生化试剂存在的问题及解决办法
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ELISA试剂盒可能出现的问题及解决方法问题及现象原因解决办法1整块板最终反应未产生颜色或整体吸光度值偏低1.室温过低或试剂未回至室温。
2.试剂失效。
3.试剂过失效日期。
4.试剂开启时间过长,污染。
5.移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸头内壁挂液太多或者内壁不清洁。
6.反应时间不足。
7.洗涤时冲击力太大,洗涤液浸泡时间太长,洗涤次数增加。
1.控制室温并确保试剂回至室温。
2.与我公司联系。
3.更换新批号的试剂盒。
4.试剂开启后尽快用完。
5.校正移液器,吸头要配套,每次装吸头要吻合紧密。
移液不宜过快,排放应完全。
吸头内壁要清洁,最好一次性使用。
6.准确计时。
7.减少洗涤冲击力,按说明书要求浸泡时间,准确记住洗涤次数8.蒸馏水水质有问题。
9.样品添加了防腐剂,抑制了酶的反应8.测定蒸馏水配剂对酶联免疫的影响9.样品中不能添加防腐剂2整行或整列板孔最终反应产生颜色深,无梯度10.手工洗板时相对应的吸头与移液器接触不严,导致未吸上洗涤用水或吸上的水量不够。
11.洗板机洗板时相对应的管路阻塞,导致未注入洗涤用水或水量不够。
10.洗板前检查吸头是否接牢固,是否高矮一致并且在一条直线上。
如果在安装吸头时感觉不易安装牢固请不要使用。
曾发现过有的国内厂商的吸头不直,不易安装牢固,请不要使用,避免造成实验失败。
11.检查管路是否阻塞,出水不畅并疏通,检查注水量是否充分。
3标准曲线不成良好的S型,请与盒中的质检报告曲12.加完酶标记物之后的手工洗板步骤失败。
洗涤用水被板孔中游离的酶标记物污染。
12.注意加洗涤水的移液器吸头尖必须置于微孔板上方约1厘米处打出洗涤水,绝对避免注入板孔中的液体接触到或溅到移液器管尖上而将板孔线对比13.加完酶标记物之后的洗板机洗板步骤失败。
洗涤次数不够及注水量不够。
14.洗板后未立即进行下一步操作,中间间隔过长。
15.当板孔中含有两种以上的试剂时未能充分混均。
中游离的酶标记物带回到洗涤用水中。
生化检验试剂管理中的常见问题及解决对策摘要:检验分析准确性需确保检验分析前相关工作得到正确实施,相关研究显示,70%~80%的实验误差发生在分析前阶段。
所以在检验分析前阶段做好质量控制及管理十分必要。
近年来,加强质量控制在生化检验分析中的作用已得到临床认可,各项质量控制方法也得到了广泛应用。
相关学者研究显示,针对生化检验分析工作,建立在有效质量控制基础上,有利于提升检验准确性。
关键词:生化检验试剂;试剂管理;常见问题;质量管理引言试剂作为检验环节中不可或缺的一部分,可直接影响检测质量,同时在临床检验的日常支出中,试剂成本占比30.51%。
其中,生化检验试剂种类繁多、用量较大、稳定性不一,如何加强试剂全流程管理、建立试剂管理制度、提高试剂使用效率、避免浪费是生化检验试剂优化管理中的焦点问题,也是保证生化检验质量的重要环节之一。
1什么是生化检验生化检验通常是通过生物或化学方法进行的物理检验。
生化检测涉及广泛的主题,如血清白蛋白、谷氨酰胺、总胆固醇、肾功能等。
生物化学审查项目包括肝功能、肾功能、血糖、脂质和电解质,其中肝功能检查项目包括各种转氨酶,例如谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、谷氨腺基转移酶等。
2生化检验试剂管理中的常见问题①检查人员的风险防范力度不高,检查科工作人员的专业知识水平普遍符合标准,但风险防范意识不高,虽然生化检查工作中的危险因素众所周知,但保护要求没有严格执行,为减轻工作负载而省略了保护步骤,当工作量较大时,通常不戴口罩、手套等保护设备。
甚至一些检查员在实验室吃饭,在设备出现故障的情况下,报告不及时。
②清洁人员压力不大,目前医院对清洁人员的要求很低,大部分清洁人员缺乏专业知识安全意识不是很强,在处理和检查废弃样品时往往存在一定的风险。
③经费筹措不合理,检查工作十分专业,如果生化质量保证管理不构成综合监测系统,可能影响最终结果,检查科目前的人才结构太年轻,检查结果审查存在一定问题。
全自动生化分析仪试剂存在的问题及解决方法1 优质的仪器用水优质的仪器用水是使用好检验试剂的一个十分重要环节之一。
因为测定离子类的项目:比如铜、铁、锌、钙、Mg、磷。
这些项目在使用过程中,仪器用水的质量相当重要,虽然现在一般医院的生化仪都带有制水系统,但制水系统基本都是制备去离子水,离子交换树脂在使用一段时间后交换能力明显下降,需要定期进行更换,否则制备的水离子含量多,电导率偏高。
使用含离子超标的水冲洗仪器,直接影响检验结果。
再如血氨、二氧化碳项目,如果水质不好,仪器用水中本身含氨和二氧化碳就很高,则检测该项目的结果也会受到严重的影响。
还有如果血清中含有GLDH,而仪器用水存在氨时,可消耗NADH,使利用NADH的酶联连续监测法结果偏高。
解决办法:定期监测水质,当仪器用水的电阻小于1.0MQ时要更换离子交换树脂或活性炭。
2 标本的及时分离及测定标本的及时分离及测定是用好检验试剂的首要环节因为凡是利用NADH转化为NAD 变化率来检测其物质含量的试验都或多或少受到血液存放时间的影响。
原因是全血存放时间越长,红细胞利用血清中的糖进行无氧酵解产生丙酮酸,丙酮酸使NADH转化为NAD ,这样使测定结果假性升高。
解决办法:①作好与临床的沟通,对抽血人员和标本运送人员(传递人员)进行培训;②及时分离血清并及时检测;③也可将全自动生化分析仪上的延迟时间设置大于60秒,这样试剂在延迟期内消除丙酮酸的干扰,可完全避免假阳性结果的出现。
3 交叉污染3.1 生化分析仪本身的清洗问题造成的交叉污染在使用全自动生化分析仪时,仪器的交叉污染现象是引起实验结果偏离的一个原因。
由于全自动生化分析仪试剂针需要接触各种试剂,一般难以彻底清洗干净,所以容易造成分析项目的携带污染.而生化项目的测定往往仅需要几微升样本,试剂往往需要几百微升,尤其在没有自动冲洗程序的流动池式生化分析仪上,由于前带现象的存在,如果前一个样本为高值样本,则接后的第一个低值标本结果应慎重报告。
实验室试剂管理存在的问题实验室试剂管理存在的问题
实验室试剂管理是确保实验室正常运作的重要环节,然而在实践中,我们也发
现了一些问题存在。
首先,试剂库存管理不够及时和准确,无法及时了解试剂的使用情况和库存量。
这可能导致试剂的过期、过量或不足,影响实验的进行。
其次,试剂标识不清晰是另一个问题。
试剂瓶上的标签信息可能模糊、缺失或
已经磨损,导致实验人员难以准确识别试剂。
这种情况可能导致实验人员使用错误的试剂或不确定试剂的质量和纯度,给实验结果的可靠性带来风险。
此外,试剂的储存条件也是一个被忽视的问题。
某些试剂可能对温度、湿度和
光照敏感,如果没有正确储存,它们的有效性将受到影响。
实验室应该建立合适的储存区域,并监控储存条件,以确保试剂的质量和稳定性。
最后,在实验室试剂管理中,缺乏严格的记录和跟踪制度。
试剂的购买、领用、使用和废弃等环节应该被记录和跟踪,以便对试剂流动情况进行监控和分析。
这样的记录和跟踪制度可以帮助实验室管理人员及时发现问题,提高试剂管理的效率和准确性。
为解决以上存在的问题,实验室应该建立严格的试剂管理制度。
首先,试剂的
进库和出库应记录在册,并由专人负责审核和核对。
其次,试剂标签应明确、持久,并随时进行更新。
合适的储存和保管条件应该得到充分重视,并进行定期检查。
最后,建立完善的记录和跟踪制度,确保试剂流动的可追溯性。
通过以上改进措施,实验室试剂管理的准确性和效率将得到提升,从而为实验
工作的顺利进行提供有力的支持。
生物化学实验错误与故障排除在进行生物化学实验过程中,经常会遇到各种错误和故障,这些问题可能会影响实验结果的准确性和可靠性。
因此,及时排除实验错误和故障是保证实验顺利进行和结果准确的关键。
本文将从常见的生物化学实验错误和故障入手,介绍如何进行排除处理,以确保实验的顺利进行。
一、试剂准备错误1. 问题描述:试剂的制备过程中,可能因为操作不慎或计量不准确导致试剂配制出现差错,进而影响实验结果。
2. 解决方法:在试剂的配制过程中,要严格按照配方和操作规程进行,确保每一步骤的准确性和精确性,避免出现试剂准备错误。
同时,在使用试剂前,应该仔细检查试剂的标签和配制记录,确保试剂的纯度和浓度符合实验要求。
二、仪器设备故障1. 问题描述:在生物化学实验中经常会使用各种仪器设备,如离心机、显微镜等,如果设备故障或操作不当,会严重影响实验结果的准确性。
2. 解决方法:在进行实验前,应该对仪器设备进行检查和调试,确保设备正常工作。
同时,在实验过程中要按照操作手册和使用说明进行操作,避免操作失误和设备故障。
如果发现仪器设备出现故障,应立即停止实验,并请技术人员进行维修和调试。
三、实验操作失误1. 问题描述:实验操作中可能会出现各种失误,如样品标签混乱、操作步骤颠倒等,导致实验结果不准确。
2. 解决方法:在进行实验前,要认真阅读实验操作指南,了解实验流程和操作规程,确保每一步骤的正确性和顺序性。
在实验过程中,要认真对照操作手册进行操作,避免操作失误。
如果发现实验操作出现失误,应立即停止实验,并重新进行操作。
四、数据处理错误1. 问题描述:在数据处理过程中可能会出现计算错误、数据录入错误等问题,导致实验结果的准确性受到影响。
2. 解决方法:在进行数据处理前,要仔细核对数据的来源和准确性,避免数据处理中出现错误。
在数据处理过程中,要按照算法和计算方法进行计算,确保数据的准确性和可靠性。
如果发现数据处理错误,应及时进行纠正和调整,确保实验结果的准确性。
检验科试剂存在问题整改措施1. 背景介绍在医疗检验过程中,试剂是必不可少的工具,扮演着关键的角色。
试剂的质量与准确性直接影响到诊断结果的可靠性,从而影响到患者的健康。
然而,在实际操作中,我们经常会遇到试剂存在一系列问题的情况,如过期、质量不合格等。
为了确保检验结果的准确性和可靠性,我们需要采取一系列整改措施,以解决试剂存在的问题。
2. 问题分析2.1 试剂过期试剂过期是常见的问题之一。
试剂在过期后,其性能和稳定性会发生变化,无法保证结果的准确性。
使用过期试剂进行检验,可能导致误差增大、假阳性或假阴性等问题,从而影响诊断结果。
2.2 试剂质量不合格有时候,我们购买的试剂质量不合格,可能存在稀释、污染、纯度不足等问题。
这些质量问题直接影响到试剂的可靠性。
使用质量不合格的试剂进行检验,将会产生不可预期的结果,导致误判和诊断错误。
2.3 试剂标签不清晰试剂标签不清晰也是一个常见的问题。
试剂的标签应当包含相应的信息,如试剂名称、批次号、生产日期、有效期等等。
试剂标签不清晰会导致操作者无法准确判断试剂的有效性和使用情况,从而增加操作风险。
3. 整改措施3.1 规范试剂采购为了避免试剂过期和质量不合格等问题,我们应该加强试剂采购的管理。
具体措施如下:•建立试剂采购清单:制定试剂采购清单,明确试剂的名称、规格、用途、数量等信息;•优先选择正规供应商:选择信誉好、产品质量可靠的供应商购买试剂;•严格把关:在收到试剂时,负责人应当按照标签上的信息,检查试剂的有效期和标签信息是否清晰;•做好试剂记录:对试剂进行记录,包括购进日期、有效期、批次号等,便于管理和排查问题。
3.2 试剂定期检查为了及时发现试剂存在的问题,我们应该对试剂定期进行检查。
具体措施如下:•制定试剂检查计划:制定试剂检查的时间和频率,明确检查内容和责任人;•试剂外观检查:检查试剂外观是否有异常,如变色、结晶等;•试剂标签检查:检查试剂标签的完整性和清晰度;•试剂有效期检查:检查试剂的有效期是否过期,及时淘汰过期试剂。
实验室试剂管理存在的问题实验室试剂管理是实验室管理中非常重要的一个环节,涉及到试剂的使用、采购、储存以及废弃等多个方面。
试剂管理的好坏直接影响到实验室的安全性和效率。
然而,在实际操作中,我们经常会发现实验室试剂管理存在着一些问题。
首先,一些实验室在试剂采购方面存在着随意性。
由于管理不严,很多实验室没有明确的试剂采购流程和规范,导致试剂的采购变得混乱。
有些实验室采购试剂时缺乏详细的需求订购单,无法及时了解实验室试剂库存情况,导致试剂库存过多或过少的问题。
同时,试剂的采购过程中存在着一些纪律问题,有些实验人员没有按照规定的流程提交试剂采购申请,造成试剂的重复采购或者无法及时采购的情况。
其次,一些实验室在试剂储存方面存在着不规范的问题。
试剂的储存是试剂管理中非常重要的一个环节,涉及到试剂的保存和使用安全。
然而,一些实验室试剂储存存在着乱堆乱放、分类不清等问题。
试剂容器没有标识或者标识不规范,无法及时辨认试剂的种类和有效期。
一些易燃、易爆和有毒试剂的储存也存在着隐患,没有按照规定的方法和条件进行储存,增加了实验室的安全风险。
此外,一些实验室在试剂废弃方面存在着没有妥善处理的问题。
实验室试剂的废弃需要按照相关规定进行处理,但是一些实验室在试剂废弃方面存在着不重视或者不了解的情况。
试剂废弃处理不当可能对环境造成污染和安全隐患,尤其是一些有毒、易燃和易爆试剂。
因此,为了解决实验室试剂管理中存在的问题,有必要采取相应的措施。
首先,建立健全试剂采购管理制度,规定试剂采购流程和规范,明确试剂采购的责任人和审批程序。
同时,加强对实验室人员的培训,提高其采购意识和规范操作,并建立试剂库存管理制度,确保试剂库存的准确性和及时性。
其次,在试剂储存方面,加强试剂分类和标识,确保试剂容器上有标明试剂的名称、浓度和有效期等信息,并建立试剂储存区域的划分和管理制度,确保易燃、易爆和有毒试剂的储存安全。
最后,在试剂废弃方面,建立试剂废弃管理制度,明确试剂废弃的处理方式和程序,并加强实验室人员的培训,提高其对试剂废弃处理的认识和重视程度。
生化试剂常见问题的解决办法1.样品信息样品的溶血、脂血、黄疸等会对测定成果发生非化学反应的干扰。
因此,应根据溶血、脂浊、黄疸的光谱吸收特性,采用双波长或多波长的检测形式,并在成果核算中扣除因溶血、脂血、黄疸引起的影响,减少干扰程度。
2.试剂空白试剂空白吸光度是反映试剂质量的目标。
每种试剂都有必定的空白吸光度规模,试剂空白吸光度的改变往往提示该试剂的变质;有些试剂久置后变浑浊。
这些状况均可使空白吸光度升高。
往往需要加大用量,才使“表观”吸光度上升,将就过试剂空白核对的“关”,其成果为如下状况:①线性规模变窄现象:高值测不高。
原因:生产试剂时有效成分投料量缺乏;试剂成份稳定性较差。
②灵敏度变低现象:酶促反应速度曲线斜率下降,测定成果有严峻系统误差。
原因:试剂底物浓度缺乏。
③低值偏高现象:试剂空白的改变曲线(吸光度VS时刻)显着动摇。
原因:试剂自身不稳定,自行分解;东西酶纯度不够,杂酶含量超限,导致干扰效果。
3.测定规模每种待测物都有一个可测定的浓度或活性规模,样品成果若超越此规模,分析仪将显示成果超越规模的提示。
表明试剂现已变质,应更换合格试剂。
4.底物耗尽使用连续监测法、两点法测定酶活性时,若酶活性十分高,底物接近被耗尽,吸光度上升或下降会超越某一吸光度改变规模,监测期的吸光度将偏离线性,使测定成果不可靠。
5.酶的预活化测定血清中的某些酶,如CK,离体(采血)后很简单失活。
只有通过适当的还原效果才能重新激活。
在AST,ALT采用IFCC推荐办法测定时需要磷酸吡哆醛预活化。
需要强调:含有活化剂的生化试剂,其测定酶活性的成果要高些。
6.校准与成果溯源性酶的校对:要满足在同一办法学、同一测定条件、与理论核算的FACTOR 值差异不大,没有发现有显着影响因素,方可进行校对。
生化仪器之试剂存在的问题及解决办法全自动生化分析仪试剂存在的问题及解决办法:1 优质的仪器用水优质的仪器用水是使用好检验试剂的一个十分重要的环节之一。
因为测定离子类项目:比如铜、铁、锌、钙、镁、磷。
这些项目在使用过程中,仪器用水的质量相当重要,虽然现在一般医院的生化仪都有制水系统,但制水系统基本都是制备去离子水,离子交换树脂在使用一段时间后交换能力明显下降,需要定期进行更换,否则制备的水离子含量多,电导率偏高。
使用含离子超标的水冲洗仪器,直接影响检验结果。
再如血氨、二氧化碳项目,如果水质不好,仪器用水中本身含氨和二氧化碳就很高,则检验该项目的结果也会受到严重的影响。
还有如果血清中含有GLDH(谷氨酸脱氢酶),而仪器使用水存在氨时,可消耗NADH,使利用NADH的酶联连续检测法结果偏高。
解决办法:定期检测水质,当仪器用水的电阻小于1.0MQ时需要更换离子交换树脂或活性炭。
2 标本的及时分离及测定标本的及时分离和测定是用好检验试剂的首要环节,因为凡是利用NADH转化为NAD变化率来检测其物质含量的试验都或多或少受到血液存放时间的影响,原因是全血放时间越长红细胞利用血清中的糖进行无氧酵解产生的丙酮酸,丙酮酸使NADH转化为NAD,这样使用测定结果假性升高。
解决办法:a、作好与临床的沟通。
对抽血人员和标本运送人员进行培训;b、及时分离血清并及时检测;c、也可将全自动生化分析仪上的延迟时间设置大于60秒,这样试剂在延迟期内消除丙酮酸的干扰,可安全避免假阳性结果出现。
3 交叉污染3.1生化分析仪本身的清洗问题造成的交叉污染使用全自动生化分析仪时,仪器的交叉污染现象是引起实验结果偏离的一个原因。
由于全自动生化分析仪试剂针需要解除各种试剂,一般难以彻底清洗干净,所以容易造成分析项目的携带污染。
而生化项目的测定往往需要仅几微升样本,试剂往往需要几百微升,尤其在没有自动清洗程序的流动池式生化分析仪上,由于前带现象的存在,如果前一个人标本为高值样本,则接后的第一个低值标本结果应慎重报告。
使用计生物化学试剂的注意事项与常见问题解析计生物化学试剂是在生物化学实验中常用的一类试剂,它们在生物分析、生物工程和医学诊断等领域发挥着重要作用。
然而,由于试剂的特殊性质和操作的复杂性,使用计生物化学试剂时需要注意一些问题,本文将对这些注意事项进行解析,并针对常见问题提供解决方案。
一、试剂储存与保管1. 试剂储存温度:不同的计生物化学试剂对温度的要求不同,一般应在2-8℃的冰箱中保存。
但也有一些试剂需要在-20℃以下保存,因此,在使用前应仔细阅读试剂说明书。
2. 避光保存:部分试剂对光线敏感,容易分解或降解,因此应避免阳光直射,存放在避光的地方。
3. 密封保存:试剂瓶盖在使用后应紧密封闭,避免试剂受潮、氧化或污染。
4. 防止交叉污染:不同试剂之间应分开存放,以免发生交叉污染。
二、试剂使用注意事项1. 注意试剂的溶解度:试剂的溶解度是指在一定温度下,单位容积溶剂中能溶解的最大量试剂。
在实验中,应根据试剂的溶解度选择合适的溶剂和浓度,以免发生溶解度不足或过度溶解的情况。
2. 试剂稳定性:试剂的稳定性是指试剂在一定条件下的稳定性,如温度、酸碱度等。
在使用试剂前,应了解试剂的稳定性,避免使用已经失效的试剂。
3. 试剂使用量:在实验中,应根据实验的需要选择合适的试剂使用量,避免浪费和过量使用。
4. 注意试剂的毒性和腐蚀性:一些计生物化学试剂具有一定的毒性和腐蚀性,使用时应佩戴防护手套、护目镜等个人防护装备,避免直接接触皮肤和眼睛。
三、常见问题解析1. 试剂溶解度不足:有时候在实验中会遇到试剂溶解度不足的情况,可以尝试加热溶剂或调整溶剂的pH值,以增加试剂的溶解度。
2. 试剂失效:如果试剂失效,可能是由于存储条件不当或使用时间过长导致的。
在使用前应检查试剂的有效期和存储条件,避免使用失效的试剂。
3. 试剂交叉污染:试剂交叉污染可能会导致实验结果的误差,应注意在使用不同试剂时,避免使用同一支移液器或同一实验器皿,以减少交叉污染的可能性。
生化试剂应用常见问题的探讨试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一,但不能反映试剂质量的全部。
试剂成份、纯度、用量及稳定性,才是保证试剂质量的关键所在。
目前市售的一些试剂具有抗干扰作用,主要是通过加入抗干扰物质或使用新的色素原以避免内源性物质的干扰。
但值得注意的是:一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时,会带来样品含量真实性的变化。
1 试剂空白试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一。
每种试剂都有一定的空白吸光度范围,试剂空白吸光度的改变往往提示该试剂的变质;如利用Trinder反应为原理的检测试剂会因含酚类物质被氧化为醌而变为红色。
碱性磷酸酶、r一谷氨酰转肽酶、淀粉酶等检测试剂会因基质分解出硝基酚或酚基苯胺而变黄。
有些试剂久置后变浑浊。
这些情况均可使空白吸光度升高。
丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶等负反应,在放置过程中其试剂空白吸光度会因NADH自行氧化为NAD+而下降。
原则上,吸光度上升的反应,其试剂空白吸光度越低越好,不能超过一个高限;相反,吸光度下降的反应,其试剂空白吸光度不能低于一个低限。
因此,试剂空白吸光度限值,常作为程序参数输入仪器,如经核查超限,仪器会自动报警,提示更换试剂。
需要指出的是,还原型辅酶I(或II)等投料量不足或劣质的原料,往往需要加大用量,才使“表观”吸光度上升,凑合过试剂空白核对的“关”,其后果为如下情况:1.1 线性范围变窄现象:高值测不高。
原因:生产试剂时有效成分投料量不足;试剂成份稳定性较差。
1.2 灵敏度变低现象:酶促反应速度曲线斜率下降,测定结果有严重系统误差。
原因:试剂底物浓度不足。
1.3 低值偏高现象:试剂空白的变化曲线(吸光度VS时间)明显波动。
原因:试剂自身不稳定,自行分解;工具酶纯度不够,杂酶含量超限,导致干扰作用。
2 样品信息样品的溶血、脂血、黄疸等会对测定结果产生非化学反应的干扰。
因此,应根据溶血、脂浊、黄疸的光谱吸收特性,采用双波长或多波长的检测模式,并在结果计算中扣除因溶血、脂血、黄疸引起的影响,减少干扰程度。
第1篇随着科学技术的不断发展,生物化学领域的研究日益深入,同时也伴随着一系列复杂的问题和挑战。
本文将针对生化领域常见的几个问题及其解决方案进行探讨。
一、生物大分子的分离纯化问题1. 问题:生物大分子(如蛋白质、核酸等)在生物体内含量较低,且存在多种相似分子,分离纯化难度较大。
2. 解决方案:- 亲和层析:利用生物大分子与其配体之间的特异性相互作用进行分离纯化。
- 凝胶过滤:根据分子大小和形状的差异进行分离纯化。
- 离子交换层析:根据分子表面电荷的差异进行分离纯化。
- 疏水层析:根据分子疏水性的差异进行分离纯化。
二、蛋白质结构解析问题1. 问题:蛋白质的结构对其功能至关重要,但解析蛋白质结构存在一定的困难。
2. 解决方案:- X射线晶体学:通过分析X射线与蛋白质晶体相互作用产生的衍射图样,解析蛋白质的三维结构。
- 核磁共振(NMR)技术:利用核磁共振波谱分析蛋白质分子的结构和动态特性。
- 冷冻电镜技术:将蛋白质样品快速冷冻,利用电子显微镜观察其三维结构。
三、基因编辑技术问题1. 问题:基因编辑技术虽然具有巨大的应用潜力,但存在一定的伦理和安全问题。
2. 解决方案:- 严格审查:对基因编辑项目进行严格的伦理审查和安全评估。
- 建立监管体系:建立健全的基因编辑监管体系,确保技术应用的合法性和安全性。
- 加强国际合作:加强国际间的合作与交流,共同应对基因编辑技术带来的挑战。
四、生物制药问题1. 问题:生物制药领域存在研发周期长、成本高、成功率低等问题。
2. 解决方案:- 优化研发流程:采用高通量筛选、计算机辅助设计等新技术,缩短研发周期。
- 降低生产成本:采用生物反应器、基因工程菌等技术,降低生产成本。
- 提高成功率:加强基础研究,提高对疾病机理的认识,提高药物研发的成功率。
五、生物能源问题1. 问题:生物能源的开发利用存在资源消耗大、环境影响大等问题。
2. 解决方案:- 优化生物能源生产过程:采用先进的生物技术,提高生物能源的生产效率。
在生化室日常工作中,在双试剂测试项目中,总是R2用完了,而R1尚余很多,随着检验次数的累积,这种效应越加明显,留下来的R1留之无用,弃之可惜。
生化试剂R1、R2消耗量不对等的原因:如果查阅仪器说明书,可以发现生化试剂在使用过程中是有损耗的,这种效应是由于仪器本身设计有试剂“取样/ 富余量”所致,多数仪器都存在这种问题。
仪器在试剂瓶转移到反应杯的过程中,会多吸入大概5ul的量,R1、R2同样的加试剂办法,到最后会出现什么情况呢?以ALT试剂为例,规格R1为200ml,R2为50ml,正常情况下仪器参数设为:样品20ul;R1为160ul,R2为40ul,实际吸试剂时,R2每次吸的量是45ul,这样R2将在1111次测试后用完,而R1在1111*(160+5)次测试后,用量为183ml,富余量为17ml,相同批号试剂累积到5盒时,R1的富余量将是85ml。
解决思路:在双试剂测试中,R1 一般为缓冲液,R2为反应物质混合物。
设想:两试剂按二种不同比例混合,其所含反应物成分、构成比不变,只是反应物浓度不同,而反应物浓度不同对测定中的反应实质没有影响,只对反应的有效检测线性范围有影响;在样品量不变的情况下,如果适当增加反应物浓度,其线性范围变宽,浓度减低,则线性范围变窄;而如果同时将样品量也减少一些,则仅是曲线的斜率略降低(灵敏度略降低),而线性范围几乎不受影响;对于酶类速率法测定来说,在没有校准品时,所提供的K 值有意义,不能轻易改动,而在有校准品时,K 值是可以调整的。
解决办法:如果处于节约试剂的考虑,如上例ALT项目可采取:R1 设定量不变,R2 新设定量为36ul。
样品新设定量= 原设定量(20ul)*(36/40)= 18ul,用校准品重新定标。
结果:R2采用新设定量36ul,总的测试数变为1219次,比原先1111次增加了119次,增加了10%的测试数,即实现了节省试剂成本10%;理论上,牺牲了很小的检测灵敏度,实际应用中,室间质评和室内质控都没有影响。
实验室试剂负责人发现试剂缺少的整改措施一、前言实验室是进行科学研究、教学实验和技能培训的重要场所,试剂是实验室开展各项工作的基础。
保证实验室试剂的充足和合理使用,对于提高实验室工作效率、保障实验结果的准确性和安全性具有重要意义。
然而,在日常工作中,实验室试剂负责人经常会发现试剂缺少的问题,这给实验室的正常运行带来了困扰。
为了有效解决试剂缺少问题,提高实验室管理水平,本文从试剂管理、采购、储存、使用等方面提出了针对性的整改措施。
二、整改措施1.完善试剂管理制度建立完善的试剂管理制度是解决试剂缺少问题的关键。
实验室试剂负责人应制定详细的试剂采购、使用、储存和处置规定,明确各级实验室工作人员的职责,确保试剂管理的规范化和科学化。
2.加强试剂库存管理试剂库存管理是保证试剂充足的重要环节。
实验室试剂负责人应定期对试剂库存进行盘点,确保库存数据的准确性。
同时,根据实验室的实际情况和需求,合理制定试剂采购计划,避免试剂积压和浪费。
3.优化试剂采购流程试剂采购流程的优化可以有效缩短试剂采购时间,保障实验室工作的顺利进行。
实验室试剂负责人应与具有良好信誉的供应商建立长期合作关系,确保试剂质量。
同时,简化采购审批流程,提高采购效率。
4.提高试剂使用效率提高试剂使用效率是减少试剂浪费、缓解试剂缺少问题的关键。
实验室试剂负责人应加强对实验室工作人员的培训,提高其对试剂使用的熟练度和规范性。
此外,鼓励实验室内部交流与合作,共享试剂资源,避免重复采购。
5.建立试剂应急机制针对突发情况导致的试剂缺少,实验室试剂负责人应建立试剂应急机制。
与供应商签订应急采购协议,确保在紧急情况下能够迅速补充试剂。
同时,建立试剂库存预警系统,当库存低于一定阈值时,及时提醒负责人进行补充采购。
6.加强实验室队伍建设实验室试剂负责人应加强对实验室队伍的建设,提高实验室工作人员的责任心和使命感。
加强对实验室工作人员的培训和教育,提高其对试剂管理的重视程度,确保实验室工作的顺利进行。
全自动生化分析仪试剂存在的问题及解决方法1 优质的仪器用水优质的仪器用水是使用好检验试剂的一个十分重要环节之一。
因为测定离子类的项目:比如铜、铁、锌、钙、Mg、磷。
这些项目在使用过程中,仪器用水的质量相当重要,虽然现在一般医院的生化仪都带有制水系统,但制水系统基本都是制备去离子水,离子交换树脂在使用一段时间后交换能力明显下降,需要定期进行更换,否则制备的水离子含量多,电导率偏高。
使用含离子超标的水冲洗仪器,直接影响检验结果。
再如血氨、二氧化碳项目,如果水质不好,仪器用水中本身含氨和二氧化碳就很高,则检测该项目的结果也会受到严重的影响。
还有如果血清中含有GLDH,而仪器用水存在氨时,可消耗NADH,使利用NADH的酶联连续监测法结果偏高。
解决办法:定期监测水质,当仪器用水的电阻小于1.0M Ω时要更换离子交换树脂或活性炭。
2 标本的及时分离及测定标本的及时分离及测定是用好检验试剂的首要环节因为凡是利用NADH转化为NAD 变化率来检测其物质含量的试验都或多或少受到血液存放时间的影响。
原因是全血存放时间越长,红细胞利用血清中的糖进行无氧酵解产生丙酮酸,丙酮酸使NADH转化为NAD ,这样使测定结果假性升高。
解决办法:①作好与临床的沟通,对抽血人员和标本运送人员(传递人员)进行培训;②及时分离血清并及时检测;③也可将全自动生化分析仪上的延迟时间设置大于60秒,这样试剂在延迟期内消除丙酮酸的干扰,可完全避免假阳性结果的出现。
3 交叉污染3.1 生化分析仪本身的清洗问题造成的交叉污染在使用全自动生化分析仪时,仪器的交叉污染现象是引起实验结果偏离的一个原因。
由于全自动生化分析仪试剂针需要接触各种试剂,一般难以彻底清洗干净,所以容易造成分析项目的携带污染.而生化项目的测定往往仅需要几微升样本,试剂往往需要几百微升,尤其在没有自动冲洗程序的流动池式生化分析仪上,由于前带现象的存在,如果前一个样本为高值样本,则接后的第一个低值标本结果应慎重报告。
不仅没有冲洗程序的生化分析仪器上有这种现象,就是具有自动冲洗程序的全自动生化分析仪也有交叉污染,例如Beckman全自动生化分析仪CX4,它的试剂吸针(Probe)、样品吸针及反应搅拌棒是利用高压冲洗液冲洗,然后用高压压缩空气吹于,有时由于洗液压力和压缩空气的压力偏低,使试剂吸针、样品吸针及反应混匀棒冲不干净、吹不干,从而导致反应池之问相互污染、试剂问交又污染,使检验结果偏离。
另一个值得注意的问题是许多生化仪器由于长期频繁的利用,使加样针和试剂针的注射器磨损加重或注射器的“特氟龙”吸头不及时更换,使吸样针或试剂针密封层增大,产生泄漏现象也是造成样本间及试剂间相互污染的一个重要原因。
试剂吸样或样品吸样不准确,通常导致利用速率法测试的标本系统偏低或偏高。
众所周知,速率法计算因子是由加样体积和试剂体积参与确定的,如果加样体积或加试剂体积不准,导致真正速率计算因子和理论计算因子偏离,从而使检测结果不准确。
解决办法:①定期进行仪器维护保养;②按要求及时更换零部件;③定期对仪器进行校准;④全自动生化分析标本和试剂用量少,残存少量即会影响测试结果,每天应用无水乙醇擦洗并定期更换干燥棒,保证比色杯清洗后不留残液,避免比色杯的交叉污染。
3.2 检验项目间的交叉污染在全自动生化分析仪的使用中,我们发现一个项目会影响紧随其后项目的测试结果,造成这种影响的原因之一是一种试剂中含有另一试验的测定物质而直接干扰其测试结果。
原因之二是一种试剂中含有改变另一试验反应条件或影响其反应进程的物质而间接干扰其测试结果。
比如:在TP试剂中含有大量的CuSO4,如果将Cu放在TP项目的后面检测,会使检测结果偏高或重复性差。
再如P放在含有磷酸盐的项目后面,TBA放在含有胆酸盐的项目后面都会使检测结果偏高或重复性差。
GLU放在CK和CK—MB的项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。
LDH放在AIJT和AST的项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。
Mg放在ALP等含有镁离子项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。
ca放在a—Amy项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。
Mg试剂(CALMAGITE法)中含有EGTA,会干扰Ca的测定结果。
另外我们发现相邻两个项目的PH值相差太大或反应对PH要求严格的项目,也会对测定的结果产生影响,比如TP和Alb之间PH相差较大,会互相干扰,TBA放在Alb后面测定,会使测定结果偏低等等。
解决办法:①调整实验的前后顺序来消除这种影响;②在造成污染的项目和受污染的项目之间设置清洗剂并设定进行清洗的次数。
4 正确的参数设置也是用好检验试剂的一个关键因素现代化分析仪上通常有分析程序供用户设定,包括样品量、试剂量、波长、分析方式和延迟时间、测试时间的设定等。
下面我们就延迟时间和加样程序的设定来说明正确使用分析参数对于正确运用试剂的作用。
比如肌酐苦味酸测定法,我们在设定延迟时间时应注意到苦味酸在碱性条件下50秒前首先快速与如乙酰乙酸等快反应物质产生红色化合物,而在120秒后碱性苦味酸又能与慢反应物质产生阳性干扰,解决办法:最好设定延迟时间为50~6O秒之间,测定时间小于6O秒,这样就充分消除了快反应和慢反应干扰,从而检测到真正肌酐含量。
5 校准液的正确使用由于目前生产厂家提供的校准液并非通用的,只适用于某一特定的分析系统。
同一项目不同方法学之间有很大差异,同一项目不同方法学的校准液更不能混用,但是在临床检验中经常会发生胆红素钒酸盐法用重氮法的校准液校准,乳酸脱氢酶L—P法用P—L法校准液校准。
TBA循环酶法用比色法校准液校准等都会造成测定结果不准确。
另外同一方法学,不同厂家的校准品和试剂都会有所差异。
解决办法:①建议结合各实验室条件选择适合自已实验室的校准品,如有条件可进行系统溯源;②建立满足在同一方法学、同一测定条件、与理论计算的factor值差异不大,没有发现有明显影响因素,方可进行校正测定;③建立一个可靠的参考系统作为准确性基础,然后将准确性转移到“使用方法”测定中去,使“使用方法”测定结果可溯源到参考系统所提供的准确性基础上来。
在实现溯源性目标过程中,永远以患者新鲜标本为实验对象,以方法学对比试验方法为验证手段。
采用回归方程进行统计分析,斜率接近1,截距较小,说明“使用方法”对标本测定结果和溯源目标参考系统对标本检测结果非常接近,检测结果可靠。
6 抗凝剂的使用目前临床上常用的抗凝剂有EDTA-2K、肝素、草氨酸钠等,TBA和AFU不能用肝素抗凝剂,因为肝素会使TBA和AFU 试剂发生混浊,导致吸光度假性偏高,从而使检测结果偏高。
解决办法:①认真参阅试剂说明书;②作好与抽血人员之间的沟通和培训,使抽血人员知道什么项目用何种标本。
7 混成单一试剂的问题比如酶法肌酐试剂,第一步R.中的酶要消除样品中内源性肌酸的干扰,如果混成单一试剂,则会使检测结果偏高,消除法HDL、LDL也不能混成单一试剂,因为它们都要分别清除HDL和LDL以外的脂蛋白,从而达到检测的目的,如果混成单一试剂,则会使测定的HDL和LDL不准确。
另外,有的试剂混成单一试剂后,稳定性和抗干扰能力也会明显下降。
解决办法:①在仪器通道或试剂位允许的情况下尽量使用双试剂;②如一定要使用单一试剂,最好选择试剂厂家针对部份项目专门生产好的单一试剂。
8 试剂开瓶的问题随着全自动生化分析仪的普及,“开瓶稳定性”也随之受到了大家的重视,但是就目前有的试剂方法学来讲,还达不到人们所要求的试剂开瓶后在仪器内放很长时间不需要定标,比如ALP、TP、GSP等PH为碱性的试剂,开瓶后试剂会吸收空气中的二氧化碳,使试剂本身的PH值下降,如果长时间开瓶不定标或校准,会使检测结果发生偏离,在国外有的项目有明文规定,必须72小时之内定标,比如BUN。
但是在国内的某些实验室为了方便,很长时间都不作校准,导致测定结果的不准确。
解决办法:了解试剂的特性,及时对部份项目进行校准,2.对于每天标本量不多的医院,可按1~2天的用量取用试剂放入仪器。
9 不同批号试剂相混的问题目前将不同批号的试剂混合在一起使用的现象在检验中经常发生,当然这一方面是为了节省成本,另一方面为了方便。
但是不管是什么品牌、什么试剂,由于不同批号的试剂生产时间不同,试剂中工具酶的活性会有差异,会发生水解的底物浓度随时间长短也会不同。
因此混在一起使用而又不定标,可能会导致检测结果的不准确。
还有如果有的试剂开瓶时间太长,空气中的灰尘或细菌会进入瓶中,由于有的试剂含有大量的蛋白质和盐,是细菌生长的最好条件,虽然有的试剂添加了防腐剂,但防腐剂的防腐也是有一定限度的,而且绝大多数厂家的试剂中是没有加防霉剂的。
解决办法:①不同批号试剂建议不要混用,如果混用最好重新定标;②试剂瓶在仪器内使用时间不要过长,及时更换。
③一般每个试剂瓶内由于试剂针不能吸完,或多或少都会留有几毫升的试剂,如果是同一批号可以将未开瓶的同一批号试剂往里倒。
但如果不是同一批号的试剂时倒人后最好定标,最好的做法是将每个批号的剩余试剂留起来待一定数量后混在一起,然后重新定标后检测。
通过我们这几年使用伊得利康试剂,参加卫生部的室间质评都取得很好的成绩,确实认为该公司试剂质量好。
纯水质量对全自动生化分析仪检测的影响水是实验室内一个常常被忽视但又至关重要的试剂。
在全自动生化分析仪检测过程中,纯水作为生化反应的载体或介质、样品或试剂的稀释液和溶剂、仪器的清洗液甚至反应的参与者等贯穿检测的全过程,其纯度的高低直接关系水是实验室内一个常常被忽视但又至关重要的试剂。
在全自动生化分析仪检测过程中,纯水作为生化反应的载体或介质、样品或试剂的稀释液和溶剂、仪器的清洗液甚至反应的参与者等贯穿检测的全过程,其纯度的高低直接关系到检测结果的可信度。
目前全国大部分实验室都使用反渗透的中央纯水系统,通过对该系统工作流程的分析以及遇到的实际情况,发现并总结了导致水纯度不够的几种因素及其对全自动生化分析仪检测的影响。
1 纯水系统工作流程及影响因素1.1 原水预处理原水是指进入实验室的自来水,预处理就是除去自来水中绝大部分的杂质。
1.1.1方法:预处理一般使用机械过滤法,分三步进行:①精密滤芯(又称过滤滤芯、分线绕滤芯和熔喷滤芯)过滤原水中的泥沙等大的颗粒物;②活性炭滤芯通过吸附作用去除水中的绝大部分有机物和重金属离子等(特别是自来水中的余氯,其对反渗透膜有很大的氧化作用,所以必须经由活性炭去除);③反渗透膜(RO)进一步去除水中的微观粒子和盐分。
1.1.2影响因素:①自来水水质:自来水中杂质含量高时会导致预处理部件使用寿命缩短和处理后水质不达标,甚至会堵塞管道,导致需要更高的进水压才能工作,一般要求自来水中固体溶解物含量(TDS)小于200 mg/L。