法检测EDTA标准溶液药品纯净度,药品纯净度应符合国家标准。
3. pH值检测:通过酸碱滴定、pH计等方法,对EDTA标准溶液的pH值进行检测,其pH值应在规定范围内。
四、EDTA标准溶液的注意事项1. 制备过程中需避免EDTA二钠盐受潮,应保存于避光、防潮、干燥处。
2. 制备时需注意药品选用和浓度计算的准确性,一般应重复两次以上,确保制备的标准溶液浓度准确。
3. 使用EDTA标准溶液时应使用新制备的溶液,并根据实验需要使用不同浓度的EDTA标准溶液。
EDTA标准溶液的配制和标定(2010-02-25 16:56:19)转载▼标签:杂谈实验原理2.1 乙二胺四乙酸(简称EDTA,常用H4Y表示)难溶于水,常温下其溶解度为0.2g·L-1,在分析中不适用,通常使用其二钠盐配制标准溶液。
乙二胺四乙酸二钠盐的溶解度为120g·L-1,可配成0.3mol·L-1以上的溶液,其水溶液pH=4.8,通常采用间接法配制标准溶液。
标定EDTA溶液常用的基准物有Zn、ZnO、CaCO3、Bi、Cu、MgSO4·7H2O、Hg、Ni、Pb。
等。
通常选用其中与被测组分相同的物质作基准物,这样滴定条件较一致。
EDTA溶液若用于测定石灰石或白云石中CaO、MgO的含量,则宜用CaCO3为基准物。
首先可加HCl溶液与之作用,其反应如下:CaCO3+2HCl═CaCl2+H2O+CO2↑然后把溶液转移到容量瓶中并稀释,制成钙标准溶液。
吸取一定量钙标准溶液,调节酸度至pH≥12,用钙指示剂作指示剂以EDTA滴定至溶液从酒红色变为纯蓝色,即为终点,其变色原理如下:钙指示剂(常以H2Ind表示)在溶液中按下式电离:H3Ind═2H++HInd2-在pH≥12溶液中,HInd2-与Ca2+离子形成比较稳定的络离子,反应如下:HInd2-+Ca2+═CaInd-+H+纯蓝色酒红色所以在钙标准溶液中加入钙指示剂,溶液呈酒红色,当用EDTA溶液滴定时,由于EDTA 与Ca2+离子形成CaInd-络离子更稳定的络离子,因此在滴定终点附近,CaInd-络离子不断转化为较稳定的CaY2-络离子,而钙指示剂则被游离了出来,其反应可表示如下:CaInd-+H2Y2-═CaY2-+ HInd2-+H2O由于CaY2-离子无色,所以到达终点时溶液由酒红色变成纯蓝色。
用此法测定钙,若Mg2+离子共存(在调节溶液酸度为pH≥12时,Mg2+离子将形成Mg(OH)2沉淀),此共存的少量Mg2+离子不仅不干扰钙的测定,而且会使终点比Ca2+离子单独存在时更敏锐。
【引用】常用pH缓冲溶液的配制和pH值2011-05-13 20:01:24| 分类:生物|字号订阅本文引用自DSC《常用pH缓冲溶液的配制和pH值》一、常用溶液的配制(文章来自:医药园() 整理:zfg)(一)溶液配制注意事项1.药品要有较好的质量试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteed reagent,G.R.)、分析试剂(Antalytical reagent,A.R.)化学纯(Chemical pure,C.P.)和实验试剂(Laboratory reagent,L.R.)等等。
工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。
2.药品称量要精确。
3.配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在5.5~7.0之间才可应用,在组织培养等特殊用途时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。
4.配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。
(二)0.067(1/15)Mol/L磷酸缓冲液1.1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷酸二氢钾(KH2PO4,A.R.)9.08g,用蒸馏水溶解后,倾入1 000ml容量瓶内,再稀释至刻度(1 000ml)。
2.1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,A.R.)9.47g (或者Na2HPO4·2H2O 11.87g)用蒸馏水溶解后,放入1 000ml容量瓶内,再加蒸馏水稀释至刻度(1 000ml)。
3.按附表的比例,配制成不同pH值的缓冲溶液。
(三)0.15Mol/L PB液Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.7g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量=358.22 0.15Mol/L溶液含53.7g/L。
NaH2PO4·H2O分子量=138.00 0.15Mol/L溶液含20.7g/L。
实验EDTA标准溶液(0.05mol/L)的配制与标定一、实验目的掌握EDTA标准溶液配制和标定的方法。
二、实验原理EDTA标准溶液常用乙二胺四乙酸的二钠盐(EDTA·2Na·2H2O=372.24)配制。
EDTA·2Na·2H2O是白色结晶粉末,可以制成基准物质,但一般不直接用EDTA配制标准溶液,而是先配制成大致浓度的溶液,然后以ZnO或Zn为基准物标定其浓度。
滴定在pH≈10的条件下进行,以铬黑T为指示剂,溶液由紫红色变为纯蓝色时即为终点。
滴定过程中的反应为:Zn2+ + HIn2-ZnIn- + H+Zn2+ + H2Y2-ZnY2- + 2H+终点时:ZnIn- + H2Y2- ZnY2- + HIn2- + H+(紫红色)(纯蓝色)三、仪器与试剂仪器:分析天平,台秤,50mL碱式滴定管,250mL锥形瓶,20mL移液管,100mL烧杯,10mL量筒,洗耳球,表面皿;试剂:NH3·H2O-NH4Cl缓冲溶液(pH=10.0),6mol·L-1HCl,1:1氨水,纯锌粒,EDTA-Na2(AR) ,铬黑T指示剂。
四、实验步骤1.EDTA标准溶液(0.05mol·L-1)的配制取EDTA·2Na·2H2O约9.5g,加蒸馏水500mL使溶解,摇匀,贮存在硬质玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶中。
2.EDTA标准溶液(0.05mol·L-1)的标定以Zn粒为基准物质,用分析天平准确称取纯锌粒0.75~1.00g(准确至0.1mg),置于100mL烧杯中,加6mol·L-l HCl溶液5mL,盖好表面皿,使锌粒完全溶解。
用蒸馏水冲洗表面皿和烧杯内壁,然后将溶液移入250mL容量瓶中,再冲洗表面皿和烧杯内壁数次,冲洗液全部并入容量瓶中,最后加水稀释至刻度,摇匀。
准确移取20mL此溶液,置于锥形瓶中,逐滴加入1:1氨水至开始出现Zn(OH)2白色沉淀,再加NH 3·H 2O-NH 4Cl 缓冲溶液10mL ,加水稀释至约100mL ,加少许铬黑T ,用待标定的EDTA 标准溶液滴定至溶液由红色变为蓝色即为终点。
EDTA标准溶液浓度EDTA(乙二胺四乙酸)是一种常用的螯合剂,广泛应用于化学分析、生物化学和医药等领域。
在实验室中,制备EDTA标准溶液是常见的操作之一。
本文将介绍EDTA标准溶液的制备方法及浓度计算。
首先,制备EDTA标准溶液需要一定的实验室技术和基本的化学知识。
在实验室操作时,应严格遵守实验室安全操作规程,佩戴防护眼镜、实验服等防护用具,以确保实验过程的安全性。
制备EDTA标准溶液的原料主要包括EDTA固体和蒸馏水。
首先,需要称取一定质量的EDTA固体,然后溶解于一定体积的蒸馏水中,最终得到一定浓度的EDTA标准溶液。
在这一过程中,需要注意溶解温度、搅拌时间和溶解度等因素,以确保溶液的均匀和稳定性。
在制备EDTA标准溶液的过程中,需要根据实际需要确定所需的溶液浓度。
通常情况下,实验中常用的EDTA标准溶液浓度为0.01 mol/L。
根据摩尔浓度的定义,摩尔浓度(C)等于溶质的物质量(m)与溶液的体积(V)之比,即C=m/V。
因此,在制备过程中,需要准确计量EDTA固体的质量和蒸馏水的体积,以确保最终溶液浓度的准确性。
在实际操作中,可以按照以下步骤进行制备EDTA标准溶液,首先,称取一定质量的EDTA固体,然后将其溶解于适量的蒸馏水中,最后用蒸馏水稀释至所需体积。
在这一过程中,需要使用量筒、容量瓶等准确的容器,并注意溶解过程中的温度和搅拌均匀度。
最终得到的溶液即为所需浓度的EDTA标准溶液。
在实验室中,制备EDTA标准溶液是一项基础而重要的实验操作。
通过本文的介绍,相信读者对于EDTA标准溶液的制备方法和浓度计算有了更清晰的认识。
在实际操作中,需要严格按照操作规程进行,以确保实验的准确性和安全性。
希望本文能对您有所帮助,谢谢阅读!。
质粒提取的原理、操作步骤、各溶液的作用细菌质粒是一类双链、闭环的DNA,大小范围从1kb至200kb以上不等。
各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份,通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态,但在一定条件下也会可逆地整合到寄主染色体上,随着染色体的复制而复制,并通过细胞分裂传递到后代。
质粒已成为目前最常用的基因克隆的载体分子,重要的条件是可获得大量纯化的质粒DNA分子。
目前已有许多方法可用于质粒DNA的提取,本实验采用碱裂解法提取质粒DNA。
碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法,其基本原理为:当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA 发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。
纯化质粒DNA的方法通常是利用了质粒DNA相对较小及共价闭环两个性质。
例如,氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心、离子交换层析、凝胶过滤层析、聚乙二醇分级沉淀等方法,但这些方法相对昂贵或费时。
对于小量制备的质粒DNA,经过苯酚、氯仿抽提,RNA酶消化和乙醇沉淀等简单步骤去除残余蛋白质和RNA,所得纯化的质粒DNA已可满足细菌转化、DNA片段的分离和酶切、常规亚克隆及探针标记等要求,故在分子生物学实验室中常用。
一、试剂准备1. 溶液Ⅰ: 50mM葡萄糖,25mM Tris-HCl(pH 8.0),10mM EDTA(pH 8.0)。
1M Tris-HCl (pH 8.0)12.5ml,0.5M EDTA(pH 8.0)10ml,葡萄糖4.730g,加ddH2O至500ml。
在10 lbf/in2高压灭菌15min ,贮存于4℃。
任何生物化学反应,首先要控制好溶液的pH,因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液。
50 mM葡萄糖最大的好处只是悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部。
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EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)
简介:
EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)是用EDTA.2Na 配制,调pH 至8.0,只有其pH 接近8.0,才能完全溶解。
Leagene EDTA 溶液经高压灭菌处理,用于螯合金属离子等,是常用分子生物学试剂。
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操作步骤(仅供参考):
1、按实验具体要求操作。
注意事项:
1、 实验要求无菌时,应注意无菌操作。
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