轮叶党参不定根的诱导培养
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轮叶党参栽培技术轮叶党参,俗名山地瓜,山胡萝卜,其根可入药,有补中益气、益脾生津功效,是制作朝鲜族风味咸菜和食品的原料。
由于品味极佳,又是保健滋补食品,因此,深受消费者欢迎,特别是受韩国、日本及东南亚国家和地区消费者青睐,也是我国传统出口商品之一。
在国际上具有广阔的市场前景。
我国林地资源十分丰富,但野生资源过量采挖已近枯竭,尤其是东北地区。
因此,发展人工栽培,尤其是发展仿生栽培,对补充出口有着十分重要的意义。
一、选地由于轮叶党参喜湿润,忌涝,怕旱,喜光,怕强光,山地一般选择向东、向北坡为宜,其次向南、西向坡地。
以排水良好、土壤湿润的棕壤为宜。
一般要求坡度在25℃以下,腐殖土层10~15厘米厚为宜,底土为活黄土的疏林地、灌丛地,农田宜选择土地肥沃、排水良好、有机质含量高的壤土沙壤为宜。
农田种植要根据绿色食品生产标准进行选地。
二、整地1.农田整地:灭茬,灭茬后每亩施腐熟农家肥5000公斤,均匀扬在地表。
用旋耕机旋耕,达到耕作层全层施肥,起垅,垅距60厘米。
2.疏林灌丛仿生栽培整地:利用疏林灌丛地种植轮叶党参就是利用天然攀爬物。
因此,整地要保留一定数量攀爬物,充分用林间空闲地种植。
一般在自然攀爬物的南、东、西三面清除杂草、矮冠,深刨20厘米搂净树根、草根、碎石,杂物搂平。
播种后保持疏林灌丛原貌。
3.疏林灌丛改造:可利用改造实行间作,整地要求全面整地,割除所有地上树木植物,平铺晒干烧场,刨去树根、草根、搂净、搂平待用。
三、播种1.种子处理:(1)雪藏法处理:将种子在2月混以3倍颗粒状雪,用编织袋装好,埋于房子背阴一面预先挖好的坑内,上用雪培埋40~50厘米,再覆草帘防日晒,播前7~10天取出晾至松散时混沙催芽,待发现种子一端有破胸迹象立即播种。
(2)温水处理:购来种子已来不及雪藏处理的,可采取温水浸种处理,具体方法:将种子在播种前半月用38℃温水浸一昼夜,捞出装入布袋中,放入洗衣机甩干桶内,甩5~6秒钟,将种子放在3~5℃地方低温处理,每天用3~5℃冷水浸种30分钟至1小时,甩干,连续处理半个月,转入常温下催芽。
轮叶党参的栽培技术
轮叶党参的栽培技术
轮叶党参[Codonopsis lanceolata(Sieb.et Zucc.)Trautv.],俗名山地瓜、羊乳、四叶参、山胡萝卜等,为桔梗科多年生缠绕性草本植物,是我国长白山区特有的中草药材和主要出口山野菜之一.轮叶党参富含多种黄酮类、芹菜素、木樨草素、黄酮醇甙,具有补虚、润肺止咳.通乳、解毒、排脓、疗疮等功效.中医以根茎入药,性平、味甘.肉质根也可炒食、腌渍朝鲜成菜,其风味独特鲜美,很受欢迎,尤其受韩国客商的喜爱.
作者:王占新周婷姗张海英作者单位:王占新,张海英(吉林省集安市花甸镇农业技术推广站,吉林集安,134215)
周婷姗(吉林省集安市农业技术推广总站,吉林集安,134200)
刊名:中国园艺文摘英文刊名:CHINESE HORTICULTURE ABSTRACTS 年,卷(期):2009 25(2) 分类号:S5 关键词:。
中草药轮叶党参再生体系的建立分别以轮叶党参(Codonopsis lanceolata Benth.et Hook.)的叶片、叶柄、茎段、种子和带腋芽茎段为外植体,通过愈伤组织的诱导及分化和丛生芽的诱导,建立了两种再生体系,获得的主要结果如下:1.愈伤组织诱导:以种子、茎段、叶片和叶柄为外植体均能诱导出愈伤组织,但在出愈率和愈伤生长方面差异较大,其中叶片诱导愈伤组织效果最好,是比较理想的外植体。
不同激素组合对愈伤组织的形成影响很大,其中生长素2,4-D是愈伤组织形成的关键因素。
筛选出最佳诱导培养基为:MS+2,4-D 0.5mg.L<sup>-1</sup>+6-BA1.0mg.L<sup>-1</sup>+KT 0.5mg.L<sup>-1</sup>,出愈率达100%。
2.愈伤组织继代培养:不同光照条件下愈伤组织均可增殖,但是光照16h.d<sup>-1</sup>条件下,愈伤增殖倍数最高,达9.5,愈伤组织生长迅速,呈淡黄绿色,质地紧密,这种继代培养的愈伤组织在后期的分化过程中分化程度较高。
筛选出最佳继代培养基为MS+6-BA 0.75mg.L<sup>-1</sup>+NAA0.5mg.L<sup>-1</sup>。
3.愈伤组织分化成苗:将生长较好的愈伤组织转接到分化培养基上,愈伤组织逐渐变绿,并形成很多突起,进而形成多芽体。
不同的光照条件对再生苗的分化影响显著,16h.d<sup>-1</sup>条件下获得的再生苗健壮,叶片多,而8h.d<sup>-1</sup>条件下获得的再生苗瘦弱不宜驯化。
筛选出最佳分化培养基为1/2MS+6-BA 0.5mg.L<sup>-1</sup>+NAA0.2mg.L<sup>-1</sup>,分化率高达89.4%。
轮叶党参栽培技术1.选地整地选地:轮叶党参为深根性植物,宜在土壤肥沃、土层深厚、富含腐植质的黑壤土、沙壤土及排水良好的黄壤土、弱酸性土壤中栽培,喜阳坡、忌涝、忌旱、忌盐碱地种植。
整地:需深翻、细耙、作床整平,做床宽1.2~1.4米,高25~30厘米。
2.播种及移栽春、秋两季均可,秋播比春播效果好。
秋播时间10月下旬为宜,即土壤结冻前进行;春播4月为宜,5月10日后播种出苗率低。
播种方法有两种,即大垄双行直播定植法和条床育苗移栽定植法。
直播法可培育优质边条参且省工时;育苗移栽法产量高,但费工时,爪子参多,质量差。
因此,提倡秋季大垄双行直播定植法。
播种前种子用赤霉素800毫克/千克药剂处理24小时,发芽率可达90%左右。
开沟条播行距10~13厘米,每公顷播种量7.5~10公斤,覆土1~1.5厘米,镇压并覆盖树叶或秸草保墒。
如移栽每公顷用苗3000公斤(保苗7万株),株行距10×20厘米,斜栽覆土10厘米左右,镇压、浇水、盖秸草。
3.施肥轮叶党参为根茎植物,为此要施足底肥,及时追肥。
每公顷施生物有机肥1.5吨或农家肥27000~30000公斤、磷肥。
并于第二年6月和8月追肥,追肥后要及时浇水。
4.中耕除草人工除草每年3~5次。
化学除草在出苗前杂草多时,每100平方米喷70%的农达250~300毫升除草;出苗后如禾本科杂草多,在2~3片叶时,可用拿捕净100毫升对水30公斤除草。
5.上架轮叶党参为多年生缠绕草本植物,株高2~3米,茎叶茂盛,须上架管理。
每公顷需粗2~3厘米、高2~3米的架条7万根。
主蔓高40~50厘米时,要及时插架条,让其自然上架。
6.摘蕾、打蔓、喷三效唑当轮叶党参花蕾形成时,除留种田外,开花前要摘除花蕾,剪去主蔓1/3,喷三效唑,减少地上部分营养消耗,促使根部快速生长,提高产量。
7.留种轮叶党参播种第二年开花结实,7月中、下旬开钟状花,8月下旬到9月中旬陆续成熟。
由于成熟期长,蒴果顶部开裂,种子易脱落,应随熟随采收,晒干搓出种子,簸净置阴晾通风干燥处待用。
轮叶党参不定根的诱导培养作者:李美阳来源:《安徽农业科学》2015年第01期摘要[目的]通过考察不同外植体与外源激素诱导轮叶党参不定根的能力来探索轮叶党参不定根生长的最佳条件。
[方法]切取轮叶党参无菌实生苗的叶片和茎段,接种到含有不同浓度外源激素的不定根诱导培养基中,考察不同外植体与外源激素诱导生根的能力,并在此基础上进行不定根的诱导增殖。
[结果]不同外植体以及不同浓度外源激素对不定根诱导能力不同,茎段诱导不定根的效果明显优于叶片。
不同生长素对轮叶党参不定根诱导的影响中,IAA对不定根的诱导效果优于NAA。
当IAA浓度为1.0 mg/L时的诱导培养效果最佳,茎段的生根率达到最高,可达 92%。
[结论]为轮叶党参的大规模组织培养奠定基础。
关键词轮叶党参;不定根;组织培养中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611(2015)01-027-02Induction and Culture of Adventitious Root of Codonopsis lanceolata BenthLI Meiyang(Agricultural College of Yanbian University, Yanji, Jilin 133002)Abstract[Objective] The optimum conditions of inducing capability of Codonopsis lanceolata adventitious root were explored through the study of different explants and exogenous hormones to explore the Codonopsis lanceolata adventitious root growth. [Method] Cuttings of the Codonopsis lanceolata aseptic seedling leaves and stem segments were inoculated into adventitious root induction medium containing exogenous hormone at different concentration, the ability of different explants and exogenous hormones on induction of rooting were investigated, and on this basis the proliferation of adventitious root induction experiment was conducted. [Result] Different explants and various concentrations hormones have different abilities on induction of adventitious root, stem segments induced adventitious root is obviously better than the blade. Effect of different auxins on Codonopsis lanceolata adventitious root induction, IAA is better than NAA on the induction of adventitious root. When the concentration of IAA for inducing culture best effect at 1 mg/L, stems rooting rate reached the highest value, up to 92%. [Conclusion] The study will lay a foundation for large scale tissue culture of Codonopsis lanceolata.Key wordsCodonopsis lanceolata Benth.et Hook.f; Adventitious root; Tissue culture作者简介李美阳(1971- ),女,吉林安图人,讲师,博士,从事植物生理方面的研究。
收稿日期20141119轮叶党参 [Codonopsis lanceolata Benth.et Hook.f] 属桔梗科党参属多年生藤本草本药食两用植物,别名山海螺、山胡萝卜、四叶参、羊奶、羊奶参、白蟒肉、羊乳等。
轮叶党参主要以根入药,传统医学认为其根入药具有消肿排脓、清热解毒、补虚通乳、养阴润肺及祛痰等功效[1-2]。
现代药理学研究表明,轮叶党参具有降血脂、抗氧化、抗突变、抗肿瘤及提高机体免疫力的作用[3]。
随着国际、国内市场对轮叶党参需求量的不断增长,野生资源采集已远不能满足市场的需要[4-5]。
我国东北地区野生资源虽然较多,但经过多年的采挖,资源已经枯竭。
保护轮叶党参植物资源已成为严峻的问题。
栽培轮叶党参可以解决市场的大量需求,但栽培轮叶党参仍具有生长周期长(一般为3~5年),易受环境、季节、病虫害影响,党参皂苷含量不高等缺点,自20世纪70年代中期国内外一些研究者利用植物组织培养技术[6]进行轮叶党参快速繁殖和品种改良,作为继野生、栽培之后的第三代植物资源的生产方式——植物组织培养越来越受到人们的青睐。
目前,利用生物技术进行中药资源繁殖并大规模生产其有效成分已成为一条新的发展途径,但药用植物细胞培养的弊端之一是有效成分含量的不稳定。
这主要是由于大多数有效成分均为次生代谢产物,其合成细胞阶段表现不强而造成,而根培养可以解决这一问题[7] 。
根培养的主要优点是具有原始植物根所具有的巨大生物合成能力,同时表现出明显的代谢稳定性和活力稳定性[8]。
近年来,国内外通过培养不定根生产有用次生代谢产物的研究日益活跃,此技术已在人参[9-11]等多种药用植物应用中得以成功。
不定根培养是轮叶党参次生代谢产物产生的有效培养方法。
同时,加强轮叶党参的不定根培养研究,可为次生代谢产物的大量生产提供原料,加速其药用植物开发进程[12],以提高其应用价值,满足生产和消费的需要。
笔者通过不同外源激素诱导不定根的能力来探寻不定根生长的最佳条件,为建立药用植物大规模组织培养奠定基础。
1材料与方法1.1材料轮叶党参种子购自安图青谷土特产专业合作社。
1.2轮叶党参无菌苗的获得将冷藏储存的轮叶党参种子去掉边缘种翅后用自来水冲洗30 min,直至没有其他杂质,在无菌操作台上倒入75% 乙醇消毒20 s,再用2%次氯酸钠溶液灭菌30 min,无菌水冲洗5次,无菌滤纸吸去多余水分,然后在无菌操作台上接种到MS 培养基上,接种时应防止种子重叠,进而发生霉变,最后放入培养室内,培养温度为(25±1)℃,光照强度2 000~2 500 lx,光照时间 12 h/d。
1.3不定根的诱导选取生长健壮的无菌苗于超净工作台上,切取不含叶腋1 cm 左右的茎段和0.5 cm2的叶片,平放于含有不同浓度植物生长调节剂的不定根诱导培养基上。
待不定根长至1 cm左右,将其剥离下来,转至新的培养基上继续培养。
1.4培养基和培养条件以1/2MS培养基为基本培养基,生长素IAA浓度为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0和3.0 mg/L共6个处理;生长素NAA浓度为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0和3.0 mg/L共6个处理。
所有培养基的蔗糖含量为30 g/L,琼脂含量为10 g/L,初始 pH5.7。
培养基在121 ℃灭菌20 min。
培养温度为(25±1)℃,暗培养。
茎段每个处理均接种10个外植体,重复 5 次。
观察不同浓度生长素条件下的生根情况。
生根率=(生根外植体数/接种外植体数)×100%1.5不定根的继代培养待不定根长至1 cm左右,将其剥离下来,转至新的培养基上继续培养。
培养条件为1/2MS+IAA 0.3 mg/L,培养温度为(25±1)℃下暗室培养,蔗糖30 g/L,pH 5.7。
2结果与分析2.1不同外植体对轮叶党参不定根诱导的影响为了确定轮叶党参不定根的最佳诱导部位,分别将叶片与茎段接种于含有2.0 mg/L IAA的培养基上,28 d后统计不定根生长情况(表1)。
接种10 d后茎的外植体逐渐膨大,部分出现愈伤组织,且部分诱导生成不定根(图1)。
图1不同外植体诱导生根的情况从表1可以看出,茎段诱导生根率明显高于叶片诱导生根率;诱导效果更好,两者生根率分别是88%和44%。
茎诱导的平均根数为4.10,明显高于叶片诱导的平均根数。
表1不同外植体在不同浓度的IAA诱导下生根情况外植体接种外植体数生根外植体数生根率%平均根数外植体表面愈伤化特征茎252288.04.10较多愈伤组织叶片251144.00.65较多愈伤组织2.2不同IAA浓度对轮叶党参不定根诱导的影响因茎段诱导不定根的效果优于叶片,接种外植体使用不含叶腋1 cm 左右的茎段。
在接种4~5 d后,轮叶党参外植体开始膨胀变大,部分开始卷曲,此时应将卷曲的脱离培养基的部分重新按到培养基上,进行诱导培养。
14 d左右轮叶党参外植体的切口处开始出现愈伤化现象并生长出不定根。
从表2可以看出,不同浓度IAA对轮叶党参不定根的诱导有较大差异,具体表现在:每个浓度的IAA都能诱导出轮叶党参的不定根,但随着IAA浓度增加生根率也逐渐升高,当IAA浓度为1.0 mg/L时,生根外植体数达46个,生根率为92%,每个外植体的平均根数为4.6,不定根的诱导效果最佳。
其次为IAA浓度2.0 mg/L时生根外植体数达42个,生根率为84%。
随着IAA浓度的增加生根率反而下降。
表2不同浓度的IAA诱导生根情况IAA浓度mg/L接种外植体数生根外植体数每个外植体的平均根数生根率%总根数0.150242.0481000.250262.8521400.550372.88741441.050464.6922302.050423.8841903.050253.5501752.3不同NAA浓度对轮叶党参不定根诱导的影响将轮叶党参茎段外植体分别接种在不同浓度NAA培养基上,每种激素的培养基上切取10段无生长点、无节间的茎段,平放在培养基上,试验重复5次。
14 d左右轮叶党参外植体的切口处开始出现愈伤化现象,生长出不定根,其诱导生根情况见表3。
从表3可以看出,在低浓度下随着NAA浓度增加,生根率逐渐增加,当NAA浓度为0.5 mg/L时,生根外植体数达38个,生根率达76.00%,效果最佳。