2019年高考生物冲刺大二轮精讲习题：第19讲_生物技术实践(选修ⅰ)含解析
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2019高考生物选修一生物技术实践知识点总结
2019高考生物选修1《生物技术实践》知识点总结专题一传统发酵技术的应用*菌种项目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧异养需氧异养需氧异养厌氧繁殖方式适宜条件下出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖生产应用酿酒酿醋制作腐乳制作泡菜发酵条件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧最适温度18℃～25℃30℃～35℃15℃～18℃常温时间控制10～12天7～8天腌制8天左右腌制10天左右其他条件封闭充气口适时充气控制盐酒用量控制盐水比例课题一果酒和果醋的制作1、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。
C6H12O6＋6O2→6CO2＋6H2O在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
C6H12O6→2C2H5OH＋6CO22、在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。
3、醋酸菌是单细胞细菌.，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O4、实验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵↓↓果酒果醋7、酒精检验：在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
8. 实验装置充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。
排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连接，其目的是防止空气中微生物的污染。
开口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。
使用该装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应该充气口连接气泵，输入氧气。
课题二腐乳的制作1、多种微生物参与了发酵，起主要作用的是毛霉。
毛霉是一种丝状真菌。
生殖方式是孢子生殖。
2、原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
2019年高考生物二轮复习基础保分专题十一 选修①——生物技术实践
(3)在甲培养基中进行划线操作时， 划线时， 应该先对接种环 进行____________，为避免周围环境中微生物的污染，实验 操作应在______________附近进行。 (4) 在 乙 培 养 基 上 ， 有 透 明 带 菌 落 利 用 的 氮 源 主 要 是 ________，无透明带菌落利用的氮源可能是________，据此 可筛选出目的菌。
第五板块 以应用为前提的选修模块
选修①、选修③的知识与现实生活息息相关。当今，生物学 科进入飞速发展的时代，取得无数新成果。生物是“有用的”， 生物是“前沿的”。高考对选修模块的考查，常以生活实际、现 实热点为切入点，考查考生学以致用、迁移应用的能力。 高考对选修内容的考查，难度一般。常采用“新瓶装旧酒” 的方式考查考生活学活用、分析问题、解决问题的能力。综合研 究历年的高考题可以看出：选修几个小设问的难度设置可分为两 个层级，一是基础类设问，属于送分题目，基本上依据教材所学 即可答出；二是理解类设问，这类问题难度中等偏上，需要迁移 教材知识， 分析试题情景， 将所学与所考有效“搭桥”才能解答。 二轮复习，在抓好教材基础的同时，应将重点放在对理解类问题 的强化上，基于此，本书编写独具匠心，将每个考点知识划分为 两个层级：基础类——记记背背就能过关；理解类——理清弄明 方可触类旁通。两大层级的划分，旨在让二轮复习学有侧重、重 在补短，找准薄弱点，才是增分点。
3．特别注意实验误差和实验结论的分析，如第2题的(5)
小题，第3题的(3)小题
理教材•固根基
1．图解识记微生物的培养、分离与计数(填图)
2．熟记微生物分离与计数的两个实例(填空)
(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数：
①筛选菌株：利用 选择培养基 筛选菌株。
2019高考生物二轮复习专题七选考生物技术实践
专题七选考生物技术实践1．(2019届高三·北京海淀模拟)某校课外兴趣小组对某种品牌的酸奶中乳酸菌的数量进行了测定。
取6支灭菌的试管，分别加入9 mL灭菌的生理盐水，编号为B1、B2、B3、B4、B5、B6；吸取1 mL酸奶样液加入试管B1中，混合均匀；然后另取一支吸管从B1中吸取1 mL 溶液，加入B2中，依次类推，最后从试管B6中取0.1 mL样液进行涂布计数，涂布三个平板，其菌落数分别为251、265、276个。
请回答下列问题：(1)乳酸是乳酸菌__________呼吸的产物，进行的场所是________________。
(2)制备乳酸菌的培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是________。
平板冷凝后，倒置的目的是_______________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(3)该兴趣小组对乳酸菌接种所采用的方法是____________________。
根据三个平板中的菌落数，可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为________个/mL，该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比，一般________(填“偏大”或“偏小”)。
(4)为了使测量的结果更加准确，对照组的设置应该是_______________________。
解析：(1)乳酸是乳酸菌进行无氧呼吸的产物，无氧呼吸的场所是乳酸菌细胞的细胞质基质。
(2)制备培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是干热灭菌法，对培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。
平板冷凝后，将平板倒置的目的是防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染，同时也可以避免培养基中的水分过快地挥发。
(3)根据题干的操作步骤可推知，得到的是101、102、103、104、105、106倍的稀释液。
《高考总复习》生物训练：选修1生物技术实践
选修1生物技术实践专题1、2传统发酵技术的应用、微生物的培养与应用1．在酿酒、酿醋、制作腐乳和酸奶过程中都要涉及各种微生物，请回答下列问题：(1)酿酒利用的微生物是酵母菌，制作过程中，酵母菌先在有氧条件下大量繁殖，然后再进行酒精发酵。
检测酒精的原理是：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成________色。
(2)在酒精发酵时瓶内温度一般应控制为________。
醋酸发酵时温度一般应控制为________。
(3)在臭豆腐的制备过程中，常用的微生物主要是__________等，在此过程中，豆腐相当于微生物生长的__________。
(4)民间制作腐乳时，豆腐块上生长的微生物，在制作时一般要加盐、酒，若加入的酒精浓度(含量)过低，会出现什么现象？____________________。
(5)在腌制泡菜的过程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，用水封坛的作用是__________________。
欲检测泡菜在腌制过程中产生的亚硝酸盐含量，使用检测试剂后颜色变为__________。
2．(2014年海南卷)已知泡菜中亚硝酸盐含量与腌制时间有关。
为了测定不同腌制天数泡菜中亚硝酸盐的含量，某同学设计了一个实验，实验材料、试剂及用具包括：刻度移液管、比色管、不同浓度的亚硝酸钠标准溶液、亚硝酸盐的显色剂、不同腌制天数的泡菜滤液等。
回答相关问题。
(1)请完善下列实验步骤。
①标准管的制备：用__________________________和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管。
②样品管的制备：用刻度移液管分别吸取一定量的____________________________，加到不同的比色管中，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管。
③将每个____________分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅________的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中的亚硝酸盐含量，记录各样品管中亚硝酸盐的含量。
2019年高考生物冲刺大二轮精讲习题：第19讲 生物技术实践(选修Ⅰ)
专题跟踪训练(十九)一、单选题1．(2018·北京市门头沟区二模)下列关于高中生物学实验的相关叙述，不正确的是( )A．泡菜制作的过程中，乳酸菌能在缺氧条件下产生乳酸B．运用植物细胞质壁分离的原理，可估测某作物新品种的细胞液浓度C．调查人群中白化病的发病率应在患者家系中多调查几代，以减少误差D．常取大蒜幼苗根尖做临时装片，用碱性染料染色可观察染色体[解析] 泡菜发酵的实验原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸，A正确；运用植物细胞质壁分离的原理，让某作物新品种的成熟细胞分别浸泡在一系列浓度梯度的蔗糖溶液中一段时间后，分别镜检，待测细胞的细胞液浓度范围介于未发生质壁分离和刚刚发生质壁分离的蔗糖溶液的浓度范围之间，B正确；调查人群中白化病的发病率，应在人群中随机抽样调查，以减少误差，C错误；观察根尖分生组织细胞有丝分裂，常取大蒜幼苗根尖做临时装片，用碱性染料将染色体染色，进而观察染色体，D正确。
[答案] C2．(2018·北京卷)以下高中生物学实验中，操作不正确的是( )A．在制作果酒的实验中，将葡萄汁液装满整个发酵装置B．鉴定DNA时，将粗提产物与二苯胺混合后进行沸水浴C．用苏丹Ⅲ染液染色，观察花生子叶细胞中的脂肪滴(颗粒)D．用龙胆紫染液染色，观察洋葱根尖分生区细胞中的染色体[解析] 本题考查高中几个主要实验的材料选择、试剂选择、操作步骤等。
在制作果酒的实验中，葡萄汁液不能装满发酵装置，要留出1/3的空间，A错误；在DNA鉴定实验中，DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，B正确；用苏丹Ⅲ染液可以把花生子叶细胞中的脂肪颗粒染成橘黄色，C正确；用龙胆紫染液能将细胞中的染色体染成深紫色，在洋葱根尖分生区细胞中能清晰地观察到，D正确，所以选A。
[答案] A3．(2018·江苏省高考冲刺预测卷)下列关于“腐乳的制作”实验的叙述，正确的是( )A．加盐主要是为了调节水分，利于毛霉生长B．含水量大于85%的豆腐利于保持湿度，适宜制作腐乳C．装坛阶段加入料酒可有效防止杂菌污染D．密封瓶口前瓶口不需要通过火焰灭菌[解析] 加盐主要是为了抑制微生物生长，防止豆腐腐败变质，A错误；豆腐含水量以70%为宜，毛霉为异养需氧型真菌，若含水量过高，影响毛霉的有氧呼吸，豆腐不宜成块；若含水量过少，则不利于毛霉的生长，毛霉的代谢也离不开水，B错误；加料酒为了抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味，C正确；封瓶时，需要将瓶口通过酒精灯的火焰，这样可以防止杂菌污染，D错误，所以选C。
2019年高考生物二轮专题训练：第19讲生物技术实践选修ⅰ_含详解
第19讲生物技术实践（选修Ⅰ）专题跟踪训练(十九)一、单选题1．(2018·北京市门头沟区二模)下列关于高中生物学实验的相关叙述，不正确的是( ) A．泡菜制作的过程中，乳酸菌能在缺氧条件下产生乳酸B．运用植物细胞质壁分离的原理，可估测某作物新品种的细胞液浓度C．调查人群中白化病的发病率应在患者家系中多调查几代，以减少误差D．常取大蒜幼苗根尖做临时装片，用碱性染料染色可观察染色体[解析] 泡菜发酵的实验原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸，A正确；运用植物细胞质壁分离的原理，让某作物新品种的成熟细胞分别浸泡在一系列浓度梯度的蔗糖溶液中一段时间后，分别镜检，待测细胞的细胞液浓度范围介于未发生质壁分离和刚刚发生质壁分离的蔗糖溶液的浓度范围之间，B正确；调查人群中白化病的发病率，应在人群中随机抽样调查，以减少误差，C错误；观察根尖分生组织细胞有丝分裂，常取大蒜幼苗根尖做临时装片，用碱性染料将染色体染色，进而观察染色体，D正确。
[答案] C2．(2018·北京卷)以下高中生物学实验中，操作不正确的是( )A．在制作果酒的实验中，将葡萄汁液装满整个发酵装置B．鉴定DNA时，将粗提产物与二苯胺混合后进行沸水浴C．用苏丹Ⅲ染液染色，观察花生子叶细胞中的脂肪滴(颗粒)D．用龙胆紫染液染色，观察洋葱根尖分生区细胞中的染色体[解析] 本题考查高中几个主要实验的材料选择、试剂选择、操作步骤等。
在制作果酒的实验中，葡萄汁液不能装满发酵装置，要留出1/3的空间，A错误；在DNA鉴定实验中，DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，B正确；用苏丹Ⅲ染液可以把花生子叶细胞中的脂肪颗粒染成橘黄色，C正确；用龙胆紫染液能将细胞中的染色体染成深紫色，在洋葱根尖分生区细胞中能清晰地观察到，D正确，所以选A。
[答案] A3．(2018·江苏省高考冲刺预测卷)下列关于“腐乳的制作”实验的叙述，正确的是( ) A．加盐主要是为了调节水分，利于毛霉生长B．含水量大于85%的豆腐利于保持湿度，适宜制作腐乳C．装坛阶段加入料酒可有效防止杂菌污染D．密封瓶口前瓶口不需要通过火焰灭菌[解析] 加盐主要是为了抑制微生物生长，防止豆腐腐败变质，A错误；豆腐含水量以70%为宜，毛霉为异养需氧型真菌，若含水量过高，影响毛霉的有氧呼吸，豆腐不宜成块；若含水量过少，则不利于毛霉的生长，毛霉的代谢也离不开水，B错误；加料酒为了抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味，C正确；封瓶时，需要将瓶口通过酒精灯的火焰，这样可以防止杂菌污染，D错误，所以选C。
高考生物总复习选修Ⅰ生物技术实践
×
• 2．啤酒瓶子放置久了会在啤酒表面×形成一 层酵母菌繁殖形成的“×白膜”。
×
ו ( )
• 3．腐乳制作有多种微生× 物参与，其中起主 要作用的是根霉。( )
• 4．含抗生素的牛奶能生产酸奶。( )
• 8．培养霉菌、细菌时需要将培×养基pH调节
为碱性。( )
×
√
• 9．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉
• 15．PCR技术的原理是 __________，需要的 条件是__________、模蒸板馏 、原压榨料、耐高萃取温的 TaqDNA聚合酶等，过程是__________、 __________和__________。
• 16．蛋白质的提取和分离一般分为四步：
02 第2关 切入高考
• 1．酒精发酵过程中先产√生水后产生酒。 ()
• 3．(2016·全国卷Ⅲ)某同学用新鲜的泡菜滤
液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化所用固体
培养基中因含有碳酸钙无而菌不水 透明，乳酸菌产生
的乳酸能溶泡菜解滤培液中养菌的基浓度中高，的直碳接培酸养很钙难分。离回得到答单菌下落 列问
题：
鉴别乳酸菌
中和产生的乳酸
具有透明圈
• (1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用__甘_油_____
• 6．培养基按物理液状体态分为___固_体______培养 基选和择_________鉴_别培平养板划基线；按功稀释能涂布分平板为 __________培养基和__灼_烧_______培养基。
• 干热7．常见的两种接种方法是高_压_蒸_汽_______法和
________________法。
样品的稀释 筛选能生长的微生物菌落
2．果醋制作用到的微生物是_醋__酸__菌_____，其代谢类型为___异__养__需__氧__型_____，重 要反应：C2H5OH＋O2――酶→CH3COOH＋H2O，最适温度为____3_0_～__3_5_℃_____。
• 2．啤酒瓶子放置久了会在啤酒表面×形成一 层酵母菌繁殖形成的“×白膜”。
×
ו ( )
• 3．腐乳制作有多种微生× 物参与，其中起主 要作用的是根霉。( )
• 4．含抗生素的牛奶能生产酸奶。( )
• 8．培养霉菌、细菌时需要将培×养基pH调节
为碱性。( )
×
√
• 9．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉
• 15．PCR技术的原理是 __________，需要的 条件是__________、模蒸板馏 、原压榨料、耐高萃取温的 TaqDNA聚合酶等，过程是__________、 __________和__________。
• 16．蛋白质的提取和分离一般分为四步：
02 第2关 切入高考
• 1．酒精发酵过程中先产√生水后产生酒。 ()
• 3．(2016·全国卷Ⅲ)某同学用新鲜的泡菜滤
液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化所用固体
培养基中因含有碳酸钙无而菌不水 透明，乳酸菌产生
的乳酸能溶泡菜解滤培液中养菌的基浓度中高，的直碳接培酸养很钙难分。离回得到答单菌下落 列问
题：
鉴别乳酸菌
中和产生的乳酸
具有透明圈
• (1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用__甘_油_____
• 6．培养基按物理液状体态分为___固_体______培养 基选和择_________鉴_别培平养板划基线；按功稀释能涂布分平板为 __________培养基和__灼_烧_______培养基。
• 干热7．常见的两种接种方法是高_压_蒸_汽_______法和
________________法。
样品的稀释 筛选能生长的微生物菌落
2．果醋制作用到的微生物是_醋__酸__菌_____，其代谢类型为___异__养__需__氧__型_____，重 要反应：C2H5OH＋O2――酶→CH3COOH＋H2O，最适温度为____3_0_～__3_5_℃_____。
2019届高考生物二轮复习基础过关选修Ⅰ生物技术实践课件
【解析】 (1)胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键，根 据双键的数目可以将胡萝卜素划分为 α、β、γ 三类，β胡萝卜素是 其中最主要的组成成分；一分子的 β胡萝卜素在人或动物的小肠、 肝脏等器官被氧化成两分子的维生素 A；由于饮食中缺乏维生素 A 或因某些消化系统疾病影响维生素 A 的吸收， 致使视网膜杆状细胞 没有合成视紫红质的原料而造成夜盲 (暂时性夜盲症可由补充维生 素 A 得以痊愈)。(2)提取胡萝卜素时，新鲜的岩藻具有大量的水分， 需要进行干燥。(3)乙酸乙酯属于水不溶性有机溶剂，与水不互溶， 能够溶解胡萝卜素；乙醇是水溶性有机溶剂，因萃取过程中能与水 混溶而影响萃取效果，所以不用它作萃取剂。
高温烘干过程中，植物甲中的物质 W 易被破坏；新鲜的植物 甲含水量高，用于提取的极性有机溶剂会被稀释，进而降低对物 质 W 的提取效果
(2)提取物质 W 时，振荡的作用是______________________ 使原料和溶剂充分混匀 。 (3)活性炭具有很强的吸附能力，在提取过程中，用活性炭处理 提取液的目的是__________________________ 。 去除提取液中的色素 (4)现有丙酮(沸点 56 ℃)、乙醇(沸点约 78 ℃)两种溶剂，在提 取 物 质 W 时 ， 应 选 用 丙 酮 作 为 提 取 剂 ， 理 由 是 _______________________________________________________ 。 丙酮沸点低于乙醇，蒸馏时物质 W 分解较少 (5) 该 实 验 操 作 过 程 中 应 注 意 的 事 项 是 在温度较低的情况下操作，防火 ________________________________(答出两点即可)。
4．腐乳制作涉及的主要微生物是毛霉，其代谢类型为异养需 氧型，重要反应：蛋白质蛋白酶、肽酶 ――→ 多肽、氨基酸。 5．泡菜制作用到的微生物是乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧 酶 2C3H6O3＋能量， 型， 重要反应： C6H12O6――→ 最适温度一般为 18～ 20℃。 6．培养基按物理状态分为液体培养基和固体培养基；按功能 分为选择培养基和鉴别培养基。 7．常见的两种接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。 8．三种常用的灭菌方法有：(1)灼烧灭菌，如接种环、接种针； (2)干热灭菌，如玻璃器皿和金属用具等；(3)高压蒸汽灭菌，如培养 基等。
2019年高考生物冲刺大二轮精讲课件：第19讲-生物技术实践(选修ⅰ)ppt课件AqwHHn
一分耕耘一分收获
[答案] (1)尿素 其他两组都含有 NH4NO3，能分解尿素的 细菌和不能分解尿素的细菌都能利用 NH4NO3，不能起到筛选作 用
(2)为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程 中 pH 稳定
(3)不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能 培养基 中没有纤维素，不会形成 CR－纤维素红色复合物，即使出现单 菌落也不能确定其为纤维素分解菌
(2018·湖北省重点中学联考)大肠埃希菌，俗称大肠 杆菌。是人和动物肠道中的正常栖居菌。自来水一旦被它污染， 就有可能引发肠道传染病，甚至流行病。因此，必须对自来水进 行严格的检测，以确保饮水安全。我国规定 1000 mL 自来水中的 大肠杆菌数不得超过 3 个。某同学欲对家中自来水中大肠杆菌含 量是否达标，对饮用水中大肠杆菌进行了培养、计数和鉴定。回 答下列问题：
一分耕耘一分收获
[解析] 要获得纯净的菌种，在培养细菌的整个过程中都严 格要求无菌，所有用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等 需要进行灭菌，A 正确；土壤样品不能进行灭菌，否则得不到要 分离纯化的菌种，B 错误；操作过程要严格无菌，培养菌种需要 在其适宜的条件下培养，如乳酸菌需要在无氧条件下培养，C 正 确；倒置培养能避免水珠滴入培养基中造成污染，D 正确。
第
一 部
专题突破篇
分
一分耕耘一分收获
专
题
生物技术与工程
六一分耕耘一分收获 Nhomakorabea 第 19 讲
生物技术实践(选修Ⅰ)
一分耕耘一分收获
考点 1 微生物的培养、分离与计数 [核心知识回顾]
1．图解识记微生物的培养、分离
一分耕耘一分收获
2．微生物培养的 5 种基本操作 (1)培养基的制备。 (2)无菌技术。 (3)倒平板操作。 (4)平板划线操作。 (5)稀释涂布平板法。
[答案] (1)尿素 其他两组都含有 NH4NO3，能分解尿素的 细菌和不能分解尿素的细菌都能利用 NH4NO3，不能起到筛选作 用
(2)为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程 中 pH 稳定
(3)不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能 培养基 中没有纤维素，不会形成 CR－纤维素红色复合物，即使出现单 菌落也不能确定其为纤维素分解菌
(2018·湖北省重点中学联考)大肠埃希菌，俗称大肠 杆菌。是人和动物肠道中的正常栖居菌。自来水一旦被它污染， 就有可能引发肠道传染病，甚至流行病。因此，必须对自来水进 行严格的检测，以确保饮水安全。我国规定 1000 mL 自来水中的 大肠杆菌数不得超过 3 个。某同学欲对家中自来水中大肠杆菌含 量是否达标，对饮用水中大肠杆菌进行了培养、计数和鉴定。回 答下列问题：
一分耕耘一分收获
[解析] 要获得纯净的菌种，在培养细菌的整个过程中都严 格要求无菌，所有用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等 需要进行灭菌，A 正确；土壤样品不能进行灭菌，否则得不到要 分离纯化的菌种，B 错误；操作过程要严格无菌，培养菌种需要 在其适宜的条件下培养，如乳酸菌需要在无氧条件下培养，C 正 确；倒置培养能避免水珠滴入培养基中造成污染，D 正确。
第
一 部
专题突破篇
分
一分耕耘一分收获
专
题
生物技术与工程
六一分耕耘一分收获 Nhomakorabea 第 19 讲
生物技术实践(选修Ⅰ)
一分耕耘一分收获
考点 1 微生物的培养、分离与计数 [核心知识回顾]
1．图解识记微生物的培养、分离
一分耕耘一分收获
2．微生物培养的 5 种基本操作 (1)培养基的制备。 (2)无菌技术。 (3)倒平板操作。 (4)平板划线操作。 (5)稀释涂布平板法。
2019届高考生物二轮复习基础过关选修Ⅰ生物技术实践课件
10．CaCl2 溶液的作用是使海藻酸钠形成凝胶珠。( √ ) 11．利用固定化酶降解水体中的有机磷农药，需提供适宜的营 养条件。( × ) 12．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应 底物。( × ) 13．可用蒸馏水涨破细胞的方法从猪的红细胞中提取到 DNA 和蛋白质。( × ) 14．蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的 DNA。 (×) 15．利用透析法纯化蛋白酶时，应以蒸馏水作为透析液。( × )
9．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数过程：土壤取样→样 品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→筛选 能生长的微生物菌落。 10．分解纤维素的微生物的分离实验原理
11．果胶酶的作用是将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸。
12．酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力。酶反应速度用 单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量表示，影 响酶活性的因素有温度、pH 和酶的抑制剂等。 13．固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞 固定在一定空间内的技术， 包括包埋法、 化学结合法和物理吸附法。 14．DNA 粗提取的原理是 DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的 溶解度不同，在 0.14_mol/L 的 NaCl 溶液中的溶解度最低。 15．蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理→粗分离→ 纯化→纯度鉴定。 16．植物有效成分的提取方法有蒸馏法、压榨法和萃取法等。
【解析】 (1)胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键，根 据双键的数目可以将胡萝卜素划分为 α、β、γ 三类，β胡萝卜素是 其中最主要的组成成分；一分子的 β胡萝卜素在人或动物的小肠、 肝脏等器官被氧化成两分子的维生素 A；由于饮食中缺乏维生素 A 或因某些消化系统疾病影响维生素 A 的吸收， 致使视网膜杆状细胞 没有合成视紫红质的原料而造成夜盲 (暂时性夜盲症可由补充维生 素 A 得以痊愈)。(2)提取胡萝卜素时，新鲜的岩藻具有大量的水分， 需要进行干燥。(3)乙酸乙酯属于水不溶性有机溶剂，与水不互溶， 能够溶解胡萝卜素；乙醇是水溶性有机溶剂，因萃取过程中能与水 混溶而影响萃取效果，所以不用它作萃取剂。
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专题跟踪训练(十九)一、单选题1．(2018·北京市门头沟区二模)下列关于高中生物学实验的相关叙述，不正确的是()A．泡菜制作的过程中，乳酸菌能在缺氧条件下产生乳酸B．运用植物细胞质壁分离的原理，可估测某作物新品种的细胞液浓度C．调查人群中白化病的发病率应在患者家系中多调查几代，以减少误差D．常取大蒜幼苗根尖做临时装片，用碱性染料染色可观察染色体[解析]泡菜发酵的实验原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸，A正确；运用植物细胞质壁分离的原理，让某作物新品种的成熟细胞分别浸泡在一系列浓度梯度的蔗糖溶液中一段时间后，分别镜检，待测细胞的细胞液浓度范围介于未发生质壁分离和刚刚发生质壁分离的蔗糖溶液的浓度范围之间，B正确；调查人群中白化病的发病率，应在人群中随机抽样调查，以减少误差，C错误；观察根尖分生组织细胞有丝分裂，常取大蒜幼苗根尖做临时装片，用碱性染料将染色体染色，进而观察染色体，D正确。
[答案] C2．(2018·北京卷)以下高中生物学实验中，操作不正确的是()A．在制作果酒的实验中，将葡萄汁液装满整个发酵装置B．鉴定DNA时，将粗提产物与二苯胺混合后进行沸水浴C．用苏丹Ⅲ染液染色，观察花生子叶细胞中的脂肪滴(颗粒)D．用龙胆紫染液染色，观察洋葱根尖分生区细胞中的染色体[解析]本题考查高中几个主要实验的材料选择、试剂选择、操作步骤等。
在制作果酒的实验中，葡萄汁液不能装满发酵装置，要留出1/3的空间，A错误；在DNA鉴定实验中，DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，B正确；用苏丹Ⅲ染液可以把花生子叶细胞中的脂肪颗粒染成橘黄色，C正确；用龙胆紫染液能将细胞中的染色体染成深紫色，在洋葱根尖分生区细胞中能清晰地观察到，D正确，所以选A。
[答案] A3．(2018·江苏省高考冲刺预测卷)下列关于“腐乳的制作”实验的叙述，正确的是()A．加盐主要是为了调节水分，利于毛霉生长B．含水量大于85%的豆腐利于保持湿度，适宜制作腐乳C．装坛阶段加入料酒可有效防止杂菌污染D．密封瓶口前瓶口不需要通过火焰灭菌[解析]加盐主要是为了抑制微生物生长，防止豆腐腐败变质，A错误；豆腐含水量以70%为宜，毛霉为异养需氧型真菌，若含水量过高，影响毛霉的有氧呼吸，豆腐不宜成块；若含水量过少，则不利于毛霉的生长，毛霉的代谢也离不开水，B错误；加料酒为了抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味，C正确；封瓶时，需要将瓶口通过酒精灯的火焰，这样可以防止杂菌污染，D错误，所以选C。
[答案] C4．(2018·昆明市调研)下列哪项操作会引起发酵液污染，使发酵失败() A．榨汁机用温水进行清洗，并晾干B．发酵瓶先用温水清洗，再用75%的酒精擦拭后晾干使用C．葡萄先去除枝梗，再冲洗多次D．每次排气时，只需拧松瓶盖，不能将盖完全揭开[解析]榨汁机用温水进行清洗，并晾干是防止发酵液被污染的措施之一，A错误。
发酵瓶先用温水清洗，再用75%的酒精擦拭后晾干使用是防止发酵液被污染的措施之一，B错误。
先去除枝梗再冲洗葡萄，会使葡萄破损而增加被杂菌污染的机会；冲洗多次会使附着的酵母菌大量减少，C正确。
每次排气时，只需拧松瓶盖，不能将盖完全揭开是防止发酵液被污染的措施之一，D错误。
[答案] C5．(2018·北京市通州区调研)在涂布平板操作时错误的是()A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红B．取少量菌液滴加在培养基表面C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8～10 s再用D．涂布时可转动培养皿，使涂布均匀[解析]将蘸过酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃，然后在酒精灯火焰旁冷却，A错误；取少量菌液滴加在培养基表面，B正确；涂布器灭菌时，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8～10 s再用，C正确；涂布时，涂布器可以不动，可转动培养皿，使涂布均匀，D正确。
[答案] A6．(2018·重庆模拟)在做分离分解纤维素的细菌实验中，加入刚果红应该在()①制备培养基时②梯度稀释时③倒平板时④涂布时⑤长出菌落时A．①③B．②⑤C．③⑤D．④⑤[解析]常用的刚果红染色法有两种：一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；另一种是在倒平板时就加入刚果红。
综上所述，C项正确。
[答案] C7．(2018·上海市虹口区二模)在分离和纯化土壤中自生固氮菌的实验中，不合理的操作是()A．取土表3～5 cm以下土层的土壤B．用无菌水稀释土壤样品C．使用牛肉膏蛋白胨培养基D．用接种环进行划线接种[解析]土表3～5 cm以上的土壤比较干燥，自生固氮菌的数量较少，因此取土表3～5 cm以下土层的土壤，A正确；用无菌水稀释土壤样品，否则可能造成土壤被杂菌污染，B正确；自生固氮菌可以在缺乏氮源的培养基中生存，牛肉膏蛋白胨培养基含有氮源，用其分离出的微生物既有自生固氮菌也有其他的杂菌，无法纯化自生固氮菌，C错误；接种自生固氮菌时可用接种环进行划线接种，也可用涂布器用稀释涂布平板法接种，D正确。
[答案] C8．(2018·上海市青浦区二模)如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345，下列说法中正确的是()A．操作前要将接种环用酒精消毒B．划线操作须在火焰上方进行C．只有在5区才可以得到所需菌落D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌[解析]在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，不用酒精消毒，A错误；接种时划线操作是在火焰周围进行，B错误；在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，C错误；每次划线前都要灼烧接种环，目的是杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，每次划线的菌种都来自上一次划线的末端，D正确，所以选D。
[答案] D二、非选择题9．(2018·山西省太原市模拟)银杏酒以高粱和银杏叶为主要原料制作而成，适宜中老年人群饮用。
请回答：(1)在酿制银杏酒的开始时一般要先通气，其目的是__________________________。
(2)在酿制时，不需要对高粱、银杏叶等进行严格的消毒处理也能抑制杂菌生长，这是因为在___________________________。
(3)制作成功的银杏酒(低度)若暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现醋酸味，尤其是气温高的夏天更易如此，分析其原因是________________________________________。
写出该过程发生的反应式________________________。
(4)银杏叶中的银杏黄酮常采用萃取法提取，萃取前对银杏叶进行干燥时，要求温度________，时间________，而萃取时则要求温度________，时间________。
采取以上措施的原因是______________________________________________。
[解析]本题考查微生物的利用和植物有效成分的提取，考查对果酒、果醋制作原理、植物有效成分提取方法的理解。
解答此题，可根据果酒、果醋制作所需菌种的代谢类型分析发酵条件的控制。
(1)酿酒主要利用酵母菌发酵。
酵母菌属于兼性厌氧菌，在酿制银杏酒开始时一般先通气，使酵母菌进行有氧呼吸，为酵母菌繁殖提供能量，使酵母菌快速繁殖。
(2)酵母菌可以在无氧条件下进行生命活动，酵母菌发酵使发酵液显酸性且含有酒精，其他微生物无法在无氧、酸性含有酒精的发酵液中进行生命活动。
(3)空气中含有醋酸菌，醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为30～35 ℃，制作成功的银杏酒(低度)暴露在空气中，醋酸菌会把酒精转化为醋酸而使酒味逐渐消失，进而出现醋酸味，且一定范围内温度越高醋酸菌代谢活动越强。
反应式应注意用箭头而不是等号，不要漏掉反应条件酶。
(4)萃取前对银杏叶进行干燥时，温度过高，时间过长，均会使银杏叶中的有效成分分解。
萃取时温度高、时间长，有利于萃取剂充分溶解银杏叶中的有效成分。
[答案](1)让酵母菌在有氧条件下大量繁殖(2)缺氧呈酸性含有酒精的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应该环境而受抑制(3)空气中含有醋酸菌，醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为30～35 ℃C 2H 5OH ＋O 2――→酶CH 3COOH ＋H 2O(4)低 短 高 长 干燥时温度过高，时间过长，有效成分易分解。
萃取时温度高，时间长，有利于充分溶解有效成分10．(2018·河南省郑州市模拟)农作物秸秆中的纤维素阻碍了堆肥技术在处理有机固体废物领域的发展。
为提高堆肥品质，科研人员探究了温度对纤维素分解菌分解能力的影响，实验步骤如下：①纤维素分解菌的筛选、分离及纯化→②纤维素分解菌菌株数量测定→③纤维素酶活力测定和降解滤纸能力的检测。
请问答下列问题：(1)步骤①中，若用稀释涂布平板法接种，则必须将菌液进行一系列的______________________。
已知纤维素酶的最适温度在45～65 ℃之间，欲从45～65 ℃的恒温箱中筛选出能高效分解纤维素的细菌，请写出测定纤维素酶的最适温度的实验思路：__________________________________________________________________。
(2)步骤②中，在条件适宜的环境下培养细菌10 d 后，用________________(填一种实验用具)在显微镜下可计算细菌数量。
此方法中的“条件”至少包括：适宜温度、以________作为唯一碳源的________________(填“固态”“半固态”或“液态”)培养基等。
可用台盼蓝染液鉴定视野中细菌是否死亡，原理是______________________________________________。
(3)步骤③中，酶活力可用培养基上菌落的直径及________________来表示。
[解析] 本题考查纤维素分解菌培养的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
(1)若用稀释涂布平板法接种，则必须将菌液进行一系列的梯度稀释。
要在45～65 ℃的恒温箱中筛选出能高效分解纤维素的细菌，需要设置一系列温度梯度。
实验思路：取若干以纤维素为唯一碳源的刚果红培养基，在其上接种等量的纤维素分解菌，分别置于45～65 ℃的不同温度的恒温箱中培养，一段时间后，分别测定各培养基上菌落周围的透明圈大小。
(2)对于细菌的计数，可用血细胞计数板在显微镜下计算细菌数量。
对于纤维素分解菌的培养条件包括：适宜温度、以纤维素作为唯一碳源的液态培养基等。
由于活细菌的细胞膜具有选择透过性，不会被台盼蓝染色，因此可用台盼蓝染液鉴定视野中细菌是否死亡。