植物生理学实验
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植物生理学实验测试
植物生理学实验测试植物生理学是研究植物生长和发育等生理过程的科学学科，通过实验测试可以揭示植物对外界环境因素的响应和适应机制。
本文将介绍几种常见的植物生理学实验测试方法，包括植物生长实验、叶绿素测定实验和逆境胁迫实验等。
一、植物生长实验植物生长实验是研究植物对不同环境条件下的生长反应的一种常见方法。
可以通过改变光照、温度、水分等环境因素来观察植物生长的变化。
在实验中，选取相同种子并进行处理，如将一组种子暴露在高温环境下，另一组放置在低温环境中，然后记录植物的生长情况，并进行数据统计和分析。
通过这种实验方法可以了解植物对温度的适应性以及不同温度对植物生长的影响。
二、叶绿素测定实验叶绿素是植物中起着关键作用的色素，其含量可以反映植物光合作用的强弱。
叶绿素测定实验可以通过测量植物叶片中叶绿素的含量来评估光合作用的效率。
实验中，首先需要采集新鲜叶片样品，并将其研磨得到绿色叶汁，然后通过光度计等仪器测定叶绿素的吸光度值，并根据标准曲线计算叶绿素的含量。
通过叶绿素测定实验可以评估植物对不同环境因素（如光照强度、养分浓度）的响应和适应能力。
三、逆境胁迫实验逆境胁迫实验是模拟植物在环境恶劣条件下的生理反应，如盐胁迫、干旱胁迫、冷热胁迫等。
通过逆境胁迫实验，可以研究植物在逆境条件下的生理适应和耐受机制。
实验中，可以使用不同浓度的盐水浇灌植物或让植物在干旱条件下生长，然后观察植物的生长情况、生理指标的变化，并与正常生长的植物进行比较分析。
逆境胁迫实验可以揭示植物对逆境的敏感性和胁迫响应机制，为育种和改良耐逆植物品种提供理论依据。
总结：植物生理学实验测试是研究植物生理过程的重要手段，通过不同的实验方法可以揭示植物对环境因素的响应和适应机制。
植物生长实验、叶绿素测定实验和逆境胁迫实验是常见的植物生理学实验方法，分别用于研究植物生长、光合作用和逆境胁迫的情况。
通过这些实验测试的结果，可以进一步了解植物的适应性和耐受能力，为培育适应不同环境的优良植物品种提供理论基础。
植物生理学实验
1 外渗电导率记录
[思考题]
1 测定植物组织外渗电导率时，有时会发 现处理电导率比对照低的现象，试解释？
植物组织水势测定--小液流法
[原理]
在恒温恒压下，由植物组织与外界溶液组 成的体系的水势包含有植物组织的水势和 溶液的渗透势。
如果植物组织的水势低于外液的渗透势， 则植物组织吸水而使外液浓度变大；反之， 植物组织失水而使外液浓度变小；若二者 相等，则外液浓度不变，此时外界溶液的 渗透势等于植物组织的水势。
[思考题]
1.为什么常根据葡萄的颜色来判断葡萄的 质量好坏？
2.试想一下，在植物生长过程中影响花青 素形成的因素有哪些？
植物组织抗逆性鉴定 --外渗电导法
[原理]
质膜的选择透性因逆境伤害而明显改变或 丧失时，细胞内的物质(尤其是电解质)大 量外渗，从而引起组织浸泡液的电导率发 生变化，通过测定外渗液电导率的变化， 就可反映出质膜的伤害程度和所测材料抗 逆性的大小.
同一种溶液浓度不同，比重亦不同。
当两个不同浓度的溶液相遇时，稀的溶液 由于比重小而上浮，浓的溶液比重大而下 沉。当把浸过植物组织的溶液滴回到原浓 度的溶液中时，液滴会发生下降、上升或 基本不动几种情况。
如果液滴下降，说明浸泡液的渗透势高于 植物组织的水势；若液滴上升，说明浸泡 液的渗透势低于植物组织的水势；如果液 滴不动，则表示植物组织与浸泡液的水分 交换处于动态干衡中，浸泡液的渗透势等 于植物组织的水势。
实验一 植物的光合速率测定 ---改良半叶法
[原理]
• 植物叶片的主脉两侧对称部分叶面积基本 相等，其形态和生理功能也基本一致。
• 用物理或化学方法处理叶柄或茎的韧皮部， 保留木质部，以阻断叶片光合产物的外运， 同时保证正常水分供应。
[思考题]
1 测定植物组织外渗电导率时，有时会发 现处理电导率比对照低的现象，试解释？
植物组织水势测定--小液流法
[原理]
在恒温恒压下，由植物组织与外界溶液组 成的体系的水势包含有植物组织的水势和 溶液的渗透势。
如果植物组织的水势低于外液的渗透势， 则植物组织吸水而使外液浓度变大；反之， 植物组织失水而使外液浓度变小；若二者 相等，则外液浓度不变，此时外界溶液的 渗透势等于植物组织的水势。
[思考题]
1.为什么常根据葡萄的颜色来判断葡萄的 质量好坏？
2.试想一下，在植物生长过程中影响花青 素形成的因素有哪些？
植物组织抗逆性鉴定 --外渗电导法
[原理]
质膜的选择透性因逆境伤害而明显改变或 丧失时，细胞内的物质(尤其是电解质)大 量外渗，从而引起组织浸泡液的电导率发 生变化，通过测定外渗液电导率的变化， 就可反映出质膜的伤害程度和所测材料抗 逆性的大小.
同一种溶液浓度不同，比重亦不同。
当两个不同浓度的溶液相遇时，稀的溶液 由于比重小而上浮，浓的溶液比重大而下 沉。当把浸过植物组织的溶液滴回到原浓 度的溶液中时，液滴会发生下降、上升或 基本不动几种情况。
如果液滴下降，说明浸泡液的渗透势高于 植物组织的水势；若液滴上升，说明浸泡 液的渗透势低于植物组织的水势；如果液 滴不动，则表示植物组织与浸泡液的水分 交换处于动态干衡中，浸泡液的渗透势等 于植物组织的水势。
实验一 植物的光合速率测定 ---改良半叶法
[原理]
• 植物叶片的主脉两侧对称部分叶面积基本 相等，其形态和生理功能也基本一致。
• 用物理或化学方法处理叶柄或茎的韧皮部， 保留木质部，以阻断叶片光合产物的外运， 同时保证正常水分供应。
植物生理学实验 实验报告
植物生理学实验实验报告植物生理学实验实验报告摘要：本实验旨在探究植物的生理反应和适应机制。
通过观察植物在不同环境条件下的生长和生理指标的变化，我们可以更好地理解植物的生理过程和适应策略。
本实验采用了盆栽植物的生长观察和测量方法，结合实验室中的设备和技术手段，得出了一系列有关植物生理学的结论。
1. 引言植物生理学是研究植物生长、发育和适应环境的科学，它涉及植物的生理过程、代谢调节、信号传导等方面。
通过实验研究，我们可以揭示植物在不同环境条件下的生理反应和适应机制，为植物的生产和保护提供理论依据。
2. 材料与方法本实验选取了常见的盆栽植物作为实验对象，包括绿萝、仙人掌和吊兰。
为了模拟不同环境条件，我们设置了三组实验组：阳光组、阴影组和干旱组。
每组实验设置五个重复，以保证实验结果的可靠性。
3. 结果与讨论3.1 生长观察在阳光组中，绿萝的叶片呈现出深绿色，茂密且向阳生长；仙人掌的刺变得更加粗壮，颜色也更加鲜艳；吊兰的叶片展开较大，叶色浅绿。
而在阴影组中，绿萝的叶片变得较为苍白，茂密度下降；仙人掌的刺变得细长，颜色较为暗淡；吊兰的叶片展开较小，叶色深绿。
在干旱组中，绿萝的叶片开始出现萎蔫现象；仙人掌的刺变得干瘪，颜色变得暗淡；吊兰的叶片开始卷曲，叶色变黄。
3.2 生理指标测量我们通过测量叶片的光合速率、蒸腾速率和叶绿素含量等指标，来进一步了解植物在不同环境条件下的生理变化。
在阳光组中，绿萝的光合速率较高，蒸腾速率也较高；仙人掌的光合速率较低，蒸腾速率也较低；吊兰的光合速率和蒸腾速率处于中等水平。
而在阴影组中，绿萝的光合速率和蒸腾速率下降明显；仙人掌的光合速率和蒸腾速率几乎停止；吊兰的光合速率和蒸腾速率也有所下降。
在干旱组中，绿萝的光合速率和蒸腾速率急剧下降；仙人掌的光合速率和蒸腾速率几乎停止；吊兰的光合速率和蒸腾速率也有所下降。
叶绿素含量的测量结果与光合速率和蒸腾速率的变化趋势一致。
4. 结论通过本实验的观察和测量，我们可以得出以下结论：1) 植物在阳光充足的环境下生长更加茂盛，叶片颜色更加鲜艳。
植物生理学实验
叶绿素的卟啉环
叶绿素分子头部的金属卟啉环中心均为Mg2+。 在弱酸作用下，叶绿素分子中的镁可被H + 取
代而形成褐色的去镁叶绿素，后者遇铜则可形 成绿色的铜代叶绿素。 铜代叶绿素很稳定，在光下不易被破坏，故常 用此法制做植物的原色标本。
（三）叶绿素的光学性质
叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性，表现出一定 的吸收光谱，可用分光光度计精确测定。
二、植物生理学实验的目录
实验一 种子生活力的快速测定--------------------------4学时 实验二 小蓝子法测定植物的呼吸速率-------------------4学时 实验三 叶绿素a、b含量的测定---------------------------4学时 实验四 植物抗逆性的鉴定（电导仪法、丙二醛含量的测定、植物
实验一 植物种子生活力的快速测定 (TTC法、染料染色法)
[实验步骤]
一、氯化三苯四氮唑法（TTC法） 1、原理
凡是生活细胞，就有新陈代谢。渗入生活细胞的无色的TTC能被脱氢辅酶（NADH2或NADPH2）上 的氢还原成红色产物（TTF），肉眼可辨。 2、材料：玉米、小麦（吸胀种子） 3、方法：100粒种子，沿中心线纵切为二，做如下处理： 100半粒
4、叶绿素提取液荧光现象观察
➢ 取试管3： ➢ 从与入射光垂直的方向观
察； ➢ 再在透射光方向观察叶绿
体色素溶液的颜色； ➢ 记录叶绿素体色素溶液颜
色有何不同 ，分析原因。
5、铜代叶绿素反应
向试管4中逐滴加入浓盐酸，并不断摇匀，至颜色变化， 观察并记录现象；
向变色后的叶绿素溶液中加入少量醋酸铜，并在酒精灯上 缓缓加热，观察并记录颜色的变化。
[实验结果分析]
现代植物生理学实验指南
现代植物生理学实验指南植物生理学是一门重要的生物学科，研究植物在生长、发育、代谢和适应环境等方面的生理过程。
为了深入理解植物生理学，我们需要进行各种实验研究，这里为大家提供一份现代植物生理学实验指南，帮助大家系统了解植物生理学实验的基本方法和技巧。
实验一：光合作用实验光合作用是植物体内最重要的生理过程之一，我们可以通过测量植物的氧气释放量和二氧化碳吸收量来评估光合作用效率。
实验步骤如下：1. 将一片绿叶片放入水中，并用环状金属片夹住叶片。
2. 将装有水的容器倒置在金属片上，并使叶片完全浸入水中。
3. 在光亮条件下放置数小时，测量水中溶氧量的变化，记录并计算光合速率。
4. 重复操作若干次，得出稳定的结果。
实验二：水分利用实验水是植物生命的重要组成部分，其缺乏或过多都会对植物生长产生影响。
我们可以通过测量植物根系吸水能力和细胞渗透压来评估植物对水分的利用效率。
实验步骤如下：1. 准备两盆一模一样的植物，其中一盆为对照组，另一盆加盐水。
2. 分别测量两盆植物的根系吸水量和细胞渗透压，记录数据。
3. 将两盆植物进行比较，得出对盐水处理的植物的适应能力。
实验三：激素生理实验植物激素在影响植物生长、发育和适应环境方面发挥了重要作用，我们可以通过测量植物生长的速率和荷尔蒙水平来评估激素的作用。
实验步骤如下：1. 选择一些与生长相关的植物，如小麦或豌豆等。
2. 分别在一组处理中加入不同浓度的激素，另一组作为对照组。
3. 坚持一段时间，测量植物的生长速率和荷尔蒙水平，比较两组的差异。
以上是三个常见的植物生理学实验，希望这份实验指南能对学习植物生理学的同学们有所帮助。
在实验过程中，需要注意实验条件的一致性和数据的准确性，以确保实验的正确性和可靠性。
植物生理学实验报告植物生理学实验基本理论
植物生理学实验报告植物生理学实验基本理论一、植物生理学实验的基本理论1.植物生理学的基本概念：植物生理学是研究植物的生命过程和功能的学科，包括植物的营养、吸收与运输、呼吸、光合作用、生长发育等方面的研究。
2.实验的重要性：实验是科学研究的基础，通过实验可以验证理论，揭示现象背后的机制，推动学科的发展。
3.实验设计的原则：实验设计应具有科学性、可重复性、控制性和操作性。
科学性是指实验要有明确的科学目的和科学问题；可重复性是指实验的方法和结果可以被其他人重复验证；控制性是指实验中要对可能影响结果的因素进行控制；操作性是指实验的方法和步骤应具有可行性和操作性。
二、植物生理学实验的实施步骤1.实验前的准备工作：确定实验的目的和科学问题，收集相关的文献资料，了解实验的背景和已有研究成果。
2.实验器材和试剂准备：选择适当的实验仪器和试剂，确保其质量和可靠性。
3.实验的操作步骤：按照实验设计的方法和步骤进行实验操作，记录下关键的观察和测量数据。
4.实验结果的分析与讨论：将实验数据进行统计和分析，通过统计学方法对结果进行验证，并对实验结果进行解释和讨论。
5.实验结论的总结：根据实验结果和讨论的内容，总结出实验结论，并对下一步的研究方向提出建议。
三、实验示例：光合作用速率与光强的关系实验1.实验目的：探究光合作用速率与光强之间的关系。
2.实验步骤：(1)实验器材准备：太阳光度计、荧光光度计、并联光电度数计、光源、植物叶片。
(2)实验操作：a.在不同的光强条件下，测量光合作用速率和光强的关系。
b.分析测量结果，绘制光合作用速率与光强的曲线图。
c.讨论实验结果，解释光合作用速率与光强之间的关系。
3.实验结果：(1)测量结果表明，光合作用速率与光强之间存在正相关关系。
(2)高光强条件下，光合作用速率较高；低光强条件下，光合作用速率较低。
4.实验结论：光合作用速率与光强呈正相关关系，即光合作用速率随着光强的增加而增加。
通过以上实验示例，我们可以看到植物生理学实验的基本理论和实验设计。
植物生理学实验报告册
前言植物生理学是研究植物生命活动规律的科学，通过实验方法探究植物的生长、发育、代谢等生理过程。
本实验报告册旨在为学生提供植物生理学实验的基本方法和步骤，帮助学生掌握实验技能，提高实验操作水平。
一、实验内容本实验报告册包含以下实验内容：1. 细胞质壁分离与质壁分离复原2. 植物组织水势测定（小液流法）3. 植物蒸腾强度测定4. 植物蒸腾现象观察5. 根对矿质元素离子的交换吸附6. 植物光合强度的测定7. 叶绿体色素的提取分离及其理化性质8. 光合作用必需条件及光下放氧9. 植物呼吸强度的测定（广口瓶法）10. 种子生活力测定11. 细胞分裂素对离体叶片的保绿作用12. 种子萌发时有机物质转化的观察二、实验方法以下为部分实验的具体方法：1. 细胞质壁分离与质壁分离复原实验目的：熟悉质壁分离发生的条件，区分初始质壁分离、凹形质壁分离、凸形质壁分离等的不同。
实验材料：黄丝藻主要仪器设备和药品：- 仪器设备：显微镜；载玻片；盖玻片；单面刀片；尖头镊子；小培养皿。
- 试剂：1mol/L 硝酸钾溶液；1mol/L 氯化钙溶液；1mol/L 蔗糖溶液。
实验步骤：- 将黄丝藻置于载玻片上，滴加1mol/L 蔗糖溶液，观察细胞质壁分离现象。
- 将细胞置于1mol/L 硝酸钾溶液中，观察质壁分离复原现象。
2. 植物组织水势测定（小液流法）实验目的：测定植物组织的水势。
实验材料：洋葱鳞片叶主要仪器设备和药品：- 仪器设备：小液流仪；滤纸；蒸馏水。
- 试剂：0.5mol/L 蔗糖溶液。
实验步骤：- 将洋葱鳞片叶切成小块，置于小液流仪的滤纸上。
- 将滤纸浸入0.5mol/L 蔗糖溶液中，记录液流速度。
- 重复实验，改变蔗糖浓度，观察液流速度的变化。
三、实验报告撰写实验报告应包括以下内容：1. 实验目的：简述实验的目的和意义。
2. 实验原理：阐述实验的理论依据。
3. 实验材料：列出实验所使用的材料和试剂。
4. 实验方法：详细描述实验步骤。
植物生理学的重要实验技术
植物生理学的重要实验技术植物生理学是研究植物内部各种生理过程的科学，通过实验技术的应用，可以深入研究植物的生理特性和调控机制。
本文将介绍几种重要的植物生理学实验技术，包括光合作用测定、光周期实验、蒸腾作用研究和植物生长素的测定。
一、光合作用测定光合作用是植物通过光能将二氧化碳和水转化为有机物质和氧气的过程。
光合作用的测定可以通过净光合速率的测定来进行。
测定方法可以使用荧光法或者气体交流法。
荧光法是通过测定叶片上的荧光信号的强度来计算净光合速率，而气体交流法是通过测定进出叶气体的浓度变化来计算净光合速率。
这些方法需要使用一些仪器设备，如荧光测定仪或气体交流测定系统。
二、光周期实验光周期是植物在一定时间内接受光照和黑暗的周期性变化。
光周期实验主要用于研究植物的花期控制、休眠期控制等生理过程。
常用的方法是通过控制植物所接受的光照时间和黑暗时间的比例来模拟不同的光周期条件。
可以使用光周期系列灯来实现对光周期的控制。
在实验过程中，可以观察植株的生长状况、花期的调控以及激素含量的变化等指标。
三、蒸腾作用研究蒸腾作用是植物体内水分的散失过程，是植物体内水分运输和植物生长发育的关键过程之一。
蒸腾作用研究常用的技术是测定植物叶片表面的水蒸气压，并结合气孔开闭情况来研究蒸腾作用的影响因素。
测定水蒸气压时通常使用水分压差传感器或者电子秤等设备，观察气孔开闭可以通过显微镜或者扫描电子显微镜等工具进行。
四、植物生长素的测定植物生长素是一类植物内源激素，调控着植物体内的生长和发育过程。
研究植物生长素的测定可以使用生物测定法、免疫测定法和色谱法等。
生物测定法使用生物体来测定生长素的活性，如使用阿片酸促进小麦胚芽的生长来测定生长素含量。
免疫测定法则是利用抗体和抗原之间的特异性结合来测定生长素含量。
色谱法是利用气相色谱或者液相色谱来分离和测定植物生长素的含量，通常需要先对样品进行提取和纯化。
结论植物生理学的实验技术是理解植物各种生理过程和调控机制的关键。
植物生理学实验报告
实验一植物组织水势的测定（小液流法）——2013.3.11 一、目的用小液流法（落滴法）测定植物组织的水势，由水势大致了解植物体内的水分状况二、原理水势表示水分的化学势，象电流由高电位处流向低电位处一样，谁从水势高处流向低处。
植物体细胞之间，组织之间以及植物体和环境间的水分移动方向都由水势插决定。
三、材料与设备植物材料：阔叶树叶片（大叶女贞）实验器具：细滴管一支；试管及指形管各五支（带塞）；100mL烧杯一只；镊子、剪刀各一把；2mL、5mL移液管各一支；标签纸；钻孔器；木板试剂：1ml/L蔗糖溶液；甲烯蓝溶液四、操作步骤1.用短滴管吸取1,mol/L蔗糖液配制一系列浓度递增的蔗糖溶液（0.05,0.1,0.2,0.3,0.4mol/L）各10 ml，加入干燥刻度试管内，各管都加上塞子，充分混合，并编号。
用移液管从浓度各试管中吸取1ml注入第二指形管内，各管均加塞，并贴上标签。
2.用钻孔器（取相同部位）钻取同大小叶片。
每支指形管中放入10片，加塞，放置20~30分钟（期间摇动2~3次），到时间后，加入2~3滴甲烯蓝溶液于指形管中，使其溶液呈蓝色，以区别原来的颜色。
3.用细长滴管从各指形管中依次吸取着色的液体少许，然后伸入相同编号（原相同浓度）试管的中部，缓慢从细长滴管尖端横向放出一滴蓝色试验溶液，在无色透明背景上观察小液滴移动的方向。
如果有色液滴向上移动，说明细胞液中水分外流，试验比重比原来小；如果有色液向下移动，则说明细胞从溶液中吸收了水分，溶液变浓，比重变大；如果液滴不动，向外扩散则说明两者的浓度相等或接近，即植物组织的水势等于溶液的渗透势。
记录液滴不动的试管中蔗糖溶液的浓度，若找不到改浓度，取在下降上升转变时量浓度的均值。
五、作业1.记录小液流在试管内的移动方向2.按下列公式计算组长的水势：ψW（细胞水势）=ψs=-CRT式中：ψs——溶液的渗透势，以Mpa为单位R——气体常数，为0.008314Mpa*L/（mol*K）。
植物生理学实验报告
植物生理学实验报告摘要：本实验旨在通过一系列实验来研究植物的生理特性及其对外界环境的响应。
我们使用了单子叶植物蔗糖苦苣菜（Saccharum officinarum L.）作为研究对象，并分别对其光合作用、光反应及水分运输进行了分析。
通过实验结果，我们得出了一些重要结论，对于深入了解植物生理学及其应用具有重要的意义。
引言：植物生理学是研究植物如何在内外环境的调节下进行生长和发育的科学。
通过对植物的生理特性进行研究，我们可以更好地了解植物生活的基本规律。
因此，本实验旨在通过一系列实验来深入研究植物的生理学特性。
材料与方法：1. 实验材料：蔗糖苦苣菜植株、草状质量秤、光谱辐射计、叶绿素荧光仪、离心机等。
2. 实验步骤：- 实验一：光合作用a. 将蔗糖苦苣菜植株放置在恒温暗房内恢复一段时间。
b. 将光谱辐射计放在适当位置，记录光照强度和光质。
c. 将一片健康的叶片置于夹层式草状质量秤上，记录叶片重量。
d. 将叶片暴露在光源下，测量一定时间内的叶片重量。
e. 重复实验步骤c和d，以获得多组数据并进行统计分析。
- 实验二：光反应a. 将蔗糖苦苣菜叶片置于叶绿素荧光仪上，等待测量稳定。
b. 记录初始叶绿素荧光（F_o）值。
c. 迅速打开强光源，记录最大叶绿素荧光（F_m）值。
d. 计算有效光能利用率（Yield）和光化学淬灭（qP）等参数。
- 实验三：水分运输a. 随机选取两片蔗糖苦苣菜叶片，将其离枝并切割横截面。
b. 快速将一片叶片放置在自来水中，随即用另一片叶片封住叶脉。
c. 将样品放置在离心机上，启动离心机以模拟植物体内水分运输。
d. 一段时间后，观察叶片的水分状态，并记录数据。
结果与讨论：1. 实验一的结果显示，蔗糖苦苣菜的光合作用明显受到光照强度和光质的影响。
光照强度越高，光合速率越快。
同时，特定波长范围的光对光合作用的促进作用更为明显。
2. 实验二的结果表明，蔗糖苦苣菜的光反应能力非常高，有效光能利用率和光化学淬灭都表现出良好的性能。
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２.组织液中硝态氮含量的测定
• 取5g新鲜植物材料，切碎，于研钵内加少量蒸馏 水研磨，洗入量筒或三角瓶，振荡１-２分钟 （或用榨汁器尽力榨出尽汁液）， 定容至1０毫 升，澄清，取上清液1毫升按标准曲线制作方法 测定硝态氮（比色时如样品液颜色太深，可以适 当稀释10-20倍），按下列公式计算含氮量：
酶活性：
C V1 / V 2 W t
C—反应液催化产生的亚硝态氮总量（μg） V1—提取酶液时加入缓冲液等后的总体积（ml） 10ml V2—酶反应时加入的粗酶液体积（ml）1ml W—样品重量（g） t—反应时间（h小时,0.5）
E5植物组织中硝态氮的测定
• 一、原理及意义：植物体内硝态氮的含量， 不仅反映出植物的氮素营养状态，还有助 于鉴定果蔬及其加工品的品质．硝态氮必 须还原成NH3才能参加植物体内的有机化合 物的合成．还原的部位因植物类别和环境 条件而异，可以在根部，也可以在枝叶.
• 硝酸盐还原为亚硝酸盐（植物体内由硝 酸还原酶（NR）催化）。
• 产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸（或对 –氨基苯磺酰胺）及α–萘胺（或萘基乙 烯二胺）在酸性条件下定量生成红色偶 氮化合物。
• 生成的红色偶氮化合物在520nm波长下有最 大吸收峰，可用分光光度法测定。
二、仪器与设备
分光光度计；
三、实验步骤
• 1. 绘制标准曲线：取上述标准磷溶液配成浓 度为0，10，20，30，40，50μg/mL，分别取 1mL于试管中，各加入钼酸铵-硫酸混合溶液 。 3.5ml、α-1.2.4氨基奈酚磺酸0.5ml，摇匀，37 C保温15-25min。选择660nm波长，用光径 1cm比色杯，以浓度0为参比溶液，测得各标 准溶液的光密度。以磷的浓度为横坐标，光 密度为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线。
• 植物组织中硝态氮含量（ug/g）=C*V
• Ｃ 为标准曲线上查得的组织提取液所含硝态氮浓度 （ug/ml） • Ｖ为１g植物组织所制备的提取液体积（ml）此次为2.
E6.植株磷素的测定
一、原理
与意义
材料中的有机物经酸氧化分解，使磷在酸性 条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。 此化合 物经α-1.2.4氨基奈酚磺酸还原成兰色化合物-钼蓝。用分光光度计在波长660nm处测定钼 蓝的吸光值，以测定磷的含量。反应式为： H3PO4+12（NH4）3MoO4+21HNO3→（NH4） 12MoO3+21NH4NO3+12H2O 3PO4· （NH4）3PO4· 12MoO3 钼蓝
2．酶反应和酶活性测定 （1）取样 将材料（小白菜、小麦、玉米等作物叶片）洗净， 用蒸馏水冲洗，滤纸吸干。在叶片中部打取直径 1cm的圆片（或剪成0.5～1.0cm2的小块）混匀。 A 称0.5～1.0g 1-3份，放入三角瓶（试管并编 号）。 B 对照，称0.5～1.0g 1份，放入三角瓶。 (A和B最好同重，便于计算。)
注意：液滴不 能贴壁
• 五、计算
• 计算公式：фW =-RTiC • 式中фW为植物组织水势，以bar表示；i为解离系数，蔗糖是1； R为气体常数，0.083 L•bar/mol•K；T为绝对温度，K（即 273℃＋t，t为实验温度）；C为等渗溶液浓度 • [注意事项]
• 1．叶片投入小瓶要快，小瓶及时加盖，防止叶内或小瓶中水分蒸发影响实 验结果。 • 2．加人实验组的甲烯蓝粉末量不宜过多，以免影响溶液的比重。 • 3．胶头细玻璃弯管要各溶液专用，如用一只弯管则应从低浓度到高浓度依 次吸取溶液。 • 4．释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影响液滴移动。 • 5．观察液滴移动状况最好放在一个白色的背景下进行。
• 三、仪器设备与试剂试材
• 1．植物材料 马铃薯块茎、玉米或菠菜叶片 • 2．实验器材 吸水纸、容量管（或10mL量筒）、 试管、带盖青霉素小瓶、胶头细玻璃弯管、移液 管、剪刀或打孔器、橡皮塞和软木塞、试管架、 温度计和镊子。 • 3．实验试剂 lmol/L的蔗糖溶液、甲烯蓝粉末。
• 四、实验步骤：
量大会影响溶液浓度， 能够显色即可
• 2．等渗溶液确定
• ①用胶头细玻璃弯管从各小瓶中 依次吸取少量的浅蓝色溶液，并 用吸水纸吸掉胶头弯管外壁上的 过快会影响上 浮或下沉的观 溶液，然后将弯管伸入相同编号 察效果 的对照组试管液体中部，缓慢放 出溶液一滴，观察蓝色液滴的移 动方向（见图）。 • ②若有色液滴向上移动，表明组 织失水，使蔗糖溶液浓度降低、 比重减小；若有色液滴向下移动， 表明组织吸水，使蔗糖溶液浓度 升高、比重增大；如果有色液滴 静止不动，则表明蔗糖溶液与植 物组织水势相等，记录该蔗糖溶 液的浓度。
• 四、实验步骤：
• 称量瓶洗净烘干备用 土豆洗净打孔切片称重(连 瓶，两份) 一号瓶 105℃烘干直至恒重； • 二号瓶加入浓度65％-75 ％蔗糖溶液 放置1-2小 时，中间经常摇动 阿贝折射仪测量蔗糖溶液浓 度。 • 五、计算：自由水含量=？ • 束缚水含量=？ • 组织含水量=？
E2.植物组织渗透势的测定
三、仪器设备与试剂试材
• 仪器 • 试剂 • 试材 显微镜等 0.1、0.2-0.7mol/L的蔗糖溶液 洋葱
• 四、实验步骤：
• 1.配制0.1、0.2-0.7mol/L的蔗糖溶液浓度梯度； • 2.浸入洋葱表皮5-10分钟 • 3.显微镜观测找到未产生质壁分离的最高浓度和 产生初始质壁分离的浓度，算出其平均值即等渗 溶液的浓度。
四、实验步骤
1.标准曲线制作 ：
取6支洁净烘干的15ml刻度试管，以5μg（亚硝 态氮近似1μg/ml）的标准液配制0～5.0μg的系 列标准亚硝态氮溶液各1ml,分别加入对–氨基苯磺 酸及α–萘胺各2ml。摇匀后在30℃保温箱或恒温 水浴中保温15min，然后在540nm波长下比色。以 亚硝态氮（μg）为横坐标，光密度值为纵坐标绘 标准曲线或建立回归方程。
三、试验试剂
• 1%（W/V）对-氨基苯磺酸溶液：称取1.0g 加入25ml浓HCl中，用蒸馏水定容至100ml。
• 0.2%（W/V）α-萘胺溶液：称取0.2gα-萘 胺溶于25ml冰醋酸中，用蒸馏水定容至 100ml。
• 30%三氯乙酸溶液：75.0g三氯乙酸水溶后 定容250ml。 • KNO3（0.1mol/L）、异丙醇（1% V/V）、 磷酸缓冲液（0.1mol/L）混合液：称 3.03g KNO3溶于300ml 0.1mol/L的磷酸缓 冲液中，再加3ml异丙醇混匀。
真空抽气泵（或20ml注射器筒）；
天平； 单面刀片；
保温箱（或恒温水浴）；
刻度试管（15ml）；移液管；
离心管等
三、试验试剂
• ２０﹪醋酸溶液；KNO3标准液； • 混合粉剂 • 实验材料 洗净的小白菜、小麦、玉米等 作物叶片
四、实验步骤
1.标准曲线制作 ： 取5支洁净烘干的15ml刻度试管按顺序分别加入 25ug/ml的KNO3 80、160、240、320、400ul,再分别 加蒸馏水920、840、760、680、600ul,即配成2、4、 6、8、10ug/ml的系列标准硝态氮溶液;每支试管再 加入9ml ２０﹪醋酸溶液,0.2g试剂混合粉剂，剧烈 摇匀后在30℃保温箱或恒温水浴中保温10-30min， 去除粉膜，取清液在５２０nm波长下比色。以硝态 氮（μg）为横坐标，光密度值为纵坐标绘标准曲 线。
（2）酶促反应 A 向A各三角瓶加入磷酸缓冲液混合液5ml，KNO3 5ml。 B 向B三角瓶加入磷酸缓冲液混合液5ml，蒸馏水 5ml。 然后将所有试管置真空干燥器中接真空泵抽 气，直至叶片沉在瓶底。将各三角瓶置30℃下 于黑暗处保温30min，准确记录反应时间。
（3）比色 • 将各三角瓶取出静置2min，吸取上清液1ml 加入另一组试管，按标准曲线做法进行显色 测定，从标准曲线查出或回归方程计算出其 亚硝态氮含量（处理减对照），计算酶活性 （Nμg· ﹣1· ﹣1）。 g h •
• 掌握植物组织水势的测定方法，并了解渗透系统中水势 大小是水分移动方向的决定因素。 • 二、原理及意义：植物生活细胞是一个渗透系统，当将植 物细胞或组织放人外界溶液中时，水分将以水势差为动力 在两者间流动，最终达到动态平衡。如果植物组织的水势 小于外界溶液的水势，植物细胞吸水，使外界溶液浓度增 大；反之，植物细胞失水，使外液浓度变小。若植物组织 与外界溶液水势相同，将不改变外部溶液的浓度，此时外 液的渗透势就等于植物组织的水势。可以利用外界溶液的 浓度不同其比重也不同的原理来确定与植物组织水势相同 的外液，根据公式计算植物组织的水势。
E1.植物组织中自由水、束缚水含量的测定
• 一、实验目的：了解植物组织中水分存在的状态
与生命活动的关系，熟悉折射仪的使用。
• 二、原理及意义：略
• 三、仪器设备与试剂试材
• 仪器 阿贝折射仪、分析天平、烘箱、钻孔器、 干燥器、称量瓶、移液管等。 • 试剂 质量浓度65％-75 ％蔗糖溶液
• 试材 新鲜土豆
α-1.2.4氨基奈酚磺酸
二、实验试剂
• 1. 50μg/mL标准磷溶液：（称取0.2195g分析纯 KH2PO4）溶于400mL去离子水中，加入5mL浓硫酸， 然后转入1L容量瓶中定容(摇匀）。 • 2. 钼酸铵-硫酸混合溶液： 2.5%钼酸铵和3mol/L硫酸 等体积混合。 • 3. α-1.2.4氨基奈酚磺酸溶液：将 0.25 α-1.2.4氨基奈 酚磺酸 ,15g NaHSO3及0.5gNa2SO3溶于100ml蒸馏水中。 使用前加水混合均匀。
E4.硝酸还原酶活性测定
一、原理
• 硝酸还原酶（NR）是植物氮素同化的关键酶，它催 化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐 。
• 产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸（或对–氨基苯磺 酰胺）及α–萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性条件 下定量生成红色偶氮化合物。
• 生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收 峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由 产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg· ﹣1· ﹣1为 g h 单位。