中国首创猪圆环病毒2型灭活疫苗

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验作者：刘小萍等来源：《国外畜牧学·猪与禽》2015年第10期中图分类号：S853.91 文献标识码：A 文章编号：1001-0769（2015）10-0034-02猪圆环病毒病（Porcine Circovirus Diseases，PCVD）或称猪圆环病毒相关性疾病（PCVAD）是主要由猪圆环病毒2型（PCV2）引起的免疫抑制性疾病，临床表现为仔猪先天性震颤（CT）、断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎肾病综合征（PDNS）、猪呼吸道病综合征（PRDC）、母猪繁殖障碍（RF）等[1]。

猪圆环病毒2型（PCV-2）主要在机体的单核细胞、巨噬细胞等抗原递呈细胞中生长和复制。

引起这类抗原递呈细胞的抗原递呈能力下降，导致机体的免疫机能受到抑制。

使得畜体免疫功能受到损害，造成其他细菌或者病毒的并发和继发感染[2]。

最近几年我国养猪业面临的疾病压力越来越大，情况也越来越复杂，PCV2起到了不可替代的作用。

哺乳仔猪免疫接种PCV-2疫苗已经在全球预防PCVD上表现出极高的效率，效果确切[3]。

本试验旨在对两个厂家猪圆环病毒疫苗的免疫效果进行比较，通过疫苗免疫前后应激反应、计算死淘率、料肉比及日增重进行疫苗效果评估，为广大养殖场提供参考依据。

1 试验材料试验猪：江西某规模化猪场，存栏基础母猪1 200头，一点式生产。

2 试验方案2.1 样品选定根据公母平均每窝分成3组，一个批次为14窝～16窝（3组各50头仔猪）。

2.2 免疫程序A组：免疫A厂家圆环疫苗，1 mL头，仔猪标记耳朵打橙色耳牌；B组：免疫B厂家圆环疫苗，2 mL头，仔猪标记耳朵打红色耳牌；C组：免疫生理盐水，2 mL头，做空白对照组，仔猪未作耳牌标记；以上三组，疫苗免疫均为肌肉注射，和蓝耳疫苗一边一针，14日龄免疫，圆环疫苗的免疫剂量根据厂家的疫苗说明书而定。

2.3 数据测定2.3.1测量体温免疫前及免疫后4 h、8 h、24 h随机测量各组20头仔猪的体温记录并取平均值，同时观察猪群是否出现呕吐、精神萎靡、不食等应激反应。

猪圆环病毒2型灭活疫苗（YZ株）的研制及免疫效力评价猪圆环病毒病(Porcine circovirus disease,PCVD)是当前我国广泛流行的猪传染性疾病,是由猪圆环病毒2型(Porcinecircovirustype2,PCV-2)引起的。

其中断奶仔猪最易感,临床表现多以断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)为特点,给我国乃至世界各国的养猪业造成了巨大经济损失。

PCV-2引起的猪圆环病毒病目前尚无有效的治疗措施,而且PCV-2对外界抵抗力强,猪场净化难度高。

疫苗接种仍然当前防控该病的最有效的手段之一。

由于性能稳定、安全性高,灭活疫苗是当前主要的疫苗研发类型,虽然商业化的灭活疫苗已在世界各地养殖场广泛的应用,但其综合免疫效果仍有待提高。

本研究首先对PCV-2YZ分离株的繁殖滴度、特异性、毒力、免疫原性等生物学特性进行评价;随后确立了猪圆环病毒2型YZ株的最佳细胞培养条件;进一步建立了PCV-2YZ株的种子批并完成了各项鉴定;最后筛选和优化疫苗剂型和免疫佐剂,为研制出安全高效的PCV-2灭活疫苗奠定了基础。

1.猪圆环病毒2型YZ株生物学特性研究为研究PCV-2 F1代病毒的生物学特性,采用间接免疫荧光法(Indirect fluorescence assay,IFA)测定病毒繁殖滴度,中和试验测定病毒特异性,PCR方法和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)试验测定病毒感染的毒力,进一步通过免疫攻毒保护试验评价该毒株的免疫原性。

结果显示:PCV-2YZ株F1代病毒效价为105.48TCID50/ml,并可与PCV-2阳性血清发生特异性反应,中和后感染细胞未见荧光:用F1代病毒对3～5周龄健康易感仔猪肌肉注射和滴鼻病毒液各2.0 ml/头,可使仔猪(5/5)全部发病,出现典型的PCV-2感染相关临床症状及病理变化;将PCV-2F1代毒株制备灭活疫苗,并对健康仔猪(3～5周龄)进行免疫,结果发现,在二免后2 w,该疫苗不仅能提高仔猪体液免疫水平,诱导高效特异性抗体产生,而且能够有效抵抗3株不同来源流行株的攻击,保护率可达100%。

11国内首支圆支二联苗问世，合国情减应激杨佳颖/本刊规模化猪场混合感染增多，联苗成为趋势近年来，随着我国农牧业产业化改革的不断深入，有利地带动了我国畜牧业的持续发展，畜禽品种和数量有了很大幅度的增加，同时畜禽疾病的种类和发生频率也大大增加。

临床发病中，混合感染是常见现象，特别是圆环病毒2型极易与其他病毒发生混合感染。

据统计，猪圆环病毒2型（PCV2）感染相关的断奶衰竭综合征（PMWS）病例中，最为常见的混合感染首先是高致病性蓝耳病毒占比51.9%，其次便是猪肺炎支原体占比35.5%，还有细菌和猪流感病毒，分别占比21.6%和5.4%。

经过数据统计结果显示，威胁规模化猪场最为突出的问题就是猪呼吸道疾病综合征（PRDC），而猪圆环病毒2型（PCV2）和肺炎支原体（Mhp）是2个重要的原发病原，临床调查，由它们引起的混合感染极为常见。

猪圆环病毒2型（PCV2）能引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎与肾病综合征（PDNS）、猪呼吸道复合体病（PRDC）、母猪繁殖障碍（PRF）、仔猪先天震颤（CT）等一系列疾病，同时易与其他病原混合感染或导致继发感染，增加了临床的复杂性，从而给猪场带来巨大的经济损失，对全球养猪业造成了严重影响。

猪支原体肺炎是由于感染猪肺炎支原体而引发的慢性呼吸道疾病，又称“猪气喘”或“猪地方性肺炎”。

猪肺炎支原体进入猪呼吸道后，逐步的定植感染引发严重的炎症损伤，部分肺部区域表现肉变、硬化和坏死，导致肺脏功能失调，出现呼吸困难，饲料转化率下降。

仔猪感染颇多，该病具有感染率高、传染性高的特点，给世界养猪业带来巨大的经济损失。

因此能够预防多种疾病的混合感染是目前兽用生物制品发展的趋势。

虽然针对这两种病原的防控都有成熟的商品化单苗，但其种类较多，且免疫程序复杂，引发机体应激明显，因此研发圆环病毒2型和猪肺炎支原体的联苗势在必行。

国内首发圆支二联苗，突破三大技术难题目前猪用疫苗市场上二联疫苗，仅有10种，其中以猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗的产品占主导。

猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)的研制与应用刘长明;危艳武;陆月华;黄立平;吴洪丽;张朝霞;温士刚;姜凤娟【摘要】@@ 猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现有断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等症状,统称为猪圆环病毒病.我国猪群中PCV2抗体阳性率达80%以上,发病率为25%～40%,死淘率10%左右.病毒感染猪后破坏免疫系统,产生免疫抑制,增强了对多种病原体的易感性,引发难以控制的严重疾病.【期刊名称】《畜牧兽医科技信息》【年(卷),期】2010(000)009【总页数】2页(P29-30)【作者】刘长明;危艳武;陆月华;黄立平;吴洪丽;张朝霞;温士刚;姜凤娟【作者单位】中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,哈尔滨,150001【正文语种】中文【中图分类】S8猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病，临床上表现有断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等症状，统称为猪圆环病毒病。

我国猪群中PCV2抗体阳性率达80%以上，发病率为25%～40%，死淘率10%左右。

病毒感染猪后破坏免疫系统，产生免疫抑制，增强了对多种病原体的易感性，引发难以控制的严重疾病。

1 PCV2感染引起的相关疾病1.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征发生于5～12周龄保育猪，临床表现为进行性消瘦、呼吸急促、呼吸困难、黄疸、下痢、皮肤苍白和中枢神经失调等症状。

病理变化为全身淋巴结肿大，淋巴器官的肉芽肿性炎症和不同程度的淋巴细胞缺失，解剖还可见肺斑点状出血。

1.2 猪皮炎肾病综合征发生于2～4月龄生长猪，临床表现为多处局限性微凸出的暗红色病灶，此后迅速发热，直肠温度可达41℃以上，出现皮下水肿、厌食、体重减轻和抑郁等。

中国动物保健2019.06我国猪圆环病毒2型疫苗研发及应用现状*翟少伦1，陈胜男2，周盼伊3，温肖会1，翟颀1，周秀蓉1，贾春玲1，吕殿红1**，魏文康1**（1.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广州510640；2.广州中科基因检测服务有限公司广州510500；3.《中国动物保健》杂志社有限公司北京100193）环病毒2型（PC V 2）是目前已知的最小的猪病毒，但其却给养猪场带来巨大的经济损失。

目前，防控PC V 2的主要措施是免疫接种。

2009年我国引进了首个猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗，同时也投入了大量的研究资金自主研发各种疫苗，目前市场上出现了多种类型的猪圆环病毒2型疫苗，包括全病毒灭活苗、基因工程疫苗等。

本文着重概括一下我国猪圆环病毒2型疫苗研发及应用现状，提出一些看法与展望，希望对广大疫苗研发及使用单位有所启发。

环病毒2型；全病毒灭活苗；基因工程疫苗；合成肽疫苗；嵌合疫苗；多联疫苗猪圆环病毒病（p o rc in e c i rc o v i ru s d i s -ea s e s ，PC VD ），是由猪圆环病毒2型（p o rc in e c i rc o v i ru s t y p e 2，PC V 2）引起的猪的一种传染病，主要感染家猪和野猪，牛、山羊等动物偶有报道[1-3]。

猪感染的临床症状主要为断奶后多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾病综合征、间质性肺炎、繁殖障碍、先天性震颤等，具有较高的发病率和死亡率[4]。

1998年，我国首次确诊猪圆环病毒2型的感染，自此猪圆环病毒2型在我国各地区流行[5]。

猪圆环病毒2型疫苗可有效地改善猪群生产成绩、减少猪体组织损伤，但不能完全清除猪体内病毒[6]。

不同基因型毒株之间的毒力存在差异，交叉保护率不高[7]。

因此，目前市场上出现了多种基因型或毒株的疫苗，本文对我国近年来研发及使用的猪圆环病毒2型疫苗进行概述，提出一些看法与展望，希望对广大疫苗研发及使用单位有所启发。

瑞普生物新产品——“诸元妥”发布会在汉举行作者：赵建乐徐兆强尤永君来源：《养殖与饲料》 2013年第7期赵建乐徐兆强尤永君在武汉国际博览中心举办的第十一届(2013)中国畜牧业博览会上,天津瑞普生物技术股份有限公司(以下简称“瑞普生物”)发布了一款新产品——“诸元妥”,即猪圆环病毒2型灭活疫苗(ZJ/C株)。

来自全国各地的120余位新闻媒体和客户代表共同参加了本次新产品发布会。

瑞普生物研究院诊断中心主任、家畜事业部技术总监李建丽博士详细地向与会代表介绍了猪圆环病毒病的防控现状和即将上市的“诸元妥”的研发历程、产品优势、应用效果,并回答了媒体和客户的提问。

会后,与会代表一致表示期待瑞普生物“诸元妥”的成功上市,为猪圆环病毒病的防控带来福音。

众所周知,猪圆环病毒2型(PCV2)可造成猪只免疫抑制或免疫力低下,是导致断奶仔猪发生多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原。

猪圆环病毒病是全球公认的危害养猪业的主要疫病之一,也是困扰我国养猪业的三大疫病之一。

PCV2在中国的感染率和致病率都呈逐年上升的趋势,而在各项防制策略中疫苗是预防PCV2相关疾病的关键。

李博士通过对疫苗类型的讲解与市场分析,对比国内外相关疫苗的信息和效果,深入全面地向与会代表展示了“诸元妥”的特点。

“诸元妥”的研发历时7a,于2013年1月29日获得新兽药注册证书。

“诸元妥”是用国内流行的PCV2b新型优势毒株——ZJ/C 株制作而成,此毒株是浙江大学周继勇教授从PMWS患猪的腹股沟淋巴结中分离出来的,较目前国内PCV2株有更强的侵染能力和复制能力。

因此,“诸元妥”较传统PCV2疫苗株有更好的免疫原性。

目前猪圆环病毒病疫苗的免疫效果,多是通过免疫后检测抗体水平或攻毒后观察猪只体温变化、临床表现、发病率等进行评价。

而对于PCV2来讲,猪有抗体不一定能得到保护、带毒不一定发病,还要看有效抗体水平的高低和免疫后攻毒带毒情况。

“诸元妥”是国际上首个仅以防感染为评价标准的疫苗,其效力检验通过下述方法进行:对免疫后第21天的仔猪攻毒,攻毒后第14天取其肺脏和腹股沟淋巴结分离病毒,在细胞上盲传3代后进行病毒检测,80%以上的细胞分离不到病毒判定为疫苗合格。