HIV抗体初筛检测采样规程内容

艾滋病初筛检测实验标准操作程序〔SOP文件〕一、目的保证艾滋病病毒抗体ELISA实验的准确性。

二、适用范围艾滋病病毒抗体ELISA实验。

三、具体要求3.1样品采集样品采集安试剂盒要求采集。

采血时注意平安，用一次性注射器谨慎操作，防止发生刺伤和造成外界污染。

血样如即时用可存于普通冰箱，如要长期保存，别离血清置于-20 及以下。

同时做好记录。

3.2样品运送样品转送，除特殊需要外，必须是血清或血浆，置于带有盖帽的试管内，或将塑料试管用酒精灯封死，防止样品流出。

试管上标明姓名、时间、编号，将试管放入专门带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理，在所放试管周围||上下垫有软性物质，以免碰碎，容器外标有HIV检测专用字样和生物危害标志。

路途较远或气候炎热时，容器应置于4 以下运送。

这样同时附送检单。

3.3样品登记和处理收到样品后，及时填写标本登记记录表，送样人、收样人签字，如已进行过初检，登记初检结果和实验方法及所用试剂情况。

对从其他实验室送来的样品，检查并注明送检单与标本记录的符合、样品管破损、溢漏等情况。

如有溢漏应立即将尚存的血样移出，并对管壁和盛器消毒。

检查并记录样品的质量有无严重溶血、细菌污染、血脂过多以及黄疸等情况。

对实验室自采的样品，最好将血液先放置1-2个小时，再用3000 离心15分钟，吸出上清液备用，如在几天内检测可放在2-8 冰箱中，如要贮存，置于-20冰箱。

3.4实验准备将试剂从冰箱中取出，按试剂盒要求时间恢复室温。

检查并记录冰箱、温箱温度。

按照试剂盒要求准备实验原始记录表，标明空白、阴性对照、阳性对照、外部质控血清以及检测样本的位置：登记日期和实验起止时间，记录环境条件及试剂盒厂家、批号、效期：整个实验过程中每一步操作都要在原始记录表上详细登记。

按照试剂盒的要求配置洗液及其他所需要的试剂。

3.5加样和稀释根据样品数量将适宜数量的酶标板条固定在板架上，为了不损坏洗扳机，每道上的酶标板条必须保持完整{缺乏局部可用废弃的微孔添充}，检查加样器加样刻度是否与||试剂盒要求的加样量相符，按照原始记录表说明的位置参加各种质控品和检测样品，注意：空白只加标本稀释液。

永济黄河中医院（SOP）文件HIV初筛实验室标准化操作规程生效日期：2011年10月28日修改日期：2014年8月4日
责任部门：永济黄河中医院HIV初筛实验室责任人：彭玉英
一、责任与要求
1、保证艾滋检测法准确无误，实验室人员必须按标准程序要求操作；
2、凡违反此SOP操作程序的检验，将视为无效检验。

二、样本要求及检验条件
1、采血时注意安全，用一次性注射器谨慎操作，防止发生刺伤和造成外界污染血样并做好记录；
2、采集到样品后及时填写标本登记，采样人签字，登记初筛结果和实验方法及所用试剂情况；
3、样本为血清或血浆，无明显溶血，血浆混浊和脂肪；
4、样本在两小时内完成，注意无菌操作；
5、检测在8——30℃下进行，多余试剂放冰箱2——8℃保存，检测时需要与室温平衡；
6、样品冷冻保存一年以上，申请上级领导批查后才能销毁。

三、检测试剂
1、以发现更多的艾滋病感染者为目的，本实验室只做筛查实验；
2、将试剂从冰箱取出后按试剂盒的要求恢复室温，检查记录冰箱及恒温箱的温度；
3、按照试剂盒要求准备实验原始记录表，标好空白、阴影对照、阳性对照、外部质控及检测标本的位置，登记日期和实验起止时间，登记试剂厂家、批号及效期，每一步操作都要在原始记录表上详细登记；
4、按照试剂盒的要求配置洗液及其他需要的试剂；
5、按照试剂盒的要求完成检测；
6、所用的仪器使用后及时填写使用记录。

四、结果登记和报告
1、检查原始记录表是否填写完整，操作者和复检者签字；
2、阳性标本血清封口包好运送确认实验室。

HIV抗体检测实验操作规程
1.检测试剂：初筛用的HIV抗体检测试剂，必须是HIV-1/2混合型，经卫生部批
准或注册，经过批检合格，并在有效期内。

常用的检测方法有固相酶联免疫吸附实验，颗粒凝集和其他快速诊断等方法。

2.检测要点
严格按照试剂说明书操作，不得擅自更改。

注意防止交叉感染。

严格遵守实验室操作规程。

1.初筛检测程序
(1)血液标本验收合格后，用初筛检测试剂进行检测，如呈阴性反应，则做
HIV抗体阴性报告。

(2)初筛检测结果呈阳性反应的标本，需进行重复检测。

复检时用原有试剂
和不同原理的另外一种试剂或不同厂家的初筛检测试剂复检。

(3)如两种试剂复检均呈阴性反应，则作HIV抗体阴性报告；如均呈阳性反
应，或有一份阳性，该标本需送上级实验室加以进一步证实。

送检时应准确填报复检单，重新抽血连同原血专人送省疾控做HIV-Ab确证实验。

编写：审核：批准：。

HIV初筛实验室标准操作规程人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体酶联免疫原理和方法（上海科华生物）原理：用HIV-1+2型抗原包被酶联板。

待检血清或血浆中的抗-HIV抗体与包被抗原反应，再与酶标HIV-1+2型抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。

加底物（TMB）显色，在酶标仪上测定后根据OD值判定有无HIV抗体的存在。

操作步骤：1、取出HIV抗原包被板。

每次试验设空白对照1孔，阴性对照各1孔，阳性对照各3孔（其中阳性对照1两孔，阳性对照2一孔），质控一孔。

分别加入HIV阴、阳性对照质控血清各100微升，其余孔加入待检样本各100微升。

贴上封口胶，置37℃温育60分钟。

2、将浓缩洗液用纯化水25倍稀释后洗涤用。

3、弃去各孔中样品、拍干。

每孔加满洗液，静置数秒后弃去，如此重复洗5次，拍干。

4、每孔加入酶标抗原工作液100微升，贴上封口胶。

37℃温育30分钟。

5、弃去各孔中酶液，用洗液反复洗涤5次（操作同步骤3）。

6、每孔加入底物液A50微升，再加入底物液B50微升，轻拍混匀，置37℃避光显色30分钟。

7、显色完毕后，每孔加入终止液50微升，轻拍混匀，置酶标仪450nm波长处测定OD值（参考波长为630nm）。

结果判定：阴、阳性对照和被检样本的OD值减去空白对照OD值即为计算值。

2、若阴性对照OD均值小于0.02按0.02计算。

3、临界值（cut off 值）的设定：cutoff值= PC x×10%（若PC x>=2.5按2.5算）4、被检样本的OD值≥临界值应判为HIV抗体阳性反应，<临界值为阴性反应。

检测样本的OD值≥临界值判为HIV抗体阳性，应重新取样双孔复试，复试阳性者应按照“全国HIV检测管理规范”送“HIV确认实验室”进行确认实验。

注意事项：1、本试剂的使用单位必须是当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。

2、整个HIV检测必须符合《全国艾滋病检测工作规范》严格防止交叉感染。

3.4.2检查并记录冰箱、温箱温度。

3.4.3按照试剂盒要求，严格按HIV快速检测（胶体金法）操作规程进行操作，并做好记录、整个实验过程中每一步操作都要在原始记录表上详细登记。

3.5 结果登记和报告阴性结果出具HIV抗体筛查阴性报告单，阳性结果报告为“HIV抗体待复检”并填写HIV抗体初筛阳性送检单。

3.6 标本留存转送阴性标本收集血清冷冻保存一年，并填写阴性血清保存记录表。

阳性标本收集血清封口包好，连同HIV抗体初筛阳性送检单，冷藏运送到上一级实验室。

80-2型离心机标准操作规程一、目的为保障标本分离间80-2型离心机的安全正常运转，特制作本规程。

二、范围适用80-2型离心机离心操作和日常保养。

三、责任实验室工作人员严格按80-2型离心机操作规程执行。

四、工作原理将装有等量试液的离心容器对称放置转头四周的孔内，启动机器后。

电动机带动转头高速运转所产生的相对离心力（RCF）使试液分离，相对离心力的大小取决于试样所处的位置至轴心的水平距离即旋转半径r和转速n,计算公式如下： RCF=1.118×10¯5n2r×g n--转速（转/分） r--转速半径（厘米）五、技术指标六、操作程序1：操作程序（1）把需要分离的物质定量（不超过5ml为宜）放入离心管；每支离心管所加物质重量基本相等。

（2）把离心管均匀分布插入离心头孔中，合上盖板。

（3）如根据需要选择合适的离心速度，调速开关指到“1”时，离心速度大约是1000转/分，指到“2”时，离心速度大约是2000转/分，余“3”“4”时类推。

（4）根据需要选择定时时间，把定时旋钮刻度线拨到所选定的定时时间位置，例如定时选10分钟，则把旋钮刻度线拨到10处。

（5）接通电源，电源开关拨到“开”一边，电源指示灯亮，电机开始旋转，样品开始离心分离，直到定时时间到，离心机分离结束。

（6）关闭电源，停止转动后打开离心机上盖，取出离心管，至此本次离心操作结束。

HIV初筛实验室标本管理制度（一）、样品的采集和处理艾滋病测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。

唾液或尿液有时也可作为测试样品。

常用的血液样品的采集和处理方法如下：1、血清样品采集和处理（1）、用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量静脉血，室温下自然放置1~2h，待血液凝固、血块收缩后再用3000r/in离心15in，吸出血清备用。

（2）、如用滤纸片采样，则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒，在刺破皮肤后，迅速把滤纸片沾上，切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。

采血后要待血样干燥后再包装送。

2、抗凝血样品采集和处理（1）、用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管），反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。

（2）、应根据实要求选用适当的抗凝剂，如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或枸橼酸钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量测可选用K3EDTA 或枸橼酸钠。

（3）、用于核酸定性测时，采集的抗凝全血应在4～8h内分离PBMC和血浆，否则应在24～48h内分离血浆和血细胞。

3、采集样品注意事项（1）、采集样品原则上应按临床采血技术规范操作。

（2）、采集样品时应注意安全，建议采用真空采血管及蝶形针具，以避免直接接触血液；直接接触HIV感染者/艾滋病（AIDS）病人血液/体液的操作,应戴双层手套。

（3）、所有的血液、血清、未固定的组织和组织液样品，均应视为有潜在传染性，都应以安全的方式进行操作。

（4）、应象操作未知传染风险样品一样，小心存放、拿取和使用所有可能有传染性的质量控制和参考物质。

用后的包裹应进行消毒。

（5）、采血时一定要注意安全，采血用一次性注射器，谨慎操作，防止发生刺伤皮肤和造成外界污染。

（6）、离心机要使用密闭的罐和密封头，以防液体溢出或在超/高速离心时形成气溶胶。

（二）样品的保存1、用于抗体测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以下，短期（1周）内进行测的样品可存放于2-8℃。

艾滋病初筛操作规程艾滋病初筛操作规程一、概述艾滋病是一种通过人类免疫缺陷病毒（HIV）感染导致的免疫系统失调疾病。

早期发现艾滋病对于预防和控制疾病的传播至关重要。

艾滋病初筛是早期发现感染人群的重要手段，遵守规程能确保测试的准确性和可靠性，从而更好地控制疾病的传播。

二、操作步骤1. 预备工作（1）确保操作室环境整洁、无尘、无异味，并保持温度适宜。

（2）准备艾滋病初筛所需的试剂和设备，确保其有效期内，并检查设备的工作状态。

2. 患者接待（1）接待每位患者时应保护其隐私，确保信息不泄露。

（2）向患者提供关于初筛的详细说明，解答其疑问并征得同意。

（3）记录患者的个人信息，如姓名、性别、年龄等。

3. 血液采集（1）进入采血区域前，医护人员应佩戴手套，确保操作过程中不会对患者造成交叉感染。

（2）使用一次性采血器材，保证采集的血液不被污染。

（3）采集血液时，确保采血部位干净，并用消毒棉球擦拭。

（4）正确使用采血器材，避免伤害到患者，以免对结果产生影响。

（5）采集血液后适当按压采血部位，尽量减少出血和血肿的发生。

4. 样本处理（1）采集的血液样本应尽快送往实验室，避免发生凝聚或沉淀。

（2）在送达实验室前，样本应储存在合适的温度下，避免过热或过冷。

（3）实验室工作人员应做好样本登记，确保样本不会发生混淆。

（4）在进行初筛操作前，样本应根据规定的程序进行预处理，如分离白细胞等。

5. 艾滋病初筛操作（1）根据试剂说明，准确配制试剂，并检查试剂的有效期和保存条件。

（2）将样本按照指定仪器和方法进行操作，确保操作的规范性和可靠性。

（3）操作过程中严格遵循无菌操作规范，并注意防止交叉感染的发生。

（4）自动化测试仪器的操作应根据仪器手册进行，并按照设定的步骤和程序进行操作。

三、注意事项1. 定期维护仪器和设备，确保其正常工作状态，并做好相关记录。

2. 严格遵循操作规程，严禁改动操作步骤和方法，以免影响测试结果的准确性。

3. 尽量减少干扰因素，如灰尘、温度等，以确保操作的稳定性和可靠性。

HIV初筛工作制度一、目的为了加强HIV初筛工作的管理，提高检测准确率，及时发现和控制HIV的传播，制定本制度。

二、适用范围本制度适用于我国各级疾病预防控制中心、医疗机构、采供血机构等开展HIV初筛工作的单位和个人。

三、初筛检测流程1. 样本采集：根据检测对象的不同，采集血液、尿液、唾液等样本。

采集过程中应严格遵守无菌操作规程，确保样本质量。

2. 样本运送：在确保样本安全的前提下，尽快将样本运送至实验室。

对于远程运送的样本，应采用冰袋等低温措施保持样本活性。

3. 样本接收：实验室工作人员应对样本进行严格审查，确认样本来源、采集时间、采集方法等是否符合要求。

对于不符合要求的样本，应予以退回。

4. 检测方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法进行HIV抗体初筛检测。

检测过程中应严格遵守操作规程，确保检测准确性和可靠性。

5. 结果判定：根据检测试剂说明书和实验室标准操作规程，对检测结果进行判定。

对于初筛阳性的样本，应进行复检。

6. 复检：采用不同原理或不同厂家的检测试剂进行复检。

复检结果为阳性的样本，应进行确证试验。

7. 确证试验：采用免疫印迹法（Western blot）等方法进行确证试验。

确证试验结果为阳性的样本，诊断为HIV感染。

四、质量控制1. 人员培训：对从事HIV初筛工作的人员进行专业培训，确保其具备相应的业务水平和操作技能。

2. 实验室资质认证：实验室应具备国家认证的检测资质，并定期进行质量评价和审核。

3. 检测试剂管理：选用具有国家批准文号和合格证的检测试剂，确保试剂质量。

同时，加强试剂的储存、运输和使用管理，防止试剂过期、损坏或污染。

4. 室内质控：定期进行室内质控检测，确保检测结果的准确性和稳定性。

5. 室间质评：参加国家或地方疾病预防控制中心组织的室间质评，了解实验室间的检测水平，提高检测质量。

五、结果报告和利用1. 初筛阳性结果报告：初筛阳性结果应立即报告所在单位感染管理部门，并采取相应措施，如隔离、跟踪、随访等。

艾滋病检测样品的采集和送检程序1.目的规范艾滋病病毒（HIV）检测的血清、血浆和全血样品的采集和送检要求。

2.适用范围适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品的采集和送检。

3.职责3.1 中心门诊部和艾滋病防治科工作人员负责HIV检测样品的采集和送检。

3.2 门诊部和艾滋病防治科负责人对样品的采集和送检进行管理和监督。

3.3业务管理科收样室负责样品有关信息的录入。

3.4艾滋病实验室人员负责对样品采集和送检提供技术指导和要求。

4.工作程序艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血，检测的项目主要是抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+和CD8+ T淋巴细胞测定。

不同的检测项目对样品的采集和送检有不同的要求，有关人员应区别对待。

4.1 HIV抗体、抗原检测最常用的是血清或血浆4.1.1 血清样品的采集和送检：用一次性注射器或真空采血管以无菌操作技术抽取5ml静脉血，无需加抗凝剂，送中心艾滋病实验室，采集当天不能送达实验室的应置4-8℃冰箱保存。

4.1.2 血浆样品的采集和送检：用一次性注射器以无菌操作技术抽取5ml 静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，或直接用加有抗凝剂的真空采血管抽取。

反复轻摇，送中心艾滋病实验室，采集当天不能送达实验室的应置4-8℃冰箱保存。

4.2 HIV核酸定性检测最常用的是血清、血浆或血细胞4.2.1 血清样品采集和处理：同4.1.1。

EDTA或枸橼酸钠，4.2.2 血浆和血细胞样品采集和处理：抗凝剂可选择K3采集的抗凝血应在4℃保存条件下4－8小时内送达实验室。

4.3 HIV核酸定量(病毒载量)测定最常用的是血浆4.3.1抗凝剂的选择：不同病毒载量检测方法选用不同的抗凝剂，最通用的是EDTA。

4.3.2 血浆样品采集和处理：同4.1.2。

4.4 CD4+和CD8+ T淋巴细胞检测使用的样品是抗凝全血4.4.1 抗凝剂的选择：最常用的是K3EDTA。