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小分子与蛋白体外相互作用测定方法⊙编辑:小余生物分子相互作用是一种基本的生命现象,其相互作用研究是现代生命科学研究的重大问题之一。
现在研究相互作用的技术有:平衡透析法、紫外可见吸收光谱、荧光光谱、电化学法等。
随着分子生药研究深入,一些新的检测技术问世,如微量热泳动技术(MST),那么当我们做蛋白相互作用时,面对如此多的技术,该如何让选择?笔者将目前测定小分子与蛋白的体外相互作用,最常用的四种技术:荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay,FPIA)、等温量热滴定仪(ITC)、表面离子体共振技术(SPR)等技术的原理、操作、应用范围以及优缺点做一综述,供各位研究者参考。
其中FPIA和ITC是两种经典方法。
1.荧光偏振免疫分析法(fluorescencepolarization immunoassay,FPIA)1.1 原理FPIA是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复到基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。
偏振荧光强弱程度与荧光分子的大小呈正相关,与其激发时的转动速度呈反相关。
FPIA最适宜检测小至中等分子物质,常用于药物、激素的测定。
1.2 操作1.2.1 首先针对所测蛋白,选择一个阳性药物,对阳性药物进行荧光标记;1.2.2 配制一系列浓度的标准抗原(厂家在试剂盒中提供提供已知剂量的非标记抗原);1.2.3 用一系列已知浓度的标准抗原与一定量的标记抗原在一定条件下同限量的特异性抗体进行反映;1.2.4 反应达到平衡后,以反应变量作为纵坐标,反应剂量(一系列标准抗原)作为横坐标,做一条曲线,就得到不同浓度的标准抗原对反应变量的竞争抑制曲线;1.2.5 在同等条件下,用待测抗原与一定量的标记抗原与限量的特异性抗体进行反应,并用同样的方法分离待测抗原中的B和F,测量其放射性,计算出B/F,在剂量反应曲线上就可以查出对应的抗原浓度。
5.6 测量二氧化碳〔CO2〕测量简介本监护仪采用红外吸收技术测量病人呼吸气路中的二氧化碳(CO2)浓度。
其原理基于CO2分子能吸收特定波长的红外光线能量,且吸收能量的多少与CO2的浓度有直接关系。
当红外光源发射的红外光线穿透含有CO2的气体样本时,局部能量将被气体中的CO2吸收。
在红外光源的另一侧利用光电探测器来测量剩余的红外光线能量,并转换成电信号,该电信号与红外光源的能量进展比拟并调整后,即可准确的反映气体样本中的CO2浓度。
CO2的测量方式分为以下两种:1. 主流式:在直接连接病人的呼吸系统的气道适配器上安装CO2传感器。
2. 旁流式/微流式:对病人呼吸气道中的呼吸气体,采用恒定的采样流量进展采样,通过CO2传感器对其进展分析。
测量准备.1 主流CO2模块1. 连接CO2传感器电缆将CO2传感器电缆插入监护仪侧面板上的CO2插座中。
2. 选择适宜的主流气道适配器按照病人的体形、气管内导管的直径和监护环境来选择适当的气道适配器。
详细的信息可参考以下表格或与制造商联系。
童新生儿〔可重复使用的〕≤3. 将气道适配器嵌放在CO 2传感器上连接气道适配器和传感器时,应确保气道适配器的窗口是干净和枯燥的,如有需要,请清洁或改换气道适配器。
将气道适配器嵌放在CO 2传感器上,等待气道适配器与传感器预热。
屏幕上显示提示信息“传感器加温〞,此时传感器和气道适配器升至工作温度。
当传感器预热完成,该提示信息消失。
注意:预热时间会随传感器周围温度的转变而改变。
4. 参照本说明书章节的描述,进展校零操作。
5. 校零完成后,按下列图5-6-1所示连接气路。
图5-6-1 主流CO 2连接图6. 确认气路的密闭性后,即可开场测量。
.2 旁流CO 2模块CO 2模块带有脱水瓶:1. 将脱水瓶安装在脱水瓶支架上,按下列图5-6-2连接CO 2测量组件。
图5-6-2 旁流CO 2连接图2. 进入CO 2菜单,按下〈启动采样泵〉按钮即开场测量。
分析测试仪器相关英文简称仪器紫外:UV原吸:AAS高效液相色谱:HPLC气相色谱:GC薄层色谱:TLC离子色谱:IC原子荧光:AFS电感耦合等离子体扫描光谱仪:ICP质谱:MS红外光谱:IR;傅立叶红外光谱:FT-IR;核磁共振:NMR近红外:NIR示差扫描量热仪:DSC动态热机械分析仪:DTMAX射线荧光光谱仪:XRF透射电子显微镜:TEM扫描电子显微镜:SEM场电子显微镜:FEM场离子显微镜:FIM低能电子衍射EED光电子能谱:ESCA扫描隧道显微镜:STM原子力显微镜:AFM横向力显微镜FM扫描探针显微镜:SPMBOD:生化耗氧量COD:化学耗氧量TOC:总有机碳TIC:总无机碳AOX:可吸收卤化物仪器中文名称仪器英文名称英文缩写原子发射光谱仪Atomic Emission Spectrometer AES电感偶合等离子体发射光谱仪Inductive Coupled Plasma Emission SpectrometerICP 直流等离子体发射光谱仪Direct Current Plasma Emission Spectrometer DCP紫外-可见光分光光度计UV-Visible Spectrophotometer UV-Vis微波等离子体光谱仪Microwave Inductive Plasma Emission SpectrometerMIP原子吸收光谱仪Atomic Absorption Spectroscopy AAS原子荧光光谱仪Atomic Fluorescence Spectroscopy AFS傅里叶变换红外光谱仪FT-IR Spectrometer FTIR傅里叶变换拉曼光谱仪FT-Raman Spectrometer FTIR-Raman气相色谱仪Gas Chromatograph GC高压/效液相色谱仪High Pressure/Performance Liquid ChromatographyHPLC离子色谱仪Ion Chromatograph IC凝胶渗透色谱仪Gel Permeation Chromatograph GPC体积排阻色谱Size Exclusion Chromatograph SECX射线荧光光谱仪X-Ray Fluorescence Spectrometer XRFX射线衍射仪X-Ray Diffractomer XRD同位素X荧光光谱仪Isotope X-Ray Fluorescence Spectrometer电子能谱仪Electron Energy Disperse Spectroscopy能谱仪Energy Disperse Spectroscopy EDS质谱仪Mass Spectrometer MS核磁共振波谱仪Nuclear Magnetic Resonance Spectrometer NMR电子顺磁共振波谱仪Electron Paramagnetic Resonance Spectrometer ESR 极谱仪Polarograph伏安仪Voltammerter自动滴定仪Automatic Titrator电导仪Conductivity MeterpH计pH Meter水质分析仪Water Test Kits电泳仪Electrophoresis System表面科学Surface Science电子显微镜Electro Microscopy光学显微镜Optical Microscopy金相显微镜Metallurgical Microscopy扫描探针显微镜Scanning Probe Microscopy表面分析仪Surface Analyzer无损检测仪Instrument for Nondestructive Testing物性分析Physical Property Analysis热分析仪Thermal Analyzer粘度计Viscometer流变仪Rheometer粒度分析仪Particle Size Analyzer热物理性能测定仪Thermal Physical Property Tester电性能测定仪Electrical Property Tester光学性能测定仪Optical Property Tester机械性能测定仪Mechanical Property Tester燃烧性能测定仪Combustion Property Tester老化性能测定仪Aging Property Tester生物技术分析Biochemical analysisPCR仪Instrument for Polymerase Chain Reaction PCRDNA及蛋白质的测序和合成仪Sequencers and Synthesizers for DNA and Protein 传感器Sensors其他Other/Miscellaneous流动分析与过程分析Flow Analytical and Process Analytical Chemistry气体分析Gas Analysis基本物理量测定Basic Physics样品处理Sample Handling金属/材料元素分析仪Metal/material elemental analysis 环境成分分析仪CHN Analysis发酵罐Fermenter生物反应器Bio-reactor摇床Shaker离心机Centrifuge超声破碎仪Ultrasonic Cell Disruptor超低温冰箱Ultra-low Temperature Freezer恒温循环泵Constant Temperature Circulator超滤器Ultrahigh Purity Filter冻干机Freeze Drying Equipment部分收集器Fraction Collector氨基酸测序仪Protein Sequencer氨基酸组成分析仪Amino Acid Analyzer多肽合成仪Peptide synthesizerDNA测序仪DNA SequencersDNA合成仪DNA synthesizer紫外观察灯Ultraviolet Lamp分子杂交仪Hybridization OvenPCR仪PCR Amplifier化学发光仪Chemiluminescence Apparatus紫外检测仪Ultraviolet Detector 电泳Electrophoresis酶标仪ELIASACO2培养箱CO2 Incubators倒置显微镜Inverted Microscope 超净工作台Bechtop。
一氧化氮检测仪原理分析一氧化氮检测仪原理分析:一氧化氮检测仪中文名称:一氧化氮英文名称:nitricoxide;NO定义1:化学分子式为NO2,无色无臭气体。
密度1.3402,溶点-163.6℃,沸点-151.8℃,能溶于水、醇和硫酸。
在大气中很容易与氧发生反应生成二氧化氮。
应用学科:大气科学(一级学科);大气化学(二级学科)定义2:在一氧化氮合成酶作用下,由精氨酸脱氨基而产生,易通过弥散出入质膜,直接进入相邻的细胞,在局部发挥作用。
应用学科:免疫学(一级学科);概论(二级学科);固有免疫(三级学科)定义3:属细胞内信使,由一氧化氮合酶催化精氨酸而生成。
为自由基,在平滑肌松弛、感觉传入,乃至学习记忆中有重要作用。
一氧化氮能促使心血管扩张。
应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科);新陈代谢(二级学科)定义4:在细胞中由精氨酸脱氨产生的气体。
起气体信号分子的作用,可调节平滑肌的收缩。
应用学科:细胞生物学(一级学科);细胞化学(二级学科)一氧化氮检测仪起着信使分子的作用。
当内皮要向肌肉发出放松指令以促进血液流通时,它就会产生一些一氧化氮分子,这些分子很小,能很容易地穿过细胞膜。
血管周围的平滑肌细胞接收信号后舒张,使血管扩张。
一氧化氮也能在神经系统的细胞中发挥作用。
它对周围神经末梢所起的作用。
大脑通过周围神经发出信息,向会阴部的血管提供相应的一氧化氮,引起血管的扩张,增加血流量,从而增强勃起功能。
在一些情况下,勃起无力是由于神经末梢产生的一氧化氮较少所致。
伟哥能扩大一氧化氮的效能,从而增强勃起功能。
免疫系统产生的一氧化氮分子,不仅能抗击侵入人体的微生物,而且还能够在一定程度上阻止癌细胞的繁殖,阻止肿瘤细胞扩散。
一氧化氮检测仪的合成一氧化氮检测仪的产生大致分为2种,一种是酶生性一氧化氮,一种是非酶生性一氧化氮。
非酶生性通过供体生成如硝酸甘油、硝普纳等临床药物产生。
酶生性必须有酶的参与,同时也要有前体物质的。
动脉二氧化碳氧分压英文Alright, let's dive into talking about arterial partial pressure of carbon dioxide, or PaCO2, in an informal yet informative way.So, you wanna know about PaCO2? Well, it's basically a measure of how much carbon dioxide is dissolved in your blood. Yeah, like the air you breathe out but in your bloodstream. And doctors use it to check if your lungs and respiratory system are working smoothly.Hey, did you know that PaCO2 can give doctors a clue about how well your body is using oxygen? It's kind of like a window to your respiratory health. High levels can mean your body's not getting rid of enough CO2, while low levels could suggest you're hyperventilating or something's up with your lungs.Let's put it simply: PaCO2 is a number that tells us how your body handles the balance of gases in and out. It'snot just a random test; it's an important part of understanding your overall health. And just like a good balance in life, keeping PaCO2 in check is essential for good health.Remember, though, everyone's body is different, and PaCO2 levels can vary. But knowing what's normal for you and keeping track of any changes can help you and your doctor stay on top of your respiratory health. So, next time you hear about PaCO2, don't panic; just think of it as a helpful tool in understanding your body's inner workings.。
烟道氧分析仪的测量原理介绍分析仪工作原理在线烟气氧分析仪也叫在线烟道氧分析仪,被广泛应用于冶金、化工、电力、供暖、环保等行业,分析各种工业锅炉及窑炉中烟气的氧含量;医疗垃圾焚烧炉污染物的掌控;CEMS配套掌控污染排放;炼钢精炼炉VOD的应用。
烟道氧分析仪测量原理:氧化锆;背景气体:燃烧烟气(强腐蚀和还原性气体除外);安装方式:探头:插入式,仪表:壁挂式。
数显式直观便利;接受新型氧化锆传感器,漂移量微小,响应速度极快,精度更高;在传感器接触烟气的管壁上加涂涂层,减小腐蚀牲气体对传感器的腐蚀,延长使用寿命;氧探头与烟气的接触部分接受新型高温合金钢,氧探头可以在650℃以下直接插入炉膛内;PID自动温控电路,升温快速而精准,能够除去外部环境对温控影响;自带故障检测功能,可提高排出故障的效率及自我保护本领;多种故障信息提示功能;数据自动存储功能,可供客户自由查阅历史数据;两点标定即可充分整个量程的测量精度;探头和仪表均为IP54防护等级(探头前端部位除外);广泛应用于冶金、化工、电力、供暖、环保等行业,分析各种工业锅炉及窑炉中烟气的氧含量;医疗垃圾焚烧炉污染物的掌控;CEMS配套掌控污染排放;炼钢精炼炉VOD的应用。
气体分析仪的一些应用说明气体分析仪是用于分析气体构成成分的仪表,它属于流程分析仪表中的一种。
气体分析仪是化学参数测量仪表,在很多工业生产过程中,气体分析仪表的地位与压力仪表、流量仪表等物理参数测量仪表是不相上下的,能起到掌控生产环境、削减安全事故等紧要作用。
1、气体分析仪在化学反应生产中的应用气体分析仪多应用于存在化学反应的生产过程,例如氨气合成流程中,在使用温度仪表和压力仪表掌控反应环境以外,还需要使用气体分析仪表来分析进气的化学成分,掌控氢气和氨气之间的合理比例,这样才能最大限度的提高氨气合成率,而获得较高的生产效率。
2、气体分析仪在锅炉燃烧中的应用气体分析仪在锅炉燃烧掌控中也起到了特别紧要的作用。
「氧合指数」是多少?如何计算?说到「氧合指数」,是不是第一反应就是急性呼吸窘迫综合征(ARDS)柏林定义(1)里面的动脉氧分压/吸入氧浓度(PaO2/FiO2)?实际上,柏林定义里面并没有给PaO2/FiO2冠以「氧合指数」的命名,那是因为氧合指数(Oxygenation Index,OI)在英文中对应的是另一个类似的参数。
国内给它起名「氧合指数」的原因个人还不清楚,但不管命名是什么,Pa O2/Fi O2是公知的,今天就和大家一起来探索一下PaO2/FiO2的秘密。
1PaO2/FiO2的由来及参考范围早在 1974 年,Horovitz 等人为了更好比较不同吸氧浓度患者的肺氧合差异,提出PaO2/FiO2这一参数,期望能够用吸入氧浓度(Fi O2)来校正氧合水平(2)。
PaO2/FiO2 的参考范围为 350 ~ 500 mmHg(年龄越大,参考值越低)。
Horovitz 等人认为PaO2/FiO2≤ 300 mmHg 意味着存在显著的肺部功能障碍(诊断 I 型呼吸衰竭要求海平面大气压下 Pa O2< 60 mmHg,空气Fi O2为 21%, Pa O2/Fi O2大致计算为< 300 mmHg),后续柏林定义及 ARDS 相关指南也都采用这一界值来进行相关诊断。
2PaO2/FiO2降低的病理生理意义「不想看原理的请跳过,直接看这部分的结论」我们先看一下 Fi O2(以海平面空气 21% 氧浓度为例)转化为动脉血氧(Pa O2)的过程(图 1)。
图 1.氧分压从空气到动脉的变化历程(修改自 Physiology 5th Ed. GAS EXCHANGE)第一步,空气中的氧进入呼吸道。
海平面大气压下(760 mmHg),空气的氧分压为760 × 0.21 ≈ 160 mmHg。
空气经呼吸道的湿化作用后水蒸气饱和,体内37℃ 情况下水蒸气饱和蒸汽压约为 47 mmHg,因此气道中氧分压 =(760 - 水蒸气压)× 0.21 ≈ 150 mmHg。